食品安全快速檢測方法及質(zhì)量控制（食品安全監(jiān)督管理課件）

食品安全快速檢測方法及質(zhì)量控制CONTENTS目錄01快速檢測方法選擇02常用快檢方法操作要點03快檢產(chǎn)品的選擇1快速檢測技術(shù)方法選擇第一百一十二條縣級以上人民政府食品藥品監(jiān)督管理部門在食品安全監(jiān)督管理工作中可以采用國家規(guī)定的快速檢測方法對食品進行抽查檢測。KJ201710蔬菜中敵百蟲、丙溴磷、滅多威、克百威、敵敵畏殘留的快速檢測NY/T448-2001蔬菜上有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘毒快速檢測方法GB/T

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蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測國家規(guī)定的快檢方法有哪些？國家標準GB/T農(nóng)業(yè)標準NY/T進出口行業(yè)標準SN/T市場監(jiān)管總局批準發(fā)布的標準KJ動物源性食品中喹諾酮類物質(zhì)的快速檢測；動物源性食品中克倫特羅、萊克多巴胺及沙丁胺醇的快速檢測；水產(chǎn)品中氯霉素的快速檢測；水產(chǎn)品中硝基呋喃類代謝物的快速檢測；保健食品中巴比妥類化學成分的快速檢測；保健食品中羅格列酮和格列苯脲的快速檢測；保健食品中西地那非和他達拉非的快速檢測快速檢測方法分類膠體金檢測卡法（17個）：食品中嘔吐毒素的快速檢測；食品中玉米赤霉烯酮快速檢測；液體乳中黃曲霉毒素M1的快速檢測；食用油中黃曲霉毒素B1的快速檢測；食用油中苯并（a）芘的快速檢測；液體乳中三聚氰胺的快速檢測；水產(chǎn)品中孔雀石綠的快速檢測；辣椒制品中蘇丹紅I的快速檢測；食品中羅丹明B的快速檢測；食品中嗎啡、可待因的快速檢測；食用油、肉制品、水產(chǎn)品、保健食品…真菌毒素、非法添加物、獸藥殘留…膠體金檢測卡法：目標物與膠體金標記的特異性抗體結(jié)合，抑制抗體和檢測卡中檢測線（T線）上抗原的結(jié)合，從而導(dǎo)致檢測線顏色深淺的變化，通過檢測線與控制線（C線）顏色深淺比較，對目標物進行定性判定?？焖贆z測方法分類比色管比色法：食品中硼酸的快速檢測姜黃素比色法；食品中亞硝酸鹽的快速檢測鹽酸萘乙二胺法；水發(fā)產(chǎn)品中甲醛的快速檢測；白酒中甲醇的快速檢測與試劑反應(yīng)后觀察比色管顏色來定性，或根據(jù)顏色深淺來半定量，比色定量可以是目視，也可以用便攜式光度計?？焖贆z測方法分類試紙法：KJ201911食用植物油酸價、過氧化值的快速檢測；KJ201710蔬菜中敵百蟲、丙溴磷、滅多威、克百威、敵敵畏殘留的快速檢測用試紙直接顯色來定性，或根據(jù)顯色深淺來半定量。2常用快速檢測技術(shù)操作要點一、農(nóng)藥殘留快速檢測方法★農(nóng)業(yè)標準NY/448-2001

蔬菜上有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘毒快速檢測方法★國家標準GB/T

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蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測★KJ201710蔬菜中敵百蟲、丙溴磷、滅多威、克百威、敵敵畏殘留的快速檢測

