美斯地濃緩釋片的制備及體外釋放度考察

美斯地濃緩釋片的制備及體外釋放度考察

氨基溶膠1-3-羥色胺二甲基氨基磺酸酯是一種可逆性抗膽堿藥物，具有抑制膽堿酯酶的活性，對運(yùn)動(dòng)最終板上的脂質(zhì)炎樣品的膽堿受體（二甲基受體）具有直接興奮作用，防止血小板聚集，促進(jìn)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)末梢釋放乙酰磷，從而改善胃腸道、支腸肌和全身骨瘦肌肉的肌肉張力。長期使用。目前,美斯地濃國外主要?jiǎng)┬陀衅瑒?、膠囊和注射劑,國內(nèi)僅有片劑上市,其片劑需每日服用3次以上,血藥濃度波動(dòng)較大,可能影響療效及使藥物產(chǎn)生不良反應(yīng),此外,美斯地濃口服后胃腸道吸收差,生物利用度低。為了減少服藥次數(shù),提高患者的順應(yīng)性,同時(shí)提供相對平穩(wěn)的血藥濃度,提高其生物利用度,適應(yīng)臨床安全用藥的要求,本研究擬將美斯地濃制成能持續(xù)釋放12h的緩釋片,并考察裝置、轉(zhuǎn)速、釋放介質(zhì)對其體外釋放的影響。實(shí)驗(yàn)儀器和試劑ZRD6A型藥物溶出度測定儀(上海黃海藥檢儀器廠);UV2501PC型紫外-可見分光光度計(jì)(日本島津公司);XP205分析電子天秤(瑞士MettlerToledo儀器公司);TD10型單沖壓片機(jī)(上海天翔健臺(tái)制藥機(jī)械有限公司);XT86型實(shí)驗(yàn)用小型包衣鍋(上海黃海藥檢儀器有限公司);PHS3C型pH測定儀(上海精科儀器有限公司)。美斯地濃(純度99.6%,上海三維制藥有限公司)。羥丙甲基纖維素(HPMCK4M,上海卡樂康包衣技術(shù)有限公司);HPMCK15M(山東聊城阿華制藥有限公司);HPMCK100M(山東聊城阿華制藥有限公司);微晶纖維素(山東聊城阿華制藥有限公司);其余試劑均為分析純,水為純化水。方法和結(jié)果1軟材片芯的制備按處方用量稱取過100目篩的美斯地濃,與緩釋材料和其他輔料充分混合均勻,加入95%乙醇溶液適量制備軟材,過24目篩網(wǎng)制備顆粒,在55℃熱風(fēng)循環(huán)烘箱中干燥,過20目篩整粒,加入處方量的滑石粉,混合均勻,用直徑7.0mm淺凹沖壓片,即得片芯。將片芯用實(shí)驗(yàn)用小型包衣鍋包衣干燥后,于真空干燥器中保存。2釋放率法的建立2.1超聲時(shí)間的確定稱取適量的美斯地濃對照品用純化水配成一定濃度的溶液,在200～400nm間進(jìn)行紫外掃描,確定最大吸收波長。同時(shí)將所有輔料按處方用量稱取,并用水配成一定濃度的溶液,超聲10min后用0.45μm的微孔濾膜濾過,濾液于200～400nm間進(jìn)行紫外掃描。美斯地濃在269nm處有最大吸收,而輔料在此處無吸收,不干擾測定,故選擇269nm作為檢測波長。2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密稱取美斯地濃對照品10.0mg,置100mL量瓶中,加水溶解并稀釋至刻度,作為儲(chǔ)備液。分別精密量取儲(chǔ)備液1.0,1.5,2.0,2.5,3.0,3.5,4.0mL于10mL量瓶中,加水定容,以水為空白,在269nm處測定吸收度,以濃度(C,μg·mL-1)對吸光度(A)進(jìn)行線性回歸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,求得回歸方程為A=0.0158C+0.0204,r=0.9998(n=7)。說明美斯地濃在濃度10～40μg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。2.3超聲回收率測定取不同體積的儲(chǔ)備液,配制標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍內(nèi)高、中、低濃度的美斯地濃溶液各5份,加入處方量的輔料,超聲10min后用0.45μm的微孔濾膜濾過,取續(xù)濾液于269nm處測定吸光度,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程求出測定濃度,以測定濃度與實(shí)際濃度之比計(jì)算回收率。