07-核酸代謝課件

1第七章核酸代謝第一節(jié)核酸降解和核苷酸代謝第二節(jié)DNA的生物合成第三節(jié)RNA的生物合成第四節(jié)核酸代謝的調(diào)節(jié)1第七章核酸代謝第一節(jié)核酸降解和核苷酸代謝212第一節(jié)核酸降解和核苷酸代謝一、核酸和核苷酸的分解代謝二、核苷酸的合成代謝212第一節(jié)核酸降解和核苷酸代謝一、核酸和核苷酸的分解代3一、核酸和核苷酸的分解代謝1、核酸的解聚作用2、核苷酸的降解3、嘌呤的分解4、嘧啶的分解3一、核酸和核苷酸的分解代謝1、核酸的解聚作用41、核酸的解聚作用核苷核酸核苷酸堿基許多個(gè)戊糖磷酸41、核酸的解聚作用核苷核酸核苷酸堿基許多個(gè)戊糖磷酸51、核酸的解聚作用核糖核酸酶與脫氧核糖核酸酶核酸內(nèi)切酶與核酸外切酶限制性核酸內(nèi)切酶51、核酸的解聚作用核糖核酸酶與脫氧核糖核酸酶62、核苷酸的降解核苷堿基戊糖磷酸各種單核苷酸受細(xì)胞內(nèi)磷酸單酯酶或核苷酸酶的水解作用成為核苷和磷酸62、核苷酸的降解核苷堿基戊糖磷酸各種單核苷酸受細(xì)胞內(nèi)磷酸72、核苷酸的降解核苷堿基戊糖磷酸非特異性的磷酸單酯酶，其水解位點(diǎn)可以是核苷的2'、3'或5'特異性強(qiáng)的磷酸單酯酶只能水解3'-或5'-核苷酸磷酸72、核苷酸的降解核苷堿基戊糖磷酸非特異性的磷酸單酯酶，其82、核苷酸的降解堿基戊糖核苷酶按底物不同可分為嘌呤核苷酶和嘧啶核苷酶按催化反應(yīng)的不同可以分為核苷磷酸化酶和核苷水解酶82、核苷酸的降解堿基戊糖核苷酶按底物不同可分為嘌呤核苷酶92、核苷酸的降解堿基戊糖92、核苷酸的降解堿基戊糖10

腺嘌呤(A)鳥(niǎo)嘌呤(G)

H2O

H2O

NH3

NH3

次黃嘌呤

黃嘌呤(Xan)

H2O+O2

H2O2

H2O+O2

H2O2

尿囊素

尿酸

H2O

CO2+H2O2

2H2O+O2

尿囊酸

尿素+乙醛酸

H2O

2H2O

4NH3+2CO2（人類和靈長(zhǎng)類動(dòng)物、爬蟲(chóng)、鳥(niǎo)類）（靈長(zhǎng)類以外的哺乳動(dòng)物）（植物）（魚(yú)類、兩棲類）（海洋無(wú)脊椎動(dòng)物）腺嘌呤脫氨酶鳥(niǎo)嘌呤脫氨酶黃嘌呤氧化酶黃嘌呤氧化酶尿酸氧化酶尿囊素酶尿囊酸酶脲酶3、嘌呤的分解10腺嘌呤(A)鳥(niǎo)嘌呤11（1）鳥(niǎo)嘌呤的分解鳥(niǎo)嘌呤酶黃嘌呤氧化酶鳥(niǎo)嘌呤黃嘌呤尿酸（2）腺嘌呤的分解腺苷脫氨酶黃嘌呤氧化酶尿酸腺苷黃嘌呤腺苷酸脫氨酶黃嘌呤氧化酶尿酸腺苷酸黃嘌呤3、嘌呤的分解11（1）鳥(niǎo)嘌呤的分解鳥(niǎo)嘌呤酶黃嘌呤氧化酶鳥(niǎo)嘌呤黃嘌呤尿酸（12腺嘌呤鳥(niǎo)嘌呤次黃嘌呤黃嘌呤3、嘌呤的分解12腺嘌呤鳥(niǎo)嘌呤次黃嘌呤黃嘌呤3、嘌呤的分解13腺苷?。ù吸S）苷腺苷脫氨酶H2ONH3嘌呤核苷磷酸化酶Pi磷酸核糖次黃嘌呤3、嘌呤的分解13腺苷?。ù吸S）苷腺苷脫氨酶H2ONH3嘌呤核苷磷酸化酶P14鳥(niǎo)苷嘌呤核苷磷酸化酶Pi磷酸核糖鳥(niǎo)嘌呤3、嘌呤的分解14鳥(niǎo)苷嘌呤核苷磷酸化酶Pi磷酸核糖鳥(niǎo)嘌呤3、嘌呤的分解15腺嘌呤鳥(niǎo)嘌呤次黃嘌呤黃嘌呤腺嘌呤脫氨酶

＋H2O,－NH3鳥(niǎo)嘌呤脫氨酶

＋H2O,－NH33、嘌呤的分解15腺嘌呤鳥(niǎo)嘌呤次黃嘌呤黃嘌呤腺嘌呤脫氨酶鳥(niǎo)嘌呤脫氨酶3、嘌16黃嘌呤黃嘌呤氧化酶H2O＋O2H2O2尿酸尿酸氧化酶2H2O＋O2H2O2＋CO2尿囊素3、嘌呤的分解16黃嘌呤黃嘌呤氧化酶H2O＋O2H2O2尿酸尿酸氧化酶217尿囊素酶

＋H2O尿囊素尿囊酸尿囊酸酶

＋H2O尿素乙醛酸尿酶＋2H2O4NH32CO23、嘌呤的分解17尿囊素酶尿囊素尿囊酸尿囊酸酶尿素乙醛酸尿酶4NH32C18

尿酸是人、猿及鳥(niǎo)類等體內(nèi)嘌呤代謝的最終產(chǎn)物。尿酸因動(dòng)物的種類而異可進(jìn)一步分解，成為尿囊素、尿素、乙醛酸及NH3和CO2。尿酸尿囊素尿素＋乙醛酸NH3和CO2尿酸酶尿囊酶（非靈長(zhǎng)類的哺乳類）（魚(yú)類、兩棲類）尿酶＋H2O（甲殼類）3、嘌呤的分解18尿酸是人、猿及鳥(niǎo)類等體內(nèi)嘌呤代謝的最終產(chǎn)物。19尿素乙醛酸腺苷酸次黃苷酸腺苷腺嘌呤次黃苷次黃嘌呤黃嘌呤尿酸尿囊素黃嘌呤尿囊酸鳥(niǎo)嘌呤3、嘌呤的分解19尿素乙醛酸腺苷酸次黃苷酸腺苷腺嘌呤次黃苷次黃嘌20胞嘧啶(C)尿嘧啶(U)

