2022-2023學(xué)年山西省晉城市一中高二4月月考生物試題 （解析版）

試卷第=page11頁(yè)，共=sectionpages33頁(yè)試卷第=page11頁(yè)，共=sectionpages33頁(yè)山西省晉城市一中2022-2023學(xué)年高二4月月考生物試題學(xué)校:___________姓名：___________班級(jí)：___________考號(hào)：___________一、單選題1．根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，下列?shí)驗(yàn)的對(duì)照設(shè)置不合理的是（

）實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?duì)照設(shè)置A酵母菌的純培養(yǎng)未接種的滅菌平板B探究土壤微生物對(duì)淀粉的分解作用用碘液和斐林試劑檢測(cè)土壤浸出液處理的淀粉糊C粗提取DNA的鑒定將二苯胺試劑加入2mol/LNaCl溶液中，沸水浴加熱D通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR的產(chǎn)物加樣孔中加入指示分子的標(biāo)準(zhǔn)參照物A．A B．B C．C D．D【答案】B【分析】除了一個(gè)因素以外，其余因素都保持不變的實(shí)驗(yàn)叫做對(duì)照實(shí)驗(yàn)。對(duì)照實(shí)驗(yàn)一般要設(shè)置對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組。人為改變的變量稱為自變量，隨著自變量的變化而變化的變量稱為因變量?！驹斀狻緼、用未接種的滅菌平板做空白對(duì)照，可知培養(yǎng)基是否滅菌合格，A正確；B、應(yīng)用碘液和斐林試劑檢測(cè)未處理的淀粉糊做空白對(duì)照，可知實(shí)驗(yàn)組土壤微生物的分解效果，B錯(cuò)誤；C、將二苯胺試劑加入2mol/LNaCl溶液中，沸水浴加熱，沒(méi)有顏色反應(yīng)，可證明實(shí)驗(yàn)組出現(xiàn)藍(lán)色是DNA和二苯胺試劑反應(yīng)的結(jié)果，與NaCl溶液無(wú)關(guān)，C正確；D、加樣孔中加入指示分子大小的標(biāo)準(zhǔn)參照物做對(duì)照，可知PCR的產(chǎn)物是否合格，D正確。故選B。2．下圖甲、乙是探究發(fā)酵的裝置示意圖。下列相關(guān)敘述正確的是A．甲用于探究果醋果酒發(fā)酵時(shí)，打開(kāi)閥a，轉(zhuǎn)動(dòng)攪拌器有利于提高產(chǎn)量B．打開(kāi)閥b，經(jīng)管口3取樣檢測(cè)酒精和二氧化碳的產(chǎn)生情況C．甲可用于探究果酒果醋發(fā)酵，發(fā)酵前要對(duì)整個(gè)裝置進(jìn)行氣密性檢查D．乙用于腐乳制作，應(yīng)控制好溫度，加鹽腌制后接種毛霉菌種【答案】C【分析】據(jù)圖分析：閥a是控制充氣口充氣的，制備果酒，應(yīng)該關(guān)閉充氣口，醋酸發(fā)酵時(shí)連接充氣泵充入無(wú)菌空氣；閥b是控制發(fā)酵液的取樣的，管口2連接的是排氣口，酒精發(fā)酵時(shí)用來(lái)排出二氧化碳。腐乳制作過(guò)程中，加鹽的作用是析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬和抑制微生物的生長(zhǎng)，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)?！驹斀狻緼.閥a是控制充氣口充氣的，制備果酒，酒精發(fā)酵需要無(wú)氧環(huán)境，應(yīng)該關(guān)閉閥a，故當(dāng)甲用于探究果酒發(fā)酵時(shí)，打開(kāi)閥a，轉(zhuǎn)動(dòng)攪拌器的條件下，由于溶氧量增加，不利于酒精發(fā)酵，A錯(cuò)誤；B.打開(kāi)閥b，可經(jīng)管口3取樣檢測(cè)酒精的產(chǎn)生情況，而產(chǎn)生的二氧化碳從管口2排出，B錯(cuò)誤；C.甲可用于探究果酒果醋發(fā)酵，發(fā)酵前要對(duì)整個(gè)裝置進(jìn)行氣密性檢查，C正確；D.腐乳制作過(guò)程中，溫度控制在15~18℃，并保持一定濕度，加鹽的作用是析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬和抑制微生物的生長(zhǎng)，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)，故腐乳制作時(shí)應(yīng)先接種毛霉菌種，后加鹽腌制，D錯(cuò)誤。故選C。3．培養(yǎng)基是指供給微生物、植物或動(dòng)物細(xì)胞（或組織）生長(zhǎng)繁殖的，由不同物質(zhì)組合配制而成的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。針對(duì)下表中的三組培養(yǎng)基，下列敘述錯(cuò)誤的是（）組別培養(yǎng)基成分a蛋白胨、酵母提取物、甘露醇、水b葡萄糖、尿素、NaCl、K2HPO4、酚紅、瓊脂糖c礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、甘氨酸、水、瓊脂A．a(chǎn)組培養(yǎng)基可用于醋酸桿菌的擴(kuò)大培養(yǎng)，該培養(yǎng)過(guò)程需用到磁力攪拌器和搖床B．b組培養(yǎng)基可用于分離能合成脲酶的微生物，該實(shí)驗(yàn)中可用全營(yíng)養(yǎng)LB固體培養(yǎng)基作對(duì)照C．c組培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物時(shí)，甘氨酸和蔗糖可為其提供氮源D．上述培養(yǎng)基不僅要為相應(yīng)的細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)還要為其生存和繁殖提供適宜的環(huán)境【答案】C【分析】篩選目的微生物時(shí)應(yīng)該使用只有目的微生物能夠生存，而其他微生物不能生存的選擇培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是指通過(guò)培養(yǎng)混合的微生物，僅得到或篩選出所需要的微生物，其他不需要的種類在這種培養(yǎng)基上是不能生存的?！驹斀狻緼、a組培養(yǎng)基可用于醋化醋桿菌的擴(kuò)大培養(yǎng)，磁力攪拌器和搖床都是擴(kuò)大菌落與其所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的接觸面積，利于菌落的培養(yǎng)，A正確；B、b組培養(yǎng)基以尿素作為唯一氮源，含脲酶的微生物在該培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)，其它微生物在該培養(yǎng)基上因缺乏氮源而不能生長(zhǎng)，可用于分離含脲酶的微生物，該實(shí)驗(yàn)中需用全營(yíng)養(yǎng)LB固體培養(yǎng)基作對(duì)照，通過(guò)對(duì)照可以判斷選擇培養(yǎng)基的選擇作用，B正確；C、蔗糖的元素組成是C、H、O，不含N元素，不能提供氮源，C錯(cuò)誤；D、上述培養(yǎng)基不僅要為相應(yīng)的細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，還要為其生存和繁殖提供適宜的環(huán)境，以保證微生物的正常生長(zhǎng)，D正確。故選C。4．酵母菌的品質(zhì)影響葡萄酒的產(chǎn)量和質(zhì)量，研究人員為分離出產(chǎn)酒精能力強(qiáng)的酵母菌菌株，進(jìn)行了如圖I所示實(shí)驗(yàn)，甲、乙、丙、丁錐形瓶?jī)?nèi)分別加入100mL完全培養(yǎng)基，下列說(shuō)法正確的是（

