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不同樁道預(yù)備時(shí)機(jī)及剩余根充物長(zhǎng)度對(duì)根管修復(fù)微滲漏的影響
實(shí)驗(yàn)?zāi)P偷暮?jiǎn)介葡萄糖微滲透模型:該方法于2005年首次提出。葡萄糖作為一個(gè)指示劑(葡萄糖分子小,相對(duì)分子質(zhì)量?jī)H為180,易穿越小間隙,微生物所需的養(yǎng)分,具有良好的臨床相關(guān)性)。對(duì)牙體管系統(tǒng)中的葡萄糖濃度進(jìn)行了分析,并對(duì)微滲進(jìn)行了定量檢測(cè)。該模型的優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)單易行,無(wú)需破壞牙體組織,可在一定時(shí)間段內(nèi)對(duì)同一樣本連續(xù)、定量評(píng)價(jià)微滲漏情況。掃描電鏡:是介于透射電鏡和光學(xué)顯微鏡之間的一種微觀形貌觀察手段,可直接利用樣品表面材料的物質(zhì)性能進(jìn)行微觀成像。掃描電鏡的優(yōu)點(diǎn):(1)有較高的放大倍數(shù),20-20萬(wàn)倍之間連續(xù)可調(diào);(2)有很大的景深,視野大,成像富有立體感,可直接觀察各種試樣凹凸不平表面的細(xì)微結(jié)構(gòu);(3)試樣制備簡(jiǎn)單。0防止細(xì)菌滲透根尖周內(nèi)屏障因齲病或創(chuàng)傷導(dǎo)致牙冠部分或完全缺損的病例,絕大多數(shù)通過(guò)根管治療后進(jìn)行樁核冠修復(fù)來(lái)恢復(fù)牙齒外形與功能。完善的根管治療可為防止細(xì)菌及其毒素滲入根尖周組織建立起有效屏障,樁道預(yù)備后的根管內(nèi)剩余充填物,是阻止細(xì)菌及其毒素從冠方進(jìn)入根尖區(qū)的最后一道屏障。根管充填未達(dá)到理想標(biāo)準(zhǔn)或不良的樁核冠修復(fù),可造成材料與牙體間的微滲漏,細(xì)菌及其毒素可滲入根尖周組織,造成二次感染,影響牙體修復(fù)遠(yuǎn)期效果良好的封閉性是保證高質(zhì)量樁核冠修復(fù)的要求,樁道預(yù)備會(huì)對(duì)根管內(nèi)充填物的封閉性帶來(lái)不利影響1材料和方法1.1項(xiàng)目設(shè)計(jì)1.2時(shí)間和地點(diǎn)實(shí)驗(yàn)于2014年8月至2016年10月在中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院醫(yī)學(xué)研究中心及中山大學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心完成。1.3儀器與檢測(cè)方法牙膠尖(登士柏,美國(guó));AHPlus根管封閉劑(登士柏,美國(guó));牙科蠟(上齒,上海);中性硅酮膠(康道寧,美國(guó));葡萄糖測(cè)定試劑盒-己糖激酶法(利德曼,北京);全自動(dòng)生化分析儀(日立7600,日本);掃描電鏡(FEIQuanta200,美國(guó));雙目眼鏡式放大鏡(HEINAHRP,德國(guó))。1.4實(shí)驗(yàn)方法1.4.1材料和實(shí)驗(yàn)方法采集中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院正畸科86顆近期拔除的單、直根管下頜前磨牙,告知患者及其家屬收集樣本用途并簽署知情同意書(shū)。采用超聲潔牙器械清除離體牙表面的軟組織和結(jié)石,保存于4℃生理鹽水中備用。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中除必要實(shí)驗(yàn)操作外,所有樣本均保存于潮濕環(huán)境,所有實(shí)驗(yàn)步驟均由一人獨(dú)立完成。