臨床試驗(yàn)室安全管理課件

臨床實(shí)驗(yàn)室安全管理（二）第二節(jié)實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)備和用品中南大學(xué)湘雅三醫(yī)院檢驗(yàn)科彭懷燕教授臨床實(shí)驗(yàn)室安全管理（二）第二節(jié)實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)備和用品1

按照《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》所規(guī)定：①具有與采集病原微生物樣本所需要的生物安全防護(hù)水平相適應(yīng)的設(shè)備。②具有掌握相關(guān)專業(yè)知識(shí)和操作技能的工作人員。③具有有效地防止病原微生物擴(kuò)散和感染。④具有保證病原微生物樣本質(zhì)量的技術(shù)方法和手段。按照《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》2一.生物安全柜

一.生物安全柜

3一.生物安全柜的工作原理和分類(一)、生物安全柜的基本工作原理

生物安全柜（biosafetycabinet；biologicalsafetycabinet）是防止操作處理過(guò)程中某些含有危險(xiǎn)性或未知性生物微粒發(fā)生氣溶膠散逸的箱形空氣凈化負(fù)壓安全裝置※生物安全柜的基本設(shè)計(jì)的兩個(gè)重要改進(jìn)：1、HEPA過(guò)濾器2、HEPA過(guò)濾器+層流技術(shù)一.生物安全柜的工作原理和分類(一)、生物安全柜的基本工作原4生物安全柜的工作原理主要是將柜內(nèi)空氣向外抽吸，使柜內(nèi)保持負(fù)壓狀態(tài)，通過(guò)垂直氣流來(lái)保護(hù)工作人員；外界空氣經(jīng)高效空氣過(guò)濾器（high-efficiencyparticulateairfilter,HEPAfilter）過(guò)濾后進(jìn)入安全柜內(nèi)，以避免處理樣品被污染；柜內(nèi)的空氣也需經(jīng)過(guò)HEPA過(guò)濾器過(guò)濾后再排放到大氣中，以保護(hù)環(huán)境。

生物安全柜的工作原理主要是將柜內(nèi)空氣向外抽吸，使柜內(nèi)保持負(fù)壓5生物安全柜的工作原理――氣流示意圖生物安全柜的工作原理――氣流示意圖6(二)、生物安全柜的分類生物安全柜領(lǐng)域執(zhí)行的最重要的標(biāo)準(zhǔn)是歐洲標(biāo)準(zhǔn)EN12469和美國(guó)國(guó)家衛(wèi)生基金會(huì)的第49號(hào)標(biāo)準(zhǔn)（NSF49）NSF49在上世紀(jì)70年代就已經(jīng)出現(xiàn)，被公認(rèn)為目前生物安全柜領(lǐng)域最完善的標(biāo)準(zhǔn)。2002年，NSF49正式獲得了美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)學(xué)會(huì)（ANSI）的認(rèn)可，成為美國(guó)生物安全柜的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)歐洲標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（CEN）于2000年5月頒布了生物安全柜歐洲標(biāo)準(zhǔn)EN12469:2000，成為歐盟區(qū)域內(nèi)生物安全柜的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)這兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)生物安全柜的分類、性能和檢測(cè)均有明確規(guī)定(二)、生物安全柜的分類生物安全柜領(lǐng)域執(zhí)行的最重要的標(biāo)準(zhǔn)是歐7(二)、生物安全柜的分類根據(jù)防護(hù)程度的不同，通常將生物安全柜分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)，可適用于不同生物安全等級(jí)的媒質(zhì)的操作按照美國(guó)1992年版NSF49標(biāo)準(zhǔn)生物安全等級(jí)1級(jí)（P1）的媒質(zhì)是指普通無(wú)害細(xì)菌、病毒等微生物生物安全等級(jí)2級(jí)（P2）的媒質(zhì)是指一般性可致病細(xì)菌、病毒等微生物生物安全等級(jí)3級(jí)（P3）的媒質(zhì)是指烈性/致命細(xì)菌、病毒等微生物，但感染后可治愈生物安全等級(jí)4級(jí)（P4）的媒質(zhì)是指烈性/致命細(xì)菌、病毒等微生物，感染后不可治愈(二)、生物安全柜的分類根據(jù)防護(hù)程度的不同，通常將生物安全柜8Ⅰ級(jí)生物安全柜Ⅰ級(jí)生物安全柜是指用于保護(hù)操作人員與環(huán)境安全、而不保護(hù)樣品安全的通風(fēng)安全柜適用于對(duì)處理樣品安全性無(wú)要求且生物危險(xiǎn)度等級(jí)為1、2、3的媒質(zhì)的操作Ⅰ級(jí)生物安全柜Ⅰ級(jí)生物安全柜是指用于保護(hù)操作人員與環(huán)境安全、9Ⅰ級(jí)生物安全柜結(jié)構(gòu)示意圖