）

A．傳統(tǒng)葡萄酒發(fā)酵過(guò)程中，為避免污染發(fā)酵裝置需嚴(yán)格滅菌B．用稀釋涂布平板法計(jì)算出葡萄酒過(guò)濾液的活菌數(shù)為6．8×106個(gè)/L，此數(shù)值可能高于實(shí)際的活菌數(shù)C．對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌的方法是高壓蒸汽滅菌法，菌種接種過(guò)程中的試管口、瓶口等無(wú)需再灼燒滅菌D．由圖Ⅱ可知，丙可能是培養(yǎng)瓶密封不嚴(yán)導(dǎo)致，丁組酵母菌產(chǎn)酒精能力比乙強(qiáng)【答案】D【分析】果酒制作過(guò)程中的相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作：材料的選擇和處理→滅菌→榨汁→發(fā)酵。利用葡萄皮表面野生型酵母菌在缺氧的環(huán)境下發(fā)酵產(chǎn)酒精。若對(duì)菌液計(jì)數(shù)，需選取菌落數(shù)處于30~300的培養(yǎng)皿計(jì)數(shù)。平均菌落數(shù)除以涂布體積乘上稀釋倍數(shù)求的是每百毫升發(fā)酵液的微生物數(shù)量，還應(yīng)該再乘10算每升發(fā)酵液的微生物數(shù)?！驹斀狻緼、在傳統(tǒng)葡萄酒發(fā)酵過(guò)程中，利用的是葡萄皮表面的天然酵母菌，不需要嚴(yán)格滅菌，A錯(cuò)誤；B、若對(duì)菌液計(jì)數(shù)，需選取菌落數(shù)處于30~300的培養(yǎng)皿計(jì)數(shù)。平均菌落數(shù)除以涂布體積乘上稀釋倍數(shù)求的是每毫升發(fā)酵液的微生物數(shù)量，還應(yīng)該再乘1000算每升發(fā)酵液的微生物數(shù)，故先求平均菌落數(shù)為（62+68+74）÷3=68，除以涂布體積0.1mL后等于680個(gè)/mL，稀釋倍數(shù)為1×104，再乘1000，最后為6.8×109個(gè)/L，計(jì)數(shù)過(guò)程中兩個(gè)或兩個(gè)以上細(xì)胞連在一起，平板上生長(zhǎng)出一個(gè)菌落，所以數(shù)目偏小，B錯(cuò)誤；C、培養(yǎng)基滅菌采用高壓蒸汽滅菌，玻璃器皿、接種用具可采用干熱滅菌，接種時(shí)的玻璃瓶口等都需在酒精燈火焰處進(jìn)行灼燒滅菌，C錯(cuò)誤；D、乙、丙、丁挑取不同的菌落培養(yǎng)，丙瓶與乙、丁瓶相同條件培養(yǎng)，但培養(yǎng)液沒(méi)有酒精產(chǎn)生，且瓶?jī)?nèi)活菌數(shù)量不低，丙瓶出現(xiàn)的原因可能是培養(yǎng)瓶密封不嚴(yán)，進(jìn)行有氧呼吸；丁組的活菌數(shù)比乙組少，但是產(chǎn)生的酒精和乙組一樣多，所以丁組產(chǎn)生酒精能力比乙強(qiáng)，D正確。故選D。5．M真菌能促進(jìn)根瘤菌（Rh）刺激根的局部膨大形成根瘤。為研究AM真菌促進(jìn)Rh形成根瘤的機(jī)制，研究人員分別取經(jīng)AM＋＋Rh－、AM－＋Rh＋和AM＋＋Rh＋處理的大豆根系分泌物（＋代表有，－代表無(wú)），滅菌后裝滿毛細(xì)管，將毛細(xì)管束放入含有根瘤菌菌液的試管中，實(shí)驗(yàn)裝置如圖1（此培養(yǎng)條件下根瘤菌能生存但并不增殖）。每隔兩天取出毛細(xì)管，用無(wú)菌水沖洗其外壁，打碎研磨沖洗定容后進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，結(jié)果如圖2。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．根瘤菌與AM真菌的本質(zhì)區(qū)別是有無(wú)成形的細(xì)胞核B．可采用高壓蒸汽滅菌鍋對(duì)大豆根系分泌物進(jìn)行滅菌處理C．取一定量的毛細(xì)管研磨液劃線接種在增殖平板培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)計(jì)數(shù)D．AM真菌與根瘤菌共同存在時(shí)，根系分泌物對(duì)根瘤菌的吸引作用更強(qiáng)【答案】C【分析】AM真菌屬于真核細(xì)胞，沒(méi)有擬核；而根瘤菌（Rh）屬于細(xì)菌，為原核生物，無(wú)以核膜為界限的細(xì)胞核。根瘤菌固定大氣中游離的氮?dú)猓瑸橹参锾峁┑仞B(yǎng)料，植物供給根瘤菌無(wú)機(jī)鹽和能源?！驹斀狻緼、根瘤菌屬于原核生物，AM真菌屬于真核細(xì)胞，二者的本質(zhì)區(qū)別是有無(wú)成形的細(xì)胞核，A正確；B、可采用高壓蒸汽滅菌鍋對(duì)大豆根系分泌物進(jìn)行滅菌處理，可以殺死微生物，B正確；C、取一定量的毛細(xì)管研磨液進(jìn)行稀釋涂布在增殖平板培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)計(jì)數(shù)，C錯(cuò)誤；D、從曲線圖上可以看出，AM真菌與根瘤菌共同存在時(shí)（AM++Rh+組），菌落數(shù)更多，說(shuō)明根系分泌物對(duì)根瘤菌的吸引作用更強(qiáng)，D正確。故選C。6．下圖為啤酒生產(chǎn)過(guò)程的簡(jiǎn)要流程，其中糖化的目的是將麥芽中的淀粉等有機(jī)物水解為小分子物質(zhì)。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A．過(guò)程①可用赤霉素溶液浸泡大麥種子，使種子無(wú)需發(fā)芽就能產(chǎn)生α-淀粉酶B．過(guò)程②破碎有利于淀粉與α-淀粉酶充分接觸，延長(zhǎng)糖化過(guò)程的時(shí)間C．過(guò)程③的主發(fā)酵階段的初期需要氧氣，隨后再保持厭氧環(huán)境，以便完成酒精的生成D．發(fā)酵過(guò)程中要適時(shí)往外排氣，后發(fā)酵時(shí)期應(yīng)延長(zhǎng)排氣時(shí)間間隔【答案】B【分析】1.赤霉素可以解除休眠，促進(jìn)種子的萌發(fā)；發(fā)酵初期應(yīng)提供氧氣，因酵母菌在有氧條件下能快速繁殖，以提高菌種數(shù)量、縮短發(fā)酵時(shí)間。2.發(fā)酵過(guò)程分為主發(fā)酵和后發(fā)酵兩個(gè)階段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成都在主發(fā)酵階段完成。主發(fā)酵結(jié)束后，發(fā)酵液還不適合飲用，要在低溫、密閉的環(huán)境下儲(chǔ)存一段時(shí)間進(jìn)行后發(fā)酵，這樣才能形成潛清、成熟的啤酒。【詳解】A、赤霉素可以解除休眠，促進(jìn)種子的萌發(fā)，所以過(guò)程①可用赤霉素溶液浸泡大麥種子，無(wú)須發(fā)芽就能產(chǎn)生的α-淀粉酶，A正確；B、“糖化的目的是將麥芽中的淀粉等有機(jī)物水解為小分子物質(zhì)”，故過(guò)程②破碎有利于淀粉與α-淀粉酶的充分接觸，縮短糖化過(guò)程所用的時(shí)間，B錯(cuò)誤；C、為了提高菌種數(shù)量、縮短發(fā)酵時(shí)間，過(guò)程③的主發(fā)酵初期應(yīng)提供氧氣，酵母菌在有氧條件下能快速繁殖，后期保持厭氧環(huán)境，酵母菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精，C正確；D、發(fā)酵過(guò)程中要適時(shí)往外排氣，后發(fā)酵時(shí)期由于糖類物質(zhì)不充足，產(chǎn)生的氣體變少，可以適當(dāng)延長(zhǎng)排氣時(shí)間間隔，D正確。故選B。7．花椰菜（2n=18）種植時(shí)容易遭受病菌侵害形成病斑，紫羅蘭（2n=14）具有一定的抗病性?？蒲腥藛T利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育具有抗病性狀的花椰菜新品種如圖1所示。通過(guò)蛋白質(zhì)電泳技術(shù)分析了親本及待測(cè)植株中某些特異性蛋白，結(jié)果圖2所示。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．圖1培育雜種植株所用的技術(shù)體現(xiàn)了植物細(xì)胞全能性和細(xì)胞膜流動(dòng)性原理B．圖1過(guò)程①是在無(wú)菌水中進(jìn)行，過(guò)程②是在固體培養(yǎng)基中進(jìn)行C．圖2中屬于雜種植株的是4和5，1可能是花椰菜D．病菌懸浮液均勻噴施于雜種植株葉片上，一段時(shí)間后，測(cè)定病斑面積占葉片總面積的百分比，可篩選抗病性強(qiáng)的雜種植株【答案】B【分析】1、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：就是將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成完整植物體的技術(shù)。植物體細(xì)胞雜交的終點(diǎn)是培育成雜種植株，而不是形成雜種細(xì)胞就結(jié)束；雜種植株的特征：具備兩種植物的遺傳特征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質(zhì)；植物體細(xì)胞雜交克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。2、根據(jù)圖譜分析，4號(hào)和5號(hào)個(gè)體含有紫羅蘭和花椰菜兩種類型的蛋白質(zhì)，說(shuō)明是雜種細(xì)胞，而1、2、3號(hào)個(gè)體只有紫羅蘭中的蛋白質(zhì)，說(shuō)明不是雜種細(xì)胞?！驹斀狻緼、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)將雜種細(xì)胞培養(yǎng)成完整植株，體現(xiàn)了植物細(xì)胞全能性；兩個(gè)物種細(xì)胞的融合體現(xiàn)了細(xì)胞膜流動(dòng)性原理，A正確；B、圖一過(guò)程中①是在等滲或高滲溶液中進(jìn)行，而不是在無(wú)菌水中，B錯(cuò)誤；C、根據(jù)圖譜分析4號(hào)和5號(hào)個(gè)體含有兩種類型的蛋白質(zhì)是雜種細(xì)胞，而1號(hào)個(gè)體只有1種蛋白質(zhì)可能是花椰菜，C正確；D、可將病菌懸浮液均勻噴施于雜種植株葉片上，一段時(shí)間后，測(cè)定病斑面積占葉片總面積的百分比，篩選出抗病性強(qiáng)的雜種植株，D正確。故選B。8．我國(guó)小麥育種專家李振聲將長(zhǎng)穗偃麥草的抗病、高產(chǎn)等基因轉(zhuǎn)移到普通小麥中，培育成了小麥二體異附加系（流程如下圖所示）。普通小麥6n=42，記為42W；長(zhǎng)穗偃麥草2n=14，記為14E。根據(jù)流程示意圖判斷，下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．①過(guò)程可用秋水仙素處理，得到純合二倍體B．丙染色體組成具有多樣性與乙形成配子時(shí)7E隨機(jī)分配有關(guān)C．丁自交產(chǎn)生的子代中，含有2E的植株戊約占1/4D．該育種過(guò)程依據(jù)的原理是基因重組和染色體變異【答案】A【分析】本題主要考察了基因重組和染色體數(shù)目變異培育新物種的過(guò)程，由于同源染色體在減數(shù)第一次分裂前期可以進(jìn)行聯(lián)會(huì)，才能使得最后染色體數(shù)目減半，因此個(gè)別染色體數(shù)目的增加可能在遺傳中隨機(jī)分配，根據(jù)減數(shù)分裂過(guò)程和基因重組的相關(guān)知識(shí)分析育種過(guò)程是本題的突破點(diǎn)。【詳解】A、普通小麥共有六個(gè)染色體組，長(zhǎng)穗偃麥草中含有兩個(gè)染色體組，因此F1中共含有4個(gè)染色體組，①過(guò)程可用秋水仙素處理導(dǎo)致紡錘體無(wú)法合成，從而使得染色體數(shù)目加倍，甲中含有8個(gè)染色體組，因此是獲得純種的異源八倍體，A錯(cuò)誤；B、丙是由普通小麥和乙雜交而來(lái)，普通小麥所產(chǎn)生的配子，含有21W三個(gè)染色體組，而乙在產(chǎn)生配子時(shí)，42W可以正常聯(lián)會(huì)并減半，但7E會(huì)聯(lián)會(huì)紊亂，在減數(shù)第一次分裂時(shí)隨機(jī)分配，B正確；C、丁產(chǎn)生的配子有兩種，分別是21W+1E或21W，因此自交后會(huì)產(chǎn)生42W、42W+1E、42W+1E、42W+2E，其中含有2E的占1/4，C正確；D、過(guò)程①為染色體數(shù)目變異，其余為基因重組，D正確；故選A。9．品種青花菜具有由核基因控制的多種優(yōu)良性狀，另一遠(yuǎn)緣植物乙的細(xì)胞質(zhì)中存在抗除草劑基因，欲將乙細(xì)胞質(zhì)中的抗性基因引入甲中。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．過(guò)程A中取頂芽細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞雜交有利于獲得脫毒苗B．過(guò)程B中常用PEG誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合C．過(guò)程C中只有融合細(xì)胞具有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，可以正常生長(zhǎng)D．雜種植株的抗除草劑基因遵循孟德?tīng)栠z傳定律【答案】D【分析】題圖分析：該圖為體細(xì)胞雜交過(guò)程，其中A為去除細(xì)胞壁，制備原生質(zhì)體，可以酶解法，B為誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，可以用聚乙二醇處理，融合的雜種細(xì)胞應(yīng)該具備乙品種細(xì)胞質(zhì)中的抗性基因和甲品種的控制多種優(yōu)良性狀的核基因。【詳解】A、頂端分生組織幾乎不帶毒，因此，過(guò)程A中取頂芽細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞雜交有利于獲得脫毒苗，A正確；B、流程中A處理可使用纖維素酶和果膠酶處理植物細(xì)胞獲得原生質(zhì)體，B處理可使用聚乙二醇促融，B正確；C、過(guò)程C中只有融合細(xì)胞活性部位互補(bǔ)，具有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，才正常生長(zhǎng)，然后將獲得的雜種細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)獲得雜種植株，C正確；D、抗除草劑基因不一定插入到細(xì)胞核內(nèi)的染色體上，所以雜種植株的抗除草劑基因不一定遵循孟德?tīng)栠z傳定律，D錯(cuò)誤。故選D。10．醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)紫杉醇能有效治療某些癌癥。獲得紫杉醇的傳統(tǒng)方法是從紅豆杉屬植物的樹(shù)皮中提取，但產(chǎn)量有限，也不利于瀕危的紅豆杉的保護(hù)。研究發(fā)現(xiàn)，紅豆杉的其他組織細(xì)胞也能生產(chǎn)紫杉醇，有人嘗試用細(xì)胞工程技術(shù)生產(chǎn)。下圖為三種紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞數(shù)量與紫杉醇產(chǎn)量的數(shù)據(jù)圖。下列說(shuō)法中，錯(cuò)誤的是（）