二氫尿嘧啶

H2O

NH3

NAD(P)H+H+

NAD(P)+

H2O

β-丙氨酸

β-脲基丙酸

H2O

胸腺嘧啶(T)

二氫胸腺嘧啶

NAD(P)H+H+

NAD(P)+

H2O

β-氨基異丁酸

β-脲基異丁酸

H2O

胞嘧啶脫氨酶二氫尿嘧啶脫氫酶二氫嘧啶酶脲基丙酸酶二氫尿嘧啶脫氫酶二氫嘧啶酶脲基丙酸酶NH3+CO2+NH3+CO2+4、嘧啶的分解20胞嘧啶脫氨酶二氫尿嘧啶脫氫酶二氫嘧啶酶脲基丙酸酶二氫尿嘧21尿嘧啶胸腺嘧啶胞嘧啶4、嘧啶的分解21尿嘧啶胸腺嘧啶胞嘧啶4、嘧啶的分解22二氫尿嘧啶脫氫酶NADPHNADP++H+尿嘧啶5,6－二氫尿嘧啶二氫嘧啶水化酶＋H2Oβ-脲基丙酸β-丙氨酸脲基丙酸酶＋H2O4、嘧啶的分解22二氫尿嘧啶脫氫酶NADPHNADP++H+尿嘧啶5,623二氫尿嘧啶脫氫酶NADPHNADP++H+二氫嘧啶水化酶＋H2O脲基丙酸酶＋H2O胸腺嘧啶5,6－二氫胸腺嘧啶β-脲異丁酸β-氨基異丁酸4、嘧啶的分解23二氫尿嘧啶脫氫酶NADPHNADP++H+二氫嘧啶水化酶24尿嘧啶與胸腺嘧啶→二氫衍生物

→β-脲基丙氨酸及β-脲基異丁酸

→β-丙氨酸及β-異丁酸+

CO2+

NH3胞嘧啶具有氨基，所以要先在胞嘧啶脫氨酶的作用下水解脫氨基

胞嘧啶+H2O→尿嘧啶+NH34、嘧啶的分解24尿嘧啶與胸腺嘧啶→二氫衍生物4、嘧啶的分解25二、核苷酸的合成代謝1、嘌呤核糖核苷酸的生物合成2、嘧啶核糖核苷酸的生物合成3、脫氧核糖核苷酸的生物合成4、核糖三磷酸和胸苷酸的生物合成25二、核苷酸的合成代謝1、嘌呤核糖核苷酸的生物合成261、嘌呤核糖核苷酸的生物合成從頭合成：以氨基酸等簡(jiǎn)單物質(zhì)為原料從頭合成核苷酸。補(bǔ)救途徑：以現(xiàn)有的堿基和核苷為原料合成核苷酸。261、嘌呤核糖核苷酸的生物合成從頭合成：以氨基酸等簡(jiǎn)單物271、嘌呤核糖核苷酸的生物合成N1C2N36C5C4CN7N9C8天冬氨酸一碳單位一碳單位CO2甘氨酸谷氨酰胺谷氨酰胺271、嘌呤核糖核苷酸的生物合成N1C2N36C5C4CN7281、嘌呤核糖核苷酸的生物合成（1）嘌呤核苷酸的從頭合成（2）嘌呤核苷酸的補(bǔ)救合成（3）嘌呤核苷酸的相互轉(zhuǎn)變281、嘌呤核糖核苷酸的生物合成（1）嘌呤核苷酸的從頭合成29PRPP合成酶5-磷酸核糖焦磷酸（PRPP）的合成（1）嘌呤核苷酸的從頭合成29PRPP合成酶5-磷酸核糖焦磷酸（PRPP）的合成（1）30谷氨酰胺PRPP酰胺基轉(zhuǎn)移酶（1）嘌呤核苷酸的從頭合成930谷氨酰胺PRPP酰胺基轉(zhuǎn)移酶（1）嘌呤核苷酸的從頭合成931磷酸核糖甘氨酰胺合成酶（1）嘌呤核苷酸的從頭合成457931磷酸核糖甘氨酰胺合成酶（1）嘌呤核苷酸的從頭合成457932磷酸核糖甘氨酰胺轉(zhuǎn)甲?；福?）嘌呤核苷酸的從頭合成8945732磷酸核糖甘氨酰胺轉(zhuǎn)甲?；福?）嘌呤核苷酸的從頭合成8933磷酸核糖甲酰甘氨咪唑合成酶（1）嘌呤核苷酸的從頭合成38945733磷酸核糖甲酰甘氨咪唑合成酶（1）嘌呤核苷酸的從頭合成3834磷酸核糖氨基咪唑合成酶（1）嘌呤核苷酸的從頭合成38945734磷酸核糖氨基咪唑合成酶（1）嘌呤核苷酸的從頭合成389435磷酸核糖氨基咪唑羧化酶（1）嘌呤核苷酸的從頭合成389457635磷酸核糖氨基咪唑羧化酶（1）嘌呤核苷酸的從頭合成389436磷酸核糖氨基咪唑-琥珀酸-甲酰胺合成酶3894571636磷酸核糖氨基咪唑-琥珀酸-甲酰胺合成酶3894571637腺苷酸-琥珀酸裂解酶（1）嘌呤核苷酸的從頭合成3894571637腺苷酸-琥珀酸裂解酶（1）嘌呤核苷酸的從頭合成3894538磷酸核糖氨基咪唑甲酰胺轉(zhuǎn)甲酰基酶（1）嘌呤核苷酸的從頭合成38945716238磷酸核糖氨基咪唑甲酰胺轉(zhuǎn)甲?；福?）嘌呤核苷酸的從頭合39IMP-環(huán)化水解酶（1）嘌呤核苷酸的從頭合成38945716239IMP-環(huán)化水解酶（1）嘌呤核苷酸的從頭合成38945740AMP和GMP的合成（1）嘌呤核苷酸的從頭合成40AMP和GMP的合成（1）嘌呤核苷酸的從頭合成41（2）嘌呤核苷酸的補(bǔ)救合成41（2）嘌呤核苷酸的補(bǔ)救合成42（3）嘌呤核苷酸的相互轉(zhuǎn)變42（3）嘌呤核苷酸的相互轉(zhuǎn)變432、嘧啶核糖核苷酸的生物合成N3C2N14C5C6CCO2天冬氨酸谷氨酰胺432、嘧啶核糖核苷酸的生物合成N3C2N14C5C6CCO442、嘧啶核糖核苷酸的生物合成（1）嘧啶核苷酸的從頭合成（2）嘧啶核苷酸的補(bǔ)救合成442、嘧啶核糖核苷酸的生物合成（1）嘧啶核苷酸的從頭合成45嘧啶核苷酸的從頭合成氨甲酰磷酸合成酶Asp-氨甲?；D(zhuǎn)移酶二氫乳清酸酶乳清酸脫氫酶（1）嘧啶核苷酸的從頭合成45嘧啶核苷酸的從頭合成氨甲酰磷酸合成酶Asp-氨甲?；D(zhuǎn)移46乳清酸磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶乳清核苷酸脫羧酶（1）嘧啶核苷酸的從頭合成46乳清酸磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶乳清核苷酸脫羧酶（1）嘧啶核苷酸的47（2）嘧啶核苷酸的補(bǔ)救合成47（2）嘧啶核苷酸的補(bǔ)救合成483、脫氧核糖核苷酸的生物合成483、脫氧核糖核苷酸的生物合成494、核糖三磷酸的生物合成核苷酸不直接參加核酸的生物合成而是先轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的核苷三磷酸后再參入DNA或RNA

