臨床分子生物學(xué)檢驗(yàn)復(fù)習(xí)提綱醫(yī)學(xué)心理學(xué)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)

、RNA的污染。（4）、RNA的污染。（4）2.0是高質(zhì)量的RNA的標(biāo)志，但由于R病毒只含一種核酸（RNA或DNA），可為雙鏈或單鏈、環(huán)狀或線過(guò)低，退火時(shí)間過(guò)長(zhǎng)等，都容易產(chǎn)生二聚體39.根據(jù)堿基互補(bǔ)原則用水溶液，精確測(cè)定RNA的純度應(yīng)使用Tris10mmol/L臨床分子生物學(xué)檢驗(yàn)脫氧核苷酸，核糖核酸H2A、H2B、H3、H4：核心顆粒，形成核小體。H1：連接線上，鎖定核小體、參與包裝5.PCR體系中抑制Taq酶活性的物質(zhì)有哪些？過(guò)量加入什么會(huì)減少M(fèi)g2+濃度導(dǎo)致Taq酶游離的Mg2+濃度；dNTP、引物和模板DNA等中的磷酸基團(tuán)，螯合劑如EDTA均可與鎂離子結(jié)合減少M(fèi)g2+濃度。6.PCR擴(kuò)增時(shí)，鏈的延伸從什么地方開(kāi)始？對(duì)于引物是哪一端？模板鏈呢？7.在波長(zhǎng)260nm的紫外線下，A值=1時(shí)雙鏈DNA的濃度大約相當(dāng)于？50ug/ml的雙鏈DNA。（40ug/ml的單鏈DNA或單鏈RNA，33ug/ml的單鏈寡聚核苷酸）（紫外分光光度法，核酸濃度的鑒定）雙鏈DNA＝50×A260樣本×稀釋倍數(shù)單鏈DNA／RNA＝40×A260樣本×單鏈寡聚核苷酸DNA＝33×A260樣本能編碼有功能的蛋白質(zhì)多肽鏈或合成RNA所必需的全部核酸序列，是核酸分子的功能單位。是遺傳的結(jié)構(gòu)和功能單位。一個(gè)基因大都包括編碼蛋白質(zhì)多肽鏈或RNA的編碼序列，保證轉(zhuǎn)錄和加工所必須的調(diào)控序基因突變中的點(diǎn)突變有很高的耐熱穩(wěn)定性酶量增加使反應(yīng)特異性下降，酶量過(guò)少影響反應(yīng)產(chǎn)量；錯(cuò)配；增的片段越長(zhǎng)，錯(cuò)配的機(jī)率越高。11.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中非特異性熒光染色技術(shù)？SYBRGreenI12.人類基因組DNA多態(tài)性的形式？水，從而溶解一定的核酸。用Tris-HCl緩沖液飽和酚并調(diào)節(jié).0【注意事項(xiàng)：（水，從而溶解一定的核酸。用Tris-HCl緩沖液飽和酚并調(diào)節(jié).0【注意事項(xiàng)：（1）蛋白質(zhì)與酚的污染均可使比值下降，可通過(guò)計(jì)算DNA中ATGC各種的含量？40.和人類線粒體基因組有關(guān)死亡④抑制蛋白酶活性或改變DNA甲基化酶活性⑤調(diào)節(jié)血管形成⑥16sRNA14.真核生物染色體的DNA三級(jí)結(jié)構(gòu)不是閉環(huán)雙鏈超螺旋結(jié)構(gòu)的是？原核生物細(xì)胞中只有1種RNA聚合酶，可參與合成mRNA、tRNA和rRNA。RNA聚合酶催化聚合反應(yīng)時(shí)需要Mg2+或Mn2+。該酶無(wú)校正功能。16.PCR反應(yīng)的特異性取決于？在某些理化因素作用下，DNA雙鏈解開(kāi)成兩條單鏈的過(guò)程。增色效應(yīng)粘度下降浮力密度升高酸堿滴定曲線改變生物活性喪失（1）DNA聚合酶成松馳狀態(tài)，便于解鏈。(3）DNA解鏈酶（4）單鏈結(jié)合蛋白(SSB)：結(jié)合在解開(kāi)的DNA單鏈上，防止重新形成雙螺旋。(5）引物酶和引發(fā)體：?jiǎn)?dòng)RNA引物鏈的合成。(6）DNA連接酶視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤基因（Rb基因）20.1978年簡(jiǎn)悅威采用Southen分子雜交技術(shù)檢測(cè)出了什么疾病？鐮狀細(xì)胞貧血癥21.核酸的分離和純化中，沉淀DNA的常用試劑是？