無(wú)手套型有手套型Ⅰ級(jí)生物安全柜結(jié)構(gòu)示意圖10Ⅰ級(jí)生物安全柜因不考慮處理樣品是否會(huì)被進(jìn)入柜內(nèi)的空氣污染，故對(duì)進(jìn)入柜內(nèi)的空氣潔凈度要求不高空氣的流動(dòng)為單向、非循環(huán)式，空氣流經(jīng)HEPA過(guò)濾器后進(jìn)入柜內(nèi)，通過(guò)工作臺(tái)面后又被過(guò)濾、經(jīng)排氣口排出為保護(hù)操作人員安全，其向內(nèi)的非循環(huán)吸入氣流必須遠(yuǎn)離操作者，故要求在使用前方有操作窗口、無(wú)手套的Ⅰ級(jí)生物安全柜時(shí)，避免人員在安全柜前快速走動(dòng)或操作人員完成操作后將手臂快速?gòu)墓駜?nèi)抽出為保護(hù)環(huán)境，安全柜中的氣體在外排到大氣以前必須先經(jīng)過(guò)HEPA過(guò)濾器過(guò)濾Ⅰ級(jí)生物安全柜因不考慮處理樣品是否會(huì)被進(jìn)入柜內(nèi)的空氣污染，故11Ⅱ級(jí)生物安全柜Ⅱ級(jí)生物安全柜是指用于保護(hù)操作人員、處理樣品安全與環(huán)境安全的通風(fēng)安全柜通常適用于生物危險(xiǎn)度等級(jí)為1、2、3的媒質(zhì)的操作。當(dāng)有毒化學(xué)物質(zhì)或放射性核物質(zhì)被用于微生物研究或制藥的添加物時(shí)，應(yīng)使用專為此目的設(shè)計(jì)制造的II級(jí)生物安全柜Ⅱ級(jí)生物安全柜Ⅱ級(jí)生物安全柜是指用于保護(hù)操作人員、處理樣品安12

Ⅱ級(jí)生物安全柜為臨床生物防護(hù)中應(yīng)用最普遍的一類生物安全柜

臨床中處理高濃度或大容量感染性材料時(shí)，以Ⅱ級(jí)生物安全柜應(yīng)用最多

13Ⅱ級(jí)生物安全柜至少需裝置一個(gè)HEPA空氣過(guò)濾器對(duì)外排氣體進(jìn)行凈化，工作空間為經(jīng)HEPA過(guò)濾器凈化的無(wú)渦流的單向流垂直空氣工作時(shí)正面玻璃推拉窗打開(kāi)一半，上部為觀察窗，下部為操作窗口由于外排風(fēng)機(jī)將安全柜內(nèi)空氣不斷地向外抽吸，使柜內(nèi)保持負(fù)壓狀態(tài)，故操作窗口處雖然處于開(kāi)放狀態(tài)，外部空氣只可能經(jīng)操作窗口被吸入，而柜內(nèi)的空氣不可能由操作窗口逸出，避免了氣溶膠污染，保護(hù)了操作人員的安全Ⅱ級(jí)生物安全柜至少需裝置一個(gè)HEPA空氣過(guò)濾器對(duì)外排氣體進(jìn)行14操作窗口內(nèi)側(cè)垂直氣流和外部吸入氣流交匯點(diǎn)的平衡是生物安全柜的一個(gè)設(shè)計(jì)關(guān)鍵。若外部吸入氣流過(guò)強(qiáng)，此未經(jīng)過(guò)濾的空氣有可能越過(guò)前方的回風(fēng)隔柵而污染操作平臺(tái)；若垂直氣流過(guò)強(qiáng)，則有可能使柜內(nèi)含有微生物的空氣逸出Ⅱ級(jí)生物安全柜分為A1、A2（原B3）、B1、B2四個(gè)類型操作窗口內(nèi)側(cè)垂直氣流和外部吸入氣流交匯點(diǎn)的平衡是生物安全柜的15Ⅱ級(jí)生物安全柜--A1型生物安全柜A1型生物安全柜結(jié)構(gòu)示意圖Ⅱ級(jí)生物安全柜--A1型生物安全柜A1型生物安全柜結(jié)構(gòu)示意圖16A1型生物安全柜維持穿過(guò)工作臺(tái)開(kāi)口面的最小平均吸入口風(fēng)速（計(jì)算或測(cè)量值）為0.38m/s(75ft/min)由靜壓箱送出的，經(jīng)HEPA過(guò)濾器過(guò)濾的垂直氣流是垂直氣流和吸入氣流混合后的一部分（即柜內(nèi)70%氣體通過(guò)HEPA過(guò)濾器再循環(huán)至工作區(qū)，30%的氣體通過(guò)排氣口HEPA過(guò)濾器過(guò)濾排除）允許經(jīng)排出口HEPA過(guò)濾器過(guò)濾后的氣流返回實(shí)驗(yàn)室允許有正壓的污染風(fēng)道和靜壓箱