A．培養(yǎng)后期紫杉醇產(chǎn)量出現(xiàn)下降的原因可能是培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量減少、某些代謝產(chǎn)物積累等B．將紅豆杉細(xì)胞經(jīng)組織培養(yǎng)形成胚狀體方可接種到培養(yǎng)基中C．在培養(yǎng)過(guò)程中，要不斷通入無(wú)菌空氣并進(jìn)行攪拌D．利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)紫杉醇，具有產(chǎn)量高、節(jié)約資源、保護(hù)環(huán)境等優(yōu)點(diǎn)【答案】B【分析】紫杉醇產(chǎn)量的高低取決于培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量的多少，而環(huán)境因素會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)?！驹斀狻?。A、對(duì)比分析兩個(gè)曲線圖可知：培養(yǎng)后期紫杉醇產(chǎn)量出現(xiàn)下降的原因可能是所培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量減少、某些代謝產(chǎn)物積累等，A正確；B、將紅豆杉細(xì)胞經(jīng)組織培養(yǎng)形成愈傷組織方可接種到培養(yǎng)基中，B錯(cuò)誤；C、在培養(yǎng)過(guò)程中，要不斷通入無(wú)菌空氣并進(jìn)行攪拌，其目的是可以防止微生物污染同時(shí)保證氧氣供應(yīng)充足并使細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸，C正確；D、與傳統(tǒng)方法獲得紫杉醇相比，利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)紫杉醇，具有產(chǎn)量高、節(jié)約資源、保護(hù)環(huán)境等優(yōu)點(diǎn)，D正確。故選D。11．如圖表示某學(xué)習(xí)小組利用正常的小鼠細(xì)胞進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程，①~④表示相關(guān)過(guò)程。下列相關(guān)敘述正確的是（）

A．過(guò)程①可以使用機(jī)械法或酶解法改變細(xì)胞的通透性B．過(guò)程②為原代培養(yǎng)，培養(yǎng)細(xì)胞1一般會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象C．培養(yǎng)細(xì)胞2需要貼附于基質(zhì)表面生長(zhǎng)，直接用離心法進(jìn)行收集D．進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需置于95%O2和5%CO2的CO2培養(yǎng)箱中【答案】B【分析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)?！驹斀狻緼、過(guò)程①可以使用機(jī)械法或酶解法使組織分散成單個(gè)細(xì)胞，A錯(cuò)誤；B、過(guò)程②為動(dòng)物組織經(jīng)處理后初次培養(yǎng)，即為原代培養(yǎng)，體外培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞往往貼附在培養(yǎng)瓶的瓶壁上，當(dāng)其分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，通常會(huì)停止分裂增殖，即會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象，B正確；C、培養(yǎng)細(xì)胞2為傳代培養(yǎng)的細(xì)胞，若懸浮培養(yǎng)，則直接用離心法收集，若貼附于基質(zhì)表面生長(zhǎng)，需要重新用胰蛋白酶等處理，使之分散成單個(gè)細(xì)胞，然后再用離心法收集，C錯(cuò)誤；D、進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需置于95%空氣和5%CO2的CO2培養(yǎng)箱中，D錯(cuò)誤。故選B。12．2018年3月14日物理學(xué)家霍金去世，他曾經(jīng)患有肌肉萎縮性側(cè)索硬化癥即“漸凍癥”。有研究表明該病是由于突變的基因?qū)е律窠?jīng)元合成了某種毒蛋白，從而阻礙了軸突內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的流動(dòng)；也有最新研究結(jié)果表明，利用誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）制作前驅(qū)細(xì)胞，然后移植給漸凍癥實(shí)驗(yàn)鼠，能延長(zhǎng)其壽命。下列相關(guān)描述錯(cuò)誤的是（）A．誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞的分化實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，細(xì)胞種類增多B．誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞分化成的多種細(xì)胞中核酸相同，蛋白質(zhì)卻不完全相同C．將控制合成破壞運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的毒蛋白基因替換，可以起到良好治療作用D．植入神經(jīng)干細(xì)胞，使受損的運(yùn)動(dòng)功能得到恢復(fù)，可以一定程度改善“漸凍癥”【答案】B【分析】1、細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)。2、胚胎干細(xì)胞的主要用途是：①可用于研究哺乳動(dòng)物個(gè)體發(fā)生和發(fā)育規(guī)律；②是在體外條件下研究細(xì)胞分化的理想材料，在培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子，如牛黃酸等化學(xué)物質(zhì)時(shí)，就可以誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同類型的組織細(xì)胞分化，這為揭示細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡的機(jī)理提供了有效的手段；③可以用于治療人類的某些頑疾，如帕金森綜合征、少年糖尿病等；④利用可以被誘導(dǎo)分化形成新的組織細(xì)胞的特性，移植ES細(xì)胞可使壞死或退化的部位得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能；⑤隨著組織工程技術(shù)的發(fā)展，通過(guò)ES細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化，定向培育出人造組織器官，用于器官移植，解決供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問(wèn)題。【詳解】A、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞的分化實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，細(xì)胞分化使細(xì)胞種類增多，A正確；B、細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，分化形成的多種細(xì)胞中DNA相同，但mRNA不同，蛋白質(zhì)不完全相同，B錯(cuò)誤；C、根據(jù)題干信息“病是由于突變的基因?qū)е律窠?jīng)元合成了某種毒蛋白，從而阻礙了軸突內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的流動(dòng)”，若將控制運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元合成毒蛋白的基因替換，或許可以起到治療該病的作用，C正確；D、由“有最新研究結(jié)果表明，利用誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞（iPs細(xì)胞）制作前驅(qū)細(xì)胞，然后移植給漸凍癥實(shí)驗(yàn)鼠，能延長(zhǎng)其壽命”可推測(cè)植入神經(jīng)干細(xì)胞，使受損的運(yùn)動(dòng)功能得到恢復(fù)，可以一定程度改善“漸凍癥”，D正確。答案B。13．治療性克隆對(duì)解決供體器官缺乏和器官移植后免疫排斥反應(yīng)具有重要意義。流程圖如下，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A．重組細(xì)胞C的獲得利用了體細(xì)胞核移植技術(shù)B．胚胎干細(xì)胞通過(guò)分裂和分化產(chǎn)生移植所需的器官C．囊胚期胚胎不需植入代孕母體子宮即可獲得胚胎干細(xì)胞D．重組細(xì)胞C的遺傳物質(zhì)來(lái)自個(gè)體B，獲得的組織器官移植給個(gè)體B一般不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)【答案】D【分析】動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)：將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞內(nèi)，使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)。胚胎干細(xì)胞存在于早期胚胎中，具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一種類型的細(xì)胞，并進(jìn)一步形成機(jī)體的所有組織和器官甚至個(gè)體的潛能?！驹斀狻緼、由圖可知，將體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的卵母細(xì)胞中，從而獲得了重組細(xì)胞C，因此利用的是體細(xì)胞核移植技術(shù)，A正確；B、細(xì)胞分裂增加細(xì)胞數(shù)量，細(xì)胞分化增加細(xì)胞種類，胚胎干細(xì)胞通過(guò)分裂和分化產(chǎn)生移植所需的器官，B正確；C、由圖可知，發(fā)育至囊胚期的早期胚胎可以直接獲得胚胎干細(xì)胞，不需要植入代孕母體子宮，C正確；D、重組細(xì)胞C的遺傳物質(zhì)來(lái)自個(gè)體B（核遺傳物質(zhì)）和個(gè)體A（質(zhì)遺傳物質(zhì)），獲得的組織器官移植給個(gè)體B一般不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，D錯(cuò)誤。故選D。14．抗體—藥物偶聯(lián)物（ADC）通過(guò)將細(xì)胞毒素與能特異性識(shí)別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合，實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。ADC通常由抗體、接頭和藥物（如細(xì)胞毒素）三部分組成，它的作用機(jī)制如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．ADC中的抗體主要是發(fā)揮治療效應(yīng)，殺傷靶細(xì)胞B．制備ADC中的抗體應(yīng)用了體細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)C．ADC通過(guò)胞吞作用進(jìn)入腫瘤細(xì)胞體現(xiàn)了細(xì)胞膜的選擇透過(guò)性D．可以將ADC中的藥物換成放射性同位素，標(biāo)記單克隆抗體進(jìn)行靶向放療【答案】D【分析】據(jù)圖分析，抗體與靶細(xì)胞膜上的特異性受體結(jié)合通過(guò)胞吞的方式把藥物（細(xì)胞毒素）一并帶進(jìn)靶細(xì)胞，引起靶細(xì)胞溶酶體膜的破裂，最后導(dǎo)致細(xì)胞凋亡，實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷?！驹斀狻緼、由題干信息可知，抗體藥物偶聯(lián)物（ADC）通過(guò)將細(xì)胞毒素與能特異性識(shí)別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合，ADC中的抗體在選擇性殺傷腫瘤細(xì)胞中起識(shí)別作用，A錯(cuò)誤；B、制備單克隆抗體用到的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)有：動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，B錯(cuò)誤；C、ADC通過(guò)胞吞作用進(jìn)入腫瘤細(xì)胞體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動(dòng)性，C錯(cuò)誤；D、特異性抗體能特異性識(shí)別腫瘤抗原，所以利用同位素標(biāo)記的單克隆抗體，可用于定位診斷腫瘤，進(jìn)行靶向放療，D正確。故選D。15．人類輔助生殖技術(shù)采用醫(yī)療輔助手段，通過(guò)體外受精、胚胎移植等技術(shù)可幫助不孕不育的夫婦生育后代。下列相關(guān)敘述正確的是（

