血脂和血漿脂蛋白檢驗課件

教學目的和要求熟悉血漿脂蛋白、載脂蛋白分類及特征熟悉脂代謝有關酶類與特殊蛋白質熟悉脂蛋白代謝掌握LDL受體途徑掌握脂蛋白代謝紊亂掌握脂蛋白和脂質主要測定方法原理了解高脂蛋白血癥的預防和治療原則教學目的和要求熟悉血漿脂蛋白、載脂蛋白分類及特征1重點血漿脂蛋白結構與受體脂蛋白代謝紊亂脂蛋白和脂質測定主要方法難點脂蛋白代謝受體途經脂蛋白代謝紊亂機制難點脂蛋白代謝受體途經脂蛋白代謝紊亂機制重點2概述

血漿脂類簡稱血脂，包括：

游離膽固醇（freecholesterol，FC）膽固醇酯（cholesterolester，CE）磷脂（phospholipid，PL）甘油三酯（triglyceride/triacylglycerolTG）糖酯(glycolipids,GL)游離脂肪酸（freefattyacid，FFA）血漿中最多的脂質有膽固醇（總膽固醇totalcholesterol，TC）、PL和TG。血漿脂質總量為4.0-7.0g/L概述血漿脂類簡稱血脂，包括：3第一節(jié)血漿脂蛋白

一、血漿脂蛋白的分類二、血漿脂蛋白的組成和特征第一節(jié)血漿脂蛋白4一、血漿脂蛋白的分類(一)超速離心法←乳糜微粒(chylomicron，CM)←極低密度脂蛋白(verylowdensitylipoprotein，VLDL)←低密度脂蛋白(lowdensitylipoprotein，LDL)←高密度脂蛋白(highdensitylipoprotein，HDL)※中間密度脂蛋白(intermediatedensitylipoprotein,IDL)一、血漿脂蛋白的分類(一)超速離心法←乳糜微粒(chylo5（二）電泳法根據血漿脂蛋白表面電荷量大小不同，在電場中，其遷移速率也不同，分為：☆乳糜微粒☆β-脂蛋白☆前β-脂蛋白☆α-脂蛋白（二）電泳法根據血漿脂蛋白表面電荷量大小不同，在電場中，其遷6超速離心法與電泳法分離血漿脂蛋白的相應關系

超速離心法與電泳法分離血漿脂蛋白的相應關系7二、血漿脂蛋白的組成和特征

二、血漿脂蛋白的組成和特征8血漿脂蛋白結構

脂蛋白一般以不溶于水的TG和CE為核心，表面覆蓋有少量蛋白質和極性的PL、FFA，從而使脂蛋白顆粒能穩(wěn)定地分散在血漿中。血漿脂蛋白結構9第二節(jié)載脂蛋白

脂蛋白中的蛋白部分稱為載脂蛋白(apolipoprotein，apoprotein，Apo)。載脂蛋白在脂蛋白代謝中的生理功能：（1）構成并穩(wěn)定脂蛋白的結構。（2）修飾并影響與脂蛋白代謝有關的酶的活性。（3）作為脂蛋白受體的配體，參與脂蛋白與細胞表面脂蛋白受體的結合及其代謝過程。第二節(jié)載脂蛋白

脂蛋白中的蛋白部分稱為載脂蛋白(apo10第三節(jié)脂蛋白受體Brown和Goldstein于1974年研究家族性高膽固醇血癥(familialhypercholesterolemia，FH)患者代謝缺陷時，在成纖維細胞膜上發(fā)現了LDL受體(LDLreceptor，LDLR)的存在。以后相繼發(fā)現有VLDL受體和清道夫受體等。第三節(jié)脂蛋白受體Brown和Goldstein于197411一、低密度脂蛋白受體受體結構

由836個氨基酸殘基組成36面體結構蛋白，分子量約115kD，由五種不同的區(qū)域構成。一、低密度脂蛋白受體受體結構由836個氨基酸殘基組成36面12LDL受體基因結構及功能

1．人LDL受體基因長度45kD，由18個外顯子和17個內含子組成。2．受體親和性含ApoB100的脂蛋白可與LDL受體以高親和力結合。3.LDL受體廣泛分布于肝、動脈壁平滑肌細胞、腎上腺皮質細胞、血管內皮細胞、淋巴細胞、單核細胞和巨噬細胞。LDL受體基因結構及功能1．人LDL受體基因長度45kD，13若胞內游離膽固醇濃度升高，則：①抑制HMGCoA還原酶，以減少自身的膽固醇合成；②抑制LDL受體基因的表達，減少LDL受體的合成，從而減少LDL的攝?。虎奂せ顑荣|網ACAT，使游離膽固醇在胞質內酯化成膽固醇酯貯存，以供細胞的需要；LDL受體途徑：LDL或其他含ApoB100、E的脂蛋白如VLDL、β-VLDL均可與LDL受體結合，內吞入細胞使其獲得脂類，主要是膽固醇，這種代謝過程稱為LDL受體途徑。該途徑依賴于LDL受體介導的細胞膜吞飲作用完成。