A1型生物安全柜17Ⅱ級(jí)生物安全柜--A2型生物安全柜Ⅱ級(jí)A2型生物安全柜結(jié)構(gòu)示意圖Ⅱ級(jí)生物安全柜--A2型生物安全柜Ⅱ級(jí)A2型生物安全柜結(jié)構(gòu)18A2型生物安全柜

維持穿過(guò)工作臺(tái)開(kāi)口面的最小平均吸入口風(fēng)速（計(jì)算或測(cè)量值）為0.5m/s（100ft/min）經(jīng)HEPA過(guò)濾器過(guò)濾后的垂直氣流是由靜壓箱排出的垂直氣流和吸入氣流混合后的一部分（即柜內(nèi)30%氣體通過(guò)排氣口HEPA過(guò)濾器排除，70%的氣體通過(guò)供氣口HEPA過(guò)濾器再循環(huán)至工作區(qū)）必須經(jīng)HEPA過(guò)濾器過(guò)濾后，所有廢氣才能排到室外，但廢氣不可再進(jìn)入安全柜循環(huán)或返回實(shí)驗(yàn)室所有被生物污染的風(fēng)道和靜壓箱應(yīng)保持負(fù)壓或者被負(fù)壓的風(fēng)道和靜壓箱包圍

A2型生物安全柜

維持穿過(guò)工作臺(tái)開(kāi)口面的最小平均吸入口風(fēng)速（19Ⅱ級(jí)生物安全柜--B1型生物安全柜當(dāng)使用微量揮發(fā)性有毒化學(xué)物質(zhì)和痕量放射性核素用于微生物學(xué)研究時(shí)，可采用B1型生物安全柜，但是對(duì)這些化學(xué)物質(zhì)和放射性核素的處理應(yīng)在安全柜的直接排風(fēng)區(qū)內(nèi)進(jìn)行Ⅱ級(jí)B1型生物安全柜結(jié)構(gòu)示意圖Ⅱ級(jí)生物安全柜--B1型生物安全柜當(dāng)使用微量揮發(fā)性有毒化學(xué)20B1型生物安全柜維持穿過(guò)工作臺(tái)開(kāi)口面的最小平均吸入口風(fēng)速（計(jì)算或測(cè)量值）為0.5m/s（100ft/min）經(jīng)HEPA過(guò)濾器過(guò)濾后的垂直氣流中的絕大部分是由未污染的循環(huán)吸入氣流組成（即柜內(nèi)70%氣體通過(guò)排氣口HEPA過(guò)濾器排除，30%的氣體通過(guò)供氣口HEPA過(guò)濾器再循環(huán)至工作區(qū)）經(jīng)HEPA過(guò)濾器過(guò)濾后的大部分污染的垂直氣流，通過(guò)專用風(fēng)道過(guò)濾后排入大氣所有被生物污染的風(fēng)道和靜壓箱應(yīng)保持負(fù)壓，或被負(fù)壓的風(fēng)道和靜壓箱包圍B1型生物安全柜維持穿過(guò)工作臺(tái)開(kāi)口面的最小平均吸入口風(fēng)速（計(jì)21

Ⅱ級(jí)B2型生物安全柜（也稱為“全排”型）

Ⅱ級(jí)B2型生物安全柜結(jié)構(gòu)示意圖適用于處理感染性樣品、使用揮發(fā)性有毒化學(xué)物質(zhì)和以放射性核素作為微生物學(xué)研究的工作場(chǎng)合

