小鼠腦出血模型建立-【PPT課件】

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)——基于水迷宮實(shí)驗(yàn)解析與探究組長(zhǎng)：組員：什么是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)？動(dòng)物實(shí)驗(yàn)（animalexperiment），動(dòng)物實(shí)驗(yàn)指在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，為了獲得有關(guān)生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等方面的新知識(shí)或解決具體問(wèn)題而使用動(dòng)物進(jìn)行的科學(xué)研究。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)必須由經(jīng)過(guò)培訓(xùn)的、具備研究學(xué)位或?qū)I(yè)技術(shù)能力的人員進(jìn)行或在其指導(dǎo)下進(jìn)行。Morris水迷宮

Morris水迷宮（Morriswatermaze,MWM）實(shí)驗(yàn)是一種強(qiáng)迫實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（大鼠、小鼠）游泳，學(xué)習(xí)尋找隱藏在水中平臺(tái)的一種實(shí)驗(yàn)，主要用于測(cè)試實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)空間位置覺(jué)和方向覺(jué)（空間定位）的學(xué)習(xí)記憶能力。

一種小鼠、大鼠能夠?qū)W會(huì)在水箱內(nèi)游泳并找到藏在水下逃避平臺(tái)的實(shí)驗(yàn)方法。由于沒(méi)有任何可接近的線(xiàn)索以標(biāo)志平臺(tái)的位置，所以動(dòng)物的有效定位能力需應(yīng)用水箱外的結(jié)構(gòu)作為線(xiàn)索。迷宮由圓形水池、自動(dòng)攝像及分析系統(tǒng)兩部分組成，圖像自動(dòng)采集和處理系統(tǒng)主要由攝像機(jī)、計(jì)算機(jī)、圖像監(jiān)視器組成，動(dòng)物入水后啟動(dòng)監(jiān)測(cè)裝置，記錄動(dòng)物運(yùn)動(dòng)軌跡，試驗(yàn)完畢自動(dòng)分析報(bào)告相關(guān)參數(shù)。原理：實(shí)驗(yàn)程序包括1）定位航行實(shí)驗(yàn)用于測(cè)量小鼠對(duì)水迷宮學(xué)習(xí)和記憶的獲取能力。（2）空間搜索實(shí)驗(yàn)用于測(cè)量學(xué)會(huì)尋找平臺(tái)后，對(duì)平臺(tái)空間位置記憶的保持能力。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥途徑及取血方法

（一）經(jīng)口給藥一般當(dāng)灌胃針插入小鼠3～4cm，大鼠或豚鼠4～6cm后可將藥物注入。常用的灌胃量小鼠為0.2～1ml，大鼠1～4ml。（二）注射給藥1.皮下注射皮下注射給藥是將藥液推入皮下結(jié)締組織，經(jīng)毛細(xì)血管、淋巴管吸收進(jìn)入血液循環(huán)的過(guò)程。2.皮內(nèi)注射

是將藥液注入皮膚的表皮與真皮之間。3.肌肉注射

一般多選用臀部或股部肌肉發(fā)達(dá)、無(wú)大血管通過(guò)的部位，注射時(shí)將針頭迅速刺入肌肉，回抽無(wú)回血，即可進(jìn)行注射。小鼠腦出血模型的建立一．實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備1．針頭的處理將1號(hào)注射器（規(guī)格0.5*16）針頭由尖磨平，這樣方便在注射小鼠自身血液時(shí)不會(huì)傷及大腦而且平頭針管也方便實(shí)驗(yàn)操作。2．麻醉小鼠用2號(hào)注射器將麻醉劑注射到小鼠體內(nèi)，麻醉劑注射時(shí)應(yīng)選擇腹腔注射，將針管刺入小鼠腹部皮膚后感覺(jué)針管無(wú)阻礙感時(shí)方可推藥。注意量不可過(guò)多，否則會(huì)導(dǎo)致小鼠死亡。二．實(shí)驗(yàn)步驟

1．固定小鼠a．用繩子將已麻醉的小鼠俯臥（背朝上）固定在鼠板上，繩子用活結(jié)，這樣不易打滑。固定時(shí)要保持小鼠的兩只前腳和兩只后腳分別在一條直線(xiàn)上。b．用棉花將小鼠的頭微微墊高，這樣方便切開(kāi)皮膚。2．鉆孔a．將小鼠的頭部順著人字縫皮膚切開(kāi)大約3~5cm，露出小鼠的頭骨。b．找到小鼠的人字縫在其右邊1~2mm處做好鉆孔的標(biāo)記。c．用鉆孔器在記號(hào)處垂直鉆孔，深度不宜太大。d．止血。3．注射

a.將小鼠的尾部間斷一截，用手指將血液擠出，并用裝有抗凝血?jiǎng)┑纳睇}水溶液的1號(hào)注射器將血液收集，小鼠血液量大致為2ml。b．將鼠板置于定位儀下，利用定位儀將1號(hào)試管的針管對(duì)準(zhǔn)小鼠頭骨上的小孔。c．慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)定位儀的旋鈕，將針管插入小鼠顱腔內(nèi)，插入深度大約為1.5cm。d．推動(dòng)1號(hào)試管的活塞，將小鼠血液緩慢注射進(jìn)顱腔內(nèi)，推進(jìn)大約2格的量（2ml）。e.注射完成后，等待大約5分鐘后，旋動(dòng)定位儀的旋鈕將針管抽