全國臨床檢驗操作規(guī)程

全國臨床檢驗操作規(guī)程（第3版）精液檢查一．標(biāo)本收集1.在3個月內(nèi)檢查2次至數(shù)次，二次之間間隔應(yīng)>7天，但不超過3周。2.采樣前至少禁欲3天，但不超過7天。3.采樣后1h內(nèi)送到檢驗科。4.用清潔干燥廣口塑料或玻璃小瓶收集精液，不宜采用避孕套內(nèi)的精液。某些塑料容器具有殺精子作用，但是否合適應(yīng)事先做實驗。5.應(yīng)將射精精液全部送檢。6.傳送時溫度應(yīng)在20~40℃7.容器必須注明患者姓名和（或）識別號（標(biāo)本號或條碼），標(biāo)本采集日期和時間。8.和所有體液一樣，精液也必須按照潛在生物危害物質(zhì)處理，因為精液內(nèi)可能含有肝炎病毒、人類免疫缺陷（病毒）和皰疹病毒等。二．一般性狀檢查一般性狀檢查包括記錄精液量、顏色、透明度、粘稠度和是否液化。1.外觀正常精液呈灰白色或乳白色，不透明。棕色或紅色提示出血。黃色可能服用某種藥物。精子濃度低時精液略顯透明。正常精液是一種均勻黏稠的液體，射精后立即凝固，30min后開始液化。若液化時間超過60min考慮為異常，應(yīng)記錄這種情況。正常精液可含有不液化的膠凍狀顆粒。2.量用刻度量筒或移液管測定。正常一次全部如室溫低于10℃時，應(yīng)將標(biāo)本先放入37某些標(biāo)本試驗前就有尾部卷曲的精子，在HOS試驗前，計算未處理標(biāo)本中尾部卷曲精子的百分?jǐn)?shù)，實際HOS試驗結(jié)果百分率就等于測定值減去未處理標(biāo)本中尾部卷曲精子百分率。HOS也是精子尾部膜功能試驗。四．精子活力WHO推薦一種無需復(fù)雜設(shè)備而能進行簡單精子活力（activity）分級的方法?！静僮鳌咳?0μl標(biāo)本涂片，連續(xù)觀察至少5個視野，對200個精子進行分級，首先計數(shù)a級和b級精子，隨后在同一視野內(nèi)計數(shù)c級和d級精子。【結(jié)果判斷】根據(jù)下述標(biāo)準(zhǔn)把精子活力分為a、b、c、d四級。a級：快速前向運動：37℃時速度≥25μm/s，或20℃時速度≥20μm/s（25b級：慢速或者呆滯的前向運動。c級：非前向運動（＜5μm/s）。d級：不動?！緟⒖紖^(qū)間】正常精液采集后60min內(nèi)，a級+b級精子達(dá)50%以上。五．精子計數(shù)【試劑】精子稀釋液：碳酸氫鈉5g，40%甲醛溶液1ml，蒸餾水100ml，待完全溶解過濾后使用?！静僮鳌坑谛≡嚬軆?nèi)加精子稀釋液0.38ml，吸液化精液20μl，加入稀釋液內(nèi)搖勻。充分搖勻后，滴入改良Neubauer血細(xì)胞計數(shù)池內(nèi)，靜置1~2min，待精子下沉后，以精子頭部作為基準(zhǔn)進行計數(shù)。如每個中央方格內(nèi)精子少于10個，應(yīng)計數(shù)所有25個中方格內(nèi)的精子數(shù)。如每個中央方格內(nèi)精子在10~40個，應(yīng)計數(shù)10個中方格內(nèi)的精子數(shù)。如每個中央方格內(nèi)精子多于40個，應(yīng)計數(shù)5個中方格內(nèi)的精子數(shù)。【結(jié)果判斷】精子數(shù)=計數(shù)結(jié)果*25*1*20*103/ml計數(shù)中方格數(shù)計數(shù)池高度=計數(shù)結(jié)果*1*5*105/ml計數(shù)中方格數(shù)計數(shù)池高度【參考區(qū)間】正常男性≥20*106/ml【附注】收集精液前避免性生活3~7天。收集精液標(biāo)本后應(yīng)在1h內(nèi)檢驗，冬季應(yīng)注意保溫。出現(xiàn)一次異常結(jié)果，應(yīng)隔1周后復(fù)查，反復(fù)查2~3次方能得出比較正確的結(jié)果。