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文檔簡(jiǎn)介
22.1.1植物的花瓣屬于 的組織,利用它來(lái)培育出的植株,首先要通過(guò)細(xì)胞的 過(guò)程培育出 然后再?gòu)挠鷤M織分化形成小植株這里所說(shuō)的細(xì)胞脫分化就是讓已經(jīng)分化的細(xì)胞經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)后失去其特有的 和 而轉(zhuǎn)變成 細(xì)胞的過(guò)程。在植物中,一些分化的細(xì)胞,經(jīng)過(guò) 的誘導(dǎo),可以脫分化為具有分生力量的薄壁細(xì)胞,進(jìn)而形成植物的愈傷組織愈傷組織在肯定的培育條件下又可以 出幼根和芽形成完整的小植株。 的任何一個(gè)細(xì)胞,都具有發(fā)育成完整生物體的 ,也就是說(shuō),每個(gè)生物細(xì)胞都具有全能性的特點(diǎn)因此在理論上生物的任何一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整植株的潛力。但是,在生物的 過(guò)程中,細(xì)胞并不會(huì)表現(xiàn)出全能性,而是 成各種組織和器官這是由于在特定的 和 條件下細(xì)胞中的基因會(huì)有選擇性地表達(dá)出各種蛋白質(zhì),從而構(gòu)成生物體的不同組織和器官。植物組織培育技術(shù)植物組織培育技術(shù)試驗(yàn):胡蘿卜的組織培育以脫分化形成愈傷組織。將愈傷組織轉(zhuǎn)接到含有不同 成分的培育基上,就可以誘導(dǎo)其再分化生成胚狀體或叢芽,進(jìn)而發(fā)育成完整的小植株。植物組織培養(yǎng)的全過(guò)程,證明了 。方法步驟將胡蘿卜根用自來(lái)水充分洗凈,削去外皮,并切成段〔約10cm)。用酒精棉球擦手消毒。在超凈工作臺(tái)〔或接種箱〕上將胡蘿卜段溶液消毒30s后,馬上用無(wú)菌水清洗2—3次,再用 溶液處理30min后,馬上用無(wú)菌水清洗2~3次。用 的濾紙吸去胡蘿卜段外表的水分然后在消毒瓷磚上用無(wú)菌的解剖刀將胡蘿卜段切成1cm厚的橫切片,再選取有形成層的部位,切取1cm左右的小塊。上貼上標(biāo)簽,寫(xiě)明材料名稱、接種日期和小組編號(hào)。將接種后的胡蘿卜組織塊放在23~26℃恒溫 條件下培育4d后檢查培育材料的污染狀況;14d后,觀看愈傷組織的生長(zhǎng)狀況。然后,在恒溫箱中連續(xù)避光培育。在培育過(guò)程中,留意定期觀看和記錄愈傷組織的生長(zhǎng)狀況。培育一段時(shí)間后將生長(zhǎng)良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到 培育基上培育一段時(shí)間后胡蘿卜的愈傷組織就可以誘導(dǎo)出試管苗。然后將試管苗移栽到大田,培育成正常植株。爭(zhēng)論爭(zhēng)論1.在組織培育試驗(yàn)中,為什么要強(qiáng)調(diào)所用器械的滅菌和試驗(yàn)人員的無(wú)菌操作?1.在組織培育試驗(yàn)中,為什么要強(qiáng)調(diào)所用器械的滅菌和試驗(yàn)人員的無(wú)菌操作?大量對(duì)培育物中用到的各種器械都要進(jìn)展徹底地,試驗(yàn)人員操作肯定要標(biāo)準(zhǔn),避開(kāi)帶入雜菌。愈傷組織。請(qǐng)思考一下,胡蘿卜的其他局部〔如莖、葉、花,是否也能培育成小植株?提示:能,只是誘導(dǎo)愈傷組織比較 。請(qǐng)依據(jù)上面的試驗(yàn)過(guò)程,概括出植物組織培育技術(shù)的流程簡(jiǎn)圖。培育基的組成:固體培育基大多數(shù)都是由 、 、 、 四局部組成。通過(guò)上面的試驗(yàn)我們可以總結(jié)出:植物組織培育就是和人工掌握條件下,將的植物器官、組織、細(xì)胞,培育在人工配制的培育基上,賜予適宜的培育條件,誘導(dǎo)其產(chǎn)生 、 ,最終形成完整的植株。植物體細(xì)胞雜交技術(shù)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)科學(xué)家嘗試將番茄和馬鈴薯雜交試圖培育出一種地上長(zhǎng)番茄地下結(jié)馬鈴薯“超級(jí)作物。但是不同的兩種生物之間存在著自然的 ,用傳統(tǒng)的有性雜交方法不行能得到二者的雜種后代。經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的試驗(yàn),科學(xué)家們承受體細(xì)胞雜交的方法,最終得到了“番茄—馬鈴薯雜種植株在進(jìn)展體細(xì)胞雜交之前必需先利用 和 去除這層細(xì)胞壁,獲得具有活力的 。