不同碳源好氧顆粒污泥的微生物種群及微生物形態(tài)分析

不同碳源好氧顆粒污泥的微生物種群及微生物形態(tài)分析

好氧污泥（ags）作為一種自固定的微生物收集體，具有良好的沉淀性能、高污泥量和抗沖擊負(fù)荷等顯著優(yōu)點(diǎn)。由于ags的結(jié)構(gòu)特征和溶解氧的傳質(zhì)限制，硝化菌、反硝化菌和聚磷菌可在ags中形成相互交織、共同生長的微生態(tài)系統(tǒng)，為單個(gè)月內(nèi)高效的單級(jí)sdr實(shí)現(xiàn)同步脫氮和去除磷的提供方便[1.4]。胞外多聚物(extracellularpolymericsubstances,EPS)是微生物聚集體(如活性污泥絮凝體、生物膜、顆粒污泥等)的重要組成部分,主要包括多糖、蛋白質(zhì)、核酸、脂類和腐殖酸等成分.研究者使用特異性熒光染色劑、三位熒光光譜、SDS、釕紅染色-TEM等技術(shù)對(duì)EPS的組成、分布及其與AGS的形成、穩(wěn)定性的關(guān)系進(jìn)行了探討.但是結(jié)合熒光原位雜交技術(shù)(fluorescenceinsituhybridization,FISH)和多重?zé)晒馊旧夹g(shù)系統(tǒng)全面共同研究EPS和功能菌群對(duì)常低溫同步脫氮除磷AGS的形成和穩(wěn)定維持的影響鮮見報(bào)道.本試驗(yàn)以處理實(shí)際生活污水實(shí)現(xiàn)常低溫穩(wěn)定同步脫氮除磷的AGS為研究對(duì)象,利用FISH技術(shù)研究AGS中全菌、氨氧化菌、聚磷菌的相對(duì)數(shù)量、空間分布及其與AGS同步脫氮除磷的關(guān)系;同時(shí)采用多重?zé)晒馊旧夹g(shù)研究AGS胞外蛋白、α-吡喃葡萄糖、α-甘露糖和β-D-吡喃葡萄糖、脂類;凋亡(活菌、死菌)的相對(duì)數(shù)量和空間分布;并結(jié)合SEM共同探討同步脫氮除磷AGS形成和穩(wěn)定維持的機(jī)制以及生化反應(yīng)機(jī)制.1材料和方法1.1ags的建立和運(yùn)行試驗(yàn)所用污泥來源于北京市方莊污水處理廠排放的剩余污泥;試驗(yàn)用水為北京工業(yè)大學(xué)家屬區(qū)排放的實(shí)際生活污水,其水質(zhì)平均值COD為191.37mg/L,PO43--P為6.14mg/L,NH4+-N為58.32mg/L,pH為7.4.在直徑D=180mm,有效高度H=550mm,有效容積為12L的2個(gè)SBR反應(yīng)器(命名為A、B)內(nèi)培養(yǎng)AGS,曝氣量為0.16m3/h,初始MLSS為2600mg/L左右,反應(yīng)器共運(yùn)行254d,第1~165d為夏秋季,水溫為18~27℃,第166~254d為冬季,水溫最低可達(dá)9~13℃.由于原水有機(jī)物含量過低,從第42d向A中添加丙酸鈉+乙酸鈉,B中添加葡萄糖,設(shè)計(jì)COD∶N∶P均約為360∶60∶6.反應(yīng)器的運(yùn)行方式為進(jìn)水(2min),厭氧(238min),曝氣(470min),沉淀(1~5min),排水(2min),采用時(shí)間程序控制器自動(dòng)控制各反應(yīng)段的開關(guān).AGS形成并穩(wěn)定之后,粒徑分布在0.3~1.0mm的范圍內(nèi).系統(tǒng)以厭氧/好氧的簡單運(yùn)行方式能夠?qū)崿F(xiàn)穩(wěn)定的同步脫氮除磷效果,常溫4個(gè)月以及低溫效果恢復(fù)之后分別穩(wěn)定運(yùn)行56d、42d內(nèi),出水NH4+-N、TIN和PO43--P均能達(dá)到GB18918-2002一級(jí)排放標(biāo)準(zhǔn).