(d)NMP+ATP→(d)NDP+ADPATP作為磷酸的供體，催化酶為（脫氧）腺苷酸激酶，此酶對(duì)核糖沒(méi)有專一性，而對(duì)堿基有專一性

(d)NDP+ATP→(d)NTP+ADP催化酶為一種激酶，它沒(méi)有專一性494、核糖三磷酸的生物合成核苷酸不直接參加5012第二節(jié)DNA的生物合成一、DNA的復(fù)制二、DNA的損傷與修復(fù)3三、逆轉(zhuǎn)錄5012第二節(jié)DNA的生物合成一、DNA的復(fù)制二、DNA51一、DNA的復(fù)制1、半保留復(fù)制2、復(fù)制的起點(diǎn)和方式3、參與DNA復(fù)制的酶和蛋白因子4、DNA的半不連續(xù)復(fù)制5、原核生物DNA復(fù)制的特點(diǎn)6、真核生物DNA復(fù)制的特點(diǎn)51一、DNA的復(fù)制1、半保留復(fù)制521、半保留復(fù)制定義：由親代DNA生成子代DNA時(shí)，每個(gè)新形成的子代DNA中，一條鏈來(lái)自親代DNA，而另一條鏈則是新合成的實(shí)驗(yàn)證據(jù)：1958年Meselson和Stahl用同位素15N標(biāo)記大腸桿菌DNA，首先證明了DNA的半保留復(fù)制ＤＮＡ復(fù)制521、半保留復(fù)制定義：由親代DNA生成子代DNA時(shí)，每個(gè)53親代第一代第二代[15N]DNA[14N-15N]DNA[14N]DNA實(shí)驗(yàn)證明53親代第一代第二代[15N]DNA[14N-15N]DN542、復(fù)制的起點(diǎn)和方式復(fù)制叉：

DNA復(fù)制進(jìn)行時(shí)，在復(fù)制眼中發(fā)生的DNA合成反應(yīng)的分支點(diǎn)復(fù)制子：在DNA復(fù)制原點(diǎn)的控制下能夠獨(dú)立進(jìn)行DNA復(fù)制的單位。一個(gè)復(fù)制子可以有一個(gè)或兩個(gè)復(fù)制叉復(fù)制方向：?jiǎn)蜗蚝碗p向542、復(fù)制的起點(diǎn)和方式復(fù)制叉：DNA復(fù)制進(jìn)行時(shí)，在復(fù)制55起點(diǎn)起點(diǎn)起點(diǎn)起點(diǎn)起點(diǎn)未復(fù)制DNA單向復(fù)制雙向復(fù)制復(fù)制叉復(fù)制叉復(fù)制叉55起點(diǎn)起點(diǎn)起點(diǎn)起點(diǎn)起點(diǎn)未復(fù)制DNA單向復(fù)制雙向復(fù)制復(fù)制叉復(fù)562、復(fù)制的起點(diǎn)和方式真核細(xì)胞染色體的復(fù)制562、復(fù)制的起點(diǎn)和方式真核細(xì)胞染色體的復(fù)制573、參與DNA復(fù)制的酶和蛋白因子（1）DNA聚合酶（2）DNA連接酶（3）與解除DNA高級(jí)結(jié)構(gòu)相關(guān)的酶及蛋白因子（4）引發(fā)體573、參與DNA復(fù)制的酶和蛋白因子（1）DNA聚合酶58以DNA為模板合成DNA的酶。催化DNA新鏈合成時(shí)需有4種dNTP作為底物，還需Mg2+、DNA模板及與模板DNA互補(bǔ)的一小段多核苷酸引物。有DNA聚合酶I、II、III、IV、V。（1）DNA聚合酶58以DNA為模板合成DNA的酶。（1）DNA聚合酶59①DNA聚合酶I②DNA聚合酶II③DNA聚合酶III④真核細(xì)胞的DNA聚合酶（1）DNA聚合酶59①DNA聚合酶I（1）DNA聚合酶601956年，A.Kornberg發(fā)現(xiàn)分子量為109,000，由一條單一多肽鏈組成，多肽鏈中含有一個(gè)鋅原子大腸桿菌有400個(gè)①DNA聚合酶I601956年，A.Kornberg發(fā)現(xiàn)①DNA聚合酶I615’→3’方向聚合作用3’→5’核酸外切作用5’→3’核酸外切作用①DNA聚合酶I615’→3’方向聚合作用①DNA聚合酶I62活性部位在肽段上的分布：5`→3`外切3`→5`外切5`→3`聚合蛋白酶NC小片段，3500Klenow片段，6800①DNA聚合酶I625`→3`外切3`→5`外切5`→3`聚合蛋白酶NC小片63由10個(gè)亞基組成的蛋白質(zhì)，其中α、ε、θ組成的部分叫核心酶，核心酶與其它亞基組成全酶。α亞基具有5’-3’聚合酶作用ε亞基3’-5’外切酶活性θ亞基組建復(fù)制起始復(fù)合物②DNA聚合酶II63由10個(gè)亞基組成的蛋白質(zhì)，其中α、ε、θ組成的部分叫核64大腸桿菌有10個(gè)聚合酶活性比DNA聚合酶I高15倍現(xiàn)在認(rèn)為它是E.coli細(xì)胞內(nèi)真正負(fù)責(zé)重新合成DNA的復(fù)制酶③DNA聚合酶III64大腸桿菌有10個(gè)③DNA聚合酶III65DNA聚合酶Ⅲ全酶