離體牙納入標(biāo)準(zhǔn):拍攝錐形束CT確認(rèn)主根管為單根管,且根管形態(tài)為直根管;釉牙骨質(zhì)界至根尖長(zhǎng)度為(12±1)mm;牙根完整;根尖孔發(fā)育完成;無(wú)牙髓治療史;雙目眼鏡式放大鏡6倍放大視野下觀察,牙體表面無(wú)隱裂或折裂。離體牙排除標(biāo)準(zhǔn):齲壞面積大,超越釉牙骨質(zhì)界;彎曲根管;牙根吸收;畸形牙;根管鈣化閉鎖。1.4.2根管的沖洗和離體牙的制備水冷狀態(tài)下截除離體牙部分牙冠,保留16mm牙體。拔髓,10號(hào)K銼疏通根管并測(cè)量根管工作長(zhǎng)度,ProtaperUniversal鎳鈦系統(tǒng)預(yù)備根管至F2。每次更換器械均用2mL5%NaOCl溶液沖洗根管。根管預(yù)備完成后,以15%EDTA和5%NaOCl溶液交替沖洗根管60s,去除玷污層,最后以5mL蒸餾水沖洗,無(wú)菌紙尖干燥根管。根管預(yù)備后隨機(jī)選擇10顆離體牙作陽(yáng)性對(duì)照組,不作根管充填;取剩余76顆離體牙,采用側(cè)方加壓法充填根管,主尖選用Protaper專用標(biāo)準(zhǔn)牙膠尖,光滑髓針導(dǎo)入AHPlus根管封閉劑,側(cè)壓充填器反復(fù)側(cè)壓及充填副尖直至不能放入為止,副尖選用0.02錐度牙膠。充填完成后用加熱器械切斷多余牙膠并垂直加壓。拍攝數(shù)字根尖片評(píng)價(jià)充填效果,樣本均恰填,充填物影像均勻、致密。1.4.3充填后樁道預(yù)備在進(jìn)行根管充填的76顆離體牙中,隨機(jī)選擇10顆離體牙為陰性對(duì)照組,根管充填后不行樁道預(yù)備,粘蠟封閉根管口及根尖孔,且整個(gè)牙體外表面涂布2層透明指甲油。余66顆離體牙隨機(jī)分為6個(gè)實(shí)驗(yàn)組,每組11顆:A1組、B1組、C1組在根管充填后即刻行樁道預(yù)備;A2組、B2組、C2組在根管充填后置于37℃、100%濕度環(huán)境中1周,再行樁道預(yù)備;樁道預(yù)備后A1組、A2組保留根管內(nèi)4mm充填物,B1組、B2組保留根管內(nèi)5mm充填物,C1組、C2組保留根管內(nèi)6mm充填物。具體分組見(jiàn)表1。樁道預(yù)備以1-3#Peeso鉆去除牙膠至預(yù)定深度,并且垂直加壓根尖段充填物。完成后拍攝數(shù)字根尖片,確定根尖部剩余充填物保留設(shè)定長(zhǎng)度,同時(shí)保證充填物與根管璧接觸緊密。完成樁道預(yù)備后,將標(biāo)本置于37℃、100%濕度環(huán)境48h。1.4.4掃描電鏡觀察從6個(gè)實(shí)驗(yàn)組各隨機(jī)選取1顆離體牙,水冷狀態(tài)下于距離牙根尖3mm處,用切片機(jī)器切取厚約1mm橫截面薄片,蒸餾水反復(fù)沖洗,依照掃描電鏡要求常規(guī)脫水,干燥,涂布導(dǎo)電糊劑,真空噴涂金膜,將標(biāo)本放置于掃描電鏡下觀察根管壁與根充材料結(jié)合狀態(tài),并拍攝放大1000倍照片。1.4.5離體牙表面進(jìn)行透明無(wú)定模和連接除作掃描電鏡觀察外,將其余的80顆離體牙在距根尖孔1mm以上牙體外表面涂布2層透明指甲油,并連接于葡萄糖微滲漏模型。葡萄糖微滲漏模型參考Xu等1.5主要觀察指標(biāo)1.6糖濃度檢測(cè)方法采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。