低劑量納洛酮對(duì)氯胺酮抗羅哌卡因致驚厥作用的影響

低劑量納洛酮對(duì)氯胺酮抗羅哌卡因致驚厥作用的影響

羅依卡因是一種新型的長(zhǎng)期酰胺引起的麻醉劑，具有麻醉和鎮(zhèn)痛作用。與kane相比，它具有低毒性。盡管如此,也無(wú)法避免臨床上羅哌卡因中毒事件的意外發(fā)生。有文獻(xiàn)報(bào)道氯胺酮和納洛酮都有抗驚厥作用。我們課題組研究發(fā)現(xiàn)低劑量納洛酮能增強(qiáng)氯胺酮的鎮(zhèn)痛作用,但低劑量納洛酮能否增強(qiáng)氯胺酮的抗驚厥作用尚鮮有報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)旨在觀察低劑量納洛酮對(duì)氯胺酮抗羅哌卡因致驚厥作用的影響。1數(shù)據(jù)和方法1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及環(huán)境昆明種小鼠150只(徐州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,雌雄均可,21～25g),在實(shí)驗(yàn)前一天讓其熟悉環(huán)境,自由取食,第2天下午2:00開(kāi)始試驗(yàn)。1.2鹽酸納洛酮注射液甲磺酸羅哌卡因注射液,規(guī)格:每支89.4mg/10mL,批號(hào)0706030,海南斯達(dá)制藥有限公司生產(chǎn)。鹽酸納洛酮注射液,規(guī)格:每支0.4mg/mL,批號(hào)20071105,北京凱因生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)。鹽酸氯胺酮注射液,規(guī)格:每支0.1g/2mL,批號(hào)KH071001,江蘇省恒瑞股份有限公司生產(chǎn)。將藥品配成相應(yīng)濃度,均按0.1mL/10g注射。1.3組和方法1.3.1羅哌卡因致驚厥的ed50組1小鼠30只隨機(jī)分成NS組(生理鹽水組)和氯胺酮組,每組15只,分別以序貫法測(cè)定預(yù)先皮下注射生理鹽水或氯胺酮的各組羅哌卡因致驚厥的ED50。將濃度為89.4mg/10mL羅哌卡因按1:0.8比例配制成不同濃度的等比溶液,即等比劑量分別為89.4、71.52、57.22、45.77和36.62mg/kg。從最大劑量開(kāi)始序貫給藥,先皮下注射氯胺酮,5min后腹腔注射羅哌卡因,分別計(jì)算氯胺酮組和NS組的羅哌卡因致驚厥ED501.3.2量表1:不同四亞組亞組5.10和20.20g/l組2小鼠40只隨機(jī)分為NS組及KT1、KT2和KT3組(氯胺酮?jiǎng)┝糠謩e為5、10和20mg/kg)四亞組,每組各10只。先皮下注射生理鹽水或氯胺酮,5min后腹腔注射羅哌卡因(85.9mg/kg),分別記錄每只小鼠驚厥次數(shù)、驚厥持續(xù)時(shí)間以及死亡情況。1.3.3酮用量的確定組3小鼠40只隨機(jī)分為NS組及NL1、NL2和NL3組(納洛酮?jiǎng)┝糠謩e為1、10和100ng/kg)四亞組,每組各10只。先皮下注射生理鹽水或納洛酮,5min后腹腔注射羅哌卡因(85.9mg/kg),觀察納洛酮對(duì)羅哌卡因致驚厥作用的影響。1.3.4納洛酮和nl+kt組組4小鼠40只隨機(jī)均分為NS組、NL組(納洛酮10ng/kg)、KT組(氯胺酮10mg/kg)和NL+KT組(納洛酮10ng/kg與氯胺酮10mg/kg合用)四亞組,每組各10只。前三組按方法1.3.2步驟操作。第四組先皮下注射納洛酮,5min后皮下注射氯胺酮,再過(guò)5min腹腔注射羅哌卡因。羅哌卡因均為85.9mg/kg,觀察納洛酮與氯胺酮配伍對(duì)羅哌卡因致驚厥作用的影響。1.4肢體陣發(fā)性肌動(dòng)學(xué)小鼠驚厥評(píng)價(jià)指標(biāo):動(dòng)物興奮性明顯增高,活動(dòng)增強(qiáng),跳躍,奔跑,因肢體陣發(fā)性痙攣體位不能平衡而倒地。驚厥持續(xù)時(shí)間以驚厥開(kāi)始致肌張力下降并能自主活動(dòng)的時(shí)間計(jì)。1.5組患者治療前后血壓變異性檢驗(yàn)采用SPSS13.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析。羅哌卡因致小鼠驚厥ED50的比較采用t檢驗(yàn);對(duì)驚厥持續(xù)時(shí)間和驚厥次數(shù)用表示;將計(jì)量數(shù)據(jù)進(jìn)行秩變換后,組間比較采用單因素方差分析,多組之間比較采用q檢驗(yàn);死亡數(shù)和驚厥數(shù)用似然比X2檢驗(yàn),以P<0.05判斷為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2.1羅哌卡因致驚厥羅哌卡因致小鼠驚厥ED50及加用氯胺酮的ED50見(jiàn)表1。與NS組相比,氯胺酮組羅哌卡因致驚厥劑量明顯提高,兩組ED50差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),說(shuō)明氯胺酮有抗羅哌卡因致小鼠驚厥的作用。