核心酶PolIII

PolIII延長(zhǎng)因子DNA聚合酶Ⅲ二聚體65DNA聚合酶Ⅲ全酶核心酶PolIII66DNA聚合酶催化的鏈延長(zhǎng)反應(yīng)3′5′模板鏈5′RNA引物子鏈3′3′5′5′3′3′5′5′3′66DNA聚合酶催化的鏈延長(zhǎng)反應(yīng)3′5′模板鏈5′RNA引物67DNA聚合酶的校對(duì)功能聚合酶錯(cuò)配堿基復(fù)制方向正確核苷酸5′5′5′3′3′3′切除錯(cuò)配核苷酸67DNA聚合酶的校對(duì)功能聚合酶錯(cuò)配堿基復(fù)制方向正確核苷酸68功能polⅠpolⅡpolⅢ聚合作用5'→3'+++外切酶活性3'→5'+++外切酶活性5'→3'+--焦磷酸解和焦磷酸交換作用+-+完整的DNA雙鏈---帶引物的長(zhǎng)單鏈DNA+--帶缺口的雙鏈DNA+--雙鏈而有間隙的DNA+++相對(duì)分子量109000120000>140000每個(gè)細(xì)胞中的分子數(shù)40017～10010～20結(jié)構(gòu)基因polApolBpolCDNA聚合酶I、II和III的不同點(diǎn)68功能polⅠpolⅡpolⅢ聚合作用5'→3'+++外69真核細(xì)胞有5種DNA聚合酶：αβγδεDNA聚合酶α：引物酶活性DNA聚合酶β：修飾作用DNA聚合酶γ：線粒體DNA的復(fù)制DNA聚合酶δ：具有5’-3’聚合酶作用和3’-5’外切酶活性；合成前導(dǎo)鏈和滯后鏈DNA聚合酶ε：DNA修復(fù)④真核細(xì)胞的DNA聚合酶69真核細(xì)胞有5種DNA聚合酶：αβγδε④真核細(xì)胞的DNA70是指催化雙鏈DNA切口處的5’-磷酸基和3’-羥基之間形成磷酸二酯鍵的酶，連接反應(yīng)需要供給能量，主要以ATP作為能量來(lái)源。3‘5‘3‘5‘OHP3‘5‘3‘5‘DNA連接酶（2）DNA連接酶70是指催化雙鏈DNA切口處的5’-磷酸基和3’-羥基之間形71（2）DNA連接酶3’PTAOH5’3’PCAPPATGT3’5’PATPAMP+PPiMg2+連接酶PTA5’3’PCAPPATGT3’5’P71（2）DNA連接酶3’PTAOH5’3’PCAPPATG72

DNA解旋酶：催化DNA雙螺旋分開(kāi)成為兩條鏈的酶。

DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶：能夠催化DNA鏈的斷裂和結(jié)合，從而控制DNA的拓?fù)錉顟B(tài)。

SSBs（單鏈結(jié)合蛋白）：穩(wěn)定已被解開(kāi)的DNA單鏈，阻止復(fù)性和保護(hù)單鏈不被核酸酶降解。（3）與解除DNA高級(jí)結(jié)構(gòu)相關(guān)的酶及蛋白因子72DNA解旋酶：催化DNA雙螺旋分開(kāi)成為兩條鏈的酶。（373

引發(fā)體：是DNA復(fù)制開(kāi)始所必須的，由多種蛋白質(zhì)及酶組成的復(fù)合物DnaA：能結(jié)合于DNA復(fù)制起始部位

DnaB：具有解鏈酶的作用

DnaC：能結(jié)合于DNA復(fù)制起始部位，解開(kāi)DNA雙鏈引物酶：DNA合成時(shí)候所需的引物（4）引發(fā)體73引發(fā)體：是DNA復(fù)制開(kāi)始所必須的，由多種蛋白質(zhì)及酶組成744、DNA的半不連續(xù)復(fù)制定義：兩條DNA鏈同時(shí)作為模板進(jìn)行復(fù)制時(shí)，一條鏈（3’→5’）的復(fù)制是連續(xù)的，另一條鏈（5’→3’）的復(fù)制是不連續(xù)的。前導(dǎo)鏈和滯后鏈：DNA聚合酶只能催化DNA鏈從5’→3’方向合成，因此新生DNA鏈先按5’→3’方向連續(xù)合成一條鏈，這一條鏈叫前導(dǎo)鏈，不連續(xù)合成的另一條鏈叫滯后鏈。Okazaki（岡崎）片斷：半不連續(xù)復(fù)制過(guò)程中出現(xiàn)的1000個(gè)左右核苷酸的DNA小片段。744、DNA的半不連續(xù)復(fù)制定義：兩條DNA鏈同時(shí)作為模板754、DNA的半不連續(xù)復(fù)制復(fù)制叉754、DNA的半不連續(xù)復(fù)制復(fù)制叉764、DNA的半不連續(xù)復(fù)制764、DNA的半不連續(xù)復(fù)制774、DNA的半不連續(xù)復(fù)制

RNA引物：DNA復(fù)制時(shí)，除了需要DNA聚合酶、模板和4種核苷酸底物及其它所需的小分子外，還需要一段RNA作為引物，在其3’末端合成DNA新鏈。