Ⅱ級(jí)B2型生物安全柜（也稱為“全排”型）

Ⅱ級(jí)B2型22

Ⅱ級(jí)B2型生物安全柜

維持穿過(guò)工作臺(tái)開(kāi)口面的最小平均吸入口風(fēng)速（計(jì)算或測(cè)量值）為0.5m/s（100ft/min）經(jīng)HEPA過(guò)濾器過(guò)濾后的垂直氣流是由實(shí)驗(yàn)室或室外空氣送入的（即：安全柜中排出的氣體不進(jìn)入垂直氣流的循環(huán)過(guò)程）所有的吸入氣流和垂直氣流經(jīng)HEPA過(guò)濾器過(guò)濾后排入大氣，不再進(jìn)入安全柜循環(huán)或返回實(shí)驗(yàn)室所有污染的風(fēng)道和靜壓箱應(yīng)保持負(fù)壓，或是被直接排風(fēng)的風(fēng)道和靜壓箱包圍

Ⅱ級(jí)B2型生物安全柜

維持穿過(guò)工作臺(tái)開(kāi)口面的最小平均吸入口23Ⅲ級(jí)生物安全柜Ⅲ級(jí)生物安全柜是完全密閉、不漏氣結(jié)構(gòu)的通風(fēng)安全柜工作空間內(nèi)為經(jīng)HEPA過(guò)濾器凈化的無(wú)渦流的單向流空氣安全柜正面上部為觀察窗，下部為手套箱式操作口。在安全柜內(nèi)的操作是通過(guò)與安全柜相連接的橡皮手套進(jìn)行的Ⅲ級(jí)生物安全柜Ⅲ級(jí)生物安全柜是完全密閉、不漏氣結(jié)構(gòu)的通風(fēng)安全24Ⅲ級(jí)生物安全柜安全柜應(yīng)維持至少120Pa的負(fù)壓，方可確保人體與柜內(nèi)物品完全隔絕進(jìn)入氣流經(jīng)數(shù)個(gè)HEPA過(guò)濾器過(guò)濾后送入安全柜，排出氣流應(yīng)經(jīng)雙層HEPA過(guò)濾器過(guò)濾或通過(guò)HEPA過(guò)濾器過(guò)濾和焚燒來(lái)處理Ⅲ級(jí)生物安全柜適用于生物危險(xiǎn)度等級(jí)為1、2、3和4的媒質(zhì)的操作Ⅲ級(jí)生物安全柜安全柜應(yīng)維持至少120Pa的負(fù)壓，方可確保人體25(三).生物安全柜的應(yīng)用