）A．體外受精技術(shù)一般需要對(duì)女性注射性激素促進(jìn)排卵B．體外受精時(shí)需對(duì)MⅡ期的卵母細(xì)胞進(jìn)行去核處理C．胚胎發(fā)育經(jīng)歷了受精卵→囊胚→桑葚胚→原腸胚過(guò)程D．經(jīng)胚胎移植技術(shù)所生育的雙胞胎不一定是同卵雙胎【答案】D【分析】體外受精主要包括卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精。早期胚胎發(fā)育過(guò)程為：受精卵→桑葚胚→囊胚→原腸胚→幼體?！驹斀狻緼、體外受精技術(shù)一般需要對(duì)女性注射促性腺激素促進(jìn)卵巢排卵，A錯(cuò)誤；B、體外受精時(shí)不需要對(duì)卵母細(xì)胞去核，B錯(cuò)誤；C、胚胎發(fā)育經(jīng)歷了受精卵→桑葚胚→囊胚→原腸胚過(guò)程，C錯(cuò)誤；D、經(jīng)胚胎移植技術(shù)所生育的雙胞胎不一定來(lái)自同一個(gè)受精卵發(fā)育而來(lái)，因此不一定是同卵雙胎，D正確。故選D。16．研究發(fā)現(xiàn)，小鼠四倍體胚胎具有發(fā)育缺陷，只能發(fā)育成胎盤(pán)等胚胎以外的結(jié)構(gòu)。ES細(xì)胞能夠誘導(dǎo)分化形成所有的細(xì)胞類型，但很難分化形成胎盤(pán)。四倍體胚胎與ES細(xì)胞的嵌合體則會(huì)使二者的發(fā)育潛能相互補(bǔ)償，可得到ES小鼠，其中的四倍體胚胎只能發(fā)育成胚外組織。下列敘述正確的是（

）A．將2細(xì)胞期胚胎用滅活病毒誘導(dǎo)法使2細(xì)胞融合，可得到一個(gè)含四個(gè)染色體組的細(xì)胞B．嵌合體中的ES具有自我更新能力并只能分化為胎盤(pán)等胚外組織C．嵌合體胚胎發(fā)育至原腸胚時(shí)需移植入與之生理狀態(tài)相同的小鼠子宮內(nèi)才可以進(jìn)一步發(fā)育D．嵌合體發(fā)育形成的ES小鼠基因型與供體ES細(xì)胞的基因型不同【答案】A【分析】胚胎工程是指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)。包括體外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。胚胎工程的許多技術(shù)，實(shí)際是在體外條件下，對(duì)動(dòng)物自然受精和早期胚胎發(fā)育條件進(jìn)行的模擬操作。嵌合體-遺傳學(xué)上用以指不同遺傳性狀嵌合或混雜表現(xiàn)的個(gè)體。【詳解】A、正常小鼠是二倍體，所以兩個(gè)2細(xì)胞期胚胎用滅活病毒等誘導(dǎo)法使細(xì)胞融合，可得到一個(gè)含四個(gè)染色體組的細(xì)胞，再經(jīng)胚胎的早期培養(yǎng)可得到四倍體胚胎，A正確；B、嵌合體中的ES具有自我更新能力，很難分化形成胎盤(pán)，可分化為處胎盤(pán)以外的所有細(xì)胞類型，B錯(cuò)誤；C、嵌合體胚胎發(fā)育至桑椹（桑葚）胚或囊胚期再移植入與之生理狀態(tài)相同的小鼠子宮內(nèi)才可以進(jìn)一步發(fā)育，C錯(cuò)誤；D、四倍體胚胎與ES細(xì)胞的嵌合體則會(huì)使二者的發(fā)育潛能相互補(bǔ)償，可得到ES小鼠，其中的四倍體胚胎只能發(fā)育成胚外組織，所以嵌合體發(fā)育形成的ES小鼠基因型與供體ES細(xì)胞的基因型相同，D錯(cuò)誤。故選A。17．如圖表示改造哺乳動(dòng)物遺傳特性的三種途徑，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．上述動(dòng)物的獲得過(guò)程中均運(yùn)用顯微注射法B．動(dòng)物2個(gè)體內(nèi)不同功能的細(xì)胞基因可以不同C．獲得動(dòng)物3的重組細(xì)胞具有全能性D．獲得動(dòng)物1的受體細(xì)胞通常是MII期卵母細(xì)胞【答案】D【詳解】A、上述動(dòng)物的獲得過(guò)程將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞均運(yùn)用了顯微注射法，A正確；B、動(dòng)物2的含有目的基因的體細(xì)胞與其他體細(xì)胞的基因種類不同，B正確；C、由重組細(xì)胞發(fā)育成一個(gè)完整的生物體動(dòng)物3，重組細(xì)胞具有全能性，C正確；D、獲得動(dòng)物1的受體細(xì)胞通常是受精卵，D錯(cuò)誤。故選D。18．下圖是“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中的兩個(gè)操作步驟示意圖。下列相關(guān)敘述不正確的是（）A．選用植物細(xì)胞提取DNA時(shí)需先研磨破碎細(xì)胞B．圖2所示實(shí)驗(yàn)操作中有一處明顯錯(cuò)誤，可能導(dǎo)致試管2中藍(lán)色變化不明顯C．圖1所示操作的原理是DNA不能溶于酒精，而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)能溶于酒精D．圖2試管1的作用是證明物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液遇二苯胺試劑出現(xiàn)藍(lán)色【答案】D【分析】1、DNA粗提取和鑒定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色?！驹斀狻緼、提取植物材料的DNA應(yīng)先破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，讓DNA釋放出來(lái)，A正確；B、圖2所示實(shí)驗(yàn)的試管中溶液的液面高于燒杯中的液面，可能導(dǎo)致加熱不充分，試管2中藍(lán)色變化不明顯，B正確；C、圖1所示操作的原理是DNA不能溶于酒精，而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)能溶，C正確；D、圖2試管1起對(duì)照作用，目的是證明沸水浴下物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液遇二苯胺試劑不會(huì)出現(xiàn)藍(lán)色，而DNA遇二苯胺試劑出現(xiàn)藍(lán)色，D錯(cuò)誤；故選D。19．下圖為不同限制性核酸內(nèi)切膀識(shí)別的序列及切割位置（箭頭所指），下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．圖示4種限制性核酸內(nèi)切酶均不能夠識(shí)別和切割RNA分子內(nèi)的核苷酸序列B．若DNA上的堿基隨機(jī)排列，NotI限制性核酸內(nèi)切酶切割位點(diǎn)出現(xiàn)頻率較其他三種限制性核酸內(nèi)切酶高C．酶切時(shí)使用兩種限制酶同時(shí)處理是為了防止質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化D．用酶BglII切出的目的基因與酶BamHI切割的質(zhì)粒重組后，則不能再被這兩種酶切開(kāi)【答案】B【分析】1、常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒（質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子）、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。2、作為運(yùn)載體必須具備的條件：①要具有限制酶的切割位點(diǎn)；②要有標(biāo)記基因（如抗性基因），以便于重組后重組子的篩選；③能在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定存在并復(fù)制；④是安全的，對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害，而且要易從供體細(xì)胞分離出來(lái)。3、天然的質(zhì)粒不能直接作為載體，基因工程中用到的質(zhì)粒都是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進(jìn)行過(guò)人工改造的。【詳解】A、酶具有專一性，限制酶是專門(mén)切割DNA序列中一定部位的酶，所以圖示4種限制性核酸內(nèi)切酶均不能夠識(shí)別和切割RNA分子內(nèi)的核苷酸序列，A正確；B、由于NotI限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別的序列比其他三種酶的序列長(zhǎng)，若DNA上的堿基隨機(jī)排列，NotI限制性核酸內(nèi)切酶切割位點(diǎn)出現(xiàn)頻率較其他三種限制性核酸內(nèi)切酶低，B錯(cuò)誤；C、兩種不同的限制酶可產(chǎn)生不同的黏性末端，所以使用兩種限制酶同時(shí)處理是為了防止質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化，C正確；D、用酶BglⅡ切出的目的基因與酶BamHⅠ切割的質(zhì)粒重組后，重組DNA分子序列為，6個(gè)脫氧核苷酸對(duì)序列既不能被限制酶BglⅡ識(shí)別，也不能被BamHⅠ識(shí)別，所以不可能被這兩種酶切開(kāi)，D正確。故選B。20．為減少引物與模板之間的非特異性配對(duì)，人們?cè)诔Ｒ?guī)PCR技術(shù)的基礎(chǔ)上進(jìn)行了改良，發(fā)明了巢式PCR技術(shù)。其原理是利用兩套PCR引物進(jìn)行兩輪PCR擴(kuò)增，首先利用第一對(duì)引物（外引物）對(duì)目的基因所在DNA進(jìn)行15-30個(gè)循環(huán)的擴(kuò)增；第二輪擴(kuò)增以第一輪擴(kuò)增產(chǎn)物為模板，利用第二對(duì)引物（內(nèi)引物或巢式引物）進(jìn)行15-30個(gè)循環(huán)擴(kuò)增，具體過(guò)程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．巢式PCR中加入的組分與常規(guī)PCR相同，但擴(kuò)增產(chǎn)物比常規(guī)PCR特異性更強(qiáng)B．兩套引物需進(jìn)行兩次PCR，由于和兩套引物都互補(bǔ)的靶序列較少，因此大大提高了擴(kuò)增的特異性C．內(nèi)引物擴(kuò)增的模板是外引物擴(kuò)增后的產(chǎn)物，第二階段反應(yīng)能否進(jìn)行，也是對(duì)第一階段反應(yīng)正確性的鑒定D．如果第一次擴(kuò)增產(chǎn)生了錯(cuò)誤片斷，則第二次能在錯(cuò)誤片段上進(jìn)行引物配對(duì)并擴(kuò)增的概率將會(huì)增加【答案】D【分析】PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)，所利用的原理為DNA分子的復(fù)制，因此PCR技術(shù)一般用于基因擴(kuò)增?！驹斀狻緼、巢式PCR中加入的組分與常規(guī)PCR相同，包括5種基本成分，依次為：引物、DNA聚合酶、dNTP（原料）、模板DNA、Mg2+，但擴(kuò)增產(chǎn)物比常規(guī)PCR特異性更強(qiáng)，A正確；B、巢式PCR通過(guò)兩輪PCR反應(yīng)，使用兩套引物擴(kuò)增特異性的DNA片段，第二對(duì)引物的功能是特異性的擴(kuò)增位于首輪PCR產(chǎn)物內(nèi)的一段DNA片段。第一輪擴(kuò)增中，外引物用以產(chǎn)生擴(kuò)增產(chǎn)物，此產(chǎn)物在內(nèi)引物的存在下進(jìn)行第二輪擴(kuò)增，從而提高反應(yīng)的特異性獲得的產(chǎn)物特異性更強(qiáng)，B正確；CD、內(nèi)引物擴(kuò)增的模板是外引物擴(kuò)增后的產(chǎn)物，第二階段反應(yīng)能否進(jìn)行，也是對(duì)第一階段反應(yīng)正確性的鑒定：如果利用外引物擴(kuò)增產(chǎn)生了錯(cuò)誤片段，再利用內(nèi)引物擴(kuò)增在錯(cuò)誤片段上進(jìn)行引物配對(duì)并擴(kuò)增的概率減小，C正確，D錯(cuò)誤。故選D。21．CRISPR/Cas9是一種生物學(xué)工具，能夠通過(guò)“剪切和粘貼”脫氧核糖核酸（DNA）序列的機(jī)制來(lái)編輯基因組。CRISPR-Cas9基因組編輯系統(tǒng)由向?qū)NA（也叫sgRNA）和Cas9蛋白組成，向?qū)NA識(shí)別并結(jié)合靶基因DNA，Cas9蛋白切斷雙鏈DNA形成兩個(gè)末端。這兩個(gè)末端通過(guò)“斷裂修復(fù)”重新連接時(shí)通常會(huì)有個(gè)別堿基對(duì)的插入或缺失，從而實(shí)現(xiàn)基因敲除，如圖所示。CRISPR-Cas9基因組編輯技術(shù)有時(shí)存在編輯出錯(cuò)而造成脫靶。下列敘述正確的是（

