《DNA的粗提取和物理性狀的觀察》

DNA的粗提取和物理性狀的觀察情景導(dǎo)入DNA的粗提取和物理性狀的觀察目的要求一、原理1）不同濃度NaCl中DNA溶解度不同。當(dāng)NaCl的物質(zhì)的量濃度為0.14mol／L時(shí),DNA的溶解度最低。利用這一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。2）DNA與其他細(xì)胞成分在酒精中溶解度不同，DNA不溶于酒精，細(xì)胞中某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理，可以進(jìn)一步提取出含雜質(zhì)較少的DNA。3）DNA和蛋白質(zhì)對(duì)洗滌劑耐受性不同：洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜，但對(duì)DNA沒有影響。4）DNA與甲基綠結(jié)合呈藍(lán)色進(jìn)行鑒定;DNA遇二苯胺（沸水?。?huì)染成藍(lán)色，二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。,二、方法首先：釋放核DNA.方法：機(jī)械粉碎的方法破壞細(xì)胞壁和細(xì)胞膜其次：把DNA和蛋白質(zhì)分離方法：根據(jù)二者的化學(xué)性質(zhì)不同三、實(shí)驗(yàn)材料洋蔥（或結(jié)球甘藍(lán)、香蕉等）四、儀器粉碎機(jī)、天平、試管、漏斗、滴管、玻璃棒、濾紙、玻璃片、顯微鏡五、試劑食鹽、95%乙醇、洗滌劑（1:5稀釋液）、蒸餾水、甲基綠溶液、班氏試劑、雙縮脲試劑六、方法步驟1）稱取

g洋蔥鱗葉。

原則上只要含DNA的生物材料都可以，但是選取DNA含量相對(duì)較高的生物組織，成功率更大。(一)實(shí)驗(yàn)材料的選取1.破碎：加入

ml洗滌劑稀釋液、2g

和50ml蒸餾水，用粉碎機(jī)打碎洋蔥鱗葉呈漿狀。

如果是動(dòng)物細(xì)胞怎么處理？請(qǐng)同學(xué)們想一想。2.過(guò)濾：用濾紙過(guò)濾漿液于試管中，獲得

。(二)破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液（三）DNA的析出與鑒定1.DNA的析出DNA的析出用的是與濾液體積相等的

（體積分?jǐn)?shù)為95％），靜置2-3min，溶液中會(huì)出現(xiàn)白色

，這就是粗提取DNA。用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水。冷卻的酒精溶液絮狀物2.觀察DNA的形態(tài)（三）DNA的析出與鑒定3.DNA的鑒定1）取少許絮狀物置載玻片上加1滴

，顯微鏡下觀察絮狀物顏色和形態(tài)，將結(jié)果記錄在實(shí)驗(yàn)報(bào)告上。甲基綠2）鑒定DNA時(shí)在試管中先加入物質(zhì)的量的濃度為2mol/L的NaCl溶液5ml于兩只試管中，其中一只加入DNA絲狀物，各加入4ml

試劑?；旌暇鶆蚝?，將試管置于沸水中加熱5min,待試管冷卻后，比較兩只試管中溶液顏色的變化，看看溶解有DNA的溶液是否有

。二苯胺藍(lán)色（三）DNA的析出與鑒定3）用

和

進(jìn)一步檢驗(yàn)粗提取液中的化學(xué)成分，將結(jié)果紀(jì)錄在實(shí)驗(yàn)報(bào)告上.班氏試劑雙縮脲試劑3.DNA的鑒定（三）DNA的析出與鑒定分析和討論1）提取洋蔥鱗葉中的DNA，為什么要用洗滌劑和NaCl進(jìn)行處理？2）實(shí)驗(yàn)所獲得的提取液是否純凈？并分析原因。3）在實(shí)驗(yàn)中，你觀察到DNA具有哪些物理性狀？4）嘗試用豬肝或其他動(dòng)物材料做這個(gè)實(shí)驗(yàn)，注意比較動(dòng)物材料和植物材料在處理上的差別。分析和討論小結(jié)1.DNA的粗提取與鑒定的方法2.原理3.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的步驟，原則

與析出DNA粘稠物有關(guān)的敘述，不正確的是（多選）A操作時(shí)緩慢滴加蒸餾水，降低DNA的溶解度B操作時(shí)用玻棒輕緩攪拌以保證DNA分子的完整C加蒸餾水可以同時(shí)降低DNA和蛋