《組織學(xué)技術(shù)》教學(xué)大綱

PAGEPAGE7《組織學(xué)技術(shù)》教學(xué)大綱適用專(zhuān)業(yè)：醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)專(zhuān)業(yè)等總學(xué)時(shí)：52理論學(xué)時(shí):4實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)：48一、課程的性質(zhì)和任務(wù)《組織學(xué)技術(shù)》是一門(mén)醫(yī)學(xué)專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)課程。醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)專(zhuān)業(yè)學(xué)生培養(yǎng)的重要環(huán)節(jié)是實(shí)驗(yàn)操作能力的訓(xùn)練。本課程主要講授常規(guī)組織學(xué)切片制備及染色技術(shù)、免疫組織化學(xué)技術(shù)、原位雜交技術(shù)、圖像分析技術(shù)等。教學(xué)的基本要求和目的注重實(shí)驗(yàn)操作能力的訓(xùn)練，從最基本的實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備開(kāi)始到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析，使學(xué)生學(xué)會(huì)使用形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)常用儀器、熟悉科研常用的技術(shù)方法，培養(yǎng)學(xué)生動(dòng)手能力、提高學(xué)生利用所學(xué)知識(shí)解決實(shí)驗(yàn)問(wèn)題的能力?！督M織學(xué)技術(shù)》實(shí)驗(yàn)課內(nèi)容為驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)。結(jié)合本科生的培養(yǎng)目標(biāo)，我們致力于加強(qiáng)教學(xué)過(guò)程管理，強(qiáng)化學(xué)生素質(zhì)教育，提高教學(xué)質(zhì)量，深化考核方式和方法的改革，調(diào)動(dòng)學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性，加強(qiáng)學(xué)生平時(shí)學(xué)習(xí)的主動(dòng)性，讓學(xué)生重視課程的全過(guò)程學(xué)習(xí)，減輕學(xué)生期末考試的壓力，降低學(xué)生學(xué)業(yè)負(fù)擔(dān)，提高學(xué)習(xí)效果。二、相關(guān)課程的銜接《組織學(xué)技術(shù)》包括組織學(xué)、病理解剖學(xué)、免疫組織化學(xué)、原位核酸分子雜交、圖像分析、組織芯片技術(shù)等，涉及組織學(xué)、病理學(xué)、檢驗(yàn)學(xué)、細(xì)胞學(xué)、生物學(xué)等多門(mén)學(xué)科的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，它們是重要的醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)課程，也是生命科學(xué)的基礎(chǔ)學(xué)科。組織學(xué)的研究極大地促進(jìn)了病理學(xué)的發(fā)展；生物化學(xué)的進(jìn)步也促進(jìn)了組織學(xué)的發(fā)展，例如，將生物化學(xué)與分子生物學(xué)的原理用于組織學(xué)而建立起組織化學(xué)及分子細(xì)胞學(xué)，將免疫學(xué)的原理用于組織學(xué)而建立起免疫組織化學(xué)等。從而使人們得知各種細(xì)胞與組織的化學(xué)組成、分子結(jié)構(gòu)及其基本生命現(xiàn)象。通過(guò)該課程的學(xué)習(xí)，使學(xué)生學(xué)會(huì)使用形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)常用儀器、熟悉科研常用的技術(shù)方法，培養(yǎng)學(xué)生動(dòng)手能力、提高學(xué)生利用所學(xué)知識(shí)解決實(shí)驗(yàn)問(wèn)題的能力，啟迪學(xué)生的科研思維，以適應(yīng)目前創(chuàng)新型人才的培養(yǎng)要求。三、教學(xué)的基本要求（一）基本理論知識(shí)和技能1.掌握組織學(xué)切片制作技術(shù)。2．掌握免疫組織化學(xué)常用技術(shù)。3．了解原位核酸分子雜交、圖像分析、組織芯片技術(shù)。（二）基本素質(zhì)1．態(tài)度培養(yǎng)學(xué)生熱愛(ài)黨、熱愛(ài)社會(huì)主義，立志獻(xiàn)身于醫(yī)學(xué)事業(yè)；樹(shù)立良好的職業(yè)道德，全心全新意為人民服務(wù)；培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)模瑢?shí)事求是的科學(xué)作風(fēng)。