平均回收率分別為100.44%,100.17%,100.16%;RSD分別為0.154%,0.02%,0.05%(n=5)。2.4方法的精密度取不同體積的儲(chǔ)備液,配制標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍內(nèi)高、中、低濃度的美斯地濃溶液各5份,分別測定日內(nèi)及日間精密度,測得日內(nèi)RSD分別為0.29%,0.16%,0.06%(n=5);日間RSD分別為1.7%,1.2%,1.1%(n=5)。2.5純化水用量的確定取美斯地濃緩釋片6片,按《中華人民共和國藥典》2010年版附錄XD釋放度測定法有關(guān)規(guī)定測定釋放度。向溶出杯加入900mL純化水,調(diào)節(jié)溫度為(37.0±0.5)℃,轉(zhuǎn)速100r·min-1,于0.5,1,2,4,6,8,10,12h取樣。每次取樣5mL,同時(shí)補(bǔ)充同溫等體積介質(zhì)到各容器。取出溶液經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾,取續(xù)濾液于269nm處測定紫外吸光度,按照標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算藥物累積釋放百分率。2.6體外釋放百分率fps采用擬合因子比較2種制劑的釋放度曲線的相似性,該方法的基本方程如下:f2=50lg{[1+(1/n)∑i=1nWt(Xiiˉˉˉˉˉ?Xriˉˉˉˉˉ)2]?1/2×100}f2=50lg{[1+(1/n)∑i=1nWt(Xiiˉ-Xriˉ)2]-1/2×100}式中,f2為相似因子,XiiˉˉˉˉˉXiiˉ為t時(shí)間參比制劑的累積釋放百分率,XriˉˉˉˉˉXriˉ為t時(shí)間時(shí)受試制劑累積釋放百分率,n為取點(diǎn)數(shù)目,Wt為權(quán)重。當(dāng)f2值在50～100之間時(shí),認(rèn)為2制劑的體外釋藥行為無顯著性差異;f2值愈接近100,相似程度就愈高。3合作工藝研究3.1釋放度測定取不同批號的3批美斯地濃緩釋片,按上述釋放度測定方法進(jìn)行試驗(yàn),結(jié)果見圖1。結(jié)果表明,3批美斯地濃緩釋片的釋放度無顯著差異,說明本處方工藝的重現(xiàn)性較好。3.2體外釋放度測定將美斯地濃緩釋片置于潔凈的表面皿中,分別于60℃烘箱內(nèi),光照強(qiáng)度為(4500±500)lx的光照箱中,以及相對濕度為(90±5)%(硝酸鉀飽和水溶液)的恒溫密閉容器中放置10d,于d0,5,10取樣觀察并進(jìn)行體外釋放度試驗(yàn)。結(jié)果美斯地濃緩釋片在60℃及強(qiáng)光照環(huán)境中較穩(wěn)定,而貯存于高濕環(huán)境中的美斯地濃緩釋片表面有水珠,體外釋放度檢查亦有明顯變化。結(jié)果表明,美斯地濃緩釋片適宜存放于干燥的環(huán)境中。4采用績效評估方法4.1法釋放度測定選取同一批制劑,在其他測定條件相同的情況下,分別用轉(zhuǎn)籃法和槳法測定其釋放度,并用f2為參數(shù),比較2法對釋放度測定的結(jié)果有無明顯差別。轉(zhuǎn)籃法與槳法的f2為92.86,說明裝置對藥物的釋放曲線無明顯影響,但為了便于觀察在釋放過程中藥片包衣膜的完整性,選擇用槳法。4.2不同轉(zhuǎn)數(shù)對藥物釋放度測定的影響取同一批制劑,在其他條件相同的情況下,轉(zhuǎn)數(shù)分別設(shè)定為50,100,150r·min-1測定其釋放度,并用f2為參數(shù),比較不同轉(zhuǎn)數(shù)對釋放度測定結(jié)果有無明顯差別,結(jié)果,f2(50～100r·min-1)=87.78,f2(50～150r·min-1)=75.73,f2(100～150r·min-1)=86.63,f2均大于50,說明轉(zhuǎn)數(shù)對藥物的釋放曲線無明顯影響。4.3fps值的比較分別選用純化水、0.1mol·L-1-HCl水溶液,pH6.8PBS、pH7.4PBS為釋放介質(zhì),考察緩釋片在不同釋放介質(zhì)的釋放行為。