中藥分析概論課件

中藥分析概論

BriefIntroductionofTCMAnalysis中藥分析概論

BriefIntroductionofT學(xué)習(xí)要求掌握部分：1、掌握中藥分析的特點2、樣品前處理和純化方法3、中藥鑒別試驗和主要的含量測定方法4、中藥指紋圖譜及其研究方法熟悉部分：1、中藥主要檢查項目和浸出物2、中藥中有害物質(zhì)的測定方法了解部分：1、中藥體內(nèi)動態(tài)及代謝組學(xué)研究方法學(xué)習(xí)要求掌握部分：目錄中藥分析的特點12鑒別實驗3檢查4含量測定5中藥安全性相關(guān)的質(zhì)量控制項目6中藥指紋圖譜和特征圖譜7中藥分析的樣品處理方法中藥體內(nèi)分析8目錄中藥分析的特點12鑒別實驗3檢查4含量測定5中藥安什么是中藥？什么是中藥？中藥以中醫(yī)藥學(xué)理論體系的術(shù)語表述其性能、功效和使用規(guī)律，并且按中醫(yī)藥學(xué)理論指導(dǎo)其臨床應(yīng)用的藥物。中醫(yī)使用的藥物稱之為中藥？ChineseMedicine（中醫(yī)藥）TraditionalChineseMedicine（TCM，傳統(tǒng)中醫(yī)藥）ChineseMateriaMedica（CMM，中藥）中藥以中醫(yī)藥學(xué)理論體系的術(shù)語表述其性能、功效和使用規(guī)律中醫(yī)藥理論中藥藥性：性（四氣）、味（五味）、歸經(jīng)（臟腑經(jīng)絡(luò)）等。冰片：辛、苦,微寒。歸心、脾、肺經(jīng)。單味藥有性味歸經(jīng)，復(fù)方呢？中醫(yī)藥理論中藥藥性：性（四氣）、味（五味）、歸經(jīng)（臟腑經(jīng)絡(luò)）中醫(yī)藥理論配伍理論：君臣佐使？（復(fù)方配伍原則）復(fù)方丹參：丹參、三七、冰片大處方（>5味）如何區(qū)分和控制質(zhì)量？中醫(yī)藥理論配伍理論：君臣佐使？（復(fù)方配伍原則）中醫(yī)藥理論整體觀（holistictheory）：系統(tǒng)觀？小檗堿代表黃連？黃酮類代表黃芩？中醫(yī)藥理論整體觀（holistictheory）：系統(tǒng)觀？中醫(yī)藥理論辨證論治：PrecisionMedicine？中醫(yī)藥理論辨證論治：PrecisionMedicine？中醫(yī)藥現(xiàn)代化？中醫(yī)藥現(xiàn)代化？中醫(yī)藥現(xiàn)代化的優(yōu)勢和不足優(yōu)勢：

臨床有效

毒副作用小

費用低？不足：

質(zhì)量不穩(wěn)定

成分不清

作用機理不明

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)！中醫(yī)藥現(xiàn)代化的優(yōu)勢和不足優(yōu)勢：質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)！中國藥典2010年版I部

藥材和飲片

植物油脂和提取物

成方制劑和單味制劑

中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中國藥典2010年版I部中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)第一節(jié)中藥分析的特點一、以中醫(yī)藥理論為指導(dǎo)，評價中藥質(zhì)量的整體性1、中藥藥性2、君臣佐使3、整體觀4、。。。。第一節(jié)中藥分析的特點一、以中醫(yī)藥理論為指導(dǎo)，評價中藥質(zhì)量二、中藥成分具復(fù)雜性，藥效成分非單一性第一節(jié)中藥分析的特點二、中藥成分具復(fù)雜性，藥效成分非單一性第一節(jié)中藥分析的特三、中藥材質(zhì)量具有多變性

五倍子鞣質(zhì)（＞80%）槐米蘆?。ǎ?0%）長春花長春新堿（百萬分之一）第一節(jié)中藥分析的特點三、中藥材質(zhì)量具有多變性第一節(jié)中藥分析的特點四、中藥炮制、制劑工藝及輔料具有多樣性，雜質(zhì)來源途徑多第一節(jié)中藥分析的特點