2．能力在教學(xué)中對(duì)學(xué)生進(jìn)行綜合能力的培養(yǎng)，即形象思維能力、空間想象能力、自學(xué)能力、綜合分析能力和描述表達(dá)能力等。教師必須研究本大綱所規(guī)定的教學(xué)內(nèi)容，掌握好重點(diǎn)和難點(diǎn)。在教學(xué)過(guò)程中，要注意培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)肅的科學(xué)態(tài)度、嚴(yán)格的科學(xué)作風(fēng)和嚴(yán)密的科學(xué)方法；要培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立分析問(wèn)題與解決問(wèn)題的能力，提高學(xué)生科學(xué)思維能力；通過(guò)多媒體教學(xué)及實(shí)驗(yàn)技能操作，理論聯(lián)系實(shí)際，培養(yǎng)學(xué)生動(dòng)手能力。四、學(xué)時(shí)分配表1《組織學(xué)技術(shù)》（學(xué)時(shí)分配表）序號(hào)教學(xué)內(nèi)容學(xué)時(shí)備注理論實(shí)驗(yàn)1石蠟切片制作、組織染色技術(shù)22免疫組織化學(xué)、原位雜交23常規(guī)標(biāo)本制備8驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告4石蠟切片、HE染色及特殊染色8驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告5免疫組化實(shí)驗(yàn)8驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告6病理組織標(biāo)本取材及病理檔案管理8驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告7冰凍切片制作及染色技術(shù)8驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告8細(xì)胞病理學(xué)基本技術(shù)8驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告總計(jì)52五、成績(jī)考核（一）考核形式及分值權(quán)重《組織學(xué)技術(shù)》課程考核成績(jī)分為三個(gè)部分，包括：平時(shí)成績(jī)（20%）、實(shí)驗(yàn)報(bào)告（20%）、期末考試（60%）。表2組織學(xué)技術(shù)課程考核成績(jī)分值與權(quán)重項(xiàng)目考核類(lèi)型考核內(nèi)容分值權(quán)重1平時(shí)成績(jī)實(shí)驗(yàn)操作、出勤、紀(jì)律、衛(wèi)生等100分0.22實(shí)驗(yàn)報(bào)告撰寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告100分0.23期末考試?yán)碚摽荚嚭蛯?shí)驗(yàn)技能考試100分0.6總成績(jī)100分（二）考核內(nèi)容及要求1.平時(shí)成績(jī)（100分）：考核學(xué)生平時(shí)實(shí)驗(yàn)課實(shí)際操作情況、出勤、課堂紀(jì)律以及維護(hù)實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生等，每次課記錄在案，期末匯總，將各次成績(jī)?nèi)∑骄岛螅?.2權(quán)重計(jì)入總成績(jī)。表3《組織學(xué)技術(shù)》課程出勤、紀(jì)律及衛(wèi)生評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)成績(jī)組成評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范（20分）實(shí)驗(yàn)過(guò)程中由于未遵守操作規(guī)范，而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)儀器、設(shè)備損壞者，每次扣20分。不遵守實(shí)驗(yàn)室守則每次扣10分。此項(xiàng)所扣總分不超過(guò)20分課堂紀(jì)律（50分）不完成或不參與實(shí)驗(yàn)者，每次扣10分。每次遲到扣除當(dāng)次成績(jī)5分。