）A．Cas9蛋白的功能與限制酶類似，能作用于脫氧核糖和堿基之間的化學(xué)鍵B．設(shè)計(jì)sgRNA時(shí)只需要考慮識(shí)別區(qū)域的堿基序列不需要考慮sgRNA的長(zhǎng)度C．其他DNA序列含有與sgRNA互補(bǔ)配對(duì)的序列，造成sgRNA錯(cuò)誤結(jié)合而脫靶D．對(duì)不同目標(biāo)DNA進(jìn)行編輯時(shí)，使用Cas9蛋白和相同的sgRNA進(jìn)行基因編輯【答案】C【分析】由題意可知，CRISPR-Cas9體系是由靶基因的向?qū)NA和Cas9蛋白構(gòu)成的復(fù)合體。向?qū)NA在基因組中負(fù)責(zé)尋找靶基因并與其結(jié)合；Cas9蛋白在向?qū)NA的引導(dǎo)下切割靶基因，使DNA雙鏈斷裂產(chǎn)生平末端。在隨后DNA自我修復(fù)的過(guò)程中容易隨機(jī)引起一些堿基對(duì)的插入或缺失，導(dǎo)致基因功能改變。

【詳解】A、Cas9蛋白識(shí)別并切斷雙鏈DNA形成兩個(gè)末端，相當(dāng)于限制酶，能作用于磷酸二酯鍵，A錯(cuò)誤；B、需要考慮長(zhǎng)度，SgRNA的序列長(zhǎng)短影響成功率，序列越短，則出錯(cuò)的頻率越高，脫靶率越高，B錯(cuò)誤；C、CRISRP/Cas9基因編輯技術(shù)有時(shí)存在編輯出錯(cuò)而造成脫靶，其最可能的原因是其他DNA序列也含有與向?qū)NA(sgRNA)互補(bǔ)配對(duì)的序列，造成向?qū)NA(sgRNA)錯(cuò)誤結(jié)合而脫靶，C正確；D、在對(duì)不同目標(biāo)DNA進(jìn)行編輯時(shí)，應(yīng)使用Cas9蛋白和不同的sgRNA結(jié)合進(jìn)而實(shí)現(xiàn)對(duì)不同基因的編輯，D錯(cuò)誤；故選C。22．下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。下列說(shuō)法正確的是（）限制酶BamHIHindⅢEcoRISmaI識(shí)別序列及切割位點(diǎn)G↓GATCCCCTAG↑GA↓AGCTTTTCGA↑AG↓AATTCCTTAA↑GCCC↓GGGGGG↑CCC