(生物安全實(shí)驗(yàn)室選用生物安全柜的原則)實(shí)驗(yàn)室級(jí)別生物安全柜選用原則一級(jí)一般無(wú)須使用生物安全柜，或使用Ⅰ級(jí)生物安全柜二級(jí)當(dāng)可能產(chǎn)生微生物氣溶膠或出現(xiàn)濺出的操作時(shí)，可使用I級(jí)生物安全柜；當(dāng)處理感染性材料時(shí)，應(yīng)使用部分或全部排風(fēng)的Ⅱ級(jí)生物安全柜；若涉及處理化學(xué)致癌劑、放射性物質(zhì)和揮發(fā)性溶媒，則只能使用Ⅱ-B級(jí)全排風(fēng)(B2型)生物安全柜。三級(jí)應(yīng)使用II級(jí)或Ⅲ級(jí)生物安全柜；所有涉及感染材料的操作，應(yīng)使用全排風(fēng)型Ⅱ-B級(jí)(B2型)或Ⅲ級(jí)生物安全柜。四級(jí)應(yīng)使用Ⅲ級(jí)全排風(fēng)生物安全柜。當(dāng)人員穿著正壓防護(hù)服時(shí)，可使用Ⅱ-B級(jí)生物安全柜。(三).生物安全柜的應(yīng)用26小結(jié)生物安全柜是防止操作處理過(guò)程中某些含有危險(xiǎn)性或未知性生物微粒發(fā)生氣溶膠散逸的箱形空氣凈化負(fù)壓安全裝置其工作原理是將柜內(nèi)空氣向外抽吸，使柜內(nèi)保持負(fù)壓狀態(tài)，通過(guò)垂直氣流來(lái)保護(hù)工作人員；外界空氣經(jīng)HEPA過(guò)濾器過(guò)濾后進(jìn)入安全柜內(nèi)，以避免處理樣品被污染；柜內(nèi)的空氣也需經(jīng)過(guò)過(guò)濾器過(guò)濾后再排放到大氣中，以保護(hù)環(huán)境小結(jié)生物安全柜是防止操作處理過(guò)程中某些含有危險(xiǎn)27小結(jié)目前世界上生物安全柜領(lǐng)域最重要的標(biāo)準(zhǔn)是歐洲EN12469標(biāo)準(zhǔn)和美國(guó)NSF49標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)防護(hù)程度的不同，通常將生物安全柜分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)小結(jié)目前世界上生物安全柜領(lǐng)域最重要的標(biāo)準(zhǔn)是歐洲28小結(jié)Ⅰ級(jí)生物安全柜是指用于保護(hù)操作人員與環(huán)境安全、而不保護(hù)樣品安全的通風(fēng)安全柜，適用于對(duì)處理樣品安全性無(wú)要求且生物危險(xiǎn)度等級(jí)為1、2、3的媒質(zhì)的操作Ⅱ級(jí)生物安全柜是指用于保護(hù)操作人員、處理樣品安全與環(huán)境安全的通風(fēng)安全柜，柜內(nèi)保持負(fù)壓狀態(tài)，適用于生物危險(xiǎn)度等級(jí)為1、2、3的媒質(zhì)的操作Ⅲ級(jí)生物安全柜是完全密閉、不漏氣結(jié)構(gòu)的通風(fēng)安全柜，適用于生物危險(xiǎn)度等級(jí)為1、2、3和4的媒質(zhì)的操作小結(jié)Ⅰ級(jí)生物安全柜是指用于保護(hù)操作人員與環(huán)境29小結(jié)Ⅱ級(jí)生物安全柜為臨床生物防護(hù)中應(yīng)用最普遍的一類生物安全柜臨床中處理高濃度或大容量感染性材料時(shí)，以Ⅱ級(jí)生物安全柜應(yīng)用最多Ⅱ級(jí)生物安全柜劃分為A1、A2、B1、B2四個(gè)類型，每一類型的性能指標(biāo)不同小結(jié)Ⅱ級(jí)生物安全柜為臨床生物防護(hù)中應(yīng)用最普遍的30（三）實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)水平危險(xiǎn)度安全水平實(shí)驗(yàn)室類型實(shí)驗(yàn)操作安全設(shè)施4級(jí)BSL4最高防護(hù)（P4）實(shí)驗(yàn)室危險(xiǎn)病原體研究BSL3+氣鎖入口、出口淋浴+污染品特殊處理III級(jí)或II級(jí)生物安全柜+正壓服，雙開(kāi)門高壓滅菌鍋（穿過(guò)墻壁、墻體）、經(jīng)過(guò)濾空氣，人員安全監(jiān)控3級(jí)BSL3防護(hù)（P3）實(shí)驗(yàn)室專門特殊的診斷研究BSL2+特殊防護(hù)服+準(zhǔn)入制度+定向氣流生物安全柜：密閉消毒；通風(fēng)系統(tǒng)；密閉消毒；通風(fēng)系統(tǒng)；雙門入口；人員安全監(jiān)控。2級(jí)BSL2基礎(chǔ)（P2）實(shí)驗(yàn)室初級(jí)衛(wèi)生服務(wù)，診斷研究微生物操作規(guī)范（GMT）、防護(hù)服、生物危險(xiǎn)標(biāo)志開(kāi)放實(shí)驗(yàn)臺(tái)；生物安全柜；（BSC）[防護(hù)可能產(chǎn)生的氣溶膠]；現(xiàn)場(chǎng)高壓滅菌鍋；建議向內(nèi)氣流通風(fēng)系統(tǒng)（HEPA過(guò)濾排風(fēng)）。