經(jīng)Sharpiro-Wilk檢驗(yàn)分析,各組葡萄糖濃度數(shù)據(jù)均為非正態(tài)分布,采用兩樣本比較的秩和檢驗(yàn)(Mann-WhitneyUtest)和多個(gè)樣本比較的秩和檢驗(yàn)(Kruskal-Wallistest)方法,檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05;多組間的兩兩比較,采用調(diào)整α值的Bonferroni法,檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α′=0.017。2結(jié)果的結(jié)果2.1充填物與根管壁的微裂縫掃描電鏡顯示,C1組根管充填物與根管壁最緊密連接,根充物與根管壁間微縫隙最小,根管封閉劑聚合均勻、致密,充填物未見(jiàn)明顯變形或破碎;A1組、B1組、C2組根管充填物與根管壁結(jié)合情況與C1組相似,牙膠尖未見(jiàn)明顯變形,但充填物與根管壁間微縫隙較C1組大,且縫隙中可見(jiàn)少量顆粒狀疏松分布的封閉劑;B2組充填物與根管壁間微縫隙較B1組明顯,且根管封閉劑呈團(tuán)塊狀分布于縫隙;A2組根管充填物與根管壁間存在最明顯微縫隙,充填物移位,封閉劑變形、碎裂,封閉劑-牙膠尖及封閉劑-根管壁界面間均存在明顯裂隙,不能緊密結(jié)合,見(jiàn)圖2。2.2陰性對(duì)照組和陰性對(duì)照組葡萄糖滲漏陽(yáng)性對(duì)照組于第1天即可觀察到葡萄糖從牙體冠方向根方滲漏,且呈快速上升趨勢(shì);陰性對(duì)照組觀察至28d無(wú)葡萄糖滲漏。說(shuō)明該裝置密封性良好,葡萄糖溶液可經(jīng)根管系統(tǒng)從冠方流向根方,該模型靈敏、可靠。2.3微滲漏量統(tǒng)計(jì)各實(shí)驗(yàn)組標(biāo)本均有微滲漏發(fā)生,A1組葡萄糖微滲漏量為(4.77±3.61)mmol/L,A2組為(21.71±9.08)mmol/L,B1組為(3.55±3.33)mmol/L,B2組為(7.83±6.32)mmol/L,C1組為(2.86±1.83)mmol/L,C2組為(5.27±3.67)mmol/L。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,A2組微滲漏量高于A1組(Z=3.781,P<0.05);B2組微滲漏量高于B1組(Z=2.118,P<0.05);C1組和C2組微滲漏量無(wú)差異(Z=1.441,P>0.05);A1組、B1組、C1組微滲漏量無(wú)差異(χ3根管冠向微滲漏影響根管系統(tǒng)的微滲漏包括來(lái)自冠方和根尖的微滲漏,冠向微滲漏是造成根管系統(tǒng)再次感染的最主要原因近年來(lái),有關(guān)樁道預(yù)備時(shí)機(jī)對(duì)微滲漏的影響研究結(jié)果頗有爭(zhēng)議。此次研究結(jié)果與Solano等然而,Greeca等樁道預(yù)備后,根管內(nèi)剩余充填物是防止細(xì)菌及其毒素進(jìn)入根尖區(qū)的最后一道屏障,同時(shí)根管內(nèi)剩余充填物的長(zhǎng)度與樁長(zhǎng)度呈反比,充填物長(zhǎng)度的增加意味著樁長(zhǎng)度的減小,影響樁核修復(fù)體的固位樁道預(yù)備后,剩余根充物的封閉作用隨著長(zhǎng)度的減少而被減弱,目前認(rèn)為不同長(zhǎng)度剩余根充物影響根尖封閉性的主要原因是側(cè)枝根管的存在綜上所述,即刻樁道預(yù)備在減少微滲漏方面優(yōu)于延遲樁道預(yù)備;即刻樁道預(yù)備后,保留4,5,6mm根充物對(duì)微滲漏影響無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,而延遲樁道預(yù)備時(shí)應(yīng)至少保留5mm根充物,以減少微滲漏的發(fā)生。臨床上根管充填后即刻行樁道預(yù)備,有利于形
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