雜交過(guò)程中的另一個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)是原生質(zhì)體間的融合。進(jìn)展原生質(zhì)體間的融合必需要借助肯定的技術(shù)手段進(jìn)展人工誘導(dǎo)人工誘導(dǎo)的方法根本可以分為兩大類(lèi)—物理法和化學(xué)法。物理法包括 、 、 等;化學(xué)法一般是用 〔PEG)作為誘導(dǎo)劑來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞融合。植物體細(xì)胞雜交就是將不同種的植物體細(xì)胞,在肯定條件下融合成 ,并把雜種細(xì)胞培育成的植物體的技術(shù)。雖然科學(xué)家們歷盡艱辛,最終實(shí)現(xiàn)了兩個(gè)物種間的雜交惋惜這株同時(shí)具有兩個(gè)物種遺傳物質(zhì)的超級(jí)植物并沒(méi)有如科學(xué)家所想像的那樣,地上長(zhǎng)番茄、 地下結(jié)馬鈴薯。盡管如此,這項(xiàng)爭(zhēng)論還是在 上,取得了巨大的突破。思考與探究思考與探究11馬鈴薯?提示:生物基因的表達(dá)不是的,它們之間是相互、相互的,所以馬鈴薯—番茄能再像馬鈴薯或番茄植株中的遺傳物質(zhì)一樣表達(dá),雜交植株不能地上長(zhǎng)番茄、地下結(jié)馬鈴薯就是很自然的了。2.自然界中有一種含有葉綠體的原生動(dòng)物──眼蟲(chóng)2.自然界中有一種含有葉綠體的原生動(dòng)物──眼蟲(chóng)出具體試驗(yàn)方案。方案可以設(shè)計(jì)如下:第第2一、植物生殖的途徑1、微型生殖植物組織培育技術(shù)不僅可以保持優(yōu)良品種的 還可以高效快速地實(shí)現(xiàn)種苗的大量生殖,因此人們形象地把用于快速生殖優(yōu)良品種的植物組織培育技術(shù),叫做植物的 技術(shù),也叫 技術(shù)。2、作物脫毒馬鈴薯和草莓都是生殖的作物它們感染的很簡(jiǎn)潔傳播給后代病毒在作物體內(nèi)逐年積存,就會(huì)導(dǎo)致作物產(chǎn)量降低,品質(zhì)變差??茖W(xué)家們覺(jué)察植四周〔如莖尖〕的病毒極少,甚至無(wú)病毒。因此,切取肯定大小的莖尖進(jìn)展 ,再生的植株就有可能不帶病毒,從而獲得 。3、奇特的人工種子農(nóng)業(yè)林業(yè)生產(chǎn)離不開(kāi)種子但不少樹(shù)木需要生長(zhǎng)數(shù)年后才能結(jié)出種子一些作物優(yōu)良雜種的后代也會(huì)因發(fā)生 而喪失其優(yōu)良特性另外常規(guī)種子的生產(chǎn)還會(huì)受到季節(jié)氣候和地域的限制,并且需要占用大量的土地來(lái)實(shí)現(xiàn)制種。人工種子:就是以植物組織培育得到的 、 、 和 等為材料,經(jīng)過(guò)人工薄膜包裝得到的種子。人工種子在適宜條件下同樣能夠萌發(fā)長(zhǎng)成幼苗。精卵發(fā)育形成的胚有類(lèi)似的構(gòu)造和發(fā)育過(guò)程。其不同的發(fā)育階段,也可以用正常胚發(fā)育中各個(gè)時(shí)期的術(shù)語(yǔ)來(lái)描述,如原胚、球形胚、心形胚、形胚等。思考思考1、為了促進(jìn)胚狀體的生長(zhǎng)發(fā)育,還可以向人工種皮中參加哪些物質(zhì)?1、為了促進(jìn)胚狀體的生長(zhǎng)發(fā)育,還可以向人工種皮中參加哪些物質(zhì)?分析:可以參加適量的養(yǎng)分、無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)碳源以及農(nóng)藥、抗生素、有益菌等。為了促進(jìn)胚狀體的生長(zhǎng)發(fā)育,還可以向人工種皮中參加一些植物生長(zhǎng)調(diào)整劑。二、作物品種的培育單倍體育種:常規(guī)選育出一個(gè)可以穩(wěn)定遺傳的農(nóng)作物優(yōu)良品種,一般要經(jīng)過(guò)5—6年的連續(xù)篩選而單倍體育種則是通過(guò)花藥培育獲得 后當(dāng)年便可得到 的優(yōu)良品種這樣就極大地縮短了 ,節(jié)約了大量的人力物力單倍體育種已成為作物育種的一條途徑。受到培育條件和外界壓力〔如射線、化學(xué)物質(zhì)等的影響而產(chǎn)生。從這些產(chǎn)生突變的個(gè)體中可以篩選出對(duì)人們有用的突變體,進(jìn)而培育成品種。