1級(jí)BSL1基礎(chǔ)（P1）實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)教學(xué)、研究GMT開(kāi)放實(shí)驗(yàn)臺(tái)；不需要安全設(shè)施。（三）實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)水平危險(xiǎn)度安全水平實(shí)驗(yàn)室類型實(shí)驗(yàn)操作31基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室：一級(jí)生物安全防護(hù)水平（BSL1）實(shí)驗(yàn)室實(shí)例：基礎(chǔ)教學(xué)實(shí)驗(yàn)室微生物實(shí)例：枯草桿菌、大腸埃希氏桿菌R12無(wú)須特殊選址，普通物即可，但應(yīng)有防止節(jié)肢動(dòng)物和嚙齒動(dòng)物入口的設(shè)計(jì)。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)有洗手池，宜設(shè)置靠近出口處在實(shí)驗(yàn)室門口處應(yīng)設(shè)掛衣裝置，個(gè)人便裝應(yīng)與實(shí)驗(yàn)室工作服分開(kāi)設(shè)置實(shí)驗(yàn)室墻壁、天花板和地面應(yīng)平整，易潔凈，不滲水，耐化學(xué)品和消毒水的腐蝕，地面應(yīng)防滑，不得鋪設(shè)地毯。實(shí)驗(yàn)臺(tái)面應(yīng)防水、基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室：一級(jí)生物安全防護(hù)水平（BSL1）32基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室：二級(jí)生物安全水平（BSL2）實(shí)驗(yàn)室實(shí)例：初級(jí)衛(wèi)生服務(wù)；診斷、研究、診斷和衛(wèi)生保健實(shí)驗(yàn)室（以公共衛(wèi)生、臨床或醫(yī)院為基礎(chǔ)的）必須設(shè)計(jì)成二級(jí)或以上生物安全水平。微生物實(shí)例：傷寒沙門氏菌、乙型肝炎病毒、結(jié)核分支桿菌、淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)叢腦膜炎病毒。開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室，有洗手池（靠近出口）在生物安全柜中進(jìn)行可能發(fā)生氣溶膠顆粒操作程序。配有高壓滅菌設(shè)備必要時(shí)配備個(gè)人防護(hù)的機(jī)械密閉設(shè)備。門可保持關(guān)閉，并貼上適當(dāng)?shù)奈ｋU(xiǎn)標(biāo)志。有可靠穩(wěn)定的應(yīng)急供電系統(tǒng)?；A(chǔ)實(shí)驗(yàn)室：二級(jí)生物安全水平（BSL2）33防護(hù)實(shí)驗(yàn)室：三級(jí)生物安全水平（BSL3）實(shí)驗(yàn)室實(shí)例：專門特殊診斷，研究實(shí)驗(yàn)室，密閉型。微生物實(shí)例：布魯氏菌屬、拉沙熱病毒、莢膜組織胞漿菌。選址：應(yīng)在建筑物中自成隔離區(qū)（如出入控制），或?yàn)楠?dú)立建筑物。在BSL2基礎(chǔ)上增加特殊防護(hù)服，準(zhǔn)入劑，定向氣流。配備II級(jí)或III級(jí)生物安全柜，形成向內(nèi)氣流而且涉及感染性材料的全部工作應(yīng)在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。生物安全柜旋轉(zhuǎn)在遠(yuǎn)離污染區(qū)入口和頻繁走動(dòng)的位置。應(yīng)有非手控水槽。實(shí)驗(yàn)室與公共通道分開(kāi)，并通過(guò)緩沖間（雙門入口或二級(jí)生物安全水平的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室）或氣鎖室進(jìn)入。處理廢棄物前，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)先行高壓滅菌，以清除污染。防護(hù)實(shí)驗(yàn)室：三級(jí)生物安全水平（BSL3）實(shí)驗(yàn)室實(shí)例：專門特殊34最高防護(hù)實(shí)驗(yàn)室：