酶抑制率法（分光光度法）檢測卡法在一定條件下，有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常情況下，酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物（乙酰膽堿）水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計在412nm處測定吸光度隨時間的變化值，計算出抑制率。有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶（白色藥片）有抑制作用，抑制膽堿酯酶催化靛酚乙酸酯（紅色藥片）水解為乙酸與靛酚（藍色），從而導(dǎo)致速測卡顏色深淺的變化。通過空白顏色比較，對樣品中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥進行定性判定。操作控制要點1、制樣整株提取法整體提取法選取韭菜、芹菜有代表性的樣品，擦去表面泥土，稱取試樣3g（精確至0.1g）置于表面皿中，加入10mL緩沖液，殘缺面不得接觸緩沖液，輕輕振搖50次，靜置2min以上，取上清液備用。選取油菜、菠菜有代表性的樣品，擦去表面泥土，剪成1cm左右見方碎片，稱取3g（精確至0.1g）放入小離心管中，加入10mL緩沖溶液，振搖50次，靜置2min以上，取上清液備用。錯誤做法不能保證取樣的代表性注意事項：1.蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有對酶有影響的植物次生物質(zhì)，容易產(chǎn)生假陽性。處理這類樣品時，采取整株蔬菜浸提。2.對一些含葉綠素較高的蔬菜，也可采取整株蔬菜浸提的方法，減少色素的干擾?；蛘呓ㄗh可以采取減半取樣量的方法進行試驗，降低干擾。操作控制要點2、質(zhì)控試驗監(jiān)控檢測過程，保證檢測結(jié)果的可信性和準確性。為什么要做質(zhì)控？空白試驗加標質(zhì)控試驗檢驗試驗過程是否被污染，所用試劑是否有目標物，扣除基體干擾。監(jiān)控試驗過程操作是否有異常，有利于及時發(fā)現(xiàn)問題。操作控制要點2、質(zhì)控試驗空白試驗加標質(zhì)控試驗每次測定都需有一個緩沖溶液的空白對照，空白試驗測定結(jié)果應(yīng)為陰性。稱取5份空白試樣各3g（精確至0.1g），按照蔬菜種類選用相應(yīng)的提取方法，分別加入檢出限水平的有機磷和氨基甲酸酯類標準中間液，加標質(zhì)控試驗測定結(jié)果應(yīng)均為陽性。例如：敵百蟲檢測限是0.1mg/kg，根據(jù)樣品量為3g，那么敵百蟲加標質(zhì)控樣需要添加0.3μg的敵百蟲，根據(jù)標準中間液的濃度為1μg/mL，需要加入0.3mL的敵百蟲標準中間液。想一想：丙溴磷檢測限是0.5mg/kg，加標質(zhì)控樣應(yīng)加入多少丙溴磷標準液？操作控制要點2、質(zhì)控試驗農(nóng)藥名稱敵百蟲丙溴磷滅多威克百威敵敵畏檢測限(mg/kg)0.10.50.20.020.2標準中間液濃度（μg/mL）11111加標量（mL）0.31.50.60.060.6樣品放置時間應(yīng)與空白對照放置時間一致才有可比性。待測樣品加入底物之后，應(yīng)馬上搖勻，放入測定儀，否則影響數(shù)據(jù)準確性。酶抑制率法最關(guān)鍵的試劑是酶的活性，酶的活性降低或失去活性時就會出現(xiàn)假陽性，空白對照測試3min的吸光度變化值△A0值應(yīng)控制在0.2~0.3，可以通過控制酶量進行調(diào)節(jié)。空白對照卡不變色的原因：藥片表面緩沖液少，預(yù)反應(yīng)后表面不夠濕潤或者溫度太低。需要保證白色藥品區(qū)域濕潤，否則檢測結(jié)果無效。結(jié)果為陽性時，應(yīng)采用其他方法進行確證，進一步確定農(nóng)藥品種和含量。因為有可能會出現(xiàn)農(nóng)藥抑制酶效果的疊加作用，呈現(xiàn)出假陽性。操作控制要點可能出現(xiàn)的問題二、瘦肉精的快速測定方法