例：三黃瀉心湯干浸膏（大黃/黃連/黃芩）

常壓減壓逆浸透成分濃縮濃縮噴霧小檗堿34.537.594.5%黃連堿6.312.093.7%黃芩苷77.477.698.5%四、中藥炮制、制劑工藝及輔料具有多樣性，雜質(zhì)來源途徑多第一節(jié)第二節(jié)中藥分析的樣品處理方法含量測定檢查鑒別取樣中藥分析的一般程序前處理第二節(jié)中藥分析的樣品處理方法含量測定檢查鑒別取樣中藥分析一、中藥分析的前處理方法根據(jù)作用機制，可分為：液固提取法，Liquid-SolidExtraction，LSE液液提取法，Liquid-LiquidExtraction，LLE水蒸氣蒸餾法，SteamDistillation，SD超臨界流體提取法，SupercriticalFluidExtraction,SFE一、中藥分析的前處理方法根據(jù)作用機制，可分為：1、液固提取法（LSE）1、液固提取法（LSE）用于皂苷類正丁醇氯仿乙醚、石油醚醋酸乙酯也稱萃取法－－利用溶質(zhì)在兩種互不相溶的溶劑中溶解度的不同用于生物堿類用于黃酮類用于揮發(fā)油2、液液提取法（LLE）用于皂苷類正丁醇氯仿乙醚、石油醚醋酸乙酯也稱萃取法－－利用溶3、水蒸氣蒸餾（SD）用于提取揮發(fā)油，小分子生物堿等3、水蒸氣蒸餾（SD）用于提取揮發(fā)油，小分子生物堿等4、超臨界流體提取法（SFE）超臨界流體是指在臨界溫度和臨界壓力以上的流體，介于氣體與液體之間的一種物相。超臨界CO2：Pc=7.37MPa；Tc=31.3℃

4、超臨界流體提取法（SFE）超臨界流體是指在臨界溫度和臨界超臨界流體萃取法CO2萃取過程無味、無臭、無毒，安全性好；CO2價格便宜，純度高，可循環(huán)使用；樣品易濃集；超臨界流體萃取法CO2萃取過程無味、無臭、無毒，安全性好；Purify，目的：去除干擾，富集組分二、中藥分析樣品的純化方法過濾法柱色譜法薄層色譜法Purify，目的：去除干擾，富集組分二、中藥分析樣品的純化第三節(jié)

鑒別試驗（IdentificationTest）假藥泛濫，質(zhì)量難以保證，嚴(yán)重危害群眾健康！第三節(jié)鑒別試驗（IdentificationTest）鑒別是保障藥品質(zhì)量的第一步！鑒別：判定真?zhèn)螜z查：安全性、有效性、均一性含量測定：有效成分的定量藥品檢驗工作的主要內(nèi)容鑒別是保障藥品質(zhì)量的第一步！鑒別：判定真?zhèn)嗡幤窓z驗工作的主要復(fù)習(xí)：維生素C的鑒別一般鑒別專屬鑒別復(fù)習(xí)：維生素C的鑒別一般鑒別專屬鑒別化學(xué)藥物的鑒別化學(xué)藥物的鑒別步驟：（1）性狀（2）一般鑒別試驗（理化鑒別為主）（3）專屬鑒別試驗（光譜鑒別為主）化學(xué)藥物的鑒別化學(xué)藥物的鑒別步驟：例：中藥黃芪的鑒別例：中藥黃芪的鑒別顯微鑒別顯微鑒別黃芪處理供試品黃芪甲苷對照藥材處理對照藥材薄層色譜法比較位置Rf顏色大小斑點黃芪處理供試品黃芪甲苷對照藥材處理對照藥材薄層色譜法比較位置中藥的鑒別（1）性狀（2）顯微鑒別（3）（薄層）色譜鑒別（4）理化鑒別中藥的鑒別（1）性狀例：乙肝寧顆粒的鑒別例：乙肝寧顆粒的鑒別黃芪黃芪乙肝寧顆粒處理處理方法1處理方法2處理方法3處理方法4黃芪甲苷原兒茶醛芍藥苷何首烏大黃素薄層色譜法比較位置Rf顏色大小斑點乙肝寧顆粒處理處理方法1處理方法2處理方法3處理方法4黃芪甲中藥分析概論課件中藥復(fù)方不同于單味藥的鑒別內(nèi)容：（1）中藥復(fù)方，原則上每味藥都要鑒別。最少要選擇制劑處方中的1/3的藥味進行鑒別。（2）按君臣佐使選擇藥味進行鑒別（黃芪、丹參）。（3）