如低倍鏡、高倍鏡檢查均無精子，應(yīng)將精液離心沉淀后再涂片檢查，如兩次均無精子，報告“無精子”。六．精子形態(tài)觀察【試劑】改良巴氏染色液、Shorr染色液、Diff-Quik快速染色液：商品化染色液一般質(zhì)量均佳，但實驗室也可自行配制。【操作】在載玻片上滴1滴精液，約5~20μl，采用壓拉涂片法或推片法制片。待干后，巴氏染色法用等量95%乙醇和乙醚混合液固定5~15min；Shorr染色法用75%乙醇固定1min；Diff-Quik快速染色法用甲醇固定15s。作改良巴氏、Shorr或Diff-Quik染色，然后在油鏡下觀察。精子頭部頂體染成淡藍(lán)色，頂體后區(qū)域染成深藍(lán)色，中段染成淡紅色，尾部染成藍(lán)色或淡紅色，細(xì)胞質(zhì)小滴位于頭部后面或中段周圍，巴氏染色染成綠色。【結(jié)果判斷】評估精子正常形態(tài)時應(yīng)采用嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)，只有頭、頸、中段和尾部都正常的精子才正常。精子頭的形狀必須是橢圓形，巴氏染色精子頭部長4.0~5.0μm，寬2.5~3.5μm，長寬之比應(yīng)在1.50~1.75，頂體的界限清晰，約占頭部的40%~70%。中段細(xì)，寬度<1μm，約為頭部長度的1.5倍，且在軸線上緊貼頭部，細(xì)胞質(zhì)小滴應(yīng)小于正常頭部大小的一半。尾部應(yīng)是直的、均一的，比中段細(xì)，非卷曲，其長約為45μm。所有形態(tài)學(xué)處于臨界狀態(tài)的精子均列為異常。異常精子可有：=1\*GB3①頭部缺陷：大頭、小頭、錐形頭、梨形頭、圓頭、無定形頭、有空泡頭、頂體過小頭、雙頭等；=2\*GB3②頸段和中段缺陷：頸部彎曲、中段非對稱地接在頭部、粗的或不規(guī)則中段、異常細(xì)的中段等；=3\*GB3③尾部缺陷：短尾、多尾、發(fā)卡形尾、尾部斷裂、尾部彎曲、尾部寬度不規(guī)則、尾部卷曲等?！緟⒖紖^(qū)間】正常人精液中正常形態(tài)者≥30%（異常精子應(yīng)少于20%，如超過20%為不正常）。七．精子凝集精子凝集是活動精子以各種方式，如頭對頭，尾對尾或頭對尾等彼此粘在一起。以分級方式報告，從“-”（沒有凝集）~“3+”（所有可動的精子凝集到一起）。凝集的存在，提示可能為免疫因素引起不育。八．非精子細(xì)胞精液含有的非精子細(xì)胞成分，成為“圓細(xì)胞”，這些細(xì)胞包括泌尿生殖道上皮細(xì)胞、前列腺細(xì)胞、生精細(xì)胞和白細(xì)胞。正常人精液中：圓細(xì)胞<5*106/ml。正常精液中白細(xì)胞，主要是中性粒細(xì)胞，數(shù)量不應(yīng)超過1*106/ml。過多提示感染，為白細(xì)胞精子癥。九．其他成分精液中可以有結(jié)晶體、卵磷脂小體、淀粉樣體、脂滴、脫落上皮細(xì)胞等。十．臨床意義1．正常精液呈灰白色，久未排精者可呈淡黃色；離體30min后，完全液化。根據(jù)精液檢查結(jié)果，臨床上常用于診斷男子不育癥及觀察輸精管結(jié)扎術(shù)后的效果。2．正常精子活力一般在a級≥25%。如活力a級<25%；a級+b級<50%可成為男性不育的原因。3．精索靜脈曲張癥患者精液中常出現(xiàn)形態(tài)不正常的精子。4．血液中有毒性代謝產(chǎn)物、接觸鉛等污染物、應(yīng)用大劑量放射線及細(xì)胞毒藥物等可使精子形態(tài)異常。前列腺液檢查標(biāo)本收集臨床醫(yī)師作前列腺按摩術(shù)后，采集標(biāo)本于清潔玻片上，立即送檢。檢查內(nèi)容記錄液體顏色、是否混有血液、有無膿塊等。濕片鏡檢，高倍鏡下觀察白細(xì)胞、紅細(xì)胞、卵磷脂小體，其次為上皮細(xì)胞、精子、淀粉樣體等。革蘭染色后檢查細(xì)菌。報告方式卵磷脂小體報告在高倍視野中分布數(shù)量。白細(xì)胞、紅細(xì)胞報告方式與尿