本試驗(yàn)取用AGS樣本為低溫穩(wěn)定運(yùn)行時(shí)期的A、B2個(gè)反應(yīng)器的AGS.1.2熒光原位雜交將A、B中培養(yǎng)獲得的AGS用現(xiàn)配的4%多聚甲醛溶液在4℃固定6~12h,保存在-20℃的PBS+乙醇(1∶1)溶液中;再用蔗糖溶液、OCT包埋劑對(duì)樣品分別進(jìn)行脫水和包埋,之后用冷凍切片機(jī)(LeicaCM1850,德國)對(duì)樣品進(jìn)行切片(切片厚度一般為10~20μm);將切片粘在明膠包被過的載玻片上,空氣中干燥后先后浸泡于50%、80%和98%的乙醇溶液中脫水3min.按照標(biāo)準(zhǔn)雜交程序進(jìn)行熒光原位雜交,所用探針(大連TaKaRa)見表1,熒光染料位置均在5′端,一次探針用量為10μL.雜交完畢后使用熒光顯微鏡(OLYMPUSBX52)或激光共聚焦顯微鏡(OLYMPUS,FV1000)對(duì)樣品進(jìn)行觀察拍照,每個(gè)污泥樣品隨機(jī)拍攝20~25張照片,用ImageProPlus6.0(MediaCyberneticsInc.)進(jìn)行定量分析.EUBmix由EUB338、EUB338-Ⅱ、EUB338-Ⅲ按體積比1∶1∶1混合組成.PAOmix為PAO462、PAO651和PAO846按照體積比1∶1∶1混合而成.EUBmix針對(duì)全菌;NSO190和NSO1225針對(duì)氨氧化菌、PAOmix針對(duì)聚磷菌.1.3相關(guān)理化性質(zhì)研究首先用甲醛+氫氧化鈉法對(duì)2個(gè)反應(yīng)器中AGS的EPS進(jìn)行提取,并使用苯酚-硫酸法、考馬斯亮藍(lán)法、二苯胺比色法分別對(duì)EPS中的多糖、蛋白質(zhì)以及核酸進(jìn)行化學(xué)定量分析,詳見參考文獻(xiàn).1.3.1胞膜熒光染料為了對(duì)AGS中的活細(xì)菌和死細(xì)菌進(jìn)行相對(duì)定量和空間分布定位,使用Hoechst33342和PI進(jìn)行雙重?zé)晒馊旧?Hoechst33342是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,對(duì)細(xì)胞的毒性較低,可以用來染活細(xì)胞.PI則是一種常用的細(xì)胞核熒光染色劑.它不能透過完整的細(xì)胞膜,但能透過凋亡中晚期的細(xì)胞和死細(xì)胞的膜而將細(xì)胞核染紅,與未結(jié)合的PI相比,強(qiáng)度增強(qiáng)20~30倍.將好氧周期末端的AGS用1×PBS清洗3遍后,先加入Hoechst33342染色30min,用1×PBS清洗3次后加入PI染色1h,再用1×PBS清洗,-20℃保存.Hoechst33342、PI購自Sigma-Aldrich(上海)貿(mào)易有限公司.1.3.2ags凋亡和eps多重染色對(duì)AGS的EPS如蛋白質(zhì)、多糖、脂類等進(jìn)行熒光染色.FITC是氨基標(biāo)記熒光染料,本試驗(yàn)中用FITC來指示胞外蛋白質(zhì);ConA則用于α-吡喃葡萄糖和α-甘露糖殘基的染色;Calcofluorwhite用于β-D-吡喃葡萄糖基的染色;Nilered則用于脂類及疏水基團(tuán)的染色.AGS凋亡和EPS多重染色所用染料其激發(fā)發(fā)射波長、用量和使用濃度見表2.將好氧周期末的AGS用1×PBS清洗3遍后,先加入10μLFITC樣品染色1h,后加入ConA染色30min,再加入Calcofluorwhite染色30min,最后加入Nilered染色10min,每次染色后均要用1×PBS清洗3遍.