對貴重藥、毒性藥進行鑒別（何首烏）。（4）凡有原粉入藥者，應(yīng)做顯微鑒別。沒有顯微鑒別的，盡可能做理化鑒別。思考題：中藥單味藥的流浸膏或提取物是否可以采用顯微鑒別的方法？中藥復(fù)方不同于單味藥的鑒別內(nèi)容：（1）中藥復(fù)方，原則上每味藥中藥及其制劑鑒別方法

形狀、大小色澤、表面特征質(zhì)地、折斷面特征氣味……性狀鑒別中藥及其制劑鑒別方法形狀、大小性狀鑒別

對組織、細(xì)胞或內(nèi)含物進行鑒別

顯微特征應(yīng)明顯、易查見多來源藥材應(yīng)選擇其共有的特征顯微鑒別對組織、細(xì)胞或內(nèi)含物進行鑒別顯微鑒別

多為化學(xué)法觀察顏色反應(yīng)或沉淀反應(yīng)，易受植物中其他成分干擾礦物藥及特殊鑒別反應(yīng)中仍在采用理化鑒別多為化學(xué)法觀察顏色反應(yīng)或沉淀反應(yīng)，易受植物中其他成分干擾理

制備供試液色譜條件選擇：獲得清晰、圓整、比移值穩(wěn)定和可重復(fù)的色譜圖

對照物選擇顯色與檢視鑒別和限度檢查色譜鑒別薄層色譜法制備供試液色譜鑒別薄層色譜法

采用公認(rèn)的、相對較短DNA序列進行物種鑒定。適用于難以用性狀、顯微和理化鑒定的中藥及其原物種鑒定。DNA條形碼DNA序列采用公認(rèn)的、相對較短DNA序列進行物種鑒定。DNA條形碼D第四節(jié)

檢查（PurificationTest）具有中藥特色的檢查項目水分總灰分酸不溶性灰分農(nóng)藥殘留量雜質(zhì)重金屬及有害元素第四節(jié)檢查（PurificationTest）具有中藥中藥分析概論課件中藥制劑特有的劑型及檢查項目中藥制劑特有的劑型及檢查項目中藥分析概論課件其他雜質(zhì)檢查項目水分膨脹度酸敗度溶出度含量均勻度浸出物測定。。。。其他雜質(zhì)檢查項目水分第五章含量測定（Determination）中藥含量測定的原則：（1）凡已知有效成分、毒性成分或能反映內(nèi)在質(zhì)量的指標(biāo)成分的藥材，應(yīng)進行含量測定。第五章含量測定（Determination）中藥含量測定（2）對中藥制劑中君藥、毒性藥、貴重藥應(yīng)進行含量測定。第五章含量測定（2）對中藥制劑中君藥、毒性藥、貴重藥應(yīng)進行含量測定。第五章（3）制劑含量測定盡可能選擇與選用藥材相同的分析方法，要對處方中藥材做全面考察。如：黃芪——>黃芪甲苷——TLC

乙肝寧顆?！?gt;黃芪——>黃芪甲苷—TLC

但采用的方法可能不一樣??？第五章含量測定（3）制劑含量測定盡可能選擇與選用藥材相同的分析方法，要對處（4）測定干擾大且確證干擾無法排除而難以測定的，可測定與其化學(xué)結(jié)構(gòu)母核類似、相對分子量接近的種類成分的含量或測定浸出物。（5）含量限度低于萬分之一的，應(yīng)增加一個含量測定指標(biāo)或浸出物測定。（6）化學(xué)方法測定有困難時，也可建立生物測定方法。第五章含量測定（4）測定干擾大且確證干擾無法排除而難以測定的，可測定與其化HPLCGCTLCS其他方法方法