乙醇、異丙醇、聚乙二醇醋酸鈉、醋酸鉀、醋酸銨、氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂等。22.通過(guò)紫外分光光度法可對(duì)核酸純度進(jìn)行鑒定，怎么鑒定？反過(guò)來(lái)是否成立？否通過(guò)A260與A280的比值來(lái)判斷有無(wú)蛋白質(zhì)的污染。在TE緩沖液中：純DNA的A260／A280比值為1.8；純RNA的A260／A280比值為2.0【注意事項(xiàng)：（1）蛋白質(zhì)與酚的污染均可使比值下降，可通過(guò)蛋白質(zhì)在280nm的高吸收峰與酚在270nm的高吸收峰來(lái)鑒別。（2）RNA污染可致DNA樣品的比值高于1.8。（3）比值為1.8的DNA溶液不一定是純DNA溶液，可能兼有蛋白質(zhì)、酚、RNA的污染。ug/ul）8.關(guān)于基因的定義正確的是？能編碼有功能的蛋白質(zhì),ug/ul）8.關(guān)于基因的定義正確的是？能編碼有功能的蛋白質(zhì),哪些是有效條帶？38.哪些是非特異擴(kuò)增？哪些是引物二聚體？過(guò)低，退火時(shí)間過(guò)長(zhǎng)等，都容易產(chǎn)生二聚體39.根據(jù)堿基互補(bǔ)原則酚的pH。異戊醇的使用：在苯酚/氯仿抽提過(guò)程中加入異戊醇，使.（5）RNA溶液的pH值會(huì)影響A260／A280的讀數(shù)，在水溶液中A260／A280的比值比在測(cè)定RNA的純度應(yīng)使用Tris10mmol/L（pH7.5）溶液?！慷嘀豍CR技術(shù)PCR-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（PCR-RFLP）等位基因特異性寡核苷酸（ASO）DNA芯片技術(shù)（DNAchip）變性梯度凝膠電泳（DGGE）DNA序列分析（DNAsequencing）24.限制性內(nèi)切酶的（通常指Ⅱ類）特點(diǎn)是？（Ⅱ類限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別序列特點(diǎn)）回文結(jié)構(gòu)GGTACCCCTAGG切口：平端切口--平末端粘端切口--粘性末端來(lái)源不同的限制酶，能識(shí)別和切割同一位點(diǎn)。有些限制性內(nèi)切酶雖然識(shí)別序列不完全相同，但切割DNA后產(chǎn)生相同的粘性末端】例如:淀粉液化芽胞桿菌25以mRNA為模板合成cDNA的酶是（RT—PCR內(nèi)容逆轉(zhuǎn)錄酶26.Sanger法DNA測(cè)序時(shí)ddNTP（雙脫氧核苷酸，少一個(gè)羥基）的作用是？ddNTPs是反應(yīng)終止劑，可以當(dāng)作正常堿基參與復(fù)制，一旦鏈入DNA中，其后就不能再繼①待測(cè)核酸樣品的制備②瓊脂糖凝膠電泳分離待測(cè)DNA樣品③電泳凝膠預(yù)處理④轉(zhuǎn)膜⑤核酸分子雜交技術(shù)乙醇、EDTA、SDS、酚、氯仿和Mg2+等某些高濃度金屬離子,均會(huì)降低限制酶的催化活性,甚至使限制酶不起作用..乙肝病毒（病毒）基因組特點(diǎn)？①分子較小，基因數(shù)少；②雙鏈D度凝膠電泳.乙肝病毒（病毒）基因組特點(diǎn)？①分子較小，基因數(shù)少；②雙鏈D度凝膠電泳)融點(diǎn)曲線分析PCR-序列分析55.探擴(kuò)增時(shí)，鏈的延伸從什么地方開(kāi)始？對(duì)于引物是哪一端？模板鏈呢？、氯化鉀、氯化鎂等。22.通過(guò)紫外分光光度法可對(duì)核酸純度進(jìn)行.DNA較小；基因數(shù)目較少；通常為一條環(huán)狀雙鏈DNA（dsDNA只有一個(gè)DNA復(fù)制起始點(diǎn)；GC含量差異很大；基因組DNA位于細(xì)胞中央的核區(qū)，無(wú)核膜，形成類核結(jié)構(gòu)；結(jié)構(gòu)基因中無(wú)內(nèi)含子；多數(shù)為單拷貝基因，編碼rRNA、tRNA的基因?yàn)槎嗫截?；具有編碼同②雙鏈DNA病毒（逆轉(zhuǎn)錄：是一類特殊類型的單鏈正鏈RNA病毒，含有RNA指導(dǎo)的DNA聚合酶，能使RNA反轉(zhuǎn)錄生成DNA。）