染色完畢后,-20℃保存.AGS細(xì)胞凋亡和EPS多重?zé)晒馊旧臉悠肪美鋬銮衅瑱C(jī)切片(厚度為20~40μm),再使用激光共聚焦顯微鏡(OLYMPUSFV1000)進(jìn)行觀察.FITC和ConA購自MolecularProbes公司;Calcofluorwhite和Nilered購自SigmaAldrich(上海)貿(mào)易有限公司.1.4模擬離子檢測在好氧周期末取出一定量AGS,清洗后用2.5%新鮮的戊二醛4℃固定2~4h,PBS(0.1mol/L,pH=6.8)清洗3次,1%鋨酸浸泡4~6h,PBS清洗3次,30%、50%、70%、85%、95%乙醇梯度脫水各1次,100%乙醇脫水2次,每次15~20min,乙酸異戊酯置換2次,每次20min,臨界點(diǎn)干燥,離子濺射金,用FEIQUANTA200觀察.2結(jié)果與討論2.1ags的生物富集強(qiáng)化功能A、B反應(yīng)器常低溫同步脫氮除磷AGS的FISH定量分析結(jié)果表明,A中AOB占總菌群數(shù)的12.32%(標(biāo)準(zhǔn)偏差SD=1.89%,樣本數(shù)n=7),PAO占總菌群數(shù)的42.56%(標(biāo)準(zhǔn)偏差SD=6.94%,n=7);B中AOB占總菌群數(shù)的14.10%(標(biāo)準(zhǔn)偏差SD=2.05%,n=6),PAO占總菌群數(shù)38.90%(標(biāo)準(zhǔn)偏差SD=4.21%,n=6),2個(gè)反應(yīng)器結(jié)果相似.絮狀污泥中AOB所占比例約為2.4%~8.4%[12~14],PAO所占比例約為4%~18%.與此不同的是,Kim等以SBAR處理人工配水培養(yǎng)短程AGS,其AOB所占比例高達(dá)64%;Zeng等的研究表明其除磷AGS中PAO所占比例為41%,DNPAO所占比例為38%,與本研究的結(jié)果相當(dāng).AGS中AOB和PAO的數(shù)量均遠(yuǎn)高于絮狀污泥,這也從微生物角度說明為何本研究中AGS可以在常低溫、COD∶N∶P為360∶60∶6的情況下實(shí)現(xiàn)優(yōu)良的同步脫氮除磷效果.同時(shí)也說明AGS具有優(yōu)良的生物富集強(qiáng)化功能.2個(gè)反應(yīng)器常低溫同步脫氮除磷AGS中EUB、AOB和PAO的空間分布結(jié)果類似,以A反應(yīng)器AGS的FISH結(jié)果為例(見圖1),可以看到AGS中的AOB和PAO有各自明顯的層狀分布特征:AOB主要分布在AGS的最外側(cè),在一些大孔隙的周圍也有;右下側(cè)的AOB深入顆粒的距離約在80~150μm之間,而右上方由于附近有大的孔洞,AOB最深可達(dá)330μm;總體上AOB深入顆粒內(nèi)部的距離從幾十μm到300μm不等;這與AOB專性好氧菌的特點(diǎn)有關(guān).而PAO主要在AOB內(nèi)側(cè)向顆粒內(nèi)部生長,基本布滿顆粒內(nèi)部;顆粒右上方PAO和AOB有部分重合,在此區(qū)域的PAO是好氧PAO,內(nèi)部的PAO是可以執(zhí)行反硝化功能的DNPAO.AOB和PAO的分布特征與不同菌種的不同生存特性以及運(yùn)行條件相關(guān).在一個(gè)厭氧/好氧反應(yīng)周期中的好氧段,總氮不斷持續(xù)下降,說明系統(tǒng)在好氧條件下反硝化作用明顯;一般情況下,反硝化作用的必要條件為缺氧環(huán)境,而反應(yīng)前2h液相主體DO濃度為2~4mg/L,反應(yīng)后5.5hDO濃度可高達(dá)5~7mg/L,因此AGS內(nèi)部可能存在缺/厭氧區(qū).由于AGS的培養(yǎng)條件不同,研究者應(yīng)用微氧電極探查到DO擴(kuò)散的深度亦有所區(qū)別,大多數(shù)研究者均發(fā)現(xiàn)AGS內(nèi)部存在缺氧區(qū):Kishida等發(fā)現(xiàn)當(dāng)液態(tài)主體的DO濃度為5.5mg/L時(shí),AGS被DO的穿透深度為100μm;Yilmaz等發(fā)現(xiàn)液相主體的DO濃度高達(dá)5~6mg/L時(shí),DO只穿透300~400μm;Lemaire等發(fā)現(xiàn)DO穿透AGS的深度在好氧段的初期和末期基本都是250μm;Chiu等發(fā)現(xiàn)即使液相主體的DO濃度為飽和,以醋酸和酚為底物培養(yǎng)的AGS、大多數(shù)DO消耗在AGS的表層125μm.