四級(jí)生物安全水平（BSL4）危險(xiǎn)病原體單位，高度密閉型。病原體實(shí)例：埃波拉病毒、口蹄疫病毒、SARS病毒。選址：實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建造在獨(dú)立物內(nèi)或建筑物中獨(dú)立的完全隔離區(qū)域內(nèi)，該建筑物應(yīng)遠(yuǎn)離城區(qū)。配備II級(jí)或III級(jí)生物安全柜、正壓服形成向內(nèi)氣流而且涉及感染性材料的全部工作應(yīng)在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。處理廢棄物前，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)先行高壓滅菌以清除污染。應(yīng)有非手控的水槽。最高防護(hù)實(shí)驗(yàn)室：

四級(jí)生物安全水平（BSL4）危險(xiǎn)病原體單位35二、超凈工作臺(tái)

超凈工作臺(tái)與生物安全柜無(wú)論是在工作原理上還是在實(shí)際的用途方面都有本質(zhì)的區(qū)別，兩種設(shè)備工作時(shí)的氣流模式截然不同，超凈工作臺(tái)的氣流是由外部徑HEPA過(guò)濾后進(jìn)入操作區(qū)，通過(guò)操作區(qū)后由超凈工作臺(tái)前側(cè)開(kāi)口區(qū)流向操作者一側(cè)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。生物安全柜除了能保護(hù)實(shí)驗(yàn)材料免受污染外，還可以保護(hù)工作人員及環(huán)境；而超凈工作臺(tái)只能保護(hù)實(shí)驗(yàn)材料，不能保護(hù)人員及環(huán)境。超凈工作臺(tái)只適于無(wú)毒、無(wú)味、無(wú)刺激性揮發(fā)性氣體以及無(wú)感染的實(shí)驗(yàn)材料操作。如微生物倒培養(yǎng)基、分裝試劑等。二、超凈工作臺(tái)超凈工作臺(tái)與生物安全柜無(wú)論36三、通風(fēng)柜實(shí)驗(yàn)室特別在操作時(shí)往往會(huì)產(chǎn)生各種有害氣體、臭氣、濕氣以及易燃、易爆、腐蝕性物質(zhì)，為了防止污染物質(zhì)向?qū)嶒?yàn)室擴(kuò)散，保護(hù)工作人員安全在污染源附近要使用排風(fēng)設(shè)備。通風(fēng)柜可起到后備安全保障作用。三、通風(fēng)柜實(shí)驗(yàn)室特別在操作時(shí)往往會(huì)產(chǎn)生各37四、消毒設(shè)施及用品臨床實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)工作中常用的消毒方法有三種：化學(xué)消毒高壓消毒焚燒可根據(jù)具體情況選用不同的消毒方式四、消毒設(shè)施及用品臨床實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)工38（一）化學(xué)消毒許多化學(xué)品可以用作消毒劑，在使用與儲(chǔ)存時(shí)要特別注意：1、化學(xué)殺菌劑的有效期：許多化學(xué)品在高溫時(shí)其殺菌效果又快又好，但也要看到另一面好較高的溫度能加速其揮發(fā)和降解而失效。2、許多化學(xué)殺菌劑對(duì)人和環(huán)境有害：所以一定要嚴(yán)格按廠商的說(shuō)明小心進(jìn)行選擇、儲(chǔ)存、操作、使用和廢棄。操作時(shí)做好個(gè)人防護(hù)。3、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)提供消毒劑的配制方法，明確有效濃度、配制日期、配制嘗試及有效期，相關(guān)人員均應(yīng)掌握（采用操作卡）。4、配制、使用均應(yīng)有記錄。（一）化學(xué)消毒許多化學(xué)品可以用作消毒劑，在使用與儲(chǔ)39（二）高壓消毒1、高壓滅菌器的種類：（1）重力置換式（“下排氣式”）高壓滅菌器蒸汽在壓力作用下進(jìn)入滅菌器，由上而下轉(zhuǎn)換較重的空氣并通過(guò)滅菌器的排氣閥（裝有HEPA過(guò)濾器）排出。（2）預(yù)真空式高壓滅菌器蒸汽進(jìn)入前使空氣從滅菌器通過(guò)裝有HEPA過(guò)濾器的排氣閥排出。滅菌結(jié)束時(shí)，蒸汽自動(dòng)排出。其特點(diǎn)：①此高壓滅菌器可在134℃下進(jìn)行，滅菌周可縮短至3分鐘。②對(duì)于多孔性物品的滅菌很理想。③不能用于液體的滅菌（要抽真空）（二）高壓消毒1、高壓滅菌器的種類：40（3）燃料加熱壓力鍋式高壓滅菌器：把要消毒滅菌的物品裝載在頂部，通過(guò)燃?xì)狻㈦娏蚱渌剂蟻?lái)加熱。