A．一個(gè)圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaI切割前后，分別含有1、2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)B．若對(duì)圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的SmaI酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越低C．與只使用EcoRI相比較，使用BamHI和HindⅢ兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒和外源DNA可以防止質(zhì)粒和含目的基因的DNA自身環(huán)化D．為了從cDNA文庫(kù)中分離獲取蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體，然后在只含蔗糖的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以完成目的基因表達(dá)的初步檢測(cè)【答案】C【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻緼、該質(zhì)粒為環(huán)狀，在沒(méi)有經(jīng)過(guò)SmaⅠ切割前，其不含游離的磷酸基團(tuán)；當(dāng)被SmaⅠ酶切割后該質(zhì)粒變成以一條DNA分子，含有兩條單鏈，而在每條單鏈的5′端會(huì)都含有一個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，所以含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，A錯(cuò)誤；B、對(duì)該質(zhì)粒進(jìn)行改造是只插入SmaⅠ酶切位點(diǎn)，SmaⅠ酶切位點(diǎn)中含有很多的C-G堿基對(duì)，含有的C-G堿基對(duì)越多，則所含的氫鍵越多，因此熱穩(wěn)定性越高，B錯(cuò)誤；C、因?yàn)槿绻皇褂猛环N限制性內(nèi)切酶，則形成的黏性末端都相同，質(zhì)粒可以和目的基因進(jìn)行重組，同時(shí)質(zhì)粒也可以與質(zhì)粒重組、目的基因也可與目的基因重組，這樣就達(dá)不到試驗(yàn)的目的，因此使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制性核酸內(nèi)切酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化，C正確；D、將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體后，含有重組質(zhì)粒的個(gè)體才能吸收蔗糖，因此可利用蔗糖作為唯一碳源的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)受體細(xì)胞，含有重組質(zhì)粒的細(xì)胞才能存活，不含有重組質(zhì)粒的因不能獲得碳源而死亡，從而達(dá)到篩選出目的基因的目的，D錯(cuò)誤。故選C。23．利用重疊延伸PCR技術(shù)進(jìn)行定點(diǎn)突變可以實(shí)現(xiàn)對(duì)纖維素酶基因進(jìn)行合理性改造，其過(guò)程如下圖所示。下列分析錯(cuò)誤的是（）A．PCR1過(guò)程中的產(chǎn)物AB是依賴引物a和引物b擴(kuò)增的結(jié)果B．引物c和引物b上均含有與模板鏈不能互補(bǔ)的堿基C．①過(guò)程需要先加熱至90～95℃后再冷卻至50～60℃D．②過(guò)程需要利用引物a和引物d獲得突變產(chǎn)物AD【答案】D【分析】1、PCR原理：在解旋酶作用下，打開(kāi)DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4中游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開(kāi)始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過(guò)程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。2、PCR反應(yīng)過(guò)程是：變性→復(fù)性→延伸。3、結(jié)果：上述三步反應(yīng)完成后，一個(gè)DNA分子就變成了兩個(gè)DNA分子，隨著重復(fù)次數(shù)的增多，DNA分子就以2n的形式增加。PCR的反應(yīng)過(guò)程都是在PCR擴(kuò)增儀中完成的?！驹斀狻緼、PCR技術(shù)中DNA單鏈延伸的方向是沿著引物的5'端向3'端延伸的，據(jù)此可分析，PCR1過(guò)程中的產(chǎn)物AB是依賴引物a和引物b擴(kuò)增的結(jié)果，A正確；B、根據(jù)突變位點(diǎn)的產(chǎn)生可推知，引物c和引物b上均含有與模板鏈不能互補(bǔ)的堿基，B正確；C、①過(guò)程是雙螺旋解開(kāi)的過(guò)程，即氫鍵斷裂可通過(guò)先加熱至90～95℃完成，而后再冷卻至55～60℃使氫鍵形成，為子鏈的延伸做準(zhǔn)備，C正確；D、②過(guò)程為子鏈延伸的過(guò)程，該過(guò)程需要利用AB上鏈和CD下鏈之間的互補(bǔ)配對(duì)實(shí)現(xiàn)子鏈的延伸過(guò)程，D錯(cuò)誤。故選D。24．為使玉米獲得抗除草劑性狀，科研人員進(jìn)行了相關(guān)操作(如圖所示)。含有內(nèi)含子的報(bào)告基因不能在原核生物中正確表達(dá)，其正確表達(dá)產(chǎn)物能催化無(wú)色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。轉(zhuǎn)化過(guò)程中愈傷組織表面常殘留農(nóng)桿菌，會(huì)導(dǎo)致未轉(zhuǎn)化的愈傷組織可能在含除草劑的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。下列敘述錯(cuò)誤的是A．T-DNA可將基因G轉(zhuǎn)移并整合到愈傷組織細(xì)胞的染色體DNA上B．利用物質(zhì)K和抗生素進(jìn)行篩選1，可獲得農(nóng)桿菌的藍(lán)色菌落C．利用物質(zhì)K和除草劑進(jìn)行篩選2，更易于獲得抗除草劑的轉(zhuǎn)基因植株D．愈傷組織重新分化為芽、根等器官的過(guò)程中，需要添加植物激素【答案】B【分析】1、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的具體過(guò)程：（1）利用土壤的Ti質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體，即將目的基因整合到土壤農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上。（2）將整合了目的基因的Ti質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌細(xì)胞內(nèi)。（3）利用土壤農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞，該過(guò)程實(shí)際上是將含有目的基因的土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒導(dǎo)入植物細(xì)胞內(nèi)。（4）含有目的基因的土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒進(jìn)入植物細(xì)胞后，可以把自己的一段基因整合到細(xì)胞核中的染色體上，這段基因中包含了目的基因。2、原理：農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上。根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn)，如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上。3、農(nóng)桿菌特點(diǎn)：易感染雙子葉植物和裸子植物，對(duì)單子葉植物沒(méi)有感染力；Ti質(zhì)粒的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞的染色體上。4、轉(zhuǎn)化：目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上農(nóng)桿菌→導(dǎo)入植物細(xì)胞→目的基因整合到植物細(xì)胞染色體上→目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)?！驹斀狻緼、農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn)，將目的基因（基因G）插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因（基因G）整合到愈傷組織細(xì)胞的染色體DNA上，A正確；B、農(nóng)桿菌屬于原核生物，含有內(nèi)含子的報(bào)告基因不能在原核生物中正確表達(dá)，故不會(huì)出現(xiàn)農(nóng)桿菌的藍(lán)色菌落，B錯(cuò)誤；C、根據(jù)題意可知，報(bào)告基因的產(chǎn)物能催化無(wú)色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色，而愈傷組織表面殘留的農(nóng)桿菌會(huì)導(dǎo)致未轉(zhuǎn)化的愈傷組織能在含除草劑的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，因此利用物質(zhì)K和除草劑進(jìn)行篩選2，更易于獲得抗除草劑的轉(zhuǎn)基因植株，C正確；D、愈傷組織重新分化為芽、根等器官的過(guò)程中，需要添加植物激素，如生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素，D正確。故選B。25．脫氧核苷三磷酸(dNTP)和雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP，ddN-Pα~Pβ~Pγ)的結(jié)構(gòu)均與核苷三磷酸(NTP)類似，其中dNTP核糖的第2位碳原子上的羥基(—OH)被氫原子取代而ddNTP核糖第2位和第3位碳原子上的羥基均被氫原子取代。DNA復(fù)制時(shí)，ddNTP可以與dNTP競(jìng)爭(zhēng)核苷酸鏈延長(zhǎng)位點(diǎn)，并終止DNA片段的延伸?，F(xiàn)有一些序列為5’—GCCTAAGATCGTA—3’的DNA分子單鏈片段，擬通過(guò)PCR獲得被32P標(biāo)記且以堿基“A”為末端(3’為堿基A)、不同長(zhǎng)度的子鏈DNA。在反應(yīng)管中加入單鏈模板、引物、底物、TaqDNA聚合酶、Mg2+及緩沖溶液。下列敘述正確的是（

）A．實(shí)驗(yàn)結(jié)束后最多可得到3種被32P標(biāo)記的子鏈DNAB．反應(yīng)底物是dCTP、dGTP、dTTP和γ位32P標(biāo)記的ddATPC．ddNTP與dNTP競(jìng)爭(zhēng)的延長(zhǎng)位點(diǎn)是脫氧核苷酸鏈的5’末端D．TaqDNA聚合酶在PCR中的作用是形成氫鍵和磷酸二酯鍵【答案】A【分析】ATP是腺苷三磷酸的英文名稱縮寫(xiě)，其結(jié)構(gòu)可以簡(jiǎn)寫(xiě)成A—P~P~P，其中A代表腺苷，P代表磷酸基團(tuán)，~代表一種特殊的化學(xué)鍵。由于兩個(gè)相鄰的磷酸基團(tuán)都帶負(fù)電荷而相互排斥等原因，使得這種化學(xué)鍵不穩(wěn)定，末端磷酸基團(tuán)有一種離開(kāi)ATP而與其他分子結(jié)合的趨勢(shì)，也就是具有較高的轉(zhuǎn)移勢(shì)能。分析題意可知，dNTP和ddNTP具有與ATP（NTP）相似的結(jié)構(gòu)，ATP中的糖是核糖，dNTP中的糖是脫氧核糖，而ddNTP中的糖是雙脫氧核糖。進(jìn)行DNA復(fù)制時(shí)，dNTP作為原料參與DNA的復(fù)制，同時(shí)能提供能量，而ddNTP可以與dNTP競(jìng)爭(zhēng)核苷酸鏈延長(zhǎng)位點(diǎn)，導(dǎo)致DNA片段延伸終止，即阻斷DNA的復(fù)制。題干中要對(duì)模板DNA分子單鏈片段通過(guò)PCR進(jìn)行擴(kuò)增，且要獲得3’為堿基A的不同長(zhǎng)度的DNA分子，說(shuō)明需要ddATP作為競(jìng)爭(zhēng)底物參與PCR過(guò)程?！驹斀狻緼、分析題意可知，5’—GCCTAAGATCGTA—3’的DNA分子單鏈片段共有四個(gè)堿基“A”，內(nèi)部有三個(gè)堿基“A”，因此利用PCR反應(yīng)體系，最多可得到3種被32P標(biāo)記的子鏈DNA，A正確；B、反應(yīng)底物是dCTP、dGTP、dTTP、dATP和α位32P標(biāo)記的ddATP，B錯(cuò)誤；C、DNA復(fù)制時(shí)，由5’端向3’端延伸，因此ddNTP與dNTP競(jìng)爭(zhēng)的延長(zhǎng)位點(diǎn)是脫氧核苷酸鏈的3’末端，C錯(cuò)誤；D、TaqDNA聚合酶能夠催化脫氧核苷酸在DNA的3’端延伸，故在PCR中的作用是形成磷酸二酯鍵，D錯(cuò)誤。故選A。26．下列有關(guān)基因工程的成果及應(yīng)用的說(shuō)法錯(cuò)誤的是（

）A．基因工程可以實(shí)現(xiàn)基因在不同種生物之間轉(zhuǎn)移B．利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)的藥物有細(xì)胞因子、抗體、青霉素等C．基因工程在給人類生產(chǎn)和生活帶來(lái)益處的同時(shí)，也使人們產(chǎn)生關(guān)于其安全性方面的擔(dān)憂D．抗蟲(chóng)棉的培育屬于基因工程在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用【答案】B【分析】基因工程是指按照人們的意愿，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過(guò)體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品?！驹斀狻緼、基因工程可以實(shí)現(xiàn)基因在不同種生物之間轉(zhuǎn)移從而實(shí)現(xiàn)對(duì)生物的定向改造，如抗蟲(chóng)植物的培育，A正確；B、利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)的藥物有細(xì)胞因子、抗體，青霉素不是基因工程的產(chǎn)物，是青霉菌的代謝產(chǎn)物，B錯(cuò)誤；C、基因工程在給人類生產(chǎn)和生活帶來(lái)益處的同時(shí)，也使人們產(chǎn)生關(guān)于其安全性方面的擔(dān)憂，因此我們要合理的利用基因工程技術(shù)，C正確；D、基因工程在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用主要是培育高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、品質(zhì)優(yōu)良和具有抗逆性的農(nóng)作物，如抗蟲(chóng)棉的培育，D正確。故選B?！军c(diǎn)睛】27．下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程應(yīng)用的敘述不正確的是（