體細(xì)胞誘變育種在作物育種中可以對(duì)植物的 進(jìn)展化學(xué)或物理的誘變處理促使其發(fā)生突變,再通過(guò)誘導(dǎo)分化形成植株。從這些植株中篩選出高抗、高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)的突變體,就可以培育成品種。三、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)化生產(chǎn)。這些細(xì)胞產(chǎn)物包括蛋白質(zhì)、脂肪、糖類(lèi)、藥物、香料、生物堿等。(ABA)和多效唑也可以用于植物的組織培育。生長(zhǎng)素類(lèi)在組織培育中生長(zhǎng)素用于誘導(dǎo)細(xì)胞的 和的分化常用的生長(zhǎng)素有IAA〔吲哚乙酸、IBA〔吲哚-3-丁酸、NAA〔萘乙酸〕和2,4—D(2,4—二氯苯氧乙酸)。其中IBA和NAA廣泛用于誘導(dǎo)分化生長(zhǎng)物的并能與細(xì)胞分裂素相互作而促進(jìn)莖的增殖。2,4-D常用于植物愈傷組織的誘導(dǎo)和生長(zhǎng),但它趨向于抑制植物形態(tài)的發(fā)生,所以在分化培育基中很少利用。細(xì)胞分裂素類(lèi)在培育基中細(xì)胞分裂素的王要作用是促進(jìn)組織細(xì)胞的 或從愈傷組織和器官上分化出 。比較常用的細(xì)胞分裂素有6-BA〔6-芐基腺嘌呤、KT〔感動(dòng)素、呋喃氨基嘌呤和玉米素其中6-BA一般用于誘導(dǎo)植物的愈傷組織分化出叢芽而KT的作用主要是刺激培育物的細(xì)胞加速分裂,加快培育物的生長(zhǎng)速度。赤霉素類(lèi)赤霉素類(lèi)植物生長(zhǎng)調(diào)整劑的主要作用是刺激培育細(xì)胞的 所以在組織培育中一般使用赤霉素來(lái)刺激分化的叢芽或小植株快速 赤霉素在高溫下極易 一般是在 除菌后再參加到已經(jīng) 的培育基中。生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的協(xié)同調(diào)控作用在組織培育中格外重要人們常把它們稱“激素杠桿。例如當(dāng)生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比例適中且生長(zhǎng)素含量高于細(xì)胞分裂素時(shí)主要誘導(dǎo)植物組織 和 的形成而當(dāng)細(xì)胞分裂素的效應(yīng)高于生長(zhǎng)素時(shí)則主要誘導(dǎo)植物組織 和 的形成。另外,植物生長(zhǎng)調(diào)整劑在培育基中的用量要考慮組織激素的含量。2.22.2動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有動(dòng)物細(xì)胞培育動(dòng)物細(xì)胞核移植動(dòng)物細(xì)胞融合生產(chǎn)單克隆抗體等,其中 技術(shù)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的根底。2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培育和核移植技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培育就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織將它分散成 ,然后放在適宜的培育基中,讓這些細(xì)胞 和 。動(dòng)物細(xì)胞培育的過(guò)程動(dòng)物細(xì)胞培育的過(guò)程成塊的組織中細(xì)胞與細(xì)胞靠在一起彼此限制了細(xì)胞的 和 因此進(jìn)展細(xì)胞培育時(shí),首先將組織分散成很多單個(gè)細(xì)胞。方法是從安康動(dòng)物體內(nèi)取出組織塊,剪碎,用或 處理一段時(shí)間這樣組織就會(huì)分散成單個(gè)細(xì)胞然后用培育液將分散的細(xì)胞稀釋制成細(xì)胞懸液再將細(xì)胞懸液放入培育瓶?jī)?nèi)置于適宜環(huán)境中培育懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上稱為 。培育貼附性細(xì)胞時(shí)細(xì)胞要能夠貼附于底物上這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的 人們通常將 稱為原代培才能 ,這就要求培育瓶或培育皿的內(nèi)外表光滑、無(wú)毒,易于貼附。