學(xué)習(xí)態(tài)度不端正、不認(rèn)真聽(tīng)講、私下講話(huà)、課堂睡覺(jué)、使用手機(jī)等，每次扣10分。經(jīng)老師指出未加改正者，當(dāng)次實(shí)驗(yàn)課本項(xiàng)得分全部扣除。此項(xiàng)所扣總分不超過(guò)50分衛(wèi)生（30分）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后應(yīng)及時(shí)整理實(shí)驗(yàn)臺(tái)試劑、儀器等，清潔實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，未完成者每次小組成員各扣5分。每人打掃實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生1次，不認(rèn)真打掃者，扣10分；不打掃者，扣20分。此項(xiàng)所扣總分不超過(guò)30分。出勤課前班長(zhǎng)向主講教師報(bào)告出勤情況，包括：班級(jí)總?cè)藬?shù)、實(shí)際出勤人數(shù)、缺勤人數(shù)及理由，缺勤者上交年級(jí)辦出具的請(qǐng)假條。無(wú)故曠課扣除當(dāng)次本項(xiàng)成績(jī)?nèi)康梅郑瑹o(wú)故曠課3次即取消考試資格，計(jì)為不及格。2.實(shí)驗(yàn)報(bào)告（100分）：考核內(nèi)容為撰寫(xiě)6篇實(shí)驗(yàn)報(bào)告，考核學(xué)生撰寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告的能力。當(dāng)堂上交作業(yè)。每篇報(bào)告滿(mǎn)分100分，期末匯總，將各次成績(jī)?nèi)∑骄岛螅?.2權(quán)重計(jì)入總成績(jī)。（1）成績(jī)計(jì)算方法：∑（xi）實(shí)驗(yàn)報(bào)告部分的最終成績(jī)=6；xi——每篇實(shí)驗(yàn)報(bào)告的成績(jī)（2）實(shí)驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容:表4《組織學(xué)技術(shù)》實(shí)驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容序號(hào)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容1常規(guī)標(biāo)本制備1.標(biāo)本取材與固定2.標(biāo)本的處理：脫水、透明、浸蠟、包埋2石蠟切片、HE染色及特殊染色石蠟切片HE染色尼氏染色或PAS染色及試劑配制3免疫組化實(shí)驗(yàn)免疫組織化學(xué)染色4病理組織標(biāo)本取材及病理檔案管理病理組織標(biāo)本取材及檔案管理標(biāo)準(zhǔn)5冰凍切片制作及染色技術(shù)冰凍切片制作及染色技術(shù)6細(xì)胞病理學(xué)基本技術(shù)細(xì)胞標(biāo)本制作及染色（3）實(shí)驗(yàn)報(bào)告評(píng)分標(biāo)準(zhǔn):實(shí)驗(yàn)報(bào)告每次卷面按100分計(jì)算，按權(quán)重折合后累加獲得本課程最后總成績(jī)。實(shí)驗(yàn)報(bào)告討論部分要求獨(dú)立完成，如有雷同或抄襲，則無(wú)論抄襲者或被抄襲者均直接扣除當(dāng)次成績(jī)30分。表5《組織學(xué)技術(shù)》實(shí)驗(yàn)報(bào)告評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)賦分實(shí)驗(yàn)題目10分實(shí)驗(yàn)?zāi)康?0分實(shí)驗(yàn)儀器及耗材20分實(shí)驗(yàn)步驟40分實(shí)驗(yàn)結(jié)果10分實(shí)驗(yàn)討論10分未完成報(bào)告0分3.期末實(shí)驗(yàn)考試（100分）：按0.6權(quán)重計(jì)入總成績(jī)。（1）理論考試（占50%）：閉卷、統(tǒng)一考試。總計(jì)12道題，卷面按100分記錄?？荚嚂r(shí)間：理論課結(jié)課后?？己藘?nèi)容：組織學(xué)技術(shù)所涉及的理論教學(xué)內(nèi)容。題型①名詞解釋20分：5道題，每題4分。②簡(jiǎn)答題60分：6道題，每題10分。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題20分：1道題，每題20分。（2）實(shí)驗(yàn)技能考試（占50%）：考試時(shí)間：隨堂考核內(nèi)容：對(duì)標(biāo)本制備及染色結(jié)果進(jìn)行評(píng)定表6標(biāo)本制備及染色評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)得分評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)優(yōu)秀（86-100分）（1）切片完整，厚度4-6微米，厚薄均勻，無(wú)皺褶無(wú)刀痕；（2）染色核漿分明，紅藍(lán)適度，透明潔凈，封裱美觀。