瘤胃尼龍袋法測定塊根類反芻動物常用精飼料淀粉瘤胃降解率

瘤胃尼龍袋法測定塊根類反芻動物常用精飼料淀粉瘤胃降解率

碳水粉是促進(jìn)畜牧業(yè)的重要養(yǎng)分，是動物身體能量和脂肪儲存的主要原料。淀粉屬于非結(jié)構(gòu)性碳水化合物的一種。淀粉作為反芻動物精飼料的主要能量物質(zhì),因其具有易于被反芻動物消化吸收,提高日糧的能量濃度,且利用效率較高等特點,故受到國內(nèi)研究者的廣泛關(guān)注,且越來越成為學(xué)術(shù)界研究的熱點。當(dāng)前研究大部分集中在對谷物類飼料淀粉的研究,而對塊根類飼料淀粉的研究還很不夠?；谶@點本研究采用瘤胃尼龍袋法測定5種常用塊根類淀粉在瘤胃內(nèi)的降解率,旨在建立常用精飼料淀粉降解率數(shù)據(jù)庫,為反芻動物精料補(bǔ)充料的合理配制提供技術(shù)參數(shù)。1材料和方法1.1選擇凈干或干燥開干選用的飼料原料有芋頭、紅薯、土豆、木薯和蕉藕,全為本地市場購買,由鮮樣制成。首先將鮮樣用水洗干凈,洗滌時注意勿損傷樣本的外皮,洗滌后用布拭去表面的水分,然后迅速切碎后混合均勻,平鋪于潔凈的磁盤內(nèi)置于陰涼通風(fēng)處風(fēng)干2～3d,最后在60～65℃的恒溫干燥箱中烘干。所有飼料經(jīng)粉碎機(jī)粉碎后過1mm篩以保證顆粒細(xì)度,裝袋標(biāo)號備用(楊勝,1993)。飼料的主要營養(yǎng)成分見表1。1.2營養(yǎng)需要及飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)日糧參照10kg左右中國青山羊的營養(yǎng)需要及飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)(張宏福,1998),能量按1.3倍維持需要配制?；A(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表2。1.3飼料降解率測定選取體重相近、健康狀況良好的帶瘤胃瘺管的去勢瀏陽黑山羊3只,一次測定一種飼料淀粉的降解率,分5期對5種飼料淀粉在瘤胃內(nèi)的動態(tài)降解率進(jìn)行測定。根據(jù)飼養(yǎng)時間設(shè)定7個時間點:0、2、4、8、12、24、36h,每頭羊每個時間點設(shè)有2個重復(fù)尼龍袋。3只羊為3個重復(fù),每種飼料同一時間點設(shè)有6個重復(fù)尼龍袋。同時將12個尼龍袋放入每只羊瘤胃中,在以上7個時間點每只羊瘤胃內(nèi)同時取出2個平行尼龍袋。1.4日糧精粗比對試驗羊單籠飼養(yǎng),每日分別于07:00和18:00兩次飼喂等量日糧,先喂精料后喂粗料,精粗比為1:1,自由飲水。試驗開始前于晨飼前空腹稱重,預(yù)飼期7d,正飼期2d。1.5尼龍網(wǎng)袋的制備稱取5g左右飼料裝入已知重量的尼龍袋中,用塑料封口機(jī)壓至密封,標(biāo)號。將裝有12個小尼龍袋的尼龍網(wǎng)袋于晨飼后1h通過瘤胃瘺管一次性放入羊瘤胃中(0時間點的尼龍袋不放入)。尼龍網(wǎng)袋的口子用約50cm的尼龍線縮緊并掛在瘺管塞上,取袋時間為放袋后的2、4、8、12、24、36h,每個時間點每只羊取出兩個平行尼龍袋,并記錄取出尼龍袋的號碼,將取出的尼龍袋立即放在中速自來水下沖洗干凈,然后放入冰箱中冷藏,直至所有尼龍袋都取出。將取出的所有尼龍袋連同0時間點的共42個尼龍袋放入洗衣機(jī)內(nèi),在標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)下洗滌,洗至水清亮為止。洗后將尼龍袋置于65℃烘箱中烘干,然后測定原樣和不同時間點水洗樣的干物質(zhì)、淀粉的含量。飼料中淀粉動態(tài)降解率操作程序見表3。