納氏試劑光度法測(cè)定氨氮

氨氮含量納氏試劑分光度法的測(cè)定方法學(xué)驗(yàn)證文件編號(hào)：第1頁(yè)共7頁(yè)水質(zhì)氨氮的測(cè)定納氏試劑分光光度法方法學(xué)驗(yàn)證報(bào)告驗(yàn)證起始日期：2018年月日結(jié)束日期：2018年月日一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、掌握比色法測(cè)定水中氨氮含量的測(cè)定方法及原理。2、熟悉納氏試劑分光度法測(cè)定氨氮的方法學(xué)驗(yàn)證。二、依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)文獻(xiàn)HJ535-2009水質(zhì)氨氮的測(cè)定納氏試劑分光光度法化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證指南GB/T27417-2017三、適用范圍適用于地表水、地下水、生活污水和工業(yè)廢水中氨氮的測(cè)定。四、方法原理以游離態(tài)的氨或銨離子等形式存在的氨氮與納氏試劑反應(yīng)生成淡紅棕色絡(luò)合物，該絡(luò)合物的吸光度與氨氮含量成正比，于波長(zhǎng)420nm處測(cè)量吸光度。氨氮與納氏試劑反應(yīng)生成棕色膠態(tài)化合物，2KSgl]+3KOH+NH=^HgO-NH]l+2HO+7KI2 4 3 2 2 2五、儀器設(shè)備紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)型號(hào)：T6新世紀(jì) 出廠編號(hào)：26-1650-01-1108廠家：北京普析六、試劑材料20mm比色皿，50毫升比色管，實(shí)驗(yàn)室用超純水機(jī)。納氏試劑（碘化汞-碘化鉀-氫氧化鈉（Hgl2-KI-NaOH）溶液）：稱取16.0g氫氧化鈉（NaOH），溶于50ml水中，冷卻至室溫。稱取7.0g碘化鉀（KI）和10.0g碘化汞（Hgl2），溶于水中，然后將此溶液在攪拌下，緩慢加入到上述50ml氫氧化鈉溶液中，用水稀釋至100ml。貯于聚乙烯瓶?jī)?nèi)，用橡皮塞或聚乙烯蓋子蓋緊，于暗處存放，有效期1年。酒石酸鉀鈉溶液：稱取50.0g酒石酸鉀鈉（KNaC4H4O6?4H2O）溶于100mL水中，加熱煮沸446 2以驅(qū)除氨，充分冷卻后稀釋至100ml。氨氮標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液（1000pg/ml）:稱取3.8190g氯化銨（NH4CI，優(yōu)級(jí)純，在100~105°C干燥2h），溶于無(wú)氨水中，移入1000ml容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻?？稍?~5C保存1個(gè)月。氨氮標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（10pg/mL）:吸10.00ml氨氮標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液于1000ml容量瓶?jī)?nèi)，用無(wú)氨水稀釋至刻度，搖勻。臨用前配制。以下為水樣需預(yù)處理時(shí)所需試劑硫代硫酸鈉溶液（3.5g/L）:稱取3.5g硫代硫酸鈉（Na2S2O3）溶于水中，稀釋至1000ml。硫酸鋅溶液（100g/L）:稱取10.0g硫酸鋅（ZnSO4?7H2O）溶于水中，稀釋至100ml。氫氧化鈉溶液（250g/L）:稱取25g氫氧化鈉溶于水中，稀釋至100ml。氫氧化鈉溶液（1mol/L）:稱取4g氫氧化鈉溶于水中，稀釋至100ml。鹽酸溶液（1mol/L）：量取8.5ml鹽酸于適量水中用水稀釋至100ml。硼酸（H3BO3）溶液（20g/L）:稱取20g硼酸溶于水，稀釋至1L。溴百里酚藍(lán)指示劑（0.5g/L）:稱取0.05g溴百里酚藍(lán)溶于50ml水中，加入10ml無(wú)水乙醇,用水稀釋至100ml。淀粉-碘化鉀試紙:棕色瓶中密封保存，外購(gòu)。七、實(shí)驗(yàn)步驟1.校準(zhǔn)曲線的繪制在8個(gè)50mL比色管中，分別加入0.00、0.50、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00和10.00mL氨氮標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，其所對(duì)應(yīng)的氨氮含量分別為0.0、5.0、10.0、20.0、40.0、60.0、80.0和100曲，加水至標(biāo)線。加入1.0ml酒石酸鉀鈉溶液，搖勻，再加入納氏試劑1.0ml，搖勻。放置10min后,在波長(zhǎng)420nm下，用20mm比色皿，以水作參比，測(cè)量吸光度。以空白校正后的吸光度為縱坐標(biāo)，以其對(duì)應(yīng)的氨氮含量（曲）為橫坐標(biāo)，繪制校準(zhǔn)曲線。2.樣品預(yù)處理樣品采集與保存f去除余氯f(wàn)絮凝沉淀f調(diào)節(jié)PH值至約6.5，預(yù)蒸餾f餾出液達(dá)200mL時(shí)，停止蒸餾，加水定容至250mL。樣品測(cè)定取經(jīng)預(yù)處理后的適量水樣50mL（使氨氮含量不超過(guò)2mg/L），加入50mL比色管中，稀釋至刻度。按與校準(zhǔn)曲線相同的步驟測(cè)量吸光度?？瞻自囼?yàn):用水代替水樣，按與樣品相同的步驟進(jìn)行前處理和測(cè)定。數(shù)據(jù)處理由水樣測(cè)得的吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得氨氮含量（曲）。氨氮（N,mg/L）V式中：m 由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得的氨氮量（yg）；V 水樣體積（mL）。5注意事項(xiàng)納氏試劑中碘化汞與碘化鉀的比例，對(duì)顯色反應(yīng)的靈敏度有較大影響。靜置后生成的沉淀應(yīng)除去。納氏試劑顯色后的溶液顏色會(huì)隨時(shí)間變化，應(yīng)在較短時(shí)間內(nèi)完成比色操作。