合格（60-85分）（1）切片較完整，厚度4-6微米，厚薄較均勻，皺褶少或有少許刀痕；（2）染色核漿較分明，紅藍(lán)適度，透明潔凈，封裱較美觀。不及格（60分以下）（1）切片不完整，厚度不均勻，皺褶多或有許多刀痕；（2）染色核漿對(duì)比不清果分明，封裱片時(shí)有氣泡或有大量樹(shù)膠溢。注：評(píng)價(jià)時(shí)按100分計(jì)算，然后按權(quán)重折算。六、《組織學(xué)技術(shù)》主講教師職責(zé)顯微形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)平臺(tái)負(fù)責(zé)《組織學(xué)技術(shù)》課程考核方案的制定、考核過(guò)程的監(jiān)督，協(xié)同平臺(tái)主講教師對(duì)學(xué)生的進(jìn)行考核方案的實(shí)施，組織協(xié)助主講教師對(duì)學(xué)生實(shí)驗(yàn)課情況進(jìn)行評(píng)估考核，對(duì)學(xué)生實(shí)驗(yàn)課考核資料（實(shí)驗(yàn)報(bào)告等）進(jìn)行歸類(lèi)存檔等。主講教師在形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的考核中，主要負(fù)責(zé)該課程考核方案的實(shí)施，考核結(jié)果的匯總與記錄等。（一）依據(jù)教學(xué)大綱安排授課內(nèi)容及進(jìn)度。（二）第一次課對(duì)學(xué)生公布課程考核方案，使全體學(xué)生知情課程考核相關(guān)要求、考核時(shí)間、考核方式、考核內(nèi)容、評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)。（三）平臺(tái)要依據(jù)教學(xué)大綱要求及講授內(nèi)容，制定考核實(shí)施辦法及步驟。協(xié)助主講教師根據(jù)考核計(jì)劃安排對(duì)學(xué)生進(jìn)行考核。（四）按權(quán)重將各部分考核成績(jī)匯總，計(jì)算出課程最后總成績(jī)。（五）每學(xué)期末，教研室要組織本課程所有任課教師，對(duì)考核改革方案的科學(xué)性、執(zhí)行情況和教學(xué)效果進(jìn)行系統(tǒng)評(píng)價(jià)，并形成評(píng)價(jià)分析報(bào)告和整改意見(jiàn)上報(bào)學(xué)院教務(wù)處。七、實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)用書(shū)1.教科書(shū)蔡勇,阿依木古麗·阿不都熱依木主編，《現(xiàn)代組織學(xué)技術(shù)》，科學(xué)出版社,2018.62.參考書(shū)[1]趙熒，唐軍民主編，《組織學(xué)技術(shù)》，北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社,2008.8[2]杜卓民主編，《實(shí)用組織學(xué)技術(shù)》，北京：人民衛(wèi)生出版社,1992.8[3]高英茂主編，《醫(yī)學(xué)形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)》，北京：科學(xué)出版社,2007[4]李玉林主編，《病理學(xué)》第八版，北京：人民衛(wèi)生出版社,2013[5]CortanRS,KumarV,CollinsT.RobbinsPathologicBasisofDisease.9thed.Philadelphia:WBSaunders，2012八、課程內(nèi)容（一）理論一石蠟切片制作、組織染色技術(shù)【目的與要求】1.了解組織樣本的采集2.熟悉標(biāo)本的固定技術(shù)3.掌握石蠟切片制作技術(shù)及HE染色技術(shù)【內(nèi)容提要】1.前言2.組織樣本制備技術(shù)（1）組織樣本采集①實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死方法②實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的解剖③取樣方法及注意事項(xiàng)（2）標(biāo)本的固定①固定的目的②固定的對(duì)象③常用固定劑④組織固定方法⑤固定時(shí)應(yīng)注意的事項(xiàng)⑥組織固定后的洗滌3.石蠟切片制作技術(shù)（1）組織固定后的處理①組織塊修整②洗滌③脫水④透明⑤浸蠟與包埋（2）石蠟切片①石蠟切片前的準(zhǔn)備②切片方法③切片中容易出現(xiàn)的問(wèn)題、原因及解決方法4.