通過(guò)加熱窗口詢問(wèn)的水來(lái)產(chǎn)生蒸汽，由下而上轉(zhuǎn)換空氣并經(jīng)排氣孔排出。當(dāng)所有的空氣排出后，關(guān)閉排氣孔的閥門，緩慢加熱使壓力和溫度上升到安全閥預(yù)置的水平。此時(shí)記為開(kāi)始滅菌的時(shí)間。滅菌結(jié)束后停止加熱，讓溫度下降到80℃以下再打蓋子。（3）燃料加熱壓力鍋式高壓滅菌器：412、高壓滅菌器使用注意事項(xiàng)（1）人員素質(zhì)應(yīng)由受過(guò)培訓(xùn)的人員負(fù)責(zé)操作與日常維護(hù)。（2）預(yù)防性的維護(hù)：應(yīng)包括由有資歷人員定期檢查滅菌器柜腔、門的密封性以及所有的儀表和控制器。（3）應(yīng)使用飽和蒸汽，其中不含腐蝕性抑制劑或其他化學(xué)品。（4）滅菌柜腔裝載要松散，以便蒸汽可以均勻作用于被消毒物品，確保滅菌的效果。2、高壓滅菌器使用注意事項(xiàng)42（5）互鎖安全裝置一定要（因當(dāng)滅菌器內(nèi)部加壓時(shí)，其可防止門被打開(kāi)。），如果沒(méi)有，必須關(guān)閉主要蒸汽閥并待溫度降到80℃以下再打開(kāi)。（6）當(dāng)高壓滅菌液體時(shí)應(yīng)采用慢排式設(shè)置。（如插排氣針等）。（7）操作者在打開(kāi)高壓滅菌器門時(shí)，即使溫度下降到80℃以下仍然要戴手套和面罩來(lái)進(jìn)行防護(hù)。（8）滅菌效果的常規(guī)監(jiān)測(cè)，生物指示劑或熱電偶計(jì)應(yīng)置于每件高壓滅菌物品的中心?！白畲蟆毖b載時(shí)，最好用熱電偶計(jì)或記錄儀進(jìn)行定時(shí)監(jiān)測(cè)，以確定滅菌程序是否恰當(dāng)。（9）滅菌器的排水過(guò)濾器應(yīng)每天拆下清洗；應(yīng)保證安全閥不被堵塞。（10）高壓滅菌操作，效果的監(jiān)測(cè)應(yīng)及時(shí)觀察并記錄、妥善保存。（5）互鎖安全裝置一定要（因當(dāng)滅菌器內(nèi)部加壓時(shí)43（三）焚燒是醫(yī)療廢棄物消毒的終末環(huán)節(jié)。一般由其他部門完成。對(duì)于事先未經(jīng)清除污染的動(dòng)物尸體以及解剖組織或其他實(shí)驗(yàn)室廢棄物，焚燒是一種有效方法。理想的焚燒爐是：一級(jí)焚燒室的溫度至少達(dá)800℃，二級(jí)焚燒室溫度至少應(yīng)達(dá)到1000℃。應(yīng)提醒：焚燒爐的操作是否有效主要取決于對(duì)需要處理的廢棄物中物品的正確混合。（三）焚燒是醫(yī)療廢棄物消毒的終末環(huán)節(jié)。一44五、安全防護(hù)用具安全防護(hù)用具是避免操作人員暴露于氣溶膠、噴濺物以及意外接種等危險(xiǎn)的一個(gè)屏障?？筛鶕?jù)工作的性質(zhì)來(lái)選擇。（一）實(shí)驗(yàn)服實(shí)驗(yàn)服包括一般操作服即工作服、隔離衣、連體衣的防護(hù)效果較一般操作服好，因此更適用于在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室以及生物安全柜中的操作。需進(jìn)一步防護(hù)時(shí)應(yīng)在實(shí)驗(yàn)服或隔離衣外面穿上圍裙。注意這些防護(hù)服、裙不能穿離實(shí)驗(yàn)室區(qū)域。五、安全防護(hù)用具安全防護(hù)用具是避免操作45（二）護(hù)目鏡和面罩（三）手套1、一次性手術(shù)用手套（用于實(shí)驗(yàn)室一般操作和處理感染性物質(zhì)、血液、體液時(shí)）。2、替代加粉乳膠手套（用于可發(fā)生皮炎及速發(fā)型超敏反應(yīng)等變態(tài)反應(yīng)者）。3、不銹鋼網(wǎng)孔手套（在進(jìn)行尸體解剖等可能接觸尖銳器械情況時(shí)）。（二）護(hù)目鏡和面罩46（四）鞋

應(yīng)防滑，從事可能出現(xiàn)液體材料漏出的工作應(yīng)穿防水鞋。進(jìn)入特殊區(qū)域（需防靜電）或SBL3和SBL4實(shí)驗(yàn)室要求使用專用鞋。（一次性或橡膠鞋）（四）鞋47第三節(jié)安全操作規(guī)范一、安全管理制度1.首先明確安全管理的目標(biāo)。2、明確安全管理的范圍及內(nèi)容。3、制定標(biāo)準(zhǔn)操作程序。4、建立相應(yīng)的緊急預(yù)案。5、成立安全管理小組。6、配備必要的防護(hù)設(shè)備及用品。7、培訓(xùn)上崗。8、安全檢查與自查方式。9、總結(jié)、持續(xù)改進(jìn)、記錄完整，妥善保管。第三節(jié)