若胞內游離膽固醇濃度升高，則：LDL受體途徑：LDL或其他14二、極低密度脂蛋白受體

▲結構與LDL受體類似。

▲僅對含ApoE的脂蛋白VLDL、VLDL殘粒有高親和性結合，對LDL為顯著的低親和性?！诟蝺葞缀跷窗l(fā)現，廣泛分布在代謝活躍的心肌，骨骼肌、脂肪組織等細胞.▲VLDL受體不受細胞內膽固醇負反饋抑制二、極低密度脂蛋白受體▲結構與LDL受體類似。15三、清道夫受體

SR-A類清道夫受體,SR是一個大家族，按分子結構分為六大類:SR-A、-B、-C、-D、-E、-F。

SR-A類清道夫受體(SR-A）有6個結構功能區(qū)組成。該受體的I、Ⅱ型均由六個區(qū)域部分組成，包括:

三、清道夫受體SR-A類清道夫受體,SR16清道夫受體配體譜廣泛，有：乙酰化或氧化LDL。多聚次黃嘌呤核昔酸，多聚鳥嘌呤核苷酸。多糖如硫酸右旋糖酐、細菌脂多糖(內毒素)。某些磷脂，如絲氨酸磷脂(卵磷脂不是配體)。配體譜的共同特點均為多陰離子化合物。清道夫受體配體

清道夫受體功能

可能有以下方面：

使細胞泡沫化，促進粥樣斑抉的形成。

清除細胞外液修飾LDL，有防御功能。

具有清除血管過多脂質和病菌毒素等功能。清道夫受體配體譜廣泛，有：清道夫受體配體清道夫受體功能17四、膽固醇酯轉運蛋白

膽固醇酯轉運蛋白（CETP）屬于脂質轉運蛋白（lipidtransferprotein，LTP），是由肝、小腸、腎上腺、脾、脂肪組織及巨噬細胞合成的一種疏水性糖蛋白，介導脂蛋白中各種中性脂質的轉移和交換。cDNA編碼的CETP含476氨基酸殘基，分子量為53kD；成熟CETP含4個天冬酰N-糖鏈，分子量為74kD。

四、膽固醇酯轉運蛋白膽固醇酯轉運蛋白（CETP）屬于脂質轉18CETP對膽固醇的逆轉運過程CETP對膽固醇的逆轉運過程19第四節(jié)脂蛋白代謝

一、血漿脂蛋白代謝密切相關的酶類

參與脂質代謝的酶有：脂蛋白脂肪酶（lipoproteinlipase，LPL）肝脂酶（hepatictriglyceridelipase，HTGL）LCAT等。第四節(jié)脂蛋白代謝一、血漿脂蛋白代謝密切相關的酶類201．LPLLPL是脂肪細胞、心肌細胞、骨骼肌細胞、乳腺細胞以及巨噬細胞等實質細胞合成和分泌的一種糖蛋白，分子量為60kD。ApoCⅡ為其必需的輔因子。作用是分解脂蛋白核心成分的甘油三酯，并促使脂蛋白之間轉移膽固醇、磷脂及載脂蛋白?；钚訪PL以同源二聚體形式存在，通過靜電引力與毛細血管內皮細胞表面的多聚糖結合，肝素可以使此結合形式的LPL釋放入血，并提高其活性。1．LPLLPL是脂肪細胞、心肌細胞、骨骼肌細胞、乳腺細胞以212．HTGLHTGL亦稱為肝性LPL（hepaticLPL）其特點：①HTGL活性不需要ApoCⅡ作為激活劑；②SDS可抑制HTGL活性，而不受高鹽濃度及魚精蛋白的抑制；③主要作用于小顆粒脂蛋白如VLDL殘粒、CM殘粒及HDL，調節(jié)膽固醇從周圍組織轉運到肝，使肝內的VLDL轉化為LDL。

2．HTGLHTGL亦稱為肝性LPL（hepaticLPL223．LCATLCAT由416個氨基酸殘基組成，分子量為6.3kD，屬于糖蛋白。LCAT由肝臟合成釋放入血液，以游離或與脂蛋白結合的形式存在。作用是將HDL中的卵磷脂的C2位不飽和脂肪酸轉移給游離膽固醇，生成溶血卵磷脂和膽固醇酯，使HDL變成成熟的HDL球狀顆粒。3．LCATLCAT由416個氨基酸殘基組成，分子量為6.323二、脂蛋白代謝外源性代謝途徑：飲食攝入的膽固醇和TG在小腸中合成CM及其代謝過程。內源性代謝途徑：包括①由肝臟合成VLDL，VLDL轉變?yōu)镮DL和LDL，LDL被肝臟或其它器官代謝的過程。②HDL的代謝過程二、脂蛋白代謝外源性代謝途徑：飲食攝入的膽固醇和TG在小腸241．CM代謝

1．CM代謝252.VLDL、IDL、LDL代謝2.VLDL、IDL、LDL代謝263．HDL代謝3．HDL代謝27第五節(jié)脂蛋白代謝紊亂一、高脂蛋白血癥二、低脂蛋白血癥三、脂蛋白代謝紊亂與動脈粥樣硬化第五節(jié)脂蛋白代謝紊亂一、高脂蛋白血癥28一、高脂蛋白血癥