【每種病毒只含一種核酸（RNA或DNA可為雙鏈或單鏈、環(huán)狀或線性】組中編碼序列占90%以上；⑦含有不規(guī)則結(jié)構(gòu)基因。33.細(xì)胞內(nèi)壽命最短的RNA是？mRNA34.細(xì)胞內(nèi)含量最多的RNA是？rRNA35.細(xì)胞內(nèi)具有調(diào)控功能的RNA是？miRNA①DNA模板濃度過(guò)高引物濃度過(guò)高，形成引物二聚體TaqDNA聚合酶酶量過(guò)多dNTP濃度過(guò)高M(jìn)g2+濃度過(guò)高退火溫度過(guò)低延伸時(shí)間過(guò)長(zhǎng)C+G堿基含量在引物中比例過(guò)高②【引物二聚體是在PCR反應(yīng)中，兩條引物上的互補(bǔ)堿基相結(jié)合形成的聚合體，這種聚合體出現(xiàn)了，就相當(dāng)于原本可以擴(kuò)增的原料鏈減少了，即會(huì)導(dǎo)致擴(kuò)增的效率降低?！科浯芜€可能是PCR體系與反應(yīng)條件的問(wèn)題，如果PCR體系中引物、鎂離子以與酶濃度過(guò)高，模板量過(guò)低，退火時(shí)間過(guò)長(zhǎng)等，都容易產(chǎn)生二聚體39.根據(jù)堿基互補(bǔ)原則計(jì)算DNA中ATGC各種的含量？40.和人類線粒體基因組有關(guān)的疾病有哪些？（了解）耳聾，糖尿病41.RNA鏈的合成方向？5’→3’：增色效應(yīng)比旋度下降粘度下降浮力密度升高酸堿滴定曲線改變生物常用于菌種鑒定的分子標(biāo)志物是？16sRNA14.真核生物染色：增色效應(yīng)比旋度下降粘度下降浮力密度升高酸堿滴定曲線改變生物常用于菌種鑒定的分子標(biāo)志物是？16sRNA14.真核生物染色鏈寡聚核苷酸DNA＝33×A260樣本×稀釋倍數(shù)／1000（、EDTA、SDS、酚、氯仿和Mg2+等某些高濃度金屬離子,.類基因發(fā)生突變、缺失或失活時(shí)，可引起細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。）①誘導(dǎo)終末分化②維持基因穩(wěn)定③觸發(fā)衰老，誘導(dǎo)細(xì)胞程序性死亡④抑制蛋白酶活性或改變DNA甲基化酶活性⑤調(diào)節(jié)血管形成⑥促進(jìn)細(xì)胞間聯(lián)系44.原核生物DNA聚合酶Ⅰ具有的酶活性有？主要用于修復(fù)DNA5’→3’聚合酶活性與延伸能力3’→5’外切酶活性與校對(duì)功能（保真性）45.編碼血紅蛋白β鏈第六位谷氨酸的密碼由GAG突變?yōu)镚TG所引起的血紅蛋白病為?鐮刀狀紅細(xì)胞貧血46.PCR反應(yīng)中的污染最主要的來(lái)自于？染、實(shí)驗(yàn)人員的污染等?！疚廴臼菍?dǎo)致PCR假陽(yáng)性的主要原因?！亢颂求w循環(huán)①核酸的釋放②核酸的純化③核酸的濃縮和沉淀④核酸的鑒定與貯存快速、靈敏、特異等優(yōu)點(diǎn)50.原核生物DNA聚合酶具有的酶活性有？5’→3’聚合酶活性與延伸能力3’→5’外切酶活性與校對(duì)功能（保真性）①Tm值取決于核酸分子的G-C含量②溫度；溶液PH值；變性劑（如尿素、酰胺以與某些有機(jī)溶劑如乙醇、丙酮等）遺傳標(biāo)志所帶的信息有限新突變基因重組家系成員不夠完整過(guò)低，退火時(shí)間過(guò)長(zhǎng)等，都容易產(chǎn)生二聚體39.根據(jù)堿基互補(bǔ)原則。過(guò)低，退火時(shí)間過(guò)長(zhǎng)等，都容易產(chǎn)生二聚體39.根據(jù)堿基互補(bǔ)原則。(6）DNA連接酶19.第一個(gè)分離到的抑癌基因是？視網(wǎng)膜母紅蛋白病為?鐮刀狀紅細(xì)胞貧血46.PCR反應(yīng)中的污染最主要的、RNA的污染。（4）2.0是高質(zhì)量的RNA的標(biāo)志，但由于R.53.在基因組DNA的提取過(guò)程中為了保護(hù)DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)的完整性而應(yīng)該采取的措施有？（1）使用還原酚：氧化酚可使DNA斷