RNA引物的合成：是在DNA模板鏈的一定部位合成并互補(bǔ)于DNA鏈，合成方向也是5’→3’。催化該反應(yīng)的酶稱為引物合成酶。引物的長(zhǎng)度通常為15—30個(gè)核苷酸。774、DNA的半不連續(xù)復(fù)制RNA引物：DNA復(fù)制時(shí)，除了784、DNA的半不連續(xù)復(fù)制ArthurKornbergwonthe1959NobelPrizeinMedicineforhisdiscoveryofthemechanisminthebiologicalsynthesisofdeoxyribonucleicacid(beforeWatsonandCrickwontheirs!)Thebiologicsynthesisofdeoxyribonucleicacid784、DNA的半不連續(xù)復(fù)制ArthurKornberg794、DNA的半不連續(xù)復(fù)制①在多種蛋白質(zhì)和酶的參與下，雙鏈解開(kāi)形成復(fù)制叉②在一系列酶的作用下，DNA雙螺旋解開(kāi)形成兩股單鏈進(jìn)行復(fù)制③兩股單鏈分別在復(fù)制叉處按堿基配對(duì)原則進(jìn)行反向平行復(fù)制，一條沿5'→3'方向連續(xù)進(jìn)行復(fù)制，而另一條則經(jīng)形成岡崎片段進(jìn)行不連續(xù)復(fù)制④岡崎片段經(jīng)DNA連接酶形成一條連續(xù)的DNA鏈DNA的復(fù)制步驟794、DNA的半不連續(xù)復(fù)制①在多種蛋白質(zhì)和酶的參與下，雙鏈804、DNA的半不連續(xù)復(fù)制804、DNA的半不連續(xù)復(fù)制815’3’復(fù)制叉的移動(dòng)方向ATPADP＋PiDNA旋轉(zhuǎn)酶解旋酶SSB引物體RNA引物DNA聚合酶III復(fù)合物DNA聚合酶III在RNA引物上開(kāi)始作用DNA聚合酶IRNA引物的去處和被脫氧核苷酸取代被DNA連接酶拼接3’5’3’5’前導(dǎo)鏈滯后鏈SSB815’3’復(fù)制叉的移動(dòng)方向ATPADP＋PiDNA旋轉(zhuǎn)酶解825、原核生物DNA復(fù)制的特點(diǎn)θ方式（或Cairns方式）：大腸桿菌滾動(dòng)環(huán)式：病毒取代環(huán)或D-環(huán)式：線粒體DNA的復(fù)制單個(gè)復(fù)制起始點(diǎn)，單個(gè)復(fù)制子復(fù)制方式825、原核生物DNA復(fù)制的特點(diǎn)θ方式（或Cairns方式836、真核生物DNA復(fù)制的特點(diǎn)真核生物有多個(gè)復(fù)制起始點(diǎn)和復(fù)制子真核生物的復(fù)制子從開(kāi)始復(fù)制后一直復(fù)制到結(jié)束，期間不再重新開(kāi)始真核和原核生物DNA聚合酶不一樣真核生物復(fù)制時(shí)，首先DNA與組蛋白解開(kāi)，復(fù)制完成后重新組裝核小體引物及岡崎片段的長(zhǎng)度均比原核細(xì)胞短836、真核生物DNA復(fù)制的特點(diǎn)真核生物有多個(gè)復(fù)制起始點(diǎn)和84真核細(xì)胞DNA復(fù)制的特點(diǎn)

多個(gè)起點(diǎn)復(fù)制起點(diǎn)起點(diǎn)起點(diǎn)起點(diǎn)起點(diǎn)起點(diǎn)84真核細(xì)胞DNA復(fù)制的特點(diǎn)多個(gè)起點(diǎn)復(fù)制起點(diǎn)起點(diǎn)起點(diǎn)起點(diǎn)85PCR聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PolymeraseChainReaction）是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法，由高溫變性、低溫退火（復(fù)性）及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個(gè)周期，循環(huán)進(jìn)行，使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。PCR又稱無(wú)細(xì)胞分子克隆或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴(kuò)增技術(shù)。

特點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、省時(shí)等。應(yīng)用范圍：不僅可用于基因分離、克隆和核酸序列分析等基礎(chǔ)研究，還可用于疾病的診斷或任何有DNA，RNA的地方。85PCR聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PolymeraseChain86PCR①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時(shí)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備；②模板DNA與引物的退火（復(fù)性）：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至40~60℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合；工作原理86PCR①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一87PCR③引物的延伸：DNA模板—引物結(jié)合物在DNA聚合酶的作用下，于72℃左右，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈。重復(fù)循環(huán)變性—退火—延伸三過(guò)程，就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需2～4分鐘，2～3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬(wàn)倍。87PCR③引物的延伸：DNA模板—引物結(jié)合物在DNA聚合酶88PCR引物酶dNTP模板Mg2+

88PCR引物89引物設(shè)計(jì)①引物長(zhǎng)度：15-30bp，常用為20bp左右。②引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。③避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3‘端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。④引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)，被擴(kuò)增的靶序列最好有適宜的酶切位點(diǎn)，這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。⑤引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。89引物設(shè)計(jì)①引物長(zhǎng)度：15-30bp，常用為20bp左DNAMANDNAClubOligoPrimer

DNAMANPCR反應(yīng)體系PCR反應(yīng)體系92PCR反應(yīng)條件第一階段：94℃預(yù)變性4min

第二階段：

94℃變性40S退火溫度30S72℃延伸1-2min

第三階段：72℃延伸10min，使引物延伸完全，并使單鏈產(chǎn)物退火成雙鏈第四階段：4℃保存×（25~35）92PCR反應(yīng)條件第一階段：94℃預(yù)變性4min×（16SrRNA擴(kuò)增電泳圖20001500M12341000500250100磷脂酶B的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物20001000750500250100M116SrRNA擴(kuò)增電泳圖20001500M194二、DNA的損傷與修復(fù)1、DNA的損傷—突變2、DNA的修復(fù)94二、DNA的損傷與修復(fù)1、DNA的損傷—突變2、DNA的951、DNA的損傷—突變點(diǎn)突變：DNA分子上一個(gè)堿基的變異。缺失：一個(gè)堿基或一段核苷酸鏈乃至整個(gè)基因，從DNA大分子上丟失。插入：一個(gè)原來(lái)沒(méi)有的堿基或一段核苷酸序列插入到DNA大分子中去，引起移碼突變，影響三聯(lián)體密碼的閱讀方式。951、DNA的損傷—突變點(diǎn)突變：DNA分子上一個(gè)堿基的變96

