萃取-紫外分光光度法測(cè)定微晶蠟中的微量3,4-苯并

萃取-紫外分光光度法測(cè)定微晶蠟中的微量3,4-苯并

1933年，科克等人通過了3、4-苯并，許多科學(xué)家進(jìn)行了致癌性厚環(huán)芳烴的分離和分析研究。1異辛烷的凈化1.1Lambda35紫外分光光度計(jì),美國(guó)PerkinElmer公司生產(chǎn);減壓蒸餾裝置,撫順石油化工研究院生產(chǎn);分液漏斗.異辛烷,正十六烷,磷酸(分析純);二甲亞砜(光譜純);3,4-苯并芘(純度大于98%);所用水為去離子水.561.2在長(zhǎng)約900mm、直徑50mm的玻璃色譜柱下端用潔凈的棉花堵塞,向色譜柱中裝入1kg左右的0.154~0.065mm細(xì)孔硅膠,然后加入異辛烷,異辛烷的處理量根據(jù)其中的雜質(zhì)而定,一般情況下1kg的硅膠可凈化4~5L的異辛烷,先滴下來的200mL須倒回上端容器再處理一次,液體流速應(yīng)控制在每分鐘4~5mL左右.正十六烷一般采用小色譜柱凈化,色譜柱的徑高比約為15~20,操作步驟與異辛烷的凈化步驟基本相同.1.33,4-稱取10mg的3,4-苯并芘,逐級(jí)定量加入凈化的異辛烷試劑,配制成相當(dāng)于溶液含有50ng/mL、200ng/mL、600ng/mL、1000ng/mL、1800ng/mL、3000ng/mL的3,4-苯并芘標(biāo)準(zhǔn)溶液.1.4取25g熔化的微晶蠟樣品,倒入裝有一定量的二甲亞砜磷酸溶液的分液漏斗中,振蕩抽提,分離濾液,重復(fù)抽提和洗滌,濾液合并.將合并的濾液和蒸餾水混合,加入異辛烷反抽提,棄去水層,得到稠環(huán)芳烴異辛烷混合液.混合液中加入1mL正十六烷,在水浴氮?dú)獯嫡糁翚堃翰淮笥?mL.殘液再加入異辛烷至總體積25mL,以空白試驗(yàn)所得殘液作參比液,在一定波長(zhǎng)下測(cè)定紫外吸光度,并與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較,得出微晶蠟中的3,4-苯并芘的含量.每毫升異辛烷溶液中所含的3,4-苯并芘量即相當(dāng)于每克微晶蠟中所含的3,4-苯并芘.2萃取時(shí)間和方法的選擇2.1選擇標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液配制的介質(zhì),首先應(yīng)考慮不影響3,4-苯并芘的測(cè)試結(jié)果,而且沸點(diǎn)和物性與微晶蠟較相近的物質(zhì)2.2用600ng/mL、1800ng/mL和3000ng/mL的3,4-苯并芘標(biāo)準(zhǔn)溶液,按1.4節(jié)實(shí)驗(yàn)方法測(cè)定,得到紫外吸收光譜圖,見圖1.由圖1可見,3,4-苯并芘異辛烷溶液在383nm處有最大吸收峰.因此,本實(shí)驗(yàn)選擇383nm作為測(cè)定微晶蠟中3,4-苯并芘的波長(zhǎng).2.3溶劑萃取是利用溶劑對(duì)樣品中的組分具有選擇性溶解能力2.4選擇75號(hào)微晶蠟和80號(hào)微晶蠟進(jìn)行萃取抽提試驗(yàn).每次取100mL二甲亞砜溶液與樣品按實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行分析,樣品吸光度與抽提次數(shù)的關(guān)系列于表1.由表1可見,吸光度隨抽提次數(shù)的增加而增大,但抽提三次后再增加抽提次數(shù)吸光度值基本保持不變,說明樣品經(jīng)過三次抽提即能將可抽提的3,4-苯并芘類稠環(huán)芳烴完全萃取,因此,本實(shí)驗(yàn)選擇的溶劑萃取次數(shù)為三次.2.5實(shí)驗(yàn)得到3,4-苯并芘濃度在50~3000ng/g的范圍內(nèi)呈良好線形關(guān)系,工作曲線回歸方程C=9242.4A–29.6,相關(guān)系數(shù)0.9995.檢出限為16ng/g.2.6在80號(hào)微晶蠟中加入不同量的3,4-苯并芘,進(jìn)行了加標(biāo)回收試驗(yàn),結(jié)果見表2.由表2可見,3,4-苯并芘的回收較高,回收率在97.0%~99.4%之間.2.7為考察方法的重復(fù)性,選取五個(gè)樣品分別進(jìn)行了六次平行測(cè)定,3,4-苯并芘含量在50~3000ng/g的范圍內(nèi),相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為6.2%.2.8按實(shí)驗(yàn)方法要求,對(duì)國(guó)內(nèi)六種石蠟和微晶蠟樣品進(jìn)行了測(cè)定,結(jié)果見表3.由表3可見,加氫后753檢出限和檢出限(1)采用二甲亞砜萃取-紫外分光光度法能夠測(cè)定食品微晶蠟中ng/g級(jí)含量的3,4-苯并芘,其檢出限為16ng/g.(2)3,4-苯并芘含量在50~3000ng/g的