以后,細(xì)胞進(jìn)展有絲分裂數(shù)量不斷增多這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的 人們通常將 稱為原代培養(yǎng)。 的細(xì)胞需要重用胰蛋白酶等處理然后分瓶連續(xù)培育讓細(xì)胞連續(xù)增殖這樣的培育過(guò)程通常被稱為 。傳代培育的細(xì)胞一般傳至10代后就不易傳下去了。一般來(lái)說(shuō),細(xì)胞在傳至10~50代左右時(shí),增殖會(huì)漸漸緩慢,以至于完全停頓,這時(shí)局部細(xì)胞的 可能會(huì)發(fā)生變化。當(dāng)連續(xù)傳代培育時(shí),少局部細(xì)胞會(huì)抑制細(xì)胞壽命的自然極限,獲得不死性,這些細(xì)胞已經(jīng)發(fā)生,正在朝著等同于癌細(xì)胞的方向進(jìn)展目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為 代以內(nèi),以保持細(xì)胞正常的 。尋根問(wèn)底:胰蛋白酶真的不會(huì)把細(xì)胞消化掉嗎?尋根問(wèn)底:胰蛋白酶真的不會(huì)把細(xì)胞消化掉嗎?提示胰蛋白酶除了可以消化細(xì)胞間的蛋白外長(zhǎng)時(shí)間的作用也會(huì)消化 蛋白對(duì)細(xì)胞有損傷作用,因此必需掌握好胰蛋白酶的消化 。分?用胃蛋白酶行嗎?分?用胃蛋白酶行嗎?提示用胰蛋白酶分散細(xì)胞說(shuō)明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是 。多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培育的適宜pH為7.2~7.4,胃蛋白酶在此環(huán)境中沒(méi)有活性,而胰蛋白酶在此環(huán)境中活性較高。小學(xué)問(wèn):1957年,科學(xué)家承受胰蛋白酶消化處理和應(yīng)用液體培育基的方法,獲得單層細(xì)胞細(xì)胞培育普遍應(yīng)用的技術(shù)。動(dòng)物細(xì)胞培育的條件動(dòng)物細(xì)胞培育的條件胞自身造成危害。 的環(huán)境首先應(yīng)保證被培育的細(xì)胞處于無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境即對(duì)培育液和全部培育用具進(jìn)展無(wú)菌處理。通常還要在細(xì)胞培育液中添加肯定量的 ,以防培育過(guò)程中的污染。此外,應(yīng) ,以便去除代謝產(chǎn)物,防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積存對(duì)細(xì)胞自身造成危害。養(yǎng)分:細(xì)胞體外培育所需養(yǎng)分物質(zhì)與體內(nèi)根本一樣,例如,需要有糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子無(wú)機(jī)鹽微量元素等將細(xì)胞所需的上述養(yǎng)分物質(zhì)按其種類(lèi)和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培育基稱為培育基由于 因此,在使用合成培育基時(shí),通常需參加、等一些自然成分。溫度和pH36.5±0.5℃為宜。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2~7.4。氣體環(huán)境:細(xì)胞培育所需氣體主要有O2和CO2,O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是 進(jìn)展細(xì)胞培育時(shí)通常承受培育皿或松蓋培育瓶將其置于 的混合氣體的培育箱中進(jìn)展培育。小學(xué)問(wèn)在科學(xué)爭(zhēng)論中有時(shí)需要明確界定培育液的成分而血清中由于含有很多未知成分,會(huì)對(duì)爭(zhēng)論結(jié)果有所影響因此,在進(jìn)展細(xì)胞培育時(shí),也可承受無(wú)血清培育無(wú)血清培育基是在根本培育基中添加一些的 的物質(zhì)。動(dòng)物細(xì)胞培育技術(shù)的應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞培育技術(shù)的應(yīng)用很多有重要價(jià)值的 ,如病干擾素、單克隆抗體等都可以借助動(dòng)物細(xì)胞的大規(guī)模培育來(lái)生產(chǎn)。