DNA突變的類型

-T-C-G-G-C-T-G-T-A-C-G--A-G-C-C-G-A-C-A-T-G-C-轉(zhuǎn)換

-T-C-G-A-G-C-T-G-T-A-C-G--A-G-C-T-C-G-A-C-A-T-G-C-插入A

-T-C-G-C-T-G-T-A-C-G--A-G-C-G-A-C-A-T-G-C-缺失T野生型基因

-T-C-G-A-C-T-G-T-A-C-G--A-G-C-T-G-A-C-A-T-G-C-

-T-C-G-T-C-T-G-T-A-C-G--A-G-C-A-G-A-C-A-T-G-C-顛換堿基對(duì)的置換（substitution）移碼突變（frameshiftmutation）96DNA突變的類型-T-C-G-G-C-T-G-T-A97三、逆轉(zhuǎn)錄1、逆轉(zhuǎn)錄酶及其催化特性2、逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程3、cDNA文庫(kù)97三、逆轉(zhuǎn)錄1、逆轉(zhuǎn)錄酶及其催化特性981、逆轉(zhuǎn)錄酶及其催化特性逆轉(zhuǎn)錄：逆轉(zhuǎn)錄酶催化的反應(yīng)，即以RNA為模板合成DNA的過(guò)程稱為逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄病毒：需在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下首先將RNA轉(zhuǎn)變?yōu)閏DNA，再在DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯等蛋白酶作用下擴(kuò)增的一類病毒。

981、逆轉(zhuǎn)錄酶及其催化特性逆轉(zhuǎn)錄：逆轉(zhuǎn)錄酶催化的反應(yīng)，即以991、逆轉(zhuǎn)錄酶及其催化特性RNA3’5’依賴于RNA的DNA聚合酶RNA3’5’核糖核酸酶H5’3’5’3’cDNA依賴DNA的DNA聚合酶cDNA雜交分子3’5’5’3’雙鏈DNA新合成的雙鏈DNA整合到寄主染色體DNA中991、逆轉(zhuǎn)錄酶及其催化特性RNA3’5’依賴于RNA的1002、逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程1002、逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程1013、cDNA文庫(kù)是以特定的組織或細(xì)胞mRNA為模板，逆轉(zhuǎn)錄形成的互補(bǔ)DNA（cDNA）與適當(dāng)?shù)妮d體（常用噬菌體或質(zhì)粒載體）連接后轉(zhuǎn)化受體菌形成重組DNA克隆群，這樣包含著細(xì)胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合稱為該組織或細(xì)胞的cDNA文庫(kù)。cDNA文庫(kù)特異地反映某種組織或細(xì)胞中，在特定發(fā)育階段表達(dá)的蛋白質(zhì)的編碼基因，因此cDNA文庫(kù)具有組織或細(xì)胞特異性。1013、cDNA文庫(kù)是以特定的組織或細(xì)胞mRNA為模板，1023、cDNA文庫(kù)1023、cDNA文庫(kù)10312第三節(jié)RNA的生物合成一、催化RNA合成的模板和酶二、轉(zhuǎn)錄過(guò)程43三、轉(zhuǎn)錄后修飾加工四、RNA的復(fù)制10312第三節(jié)RNA的生物合成一、催化RNA合成的模板104一、催化RNA合成的模板和酶1、轉(zhuǎn)錄模板2、RNA聚合酶3、RNA復(fù)制酶4、多核苷酸磷酸化酶5、模板與酶的辨認(rèn)結(jié)合104一、催化RNA合成的模板和酶1、轉(zhuǎn)錄模板1051、轉(zhuǎn)錄模板反義鏈（模板鏈、負(fù)鏈、非敏感鏈、非編碼鏈）：在RNA的轉(zhuǎn)錄中，用作模板的DNA鏈稱為反義鏈有義鏈（編碼鏈、正鏈、敏感鏈）：在RNA的轉(zhuǎn)錄中，不作為模板的DNA鏈稱為有義鏈1051、轉(zhuǎn)錄模板反義鏈（模板鏈、負(fù)鏈、非敏感鏈、非編碼鏈）1062、RNA聚合酶以DNA為模板，以4種核苷三磷酸（NTP）為底物，在二價(jià)陽(yáng)離子參與下催化合成RNA的酶。又稱為依賴DNA的RNA聚合酶。1062、RNA聚合酶以DNA為模板，以4種核苷三磷酸（N1072、RNA聚合酶大腸桿菌的RNA聚合酶，其相對(duì)分子質(zhì)量約為465000，由4種亞基α、β、β’和σ（sigma）組成的五聚體（α2ββ’σ）αβσαβ’+1072、RNA聚合酶大腸桿菌的RNA聚合酶，其相對(duì)分子108ACPTPCPGAPP-P-POH5’3’CPGPPPPOHUDNA指導(dǎo)下的RNA合成108ACPTPCPGAPP-P-POH5’3’CPGP1092、RNA聚合酶真核生物的RNA聚合酶：酶類型別名細(xì)胞定位合成RNA的類型α-鵝膏蕈堿抑制程度Ⅰ（A酶）rRNA聚合酶核仁rRNA抑制（不敏感）≥10-3mol/LⅡ（B酶）不均一RNA聚合酶核質(zhì)hnRNA低濃度抑制（高度敏感）Ⅲ（C酶）

小分子RNA聚合酶核質(zhì)5SRNA，tRNA>10-5抑制（中度敏感）1092、RNA聚合酶真核生物的RNA聚合酶：酶類型別1103、RNA復(fù)制酶依賴于RNA的RNA聚合酶，以RNA為模板，以4種核苷三磷酸為底物，合成RNA分子。RNA復(fù)制酶包括4個(gè)亞基，3個(gè)亞基來(lái)自宿主細(xì)胞，1個(gè)亞基在噬菌體感染過(guò)程中產(chǎn)生。不僅存在于被噬菌體感染的細(xì)菌體內(nèi)，而且也存在于被RNA病毒感染的高等動(dòng)物和植物體內(nèi)。1103、RNA復(fù)制酶依賴于RNA的RNA聚合酶，以RNA1114、多核苷酸磷酸化酶催化在體外合成多核苷酸的酶，不需任何模板。廣泛存在于微生物體內(nèi)，催化以核苷二磷酸為底物的多核苷酸合成反應(yīng)。人們推斷該酶在生物體內(nèi)的功能是催化RNA分解為核苷二磷酸，而不是合成RNA。1114、多核苷酸磷酸化酶催化在體外合成多核苷酸的酶，不需1125、模板與酶的辨認(rèn)結(jié)合操縱子：包括若干結(jié)構(gòu)基因及其上游的調(diào)控序列啟動(dòng)子：與RNA聚合酶相結(jié)合的區(qū)域，也是控制轉(zhuǎn)錄的關(guān)鍵部位