★KJ201706動物源性食品中克倫特羅、萊克多巴胺及沙丁胺醇的快速檢測膠體金免疫層析法

操作控制要點1、制樣隔水煮法固相萃取法90℃水浴加熱20min至離心管中可清晰看見有組織液滲透，離心取上清液。若用隔水煮法檢測結(jié)果為陽性，建議用此方法再次進行驗證，提高準確性。利用樣品中目標物與共存干擾組分在固相萃取劑上作用力強弱不同，通過選擇性吸附與選擇性洗脫，使它們彼此分離。操作控制要點固相萃取法目標物雜質(zhì)或干擾物目的是：浸潤填料、以便樣品溶液能流過固相萃取柱；清洗固相萃取柱上面的干擾雜質(zhì)以及溶劑殘留。一般用甲醇，然后用水。注意整個過程不能使小柱干涸1.活化如果使用的是高聚物基質(zhì)的陽離子柱，可直接上樣，不用活化。要是使用硅膠基質(zhì)的，活化是為了打開鍵合在硅膠上的碳基團鏈，甲醇是與碳鏈互溶，用水作為過度為了能和樣品液相溶。操作控制要點固相萃取法目標物雜質(zhì)或干擾物目的是：將樣液轉(zhuǎn)移入柱，目標物均保留在小柱上。注意控制流速一定要慢，1滴/秒，不需要加壓。2.上樣操作控制要點固相萃取法目標物雜質(zhì)或干擾物目的是：最大程度去除干擾物。建議此過程后將小柱完全抽干。3.淋洗操作控制要點固相萃取法目標物雜質(zhì)或干擾物目的是：將目標物完全洗脫下來，收集洗脫液。注意控制流速1滴/秒。4.洗脫操作控制要點2、質(zhì)控試驗空白試驗加標質(zhì)控試驗結(jié)果應(yīng)為陰性。結(jié)果應(yīng)為陽性。獸藥名稱克倫特羅萊克多巴胺沙丁胺醇檢測限(μg/kg)0.50.50.5標準中間液濃度（ng/mL）202020加標量（mL）0.1250.1250.125注意事項：本方法使用克倫特羅試劑盒可能與沙丁胺醇、特布他林、西馬特羅等有交叉反應(yīng)，當結(jié)果判定為陽性時，應(yīng)對結(jié)果進行確證。本方法使用沙丁胺醇試劑盒可能與克倫特羅、特布他林、西馬特羅等有交叉反應(yīng)，當結(jié)果判定為陽性時，應(yīng)對結(jié)果進行確證。三、亞硝酸鹽的快速測定方法

★KJ201704食品中亞硝酸鹽的快速檢測鹽酸萘乙二胺法操作控制要點1、質(zhì)控試驗質(zhì)控樣品試驗加標質(zhì)控試驗采用典型樣品基質(zhì)或相似樣品基質(zhì)按照實際生產(chǎn)工藝生產(chǎn)的，含有一定量亞硝酸鹽，并可穩(wěn)定保存的樣品。經(jīng)參比方法確認的質(zhì)控樣品中亞硝酸鹽含量（以亞硝酸鈉計）應(yīng)包括但不限于10mg/kg。結(jié)果應(yīng)在標示量值范圍內(nèi)。準確稱取空白試樣1g（精確至0.01g），加入適量亞硝酸鈉標準工作液（200μg/mL），使樣品中亞硝酸鈉含量為10mg/kg。需要注意應(yīng)振搖后，靜置30min，充分模擬樣品真實狀態(tài)。結(jié)果應(yīng)與加標量相符?；|(zhì)質(zhì)控樣操作控制要點2、結(jié)果判定本方法的檢測限為1mg/kg，雖然餐飲食品要求不能添加亞硝酸鹽，但由于很多食品中本底會帶有亞硝酸鹽，因此10mg/kg作為本底控制限，顏色介于1mg/kg和10mg/kg之間的，考慮為本底污染，顏色深于10mg/kg結(jié)果為陽性。操作控制要點注意事項：1.本方法為比色法，對于水的要求比較嚴格。水為GB/T6682規(guī)定的二級水，大桶水一般不能滿足要求，可配純水機，或使用市售瓶裝純凈水。2.待測樣品中若存在高含量的亞硫酸氫鈉、抗壞血酸或醬油時，會對本法的顯色結(jié)果產(chǎn)生一定影響，檢測時應(yīng)予以注意。3.色階卡應(yīng)確保在試劑盒保質(zhì)期內(nèi)不出現(xiàn)褪色或變色的情況。3快檢產(chǎn)品的選擇快檢產(chǎn)品的選擇如何選擇快檢的試劑盒？1.方法的性能指標假陰性率假陽性率檢測限假陰性率是指方法在實驗條件下達到的實際最低檢出水平時，陽性樣品中檢出陰性結(jié)果的最大概率（以百分比計）。快檢產(chǎn)品的選擇如何選擇快檢的試劑盒？1.方法的性能指標假陰性率假陽性率檢測限假陽性率是指方法在實驗條件下達到的實際最低檢出水平時，陰性樣品中檢出陽性結(jié)果的最大概率（以百分比計）?？鞕z產(chǎn)品的選擇如何選擇快檢的試劑盒？1.方法的性能指標假陰性率假陽性率檢測限要符合方法里面要求的檢測限水平。通過設(shè)計樣品方案，選取典型基質(zhì)樣本，設(shè)計0.5、1、2倍檢測限水平的樣品和空白樣品來驗證試劑盒檢測限水平。通過低于檢測限水平的樣品來檢驗假陽性的概率，高于檢測限水平的樣品來檢驗篩查陽性樣品的準確性?？鞕z產(chǎn)品的選擇如何選擇快檢的試劑盒？2.試劑狀態(tài)例如亞硝酸鹽快檢試劑