計(jì)算不同pH條件下釋放曲線的f2值,結(jié)果,f2(純化水-0.1mol·L-1-HCl)=94.29,f2(純化水-pH6.8PBS)=95.85,f2(純化水-pH7.4PBS)=90.43,f2(0.1mol·L-1-HCl-pH6.8PBS)=91.79,f2(0.1mol·L-1-HCl-pH7.4PBS)=83.55,f2(pH6.8PBS-pH7.4PBS)=92.91。f2均大于50,說明釋放介質(zhì)pH值對藥物釋放無明顯影響,原因在于阻滯劑的性質(zhì)不受pH變化的影響及原料藥本身的溶解度無pH依賴性。5關(guān)于釋放行為的研究5.1模型擬合結(jié)果將制劑在純化水中的釋放百分率與時(shí)間分別用零級、一級、Higuchi、Hixcon-Crowell、Retrer-Peppas、Weibull模型擬合,結(jié)果見表1。結(jié)果表明,釋放曲線的擬合以Higuchi方程的r值最大,Higuchi模型為藥物釋放的最佳模型。5.2藥物釋放機(jī)制變化一般情況下,藥物從骨架片中的釋放機(jī)制可通過Peppas經(jīng)驗(yàn)式來描述:Peppas經(jīng)驗(yàn)式:Q=ktn,進(jìn)行對數(shù)轉(zhuǎn)化后:lnQ=nlnt+C,式中,Q為藥物在t時(shí)間內(nèi)的累積釋放量(以%表示),k為釋放速率常數(shù),t為釋放時(shí)間,釋放指數(shù)n是表征釋放機(jī)制的指數(shù)。C為常數(shù)項(xiàng)。釋放指數(shù)n和藥物的釋放機(jī)制的關(guān)系見表2。用上述公式對美斯地濃緩釋片的體外釋放曲線進(jìn)行計(jì)算,得到n=0.7427,說明緩釋片中藥物的釋放機(jī)制為擴(kuò)散和骨架溶蝕協(xié)同作用。ph值釋放度計(jì)算方法的驗(yàn)證2010年版《中華人民共和國藥典》共收錄了3種裝置:轉(zhuǎn)籃法、槳法、小杯法(類似于一種小型槳法)。釋放度測定中,轉(zhuǎn)籃法和槳法應(yīng)用最多,該法操作簡單,儀器容易普及,應(yīng)用廣泛,并且FDA也推薦在使用其他方法前,優(yōu)選轉(zhuǎn)籃法和槳法。所以本實(shí)驗(yàn)選擇轉(zhuǎn)籃法和槳法對測定其釋放度的影響進(jìn)行考察。生理pH值在胃內(nèi)為1～3.5,小腸約為7,結(jié)腸約為7.5。因此,對于口服緩釋、控釋制劑來說,理想釋放介質(zhì)的pH變化范圍應(yīng)為1～7.5。一般是使用各種pH值的溶液和緩沖溶液來模擬體內(nèi)釋藥系統(tǒng)要經(jīng)歷的體內(nèi)pH變化,但在各pH值經(jīng)歷的時(shí)間是無法準(zhǔn)確確定的。為了全面考察一種產(chǎn)品的體外釋放行為,需要采取3種以上不同pH值的釋放介質(zhì)。所以本實(shí)驗(yàn)考察了美斯地濃緩釋片在純化水、0.1mol·L-1-HCl水溶液,pH6.8PBS、pH7.4PBS中的釋放行為。在比較2種制劑的釋放度曲線時(shí),常帶入適宜的數(shù)學(xué)模型加以評價(jià),常用的藥物體外釋放曲線評價(jià)方法有擬合因子、偏離度和平均溶出時(shí)間3種方法,其中以擬合因子對2條藥物體外釋放曲線進(jìn)行評價(jià)最為常用,而且,此方法現(xiàn)已被美國FDA推薦應(yīng)用。該方法的優(yōu)點(diǎn)在于可直接對釋藥數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,無需擬合各種試藥速率。釋放機(jī)制結(jié)果表明,美斯地濃緩釋片的釋放機(jī)制為擴(kuò)散和骨架溶蝕協(xié)同作用,可能是包衣膜上的水溶性物質(zhì)溶解之后,水分通過水溶性物質(zhì)形成的孔徑將HPMCK15M濕潤,形成水凝膠層,使表面藥物溶解通過孔徑釋放出來。凝膠層繼續(xù)水化,骨架膨脹,由于包衣膜的存在阻止了凝膠層向外的膨脹,因此產(chǎn)生向外的壓力。這種由于凝膠層膨脹產(chǎn)生的壓力和藥物溶解本