第3頁(yè)共7頁(yè)1.標(biāo)準(zhǔn)溶液配制記錄表配制日期標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)名稱生產(chǎn)廠家及批號(hào)度%純<稱取量/取樣體積（）溶劑定容體積（）配制濃度（）有效期2018.7.31氯化銨NH4C1批號(hào)：20160423西隴科學(xué)99.8%優(yōu)級(jí)純3.8190克純水1000毫升1000卩g/mL1個(gè)月配制日期試劑名稱試劑濃度（）儲(chǔ)備液來(lái)源儲(chǔ)備液濃度儲(chǔ)備液取用量定容體積有效期2018.7.31氨氮標(biāo)10pg/ml2018.10005.0mL500mL1天2018.8.6準(zhǔn)工作7.31配制卩g/mL5.0mL500mL1天2018.8.10溶液5.0mL500mL1天2.標(biāo)準(zhǔn)曲線試驗(yàn)結(jié)果：檢測(cè)日期：2018年7月31日氨氮標(biāo)準(zhǔn)曲線（純水空白）一序號(hào)濃度系列（Ug）測(cè)得吸光度A減空白吸光度A結(jié)果10.00.1650.165線性方程：A-0.0054C+0.1879相關(guān)系數(shù)R2=0.99125.00.2270.227310.00.2350.235420.00.2890.289540.00.4360.436660.00.5310.531780.00.6010.60181000.7200.720y二0.Li054x+0.1879 氨氮-標(biāo)準(zhǔn)曲線R-=0.991

氨氮標(biāo)準(zhǔn)曲線（純水空白）序號(hào)濃度系列（pg）吸光度A減空白吸光度A10.00.050.0525.00.0930.093310.00.1250.125420.00.2130.213540.00.3770.377660.00.5530.553780.00.6960.69681000.8270.827結(jié)果線性方程：A=0.0079C+0.0545相關(guān)系數(shù)R2=0.9982y=0.0079x+0.0545氨氮一標(biāo)準(zhǔn)曲線R*二0.99820.2檢測(cè)日期：0貳年8月10日氨氮標(biāo)準(zhǔn)曲線（水空白）序號(hào)丿予號(hào)0濃度系列（p.g）吸光度A減空白吸光度A結(jié)果 詢17010000510051線性方程：A-0.008C+0.059925.00.0990.099310.00.1350.135420.00.2090.209相關(guān)系數(shù)R2=0.9971540.00.4080.408660.00.5450.545780.00.7130.71381000.8350.835y=^08n^05"氨氮-標(biāo)準(zhǔn)曲線K-=0.99710.6

結(jié)論：綜合3次測(cè)量數(shù)據(jù)，線性方程相關(guān)系數(shù)均＞0.99,表明標(biāo)準(zhǔn)曲線方程良好。檢出限連續(xù)測(cè)量8次空白溶液的3倍標(biāo)準(zhǔn)偏差法得出檢出限。氨氮標(biāo)準(zhǔn)曲線（水加試劑空白）序號(hào)濃度系列（mg/L）測(cè)得吸光度A濃度結(jié)果10.00.001-0.0263線性方程：A=0.4035C+0.0116相關(guān)系數(shù)R2=0.996920.00.002-0.023830.00.001-0.026340.00.003-0.021350.00.001-0.026360.00.001-0.026370.00.002-0.023880.00.001-0.0263濃度平均值-0.0250濃度標(biāo)準(zhǔn)偏差S0.001891 3倍=0.00567檢出限mg/L0.00567結(jié)論：依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)HJ535-2009水質(zhì)氨氮的測(cè)定納氏試劑分光光度法要求，使用20mm（2cm）比色皿，50毫升水樣體積，檢出限為0.025mg/mL，檢出限符合要求。。4.準(zhǔn)確度檢查（回收率測(cè)定）檢測(cè)時(shí)間2018年8月10日16時(shí)樣品氨氮測(cè)得量0.20mg/L標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液名稱及濃度氯化銨NH4Cl1000》g/mL(1mg/mL)標(biāo)準(zhǔn)溶液加入量貯備溶液10.0mLf250mLf5mL，0.2mg回收率測(cè)定樣品液總體積500mL回收率測(cè)定樣品液加入標(biāo)準(zhǔn)溶液含量0.4mg/L測(cè)得氨氮總量0.58mg/L回收率=（測(cè)得氨氮總量一樣品氨氮測(cè)得量）-加入標(biāo)準(zhǔn)溶液含量x1OO%=（0.58mg/L—0.20mg/L）*0.4mg/Lx100%=95%結(jié)論：回收率95%，準(zhǔn)確度符合要求。5精密度檢查標(biāo)準(zhǔn)溶液名稱：氯化銨NH4C1 濃度:1