TTGACAAACTGTTATAATATATTA－35（識(shí)別位）－10（Pribnow框）＋1起始部位DNA5’3’原核生物啟動(dòng)子結(jié)構(gòu)1125、模板與酶的辨認(rèn)結(jié)合操縱子：包括若干結(jié)構(gòu)基因及其上113二、轉(zhuǎn)錄過(guò)程1、轉(zhuǎn)錄起始2、轉(zhuǎn)錄延長(zhǎng)3、轉(zhuǎn)錄終止113二、轉(zhuǎn)錄過(guò)程1、轉(zhuǎn)錄起始1141、轉(zhuǎn)錄起始（1）原核生物的轉(zhuǎn)錄起始（2）真核生物的轉(zhuǎn)錄起始1141、轉(zhuǎn)錄起始（1）原核生物的轉(zhuǎn)錄起始（2）真核生物的115原核生物依靠σ因子辨認(rèn)轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)，被辨認(rèn)的DNA區(qū)段就是處在-35區(qū)的TTGACA序列。-35-10ααββ’轉(zhuǎn)錄方向上游下游σ因子原核物轉(zhuǎn)錄起始的識(shí)別（1）原核生物的轉(zhuǎn)錄起始115原核生物依靠σ因子辨認(rèn)轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)，被辨認(rèn)的DNA區(qū)段116真核生物RNA聚合酶辨認(rèn)轉(zhuǎn)錄起始區(qū)上游的DNA序列，生成起始復(fù)合物。起始點(diǎn)上游大多有共同的5’-TATA序列，稱為Hogness盒或TATA盒。AATAAGCGC-CAAT-TATA-ATG切離加尾真正終止點(diǎn)翻譯起始轉(zhuǎn)錄起始TATA盒CAAT盒GC盒增強(qiáng)子內(nèi)含子外顯子（2）真核生物的轉(zhuǎn)錄起始116真核生物RNA聚合酶辨認(rèn)轉(zhuǎn)錄起始區(qū)上游的DNA序列，1172、轉(zhuǎn)錄延長(zhǎng)原核和真核生物的轉(zhuǎn)錄延長(zhǎng)過(guò)程沒(méi)有顯著區(qū)別，只是RNA聚合酶的不同。5’3’mRNA5’3’5’1172、轉(zhuǎn)錄延長(zhǎng)原核和真核生物的轉(zhuǎn)錄延長(zhǎng)過(guò)程沒(méi)有顯著區(qū)別1183、轉(zhuǎn)錄終止（1）原核生物的轉(zhuǎn)錄終止（2）真核生物的轉(zhuǎn)錄終止1183、轉(zhuǎn)錄終止（1）原核生物的轉(zhuǎn)錄終止（2）真核生物的119依賴ρ因子的轉(zhuǎn)錄終止（1）原核生物的轉(zhuǎn)錄終止119依賴ρ因子的轉(zhuǎn)錄終止（1）原核生物的轉(zhuǎn)錄終止120不依賴ρ因子的轉(zhuǎn)錄終止（1）原核生物的轉(zhuǎn)錄終止120不依賴ρ因子的轉(zhuǎn)錄終止（1）原核生物121在模板鏈讀碼框架的3’端之后，常有一組共同序列AATAAA，在下游還有相當(dāng)多的CT序列，這些序列稱為轉(zhuǎn)錄終止的修飾點(diǎn)。越過(guò)轉(zhuǎn)錄修飾點(diǎn)后，mRNA在修飾點(diǎn)處被切斷，隨即加上polyA尾及5’-帽子結(jié)構(gòu)。（2）真核生物的轉(zhuǎn)錄終止121在模板鏈讀碼框架的3’端之后，常有一組共同序列AAT122RNA合成過(guò)程起始雙鏈DNA局部解開(kāi)磷酸二酯鍵形成終止階段解鏈區(qū)到達(dá)基因終點(diǎn)延長(zhǎng)階段5

3

RNA啟動(dòng)子（promoter)

終止子(terminator)5

RNA聚合酶

5

3

5

3

5

5

3

離開(kāi)122RNA合成過(guò)程起始雙鏈DNA局部解開(kāi)磷酸二酯鍵形成終止123RNA鏈的延伸圖解3′3′RNA-DNA雜交螺旋聚合酶的移動(dòng)方向新生RNA復(fù)鏈解鏈有義鏈模板鏈（反義鏈）延長(zhǎng)部位123RNA鏈的延伸圖解3′3′RNA-DNA雜交螺旋聚合酶124三、轉(zhuǎn)錄后修飾加工1、真核生物mRNA的轉(zhuǎn)錄后加工2、真核生物tRNA的轉(zhuǎn)錄后加工3、真核生物rRNA的轉(zhuǎn)錄后加工124三、轉(zhuǎn)錄后修飾加工1、真核生物mRNA的轉(zhuǎn)錄后加工1251、真核生物mRNA的轉(zhuǎn)錄后加工（1）首、尾的修飾5′m7GpppNp………3′ 5′m7GpppNmp………3′ Pi 甲基化酶