主要用于測定揮發(fā)油及其他揮發(fā)性組分含量內(nèi)標(biāo)法、外標(biāo)法、歸一化法等分光光度法化學(xué)分析法高效毛細(xì)管電泳法電化學(xué)方法含量測定的主要方法

多采用RP-HPLC

酸堿性化合物的流動相系統(tǒng)

梯度洗脫&波長梯度

薄層吸收掃描法&薄層熒光掃描法反射法&透射法直線式掃描&鋸齒狀掃描主要采用外標(biāo)法定量HPLCGCTLCS其他方法方法主要用于測定揮發(fā)油及其他揮校正因子法同時測定多指標(biāo)成分的含量待測成分標(biāo)準(zhǔn)品可得多指標(biāo)成分待測成分標(biāo)準(zhǔn)品難得同建立單一成分測定的步驟類似，常采用梯度洗脫的方法以使個待測成分達(dá)到滿意的分離效果。一測多評原理是在一定的線性范圍內(nèi)，母核結(jié)構(gòu)類似成分的量與檢測器相應(yīng)成正比計算出各成分吸收系數(shù)間穩(wěn)定的相關(guān)數(shù)值，僅測定1個對照品，計算其他成分含量中國藥典采用此法對黃連中的表小檗堿、黃連堿、巴馬汀、小檗堿進行含量測定校正因子法同時測定多指標(biāo)成分的含量待測成分多指標(biāo)成分第六節(jié)中藥安全性相關(guān)的質(zhì)量控制項目重金屬與砷鹽檢查農(nóng)藥殘留量分析黃曲霉素測定中藥注射劑中藥摻偽摻假和非法添加的檢查毒性成分的控制第六節(jié)中藥安全性相關(guān)的質(zhì)量控制項目重金屬與砷鹽檢查重金屬與砷鹽檢查

重金屬與砷鹽檢查

重金屬與砷鹽檢查ChP附錄收載有四種重金屬檢查法，參見總論第5章砷鹽檢查法：古蔡法和二乙基二硫代氨基甲酸銀法雙硫腙比色法：選擇性地測定制劑中的鉛原子吸收分光光度法：鉛使用鉛空心陰極燈測定；砷用砷空心陰極燈重金屬與砷鹽檢查ChP附錄收載有四種重金屬檢查法，參見總論第HPLC-ICP-MS

高效液相色譜電感耦合等離子體質(zhì)譜（HPLC-ICP-MS）：測定中藥中不同價態(tài)重金屬離子的含量HPLC-ICP-MS

高效液相色譜電感耦合等離子體質(zhì)譜（農(nóng)藥殘留量分析農(nóng)藥殘留量分析殘留農(nóng)藥種類有機氯類：六六六、DDT、五氯硝基苯、艾氏劑有機磷類：磷酸酯類（敵敵畏、敵百蟲）、硫代磷酸酯類（對硫磷）、磷酰胺及硫代磷酰胺（甲胺磷）擬除蟲菊酯類：氯氰菊酯、溴氰菊酯氨基甲酸酯類：西維因、呋喃丹殘留農(nóng)藥種類有機氯類：六六六、DDT、五氯硝基苯、艾氏劑ChP2010一部附錄IXQ

農(nóng)藥殘留量測定法有機氯類農(nóng)藥殘留量測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：

SE-54（30m

0.32mm

0.25um）或DB-1701，63Ni-ECD電子捕獲檢測器。進樣口溫度：230℃；檢測器溫度：300℃；不分流進樣；程序升溫：初始100℃，每分鐘10℃升至220℃，每分鐘8℃升至250℃，保持10分鐘理論塔板數(shù)按α-BHC峰計算，不低于106，分離度應(yīng)大于1.5。ChP2010一部附錄IXQ

農(nóng)藥殘留量測定法有機氯類黃曲霉素毒性強，可誘發(fā)肝癌，以黃曲霉素B1毒性最強。測定方法：HPLC-熒光法，酶聯(lián)免疫吸附法和LC-MS/MS法。黃曲霉素毒性強，可誘發(fā)肝癌，以黃曲霉素B1毒性最強。中藥注射劑的檢查中藥注射劑的檢查中藥摻偽造假和非