）A．蛋白質(zhì)工程可以改造酶的結(jié)構(gòu)，提高酶的熱穩(wěn)定性B．通過(guò)蛋白質(zhì)工程可以改變蛋白質(zhì)的活性C．只有利用蛋白質(zhì)工程才可以在大腸桿菌細(xì)胞中得到人的胰島素D．蛋白質(zhì)工程可以對(duì)胰島素進(jìn)行改造和修飾，合成速效型胰島素制劑【答案】C【分析】蛋白質(zhì)工程：通過(guò)物理化學(xué)與生物化學(xué)等技術(shù)，了解蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能，并借助計(jì)算機(jī)輔導(dǎo)設(shè)計(jì)、基因定點(diǎn)誘變和重組DNA技術(shù)改造基因，以定向改造天然蛋白質(zhì)，甚至創(chuàng)造自然界不存在的蛋白質(zhì)的技術(shù)。【詳解】A、提高酶的熱穩(wěn)定性的方法有：(1)將肽鏈的天門(mén)冬酰胺和谷氨酰胺轉(zhuǎn)變?yōu)槠渌被幔?2)在蛋白質(zhì)分子中引入二硫鍵，因此蛋白質(zhì)工程可以改造酶的結(jié)構(gòu)，提高酶的熱穩(wěn)定性，A正確；B、蛋白質(zhì)工程的實(shí)質(zhì)是改造基因從而改造蛋白質(zhì)，所以可以通過(guò)蛋白質(zhì)工程可以改變蛋白質(zhì)的活性，B正確；C、利用基因工程可以將人的胰島素基因?qū)氲酱竽c桿菌中，也可以得到人的胰島素，C錯(cuò)誤；D、將胰島素B鏈由B28脯氨酸-B29賴氨酸改為B28賴氨酸-B29脯氨酸，獲得的單體速效胰島素，可以避免胰島素分子形成聚合體以保證它的效能及時(shí)發(fā)揮，D正確。故選C。28．玉米中賴氨酸含量比較低的原因是賴氨酸合成過(guò)程中的兩種關(guān)鍵酶——天冬氨酸激酶和二氫吡啶二羧酸合成酶的活性，受細(xì)胞內(nèi)氨基酸濃度的影響較大。賴氨酸達(dá)到一定濃度時(shí)會(huì)抑制這兩種酶的活性。為了提高玉米中的賴氨酸含量，興趣小組提出的下列方法不可行的是（

）A．用紫外線處理玉米愈傷組織，篩選有利突變體B．將富含賴氨酸的蛋白質(zhì)編碼基因?qū)胗衩准?xì)胞C．通過(guò)基因定點(diǎn)突變技術(shù)修飾天冬氨酸激酶和二氫吡啶二羧酸合成酶基因的個(gè)別堿基D．利用蛋白質(zhì)工程直接改造天冬氨酸激酶和二氫吡啶二羧酸合成酶的空間結(jié)構(gòu)【答案】D【分析】1、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲??；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與鑒定．其中構(gòu)建基因表達(dá)載體是基因工程的核心步驟，需要限制酶和DNA連接酶．植物組織培養(yǎng)技術(shù)包括脫分化和再分化兩個(gè)重要過(guò)程，而決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例，特別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過(guò)程中非常重要。2、蛋白質(zhì)工程：指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求?！驹斀狻緼、離體的細(xì)胞或組織通過(guò)脫分化培養(yǎng)可以形成愈傷組織，愈傷組織分裂能力比較強(qiáng)，用紫外線處理玉米愈傷組織會(huì)發(fā)生突變，可以篩選有利突變體，A不符合題意；B、賴氨酸達(dá)到一定濃度時(shí)會(huì)抑制天冬氨酸激酶和二氫吡啶二羧酸合成酶的活性，因此將富含賴氨酸的蛋白質(zhì)編碼基因?qū)胗衩准?xì)胞，能充分利用細(xì)胞內(nèi)的賴氨酸合成蛋白質(zhì)，從而降低細(xì)胞內(nèi)賴氨酸對(duì)天冬氨酸激酶和二氫吡啶二羧酸合成酶的抑制，從而提高玉米中的賴氨酸含量，B不符合題意；C、將天冬氨酸激酶的第352位的蘇氨酸變成異亮氨酸，將二氫吡啶二羧酸合成酶中104位的天冬酰胺變成異亮氨酸，就可以使玉米葉片和種子中的游離賴氨酸分別提高5倍和2倍。因此，增加玉米細(xì)胞中賴氨酸含量最有效的途徑是通過(guò)基因定點(diǎn)突變技術(shù)修飾天冬氨酸激酶和二氫吡啶二羧酸合成酶基因的個(gè)別堿基，C不符合題意；D、蛋白質(zhì)工程是對(duì)基因修飾或基因合成，從而改變蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，而不是直接改造蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，這方法不可行，D符合題意。故選D。【點(diǎn)睛】29．下列關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)的敘述，正確的是（

）A．利用發(fā)酵工程工廠化生產(chǎn)谷氨酸時(shí)，需要維持酸性環(huán)境并嚴(yán)格控制溫度B．利用組織培養(yǎng)技術(shù)產(chǎn)生突變體，可直接培育出具有優(yōu)良性狀的植物新品種C．進(jìn)行核移植操作時(shí)，采集到的卵母細(xì)胞需培養(yǎng)至MI期，進(jìn)行顯微操作去核D．植物體細(xì)胞雜交技術(shù)和轉(zhuǎn)基因技術(shù)都能解決傳統(tǒng)育種的遠(yuǎn)緣雜交不親和的問(wèn)題【答案】D【分析】1、植物細(xì)胞工程技術(shù)的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（包括微型繁殖，作物脫毒、人工種子等）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。2、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)是指將不同種的植物體細(xì)胞，在一定的條件下融合形成雜種細(xì)胞，并將雜種細(xì)胞培養(yǎng)成新植物體的技術(shù)，實(shí)驗(yàn)流程是：兩種植物細(xì)胞通過(guò)酶解法獲得原生質(zhì)體→兩種植物的原生質(zhì)體融合形成雜種原生質(zhì)體→原生質(zhì)體出現(xiàn)新細(xì)胞壁，形成雜種細(xì)胞→雜種細(xì)胞脫分化、再分化形成雜種植物體?！驹斀狻緼、在谷氨酸的發(fā)酵生產(chǎn)過(guò)程中，中性和弱堿性條件下利于谷氨酸的積累，酸性條件下容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺，同時(shí)還需要嚴(yán)格控制發(fā)酵罐內(nèi)溫度、pH值和溶氧等發(fā)酵條件，以保證其產(chǎn)量，A錯(cuò)誤；B、基因突變是不定向的，故利用組織培養(yǎng)技術(shù)產(chǎn)生突變體，還需進(jìn)行篩選，才能培育出具有優(yōu)良性狀新品種，B錯(cuò)誤；C、采集的卵母細(xì)胞需培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期（或MⅡ期）才能進(jìn)行顯微操作去核，C錯(cuò)誤；D、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)和基因工程育種都可打破生殖隔離，克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，D正確。故選D。30．下列關(guān)于生物工程相關(guān)知識(shí)的敘述，正確的項(xiàng)數(shù)是（）①植物組織培養(yǎng)過(guò)程中愈傷組織的代謝類型是自養(yǎng)需氧型②B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞混合，在聚乙二醇的誘導(dǎo)下，融合成的細(xì)胞只有雜交瘤細(xì)胞③若要生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因抗病棉花，可將目的基因先導(dǎo)入到土壤農(nóng)桿菌中，再轉(zhuǎn)入棉花細(xì)胞中④基因治療是把健康的外源基因?qū)胗谢蛉毕莸募?xì)胞中，達(dá)到治療疾病的目的⑤PCR技術(shù)需要利用限制性核酸內(nèi)切酶打開(kāi)DNA雙鏈⑥牛早期胚胎發(fā)育的歷程是：受精卵→桑葚胚→囊胚→原腸胚⑦利用植物莖尖培養(yǎng)脫毒苗時(shí)，全程都需要光照A．2項(xiàng) B．3項(xiàng) C．4項(xiàng) D．5項(xiàng)【答案】B【分析】1、單克隆抗體制備的基本步驟：對(duì)小鼠進(jìn)行免疫→提取B淋巴細(xì)胞→將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合→通過(guò)篩選、克隆化培養(yǎng)和擴(kuò)大化培養(yǎng)→最終注入小鼠體內(nèi)→從腹腔腹水中提取單克隆抗體。2、PCR反應(yīng)過(guò)程：變性→復(fù)性→延伸。變性：當(dāng)溫度上升到90℃以上時(shí)，雙鏈DNA解聚為單鏈，復(fù)性：溫度下降到50℃左右，兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合，延伸：72℃左右時(shí)，Taq酶有最大活性，可使DNA新鏈由5'端向3'端延伸。【詳解】①脫分化形成愈傷組織，愈傷組織沒(méi)有葉綠體，代謝類型是異養(yǎng)需氧型，①錯(cuò)誤；②B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞混合，在聚乙二醇的誘導(dǎo)下，融合成的細(xì)胞有3種類型，B淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞融合、骨髓瘤細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合、雜交瘤細(xì)胞，②錯(cuò)誤；③目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，因此若要生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因抗病棉花，可將目的基因先導(dǎo)入到土壤農(nóng)桿菌中，再轉(zhuǎn)入棉花細(xì)胞中，③正確；④基因治療是指把健康的外源基因?qū)胗谢蛉毕莸募?xì)胞中，以糾正或補(bǔ)償缺陷和異常基因引起的疾病，以達(dá)到治療目的，④正確；⑤PCR技術(shù)利用的是高溫打開(kāi)DNA雙鏈，不是酶，⑤錯(cuò)誤；⑥牛胚胎發(fā)育的歷程是：受精卵→桑椹胚→囊胚→原腸胚→幼體，⑥正確；⑦利用植物莖尖培養(yǎng)脫毒苗時(shí)，脫分化過(guò)程不需要光照，再分化過(guò)程需要光照，⑦錯(cuò)誤。綜上所述，③④⑥正確，B正確，ACD錯(cuò)誤。故選B。二、綜合題31．羧甲基纖維素鈉（CMC）是常用的食品添加劑，不能被人體消化吸收，因此通常被認(rèn)為是安全的食品添加劑。研究者用含1.0%CMC的無(wú)菌水作為飲用水，連續(xù)飼喂實(shí)驗(yàn)小鼠12周，測(cè)定小鼠體重。結(jié)果如下圖所示。