高脂血癥（hyperlipidemia）是指血漿中膽固醇和/或TG水平升高。由于血脂在血中以脂蛋白形式運輸，因而實際上高脂血癥就是高脂蛋白血癥（hyperlipoproteinemia，HLP）。一、高脂蛋白血癥29（一）高脂蛋白血癥的分型

（一）高脂蛋白血癥的分型30（二）原發(fā)性高脂蛋白血癥1．家族性多基因性高膽固醇血癥2．家族性高膽固醇血癥3．家族性異常β-脂蛋白血癥4．家族性乳糜微粒血癥5．家族性高甘油三酯血癥6．其他家族性高脂血癥（二）原發(fā)性高脂蛋白血癥1．家族性多基因性高膽固醇血癥31三）繼發(fā)性脂蛋白血癥1．糖尿病2．甲狀腺功能減退3．腎臟疾患4．肥胖癥5．酗酒6．藥物三）繼發(fā)性脂蛋白血癥1．糖尿病32（四）高HDL血癥血漿HDL-膽固醇（HDL-C）含量超過2.6mmol/L，定義為高HDL血癥。CETP及HTGL活性降低是引起高HDL血癥的主要原因。若CETP缺陷，HDL內的CE蓄積，使HDL增多；若HTGL活性降低，HDL被肝細胞攝取減少并使HDL2→HDL3轉換過程減慢而停留在血液中，并使其濃度增加，出現高HDL血癥。

（四）高HDL血癥血漿HDL-膽固醇（HDL-C）含量超過233高HDL血癥分為原發(fā)性和繼發(fā)性兩類原發(fā)性高HDL血癥的病因有：①CETP缺損；②HTGL活性降低；③其他。繼發(fā)性高HDL血癥病因有：①運動失調；③飲酒過量；④原發(fā)性膽汁性肝硬化；⑤治療高脂血癥的藥物引起；⑥其他。高HDL血癥分為原發(fā)性和繼發(fā)性兩類34二、低脂蛋白血癥（一）低脂蛋白血癥的診斷血清TC在3.3mmol/L以下，或TG在0.45mmol/L以下，或LDL-C在2.1mmol/L以下者，屬于低脂蛋白血癥。TC和TG同時降低者多見，脂蛋白中多見HDL、LDL和VLDL降低。（二）病因原發(fā)性低脂蛋白血癥的原因有ApoAⅠ缺乏或變異、LCAT缺乏癥、無α-脂蛋白血癥（Tangier?。?、無β-脂蛋白血癥、低β-脂蛋白血癥等。二、低脂蛋白血癥（一）低脂蛋白血癥的診斷35三種無（低）脂蛋白血癥的主要特點三種無（低）脂蛋白血癥的主要特點36三、動脈粥樣硬化

(一)

、動脈粥樣硬化概述

(二)、引起AS的脂蛋白

(三)、HDL的抗AS功能

(四)、代謝綜合征

三、動脈粥樣硬化(一)、動脈粥樣硬化概述(二)、引起37AS是指動脈內膜的脂質、血液成分的沉積，平滑肌細胞及膠原纖維增生，伴有壞死及鈣化等不同程度病變的一類慢性進行性病理過程。AS主要損傷動脈內壁膜凡能增加動脈壁膽固醇內流和沉積的脂蛋白如LDL、β-VLDL、oxLDL等，是致AS的因素；(一)、動脈粥樣硬化概述AS是指動脈內膜的脂質、血液成分的沉積，平滑肌細胞及膠原纖38損傷動脈壁的內膜，嚴重時累及中膜是AS主要病理特征。常易受累及的是主動脈、頸動脈、冠狀動脈、腦動脈、腎動脈及周圍動脈等。

病理特征

腦梗塞心肌梗死、心絞痛腎動脈硬化癥阻塞性動脈硬化癥腦出血主動脈瘤損傷動脈壁的內膜，嚴重時累及中膜是AS主要病理特征。常易受累39CM和VLDL經LPL水解生成CM殘粒與IDL，并轉變成富含膽固醇酯和ApoE的顆粒沉積于血管壁。Ⅲ型高脂血癥出現β-VLDL，因為肝臟的殘粒(ApoE)受體結合率降低，血中滯留的脂蛋白轉變成β-VLDL，經清道夫受體介導攝取進入巨噬細胞引起AS的增強作用。(二)、引起AS的脂蛋白脂蛋白殘粒CM和VLDL經LPL水解生成CM殘粒與IDL，并轉變成富40變性LDL

LDL的蛋白組分經化學修飾，立體構像發(fā)生改變，生物學活性也有相應的變化，這種經化學修飾的LDL稱為變性LDL或修飾,目前發(fā)現的變性LDL包括:

乙酰LDL、氧化LDL、糖化LDL

其中乙酰LDL中的ApoB100賴氨酸殘基被乙酰化產生修飾LDL，激活巨噬細胞，使巨噬細胞攝取乙酰L