2.2組小鼠ld-ns的ld-pcr檢測(cè)氯胺酮對(duì)羅哌卡因致驚厥作用的影響試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。KT3組驚厥持續(xù)時(shí)間、驚厥次數(shù)和驚厥數(shù)與NS組相比均差別顯著(P<0.05),小鼠死亡數(shù)組間比較無(wú)差別(P=0.890)。20mg/kg氯胺酮不僅能減少驚厥的持續(xù)時(shí)間和驚厥次數(shù),還能降低驚厥的發(fā)生率,抗驚厥效果明顯。2.3納洛酮對(duì)羅哌卡因致驚厥作用的影響納洛酮對(duì)羅哌卡因致驚厥作用的影響研究結(jié)果見(jiàn)表3。各組間驚厥持續(xù)時(shí)間、驚厥次數(shù)、死亡數(shù)和驚厥數(shù)均未見(jiàn)顯著差異(P>0.05),提示納洛酮對(duì)羅哌卡因致驚厥作用無(wú)影響。2.4納洛酮對(duì)氯胺酮致驚厥作用的影響試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4。將數(shù)據(jù)進(jìn)行秩變換后進(jìn)行檢驗(yàn),驚厥持續(xù)時(shí)間、驚厥次數(shù)、驚厥數(shù)和死亡數(shù)組間均未見(jiàn)顯著差異(P>0.05),納洛酮對(duì)氯胺酮抗羅哌卡因致驚厥作用無(wú)影響。3納洛酮和氯胺酮聯(lián)用對(duì)驚厥發(fā)生的影響本實(shí)驗(yàn)表明氯胺酮能提高羅哌卡因致驚厥的閾值,即氯胺酮有抗羅哌卡因致驚厥的作用。有文獻(xiàn)報(bào)道,氯胺酮為非競(jìng)爭(zhēng)性NMDA受體阻斷劑,其抗驚厥作用與阻斷NMDA受體濃度極度相近。還有試驗(yàn)證明這種抗驚厥作用可能與GABA-苯二氮受體有關(guān),故推測(cè)氯胺酮的抗驚厥作用可能與NMDA和GABA系統(tǒng)有關(guān)。本研究表明,低劑量納洛酮無(wú)抗羅哌卡因的致驚厥作用。但有文獻(xiàn)報(bào)道,內(nèi)阿片肽在調(diào)節(jié)驚厥發(fā)作中起致驚厥和抗驚厥的雙重作用,而這種雙重作用都可被預(yù)先給予阿片受體阻斷劑納洛酮所阻斷。其可能機(jī)制為納洛酮影響內(nèi)阿片肽改變GABA能神經(jīng)元活動(dòng),進(jìn)而產(chǎn)生對(duì)驚厥發(fā)作的調(diào)節(jié)。無(wú)論是氯胺酮的抗驚厥作用還是納洛酮對(duì)驚厥發(fā)作的調(diào)節(jié),其可能的機(jī)制都與GABA系統(tǒng)有關(guān)。卓九五等已證實(shí)低劑量納洛酮能增強(qiáng)氯胺酮的鎮(zhèn)痛作用,納洛酮和氯胺酮配伍對(duì)驚厥發(fā)生的影響值得關(guān)注。如果兩者伍用能增強(qiáng)氯胺酮的抗驚厥作用,一則進(jìn)一步證明了GABA系統(tǒng)對(duì)驚厥發(fā)生起作用,二則可以指導(dǎo)臨床的麻醉用藥,從而減少驚厥的發(fā)生。如果兩者合用能降低氯胺酮的抗驚厥作用,那么臨床增強(qiáng)鎮(zhèn)痛作用時(shí),納洛酮和氯胺酮的合用就要謹(jǐn)慎了。再者就是兩者合用對(duì)驚厥的發(fā)作無(wú)影響。本研究中NL+KT組與NS組和KT組比較,驚厥持續(xù)時(shí)間、驚厥次數(shù)、死亡數(shù)和驚厥數(shù)均無(wú)顯著差異(P>0.05),說(shuō)明低劑量納洛酮對(duì)氯胺酮抗羅哌卡因致小鼠驚厥無(wú)影響。筆者認(rèn)為本試驗(yàn)結(jié)果可能與下面幾點(diǎn)原因有關(guān):(1)氯胺酮的抗驚厥作用與GABA系統(tǒng)有關(guān)以及納洛酮對(duì)驚厥發(fā)生的雙重調(diào)節(jié)通過(guò)GABA系統(tǒng)完成這兩個(gè)結(jié)論可能至少有一個(gè)是錯(cuò)誤的;(2)納洛酮的劑量偏低。納洛酮阻斷阿片肽對(duì)驚厥發(fā)作的雙重作用所需劑量為10～40mg/kg,要想達(dá)到一個(gè)既能增強(qiáng)氯胺酮的鎮(zhèn)痛作用,又能增強(qiáng)其抗驚厥作用的劑量需要繼續(xù)摸索;(3)羅哌卡因的致驚厥作用既與NMDA受體無(wú)關(guān),也與GABA系統(tǒng)無(wú)關(guān),而恰恰氯胺酮能通過(guò)某種途徑抑制這種機(jī)制的發(fā)生。遺憾的是這種機(jī)制目前還沒(méi)有被發(fā)現(xiàn)和證實(shí)。雖然本實(shí)驗(yàn)得到陰性結(jié)果,但至少證明了一點(diǎn):低劑量納洛酮在氯胺酮抗羅哌卡因致驚厥方面是無(wú)效的。繼續(xù)探索如何增強(qiáng)氯胺酮抗驚厥作用,可能還應(yīng)從納洛酮的劑量或羅哌卡因致驚厥的發(fā)生機(jī)制上著手。本試驗(yàn)考慮到小鼠的個(gè)體差異和氯胺酮令人滿(mǎn)意的抗驚厥效果(方法1.3.2中KT3組有8只小鼠未出現(xiàn)驚厥),故各組之