(1)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析CMC是否引起體重變化與有關(guān)。(2)有人推測(cè)小鼠攝入的CMC改變了其腸道內(nèi)各種微生物的比例。為檢驗(yàn)上述推測(cè)，研究者設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)：分別收集A、B組小鼠糞便，制成懸液涂布于_________（選填選項(xiàng)前的符號(hào)）上。A．全營(yíng)養(yǎng)液體培養(yǎng)基 B．全營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基C．以CMC為碳源的液體培養(yǎng)基 D．以CMC為碳源的固體培養(yǎng)基(3)接種后置于（填“無(wú)氧”或“有氧”）條件下培養(yǎng)，通過(guò)觀察比較菌落的種類和數(shù)量以確定推測(cè)是否成立。(4)為進(jìn)一步研究“小鼠體重變化是否由CMC引起的小鼠消化道內(nèi)各種微生物比例改變所致”，研究者設(shè)計(jì)了糞菌移植實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)完善實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案。實(shí)驗(yàn)備選材料：普通小鼠、無(wú)菌小鼠、飼喂含CMC無(wú)菌水12周的普通小鼠、飼喂無(wú)菌水12周的普通小鼠、含1.0%CMC的無(wú)菌水、無(wú)菌水。實(shí)驗(yàn)組：將的糞菌移植到無(wú)菌小鼠消化道內(nèi)，用無(wú)菌水作為飲用水。對(duì)照組：將的糞菌移植到無(wú)菌小鼠消化道內(nèi)，用無(wú)菌水作為飲用水。兩組小鼠在相同且適宜的無(wú)菌環(huán)境中培養(yǎng)一段時(shí)間，測(cè)定小鼠的。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：，說(shuō)明小鼠體重變化是由CMC引起的小鼠消化道內(nèi)各種微生物比例改變所致?！敬鸢浮?1)生活環(huán)境(2)B(3)無(wú)氧(4)飼喂含CMC無(wú)菌水12周的普通小鼠飼喂無(wú)菌水12周的普通小鼠體重變化實(shí)驗(yàn)組小鼠體重大于對(duì)照組【分析】探究實(shí)驗(yàn)的原則：對(duì)照原則和單一變量原則。培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求?！驹斀狻浚?）根據(jù)題干信息和圖形分析可知，圖1和圖2實(shí)驗(yàn)自變量為是否用CMC處理和是否含有微生物；比較A、B組體重差值與C、D組體重差值，可以看出在普通環(huán)境中差值較大，在無(wú)菌環(huán)境中幾乎無(wú)差值，這說(shuō)明CMC的這種作用依賴于小鼠消化道內(nèi)的各種微生物。因此CMC是否引起體重變化與生活環(huán)境有關(guān)。（2）該實(shí)驗(yàn)的目的是探究小鼠攝入的CMC是否改變了其腸道內(nèi)各種微生物的比例，因此應(yīng)該搜集生存在普通環(huán)境中的A、B小鼠糞便制成懸浮液涂布于全營(yíng)養(yǎng)固體培養(yǎng)基上，B符合題意。故選B。（3）人體消化道中缺氧，因此接種后應(yīng)該置于無(wú)氧條件下培養(yǎng)。（4）根據(jù)題意分析，該實(shí)驗(yàn)的目的是研究“小鼠體重變化是否由CMC引起的小鼠消化道內(nèi)各種微生物比例改變所致”，根據(jù)對(duì)照原則和單一變量原則（無(wú)菌水中是否含有CMC）可設(shè)計(jì)以下糞便移植實(shí)驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)組：將飼喂含CMC無(wú)菌水12周的普通小鼠的糞菌移植到無(wú)菌小鼠的消化道內(nèi)，用無(wú)菌水作為飲用水。對(duì)照組：將飼喂無(wú)菌水12周的普通小鼠的糞菌移植到無(wú)菌小鼠消化道內(nèi)，用無(wú)菌水作為飲用水。兩組小鼠在相同且適宜的無(wú)菌環(huán)境中培養(yǎng)一段時(shí)間，測(cè)定小鼠的體重變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組小鼠體重大于對(duì)照組，說(shuō)明小鼠體重變化是由CMC引起的小鼠消化道內(nèi)各種微生物比例改變所致。32．雙特異性抗體是指一個(gè)抗體分子可以與兩個(gè)不同抗原或同一抗原的兩個(gè)不同抗原表位相結(jié)合，目前最常利用雜交瘤雜交法來(lái)制備。長(zhǎng)春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉，其所含的長(zhǎng)春堿具有良好的抗腫瘤作用。下圖1是科研人員通過(guò)雜交—雜交瘤細(xì)胞技術(shù)（免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù)）生產(chǎn)能同時(shí)識(shí)別癌胚抗原和長(zhǎng)春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過(guò)程。圖2是某雙特異性抗體作用圖。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：

(1)與植物體細(xì)胞雜交相比，圖2中過(guò)程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是，過(guò)程②選用的骨髓瘤細(xì)胞（選填“能”或“不能”）在HAT培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。(2)對(duì)③篩選出的雜交瘤細(xì)胞，還需進(jìn)行和，才能篩選出足夠量的既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。與傳統(tǒng)血清抗體相比，單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)是（答出三點(diǎn)）。(3)圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是。圖2方框內(nèi)需要經(jīng)過(guò)篩選，才能獲取單克隆雜交-雜交瘤細(xì)胞。體外培養(yǎng)到一定時(shí)期的單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞會(huì)因?yàn)?、有害代謝物的積累和培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻，需進(jìn)行傳代培養(yǎng)。(4)與直接使用長(zhǎng)春堿相比，將長(zhǎng)春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥，對(duì)人體的副作用更小，原因是，體現(xiàn)的是雙特異性單克隆抗體在運(yùn)載藥物方面的用途?！敬鸢浮?1)滅活病毒誘導(dǎo)法不能(2)克隆化培養(yǎng)（專一）抗體檢測(cè)能準(zhǔn)確地識(shí)別抗原的細(xì)微差異，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，并且可以大量制備(3)刺激小鼠產(chǎn)生相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞細(xì)胞密度過(guò)大(4)雙特異性單克隆抗體能將抗癌藥物定向帶到癌細(xì)胞所在位置，在原位殺死癌細(xì)胞【分析】根據(jù)題圖分析，雙特異性抗體制備流程為，先給小鼠注射特定癌胚抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，然后獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞。誘導(dǎo)免疫的B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；再把單克隆雜交瘤細(xì)胞與經(jīng)注射長(zhǎng)春堿后從小鼠中獲得的免疫的B淋巴細(xì)胞再雜交，得到單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞，再培養(yǎng)該細(xì)胞，最終生產(chǎn)出能同時(shí)識(shí)別癌胚抗原和長(zhǎng)春堿（一種抗癌藥物）的雙特異性單克隆抗體?！驹斀狻浚?）誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有：物理法（離心、振動(dòng)）、化學(xué)法（聚乙二醇）、生物法（滅活的病毒），與植物體細(xì)胞雜交相比特有的方法是滅活的病毒誘導(dǎo)。小鼠B淋巴細(xì)胞在HAT培養(yǎng)基上可正常存活，但不能繁殖，骨髓瘤細(xì)胞在HAT培養(yǎng)基上無(wú)法生長(zhǎng)，骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞之間形成的融合細(xì)胞能在HAT培養(yǎng)基上正常生活，并無(wú)限增殖。（2）為選出能產(chǎn)生專一抗體的細(xì)胞，要將從HAT培養(yǎng)基上篩選出的細(xì)胞稀釋液滴入多孔培養(yǎng)板中，使多孔培養(yǎng)板每孔中有一個(gè)細(xì)胞，然后篩選出專一抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的細(xì)胞，進(jìn)行克隆化培養(yǎng)。單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高的特點(diǎn)，并且可大量制備。（3）圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是刺激小鼠產(chǎn)生相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。圖2方框內(nèi)需要經(jīng)過(guò)2次篩選，先篩選得到對(duì)長(zhǎng)春堿免疫的B淋巴細(xì)胞，后篩選出雜交—雜交瘤細(xì)胞。體外培養(yǎng)到一定時(shí)期的單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞會(huì)因?yàn)榧?xì)胞密度過(guò)大、有害代謝物的積累和培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻，需進(jìn)行傳代培養(yǎng)。（4）雙特異性單克隆抗體能將抗癌藥物定向帶到癌細(xì)胞所在位置，在原位殺死癌細(xì)胞，對(duì)人體的副作用更小，這是利用單克隆抗體治療疾病，體現(xiàn)的是雙特異性單克隆抗體在治療疾?。ㄟ\(yùn)載藥物）方面的用途。33．北極比目魚(yú)中有抗凍基因，下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過(guò)程示意圖，過(guò)程①的mRNA序列為5'-AUCUAUGCGCUCAUCAG…（中間省略3n個(gè)核苷酸序列）…CGCAGCAAUGAGUAGCG-3'。請(qǐng)回答：

(1)過(guò)程②中既能連接黏性末端又能連接平末端的DNA連接酶是。(2)為使過(guò)程①獲取的目的基因能整合到番茄細(xì)胞的染色體的DNA上，在構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)，需要將目的基因插入中，并且需在目的基因的首端和尾端分別加入。(3)在分子水平上要檢測(cè)番茄的DNA上是否插入了抗凍基因或抗凍基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，可以通過(guò)等技術(shù)檢測(cè)；要確認(rèn)抗凍基因是否在轉(zhuǎn)基因番茄植株中完全表達(dá)，應(yīng)通過(guò)法檢測(cè)轉(zhuǎn)基因番茄植株中該基因的表達(dá)產(chǎn)物是否呈陽(yáng)性。(4)如果目的基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增，循環(huán)5次，理論上至少需要加入個(gè)引物，擴(kuò)增的產(chǎn)物中同時(shí)含有兩種引物的DNA分子有個(gè)，可選用的引物是。①5′-ATCTATGCGCTCATCAG-3′

②5′-GACTACTCGCGTATCTA-3′③5′-CGCAGCAATGAGTAGCG-3′

④5′-GCGATGAGTAACGACGC-3′⑤5′-TAGATACGCGAGTAGTC-3′⑥5′-CGCTACTCATTGCTGCG-3′【答案】(1)T4DNA連接酶(2)