組織染色技術(shù)（1）染色的原理①染色的發(fā)展②染料③染色的原理（2）染色方法①整體染色法②組織塊染色法③切片染色法④活體染色法（3）HE染色法①HE染色的基本原理②HE染色的基本方法③二甲苯在HE染色中的作用④乙醇在HE染色中的作用⑤水洗的作用⑥分化和藍(lán)化⑦切片制作中出現(xiàn)的問(wèn)題、原因及解決方法【重點(diǎn)掌握的內(nèi)容】名詞解釋固定容積率親銀性反應(yīng)嗜銀性反應(yīng)媒染劑促染劑漸進(jìn)性染色退行性染色分化作用藍(lán)化作用2.取材注意事項(xiàng)有哪些？3.固定、脫水、透明、包埋、烤片、染色、封固的目的是什么？4.微波固定的關(guān)鍵點(diǎn)和原則是什么？5.石蠟切片展片標(biāo)準(zhǔn)是什么？6.HE染色中二甲苯、乙醇、水洗的作用是什么？（二）理論二免疫組織化學(xué)技術(shù)、原位雜交【目的與要求】1.掌握免疫組織化學(xué)相關(guān)的基本類(lèi)型、原理、基本過(guò)程。2.了解原位雜交的基本步驟與原理?！緝?nèi)容提要】1.免疫組織化學(xué)技術(shù)（1）基本原理、分類(lèi)①基本原理②分類(lèi)（2）IHC標(biāo)本制備①取樣②固定③脫水、浸蠟及包埋④切片⑤烤片⑥標(biāo)本防脫落技術(shù)⑦對(duì)照試驗(yàn)⑧抗原修復(fù)⑨結(jié)果判斷（3）免疫熒光組織化學(xué)技術(shù)①直接法②間接法③補(bǔ)體法④雙重標(biāo)記法⑤非特異性染色的產(chǎn)生及消除方法（4）免疫酶組織化學(xué)技術(shù)①酶標(biāo)抗體法②非標(biāo)記抗體酶法③免疫酶雙標(biāo)記法（5）親合組織化學(xué)技術(shù)①基本原理②基本方法③操作步驟（6）免疫金組織化學(xué)技術(shù)①免疫膠體金技術(shù)②蛋白A膠體金技術(shù)③免疫金銀染色（7）免疫組織化學(xué)增敏方法①多聚螯合物酶法②催化信號(hào)放大法（8）免疫組織化學(xué)結(jié)果判定及注意事項(xiàng)①結(jié)果判斷原則②非特異性染色③常見(jiàn)問(wèn)題與處理方法2.原位雜交組織化學(xué)技術(shù)（1）原位雜交組織化學(xué)的基本原理①核酸的分子結(jié)構(gòu)②核酸的理化性質(zhì)③核酸分子雜交的基本原理④核酸探針的種類(lèi)⑤核酸分子雜交的類(lèi)型（2）原位雜交組織化學(xué)技術(shù)的基本方法①雜交前準(zhǔn)備②雜交③雜交后處理④檢測(cè)⑤、對(duì)照試驗(yàn)【重點(diǎn)掌握的內(nèi)容】1.名詞解釋單克隆抗體多克隆抗體Envision復(fù)合物PAP復(fù)合物ABC復(fù)合物空白對(duì)照血清替代對(duì)照吸收試驗(yàn)對(duì)照原位雜交雜交嚴(yán)格度2.簡(jiǎn)述單克隆抗體與多克隆抗體的比較？3.酶橋法、Envision法、SP法、ABC法的原理？4.抗原修復(fù)的目的是什么?5.免疫組織化學(xué)陽(yáng)性細(xì)胞的特征有哪些？6.陰性對(duì)照有哪些？如何設(shè)置？7.如何辨別特異性染色和非特異性染色？8.雜交后處理的目的是什么？（三）實(shí)驗(yàn)一標(biāo)本制備【目的與要求】1.掌握標(biāo)本的取材與固定方法。2.掌握標(biāo)本的處理方法。【內(nèi)容提要】1.實(shí)驗(yàn)用具2.實(shí)驗(yàn)試劑3.實(shí)驗(yàn)內(nèi)容4.實(shí)驗(yàn)操作（1）配制藥品（2）小鼠斷髓操作（3）小腸、肝、腎標(biāo)本的取材（4）標(biāo)本的固定（5）標(biāo)本固定后的再修整（6）脫水過(guò)程（7）浸蠟與包埋【重點(diǎn)掌握的內(nèi)容】1.福爾馬林的配制方法2.小腸、肝、腎取材的注意事項(xiàng)（四）實(shí)驗(yàn)二與石蠟切片、HE染色及特殊染色【目的與要求】1.掌握石蠟切片的要領(lǐng)及注意事項(xiàng)。2.掌握HE染色方法3.掌握尼氏體或PAS染色方法【內(nèi)容提要】1.實(shí)驗(yàn)用具2.實(shí)驗(yàn)試劑3.實(shí)驗(yàn)內(nèi)容4.實(shí)驗(yàn)操作（1）切片修切蠟塊石蠟切片操作展片操作烤片（2）HE染色（3）尼氏體染色或PAS染色（4）切片封固（5）結(jié)果觀察【重點(diǎn)掌握的內(nèi)容】1.石蠟切片的操作方法2.HE染色的步驟及注意事項(xiàng)3.尼氏體染色或PAS染色的步驟及注意事項(xiàng)（五)實(shí)驗(yàn)三免疫組化實(shí)驗(yàn)【目的與要求】1.掌握免疫組化染色的原理及步驟。【內(nèi)容提要】1.實(shí)驗(yàn)用具2.實(shí)驗(yàn)試劑3.實(shí)驗(yàn)材料4.實(shí)驗(yàn)內(nèi)容5.實(shí)驗(yàn)操作（1）石蠟切片脫蠟至水（2）抗原修復(fù)：（3）3%過(guò)氧化氫處理：（4）PBS洗滌（5）滴加一抗（6）P