動(dòng)物細(xì)胞是基因工程技術(shù)中常用的 細(xì)胞,因此,基因工程也離不開(kāi)動(dòng)物細(xì)胞的培育培育的動(dòng)物細(xì)胞還可以用于檢測(cè)有毒物質(zhì)推斷某種物質(zhì)的 。藥物等,為治療和預(yù)防癌癥及其他疾病供給理論依據(jù)。動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物高度分化的植物組織仍保持著全能性但動(dòng)物細(xì)胞與植物細(xì)胞不同動(dòng)物細(xì)胞的全能性會(huì)隨著動(dòng)物細(xì)胞 的提高而漸漸受到限制分化潛能漸漸變?nèi)跻虼四壳斑€不能用類(lèi)似植物組織培育的方法獲得完整的動(dòng)物個(gè)體用動(dòng)物體細(xì)胞克隆的動(dòng)物實(shí)際是通過(guò) 來(lái)實(shí)現(xiàn)的。動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核,移入一個(gè) 中,使其重組并發(fā)育成一個(gè)的胚胎這個(gè)的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為 。哺乳動(dòng)物核移植可以分為 核移植和 核移植。由于動(dòng)物胚胎細(xì)胞 ,恢復(fù)其全能性相對(duì)簡(jiǎn)潔,而動(dòng)物體細(xì)胞 ,恢復(fù)其全能性格外困難因此動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度也就明顯 胚胎細(xì)胞核移植體細(xì)胞核移植的過(guò)程下面以克隆高產(chǎn)奶牛為例,來(lái)說(shuō)明體細(xì)胞核移植的大致過(guò)程。①?gòu)墓w高產(chǎn)奶牛身體的某部位取體細(xì)胞,培育供體細(xì)胞〔動(dòng)物細(xì)胞培育;②從卵巢中采集卵母細(xì)胞,培育到 期;③通過(guò) 去除卵母細(xì)胞的核。由于MII期卵母細(xì)胞核的位置靠近第一極體,用微型吸管可一并吸出 ;④將供體細(xì)胞注入到卵母細(xì)胞外的 位置;⑤通過(guò) 使 膜和 膜融合供體核進(jìn)入受體卵母細(xì)胞構(gòu)建重組胚胎;⑥用物理〔如 〕或化學(xué)方法〔如鈣離子載體〕激活受體細(xì)胞,使其完和 進(jìn)程。⑦早期胚胎培育、胚胎移植。爭(zhēng)論爭(zhēng)論:1.在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母細(xì)胞之前,為什么必需先去掉受體卵母細(xì)胞的核?1.在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母細(xì)胞之前,為什么必需先去掉受體卵母細(xì)胞的核?提示為使核移植的胚胎或動(dòng)物的 全部來(lái)自 的動(dòng)物供給的體細(xì)胞。22.用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞,想一想,這是為什么?提示:10代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的 。3.你認(rèn)為用上述體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物,是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)展了100%的復(fù)制嗎?為什么?3.你認(rèn)為用上述體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物,是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)展了100%的復(fù)制嗎?為什么?提示克隆動(dòng)物絕大局部DNA來(lái)自于 但其核外還有少量的DNA,即 中的DNA是來(lái)自于受體卵母細(xì)胞所以用教材中所述的方法克隆的動(dòng)物不是供核動(dòng)物完全一樣的復(fù)制。此外即便動(dòng)物的遺傳根底完全一樣但動(dòng)物的一些行為習(xí)性的形成與 有很大關(guān)系核供體動(dòng)物生活的環(huán)境與克隆動(dòng)物所生活的環(huán)境不會(huì)完全一樣其形成的行為習(xí)性也不行能和核供體動(dòng)物完全一樣,從這一角度看,克隆動(dòng)物不會(huì)是核供體動(dòng)物100%的復(fù)制。生物技術(shù)資料卡目前核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是 法還有人承受其他方法,如 、 、化學(xué)物質(zhì)處理等。