甲基化酶

5′pppNp………3′ SAM

SAM 磷酸酶 5′ppNp………3′ 5′GpppNp………3′ 新生的mRNA鳥(niǎo)苷酸轉(zhuǎn)移酶 1251、真核生物mRNA的轉(zhuǎn)錄后加工（1）首、尾的修飾5126GppGGppG1、真核生物mRNA的轉(zhuǎn)錄后加工（2）mRNA的剪接AA…AAAAGppGAA…AAAAAA…AAAA5’3’5’5’3’3’12345126GppGGppG1、真核生物mRNA的轉(zhuǎn)錄后加工（2）127卵清蛋白基因產(chǎn)生mRNA的過(guò)程：轉(zhuǎn)錄1234567ABCDEFG卵清蛋白基因(7700個(gè)核苷酸)1234567ABCDEFGLL5’3’加帽子和尾巴1234567ABCDEFGL5’3’內(nèi)含子RNA的除去和拼接作用1234567LCAPPolyA尾成熟的mRNA1872個(gè)核苷酸127卵清蛋白基因產(chǎn)生mRNA的過(guò)程：轉(zhuǎn)錄121281、真核生物mRNA的轉(zhuǎn)錄后加工1281、真核生物mRNA的轉(zhuǎn)錄后加工1292、真核生物tRNA的轉(zhuǎn)錄后加工①由RNaseP（核酸內(nèi)切酶）作用，從5’末端切除多余的核苷酸②由RNaseD（核酸外切酶）作用，從3’末端切除多余的核苷酸③在tRNA核苷酰轉(zhuǎn)移酶的作用下，完成3’末端添加-CCA-序列④由核酸內(nèi)切酶和連接酶共同完成剪接反應(yīng)⑤完成堿基的甲基化、還原反應(yīng)、脫氨基反應(yīng)等化學(xué)修飾過(guò)程1292、真核生物tRNA的轉(zhuǎn)錄后加工①由RNaseP（核酸1302、真核生物tRNA的轉(zhuǎn)錄后加工tRNA的生成細(xì)胞核核仁細(xì)胞質(zhì)tRNA基因轉(zhuǎn)錄5’切斷tRNA前體nCH3假尿苷生成tRNA1302、真核生物tRNA的轉(zhuǎn)錄后加工tRNA的生成細(xì)胞核核131酵母酪氨酸t(yī)RNA前體的加工早轉(zhuǎn)錄本成熟tRNA加工131酵母酪氨酸t(yī)RNA前體的加工早轉(zhuǎn)錄本成熟tRNA加工1323、真核生物rRNA的轉(zhuǎn)錄后加工18S28S5.8S18SrRNA5.8S和28SrRNA1234轉(zhuǎn)錄剪接內(nèi)含子1323、真核生物rRNA的轉(zhuǎn)錄后加工18S28S5.8S11333、真核生物rRNA的轉(zhuǎn)錄后加工18S5.8S28S45S甲基化作用核酸內(nèi)切酶18SRNA5.8SRNA28SRNA真核生物rRNA前體的加工1333、真核生物rRNA的轉(zhuǎn)錄后加工18S5.8S28S4134真核生物rRNA的生成與成熟45S5S41S→32S5S20S32S5S細(xì)胞核核仁細(xì)胞質(zhì)28S5.8S18S5S28S5.8S18S核蛋白體134真核生物rRNA的生成與成熟45S5S41S→32S135P16SP23SP5S16S23S5S細(xì)菌rRNA的形成135P16SP23SP5S16S23S5S細(xì)菌rRNA的形136四、RNA的復(fù)制1、單鏈RNA病毒的復(fù)制2、雙鏈RNA病毒的復(fù)制136四、RNA的復(fù)制1、單鏈RNA病毒的復(fù)制1371、單鏈RNA病毒的復(fù)制＋ssRNA病毒：一旦病毒顆粒中的RNA進(jìn)入寄主細(xì)胞，就直接作為mRNA，翻譯出所編碼的蛋白質(zhì)，其中包括衣殼蛋白和病毒的RNA聚合酶。

例如脊髓灰質(zhì)炎病毒、鼻病毒、煙草花葉病毒。

1371、單鏈RNA病毒的復(fù)制＋ssRNA病毒：一旦病毒顆1381、單鏈RNA病毒的復(fù)制病毒正鏈（具mRNA功能）pppG5’3’OH5’5’pp3’OH復(fù)制中間體5’3’3’新合成的負(fù)鏈病毒正鏈為模板復(fù)制酶5’1381、單鏈RNA病毒的復(fù)制病毒正鏈（具mRNA功能）pp1391、單鏈RNA病毒的復(fù)制－ssRNA病毒：其復(fù)制是以ssRNA為負(fù)鏈，侵入寄主后不能直接作為mRNA，而是先以負(fù)鏈RNA為模板由轉(zhuǎn)錄酶轉(zhuǎn)錄出與負(fù)鏈RNA互補(bǔ)的RNA，再以這個(gè)互補(bǔ)RNA作為mRNA，翻譯出遺傳密碼所決定的蛋白質(zhì)。例如流感病毒、萵苣壞死黃化病毒等。1391、單鏈RNA病毒的復(fù)制－ssRNA病毒：其復(fù)制是以1402、雙鏈RNA病毒的復(fù)制病毒RNA聚合酶的作用下病毒基因組轉(zhuǎn)錄正鏈RNA，自髓核逸出。它們既能作為mRNA，又能作為病毒基因組的模板。mRNA翻譯結(jié)構(gòu)蛋白，裝配內(nèi)層衣殼后，再合成負(fù)鏈RNA。正鏈RNA進(jìn)入，與之形成雙鏈RNA。然后又重復(fù)上述過(guò)程，最后獲得了外層衣殼。1402、雙鏈RNA病毒的復(fù)制病毒RNA聚合酶的作用下病四節(jié)核酸代謝的調(diào)節(jié)一、原核生物基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控43二、真核生物基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控14212第四節(jié)核酸代謝的調(diào)節(jié)一、原核生物基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控143一、原核生物基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控1、操縱子的概念和結(jié)構(gòu)2、乳糖操縱子3、色氨酸操縱子143一、原核生物基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控1、操縱子的概念和結(jié)構(gòu)1441、操縱子的概念和結(jié)構(gòu)

操縱子：原核生物基因表達(dá)調(diào)控的功能單位，由啟動(dòng)子、調(diào)節(jié)基因、操縱基因和一個(gè)或多個(gè)功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因組成。RPOZYA

操縱子調(diào)節(jié)基因啟動(dòng)子操縱基因結(jié)構(gòu)基因1441、操縱子的概念和結(jié)構(gòu)操縱子：原核生物基因表達(dá)調(diào)控的1452、乳糖操縱子大腸桿菌的乳糖操縱子是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的操縱子。調(diào)控區(qū)結(jié)構(gòu)基因操縱基因啟動(dòng)子 CAP結(jié)合位點(diǎn) 調(diào)節(jié)基因 β－半乳糖透性酶 β-半乳糖苷乙?；D(zhuǎn)移酶 β－半乳糖苷酶 RP O Z A Y 1452、乳糖操縱子大腸桿菌的乳糖操縱子是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的操1462、乳糖操縱子乳糖操縱子在阻遏狀態(tài)示意圖（無(wú)乳糖存在）RPOZYA

調(diào)節(jié)基因啟動(dòng)子操縱基因與阻遏蛋白復(fù)合物操縱子mRNA阻遏蛋白阻遏蛋白結(jié)構(gòu)基因阻遏蛋白與操縱基因結(jié)合阻止結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄1462、乳糖操縱子乳糖操縱子在阻遏狀態(tài)示意圖（無(wú)乳糖存在）1472、乳糖操縱子乳糖操縱子在誘導(dǎo)狀態(tài)示意圖（有乳糖）RP