1.6樣品采集與制備1.6.1尼龍袋、尼龍袋的制備選擇孔徑為420目的尼龍布,裁672個15cm×10cm的長方塊,對折,用塑料封口機(jī)封口壓雙道,制成長×寬為10cm×7cm的尼龍袋,散邊用塑料封口機(jī)壓成膠狀,以防脫紗,用自來水浸泡沖洗后,再用蒸餾水沖洗干凈,烘干至恒重,置于干燥器中備用。1.6.2總淀粉含量的測定淀粉的分析方法是利用熱穩(wěn)定淀粉酶將淀粉水解為雙糖,然后用淀粉葡萄糖苷酶水解為葡萄糖,通過測定葡萄糖的含量來計算淀粉的含量,計算公式:總淀粉含量=G×100/W×0.9×100%公式中G為水解樣中葡萄糖含量(mg/mL),W為樣品干物質(zhì)重量(mg),0.9為淀粉與葡萄糖的轉(zhuǎn)換。1.6.3計算dp的計算淀粉在不同時間點的降解率(dp)%依下式計算:(dp)%=﹝放入袋中飼料淀粉重-某時間點殘留袋內(nèi)的飼料淀粉重/放入袋中飼料淀粉重﹞×1001.6.4淀粉剩余率的計算根據(jù)￠rskov和McDonald(1979)提出的公式計算:式中:R(t)-某一時間點的剩余率,U-淀粉中不可降解的部分(理論上認(rèn)為這一值為零),D-淀粉中慢速降解的部分(理論上認(rèn)為D=100-S,S為快速降解部分)Kd-D的降解速率常數(shù)。1.7處理數(shù)據(jù)試驗數(shù)據(jù)處理與分析采用SAS(SASforWindows,Release6.12)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計分析。2不同塊根斑塊類飼料淀粉降解速度常數(shù)k本試驗采用瘤胃尼龍袋法,根據(jù)crskov和McDonald(1979)提出的飼料營養(yǎng)物質(zhì)瘤胃降解模型得出了5種常用山羊精飼料淀粉降解模型參數(shù)和降解率,結(jié)果見表4。從中可以看出,塊根飼料種類不同,其淀粉降解情況有很大的差異。5種塊根類飼料淀粉有效降解率(P)從大到小依次為蕉藕>芋頭>紅薯>土豆>木薯,分別為59.01%、56.10%、54.86%、37.99%、25.31%。紅薯、蕉藕和芋頭之間的有效降解率差異不顯著(P>0.05),木薯、土豆分別與其他4種飼料之間差異顯著(P<0.05)。5種塊根塊莖類飼料淀粉快速降解部分(S)蕉藕>芋頭>紅薯>土豆>木薯,分別為49.22%、48.55%、39.85%、27.72%、2.49%。蕉藕和芋頭之間差異不顯著(P>0.05),但與其他3種飼料之間差異顯著(P<0.05)。5種塊根類飼料淀粉慢速降解部分(D)最高為木薯,達(dá)到66.66%,最低的為蕉藕,為13.40%,紅薯、土豆和芋頭依次為33.93%、20.73%、13.95%。木薯淀粉快慢降解部分與其他4種飼料之間差異顯著(P<0.05),蕉藕、紅薯、土豆和芋頭之間差異不顯著(P>0.05)。5種塊根類飼料淀粉降解速度常數(shù)(Kd)木薯最高,達(dá)33.79%,與其他4種塊根塊莖類飼料之間差異顯著(P<0.05)。紅薯、芋頭、土豆和蕉藕淀粉降解速度常數(shù)分別為8.53%、6.02%、5.86%、4.97%,相互之間差異不顯著(P>0.05)。3塊根類飼料淀粉的降解隨著樣品在瘤胃里培養(yǎng)時間的增加,5種塊根類飼料淀粉降解率隨之表現(xiàn)出不同程度的增加趨勢。塊根類飼料淀粉在不同培養(yǎng)時間的降解曲線見圖1。從圖1可看出,芋頭與土豆的淀粉降解曲線極為相似,但芋頭的降解曲線高出土豆的近20%;紅薯12h前,降解曲線上升趨勢比較明顯,但在12～24h這段時間的降解曲線上升的幅度變緩,而在24～36h之間上升的幅度變大。造成這種波動的原因,可能是隨著淀粉的降解,瘤胃內(nèi)的pH值下降,限制了淀粉的降解。蕉藕的降解情況類似紅薯。木薯淀粉慢速降解部分高,達(dá)到66.66%潛在降解能力強(qiáng),故在整個降解過程中降解曲線表現(xiàn)出強(qiáng)的上升趨勢,幾乎成了一條直線。在本試驗條件下,用瘤胃尼龍袋法測得塊