這些方法是在沒(méi)有刺破透亮帶或卵母細(xì)胞質(zhì)膜的狀況下,去除細(xì)胞核或使卵細(xì)胞核DNA,從而到達(dá)的目的。拓展視野:核移植技術(shù)進(jìn)展簡(jiǎn)史拓展視野:核移植技術(shù)進(jìn)展簡(jiǎn)史早在1938體。1952年,美國(guó)學(xué)者布里格斯和金將豹蛙囊胚細(xì)胞的核移植到去核卵中,得到了能夠發(fā)育的胚胎他們改進(jìn)了核移植技術(shù)后在正常分裂的卵中有80%可以發(fā)育成幼蛙這些爭(zhēng)論結(jié)果說(shuō)明細(xì)胞的全能性雖然隨著 的提高而漸漸受到限制但細(xì)胞核仍含有保持該物種遺傳性的 ,也就是說(shuō) 仍保持有全能性。20世紀(jì)70年月,我國(guó)科學(xué)家運(yùn)用核移植技術(shù),將鯉魚(yú)囊胚細(xì)胞的細(xì)胞核,移植到已去核殖力量。20世紀(jì)80年月哺乳動(dòng)物的核移植爭(zhēng)論有了很大的進(jìn)展1981年瑞士學(xué)者伊爾曼斯和霍普將小鼠胚胎的細(xì)胞核注入去核的受精卵中獲得了胚胎細(xì)胞核移植的小鼠以后人們用體內(nèi)或體外成熟的 代替了受精卵作為受體細(xì)胞相繼得到了胚胎細(xì)胞核移植的各種動(dòng)物,如綿羊、牛、小鼠、兔、豬等。但體細(xì)胞核移技術(shù)始終未能成功。直到1997年英國(guó)學(xué)者韋爾穆特等宣布用成年綿羊乳腺細(xì)胞得到 核移植后代才獲得了突破性的進(jìn)展這就是轟動(dòng)世界的綿羊多利多利的誕生說(shuō)明成年動(dòng)物的體細(xì)胞核移植技術(shù)獲得了成功。在以后的幾年中,各種體細(xì)胞克隆動(dòng)物,如小鼠、牛、山羊、豬以及各種轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物也相繼問(wèn)世。2.2.22.2.2動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合也稱 是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的 細(xì)胞,稱為雜交細(xì)胞。動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的根本原理一樣誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法也類(lèi)似,常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇(PEG)、 、電激等。細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限,使 成為可能。至今種間、屬間、科間,甚至動(dòng)物和植物之間的細(xì)胞融合都已獲得了成功利用細(xì)胞融合技術(shù)而進(jìn)展起來(lái)的雜交瘤技術(shù),為制造 開(kāi)拓了途徑。生物技術(shù)資料卡滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理是病毒外表含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用使細(xì)胞相互分散細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子 細(xì)胞膜翻開(kāi)細(xì)胞發(fā)生融合滅活是指用物理或化學(xué)手段使病毒或細(xì)菌失去 力量但是并不破壞這些病原體的 構(gòu)造。單克隆抗體單克隆抗體長(zhǎng)期以來(lái)人們?yōu)榱双@得抗體承受的方法是向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射 產(chǎn)生抗體,然后從動(dòng)物 中分別所需抗體。這種方法不僅 ,而且制備的抗體 差動(dòng)物在免疫反響的過(guò)程中體內(nèi)產(chǎn)生的特異性抗體種類(lèi)可多達(dá)百萬(wàn)種以上但是每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌 。因此,要想獲得大量的單一抗體,必需克隆單一的B淋巴細(xì)胞,形成細(xì)胞群圓滿的是,在體外培育條件下,一個(gè)B淋巴細(xì)胞是不行能
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