但是劉邵陽發(fā)現(xiàn)AGS內(nèi)部沒有缺氧區(qū);Moy等研究發(fā)現(xiàn)即使AGS的直徑>2mm,其內(nèi)部也沒有缺氧區(qū).與以上研究對(duì)比表明,本研究的AGS內(nèi)部可能存在一定深度的缺/厭氧區(qū)以實(shí)現(xiàn)好氧條件下同時(shí)脫氮除磷.AOB是絕對(duì)好氧的自養(yǎng)菌,分布在AGS的最外側(cè);PAO是兼性異養(yǎng)菌,分布在AGS的內(nèi)部.AOB的數(shù)量遠(yuǎn)小于PAO的數(shù)量,因此硝化是限速步驟(尤其在低溫、低COD∶N∶P條件下),脫氮慢于除磷,除磷2h基本完成,而脫氮需要約7.5h.除磷速度較快的另一個(gè)原因是好氧吸磷和反硝化除磷共同作用的結(jié)果,處于相對(duì)外層的PAO可以進(jìn)行好氧吸磷,內(nèi)層的PAO可以進(jìn)行反硝化除磷;按照Hu等的方法亦證明能以氧和硝酸氮作為電子受體的PAO占總PAO的74.32%;因此AGS中的PAO可以完成好氧吸磷和反硝化吸磷.甚至可以認(rèn)為,由于溶解氧較高,而聚磷菌本身對(duì)溶解氧的要求相對(duì)較低,因此才出現(xiàn)本試驗(yàn)中的AGS中的聚磷菌比其他研究中的要更靠近顆粒內(nèi)部的結(jié)果.本研究AOB的分布特征與其他研究者[24~26]類似,PAO的分布與deKreuk等和Kishida等試驗(yàn)中PAO既分布在AGS外部,又分布在內(nèi)部的特點(diǎn)并不完全相同,相同之處是AGS內(nèi)部的PAO均具有反硝化除磷功能.2.2ags的及其生物活性成分分布情況A、B反應(yīng)器的AGS細(xì)菌凋亡染色結(jié)果類似(圖2、圖3),藍(lán)色的活細(xì)菌數(shù)量較紅色的死細(xì)菌數(shù)量稍少,兩者在AGS斷面上的分布都比較均勻,活細(xì)菌更多分布在AGS的邊緣以及孔隙周圍;死細(xì)菌和活細(xì)菌相伴存在,活細(xì)菌通常包圍著死細(xì)菌.B反應(yīng)器活細(xì)菌數(shù)量比A反應(yīng)器稍多.EPS的多重?zé)晒馊旧?圖4、圖5)顯示出與細(xì)菌一起構(gòu)成顆粒的各種EPS的分布情況,A反應(yīng)器的EPS染色的結(jié)果表明:蛋白質(zhì)(綠色,FITC)含量高于其他幾種物質(zhì),且均勻分布在AGS的斷面上,即使在AGS的內(nèi)部數(shù)量仍然較多,可以認(rèn)為蛋白質(zhì)是A反應(yīng)器中AGS的EPS主要組成部分;α-吡喃葡萄糖、α-甘露糖(紅色,ConA)和脂類(黃色,NileRed)都較均勻地分布在AGS內(nèi)外,兩者的分布范圍和數(shù)量均差別不大,說明這2類物質(zhì)生成和分布情況較為類似;β-D-吡喃葡萄糖(藍(lán)色,calcofluorwhite)則較為明顯地包布在蛋白質(zhì)、脂類和α-吡喃葡萄糖、α-甘露糖的外圍.B反應(yīng)器的EPS多重染色(圖5)呈現(xiàn)出與A反應(yīng)器不同的特點(diǎn).其中蛋白質(zhì)含量高于其他幾種有機(jī)物,分布均勻,即使在顆粒的內(nèi)部仍然有較為明顯的顏色和亮度,可以說明在A、B反應(yīng)器中蛋白質(zhì)均是AGS的EPS的主要組成部分;β-D-吡喃葡萄糖仍然明顯包布在蛋白質(zhì)、脂類和α-吡喃葡萄糖、α-甘露糖的外圍;而在A反應(yīng)器中區(qū)別不明顯的α-吡喃葡萄糖、α-甘露糖和脂類在B反應(yīng)器的AGS上呈現(xiàn)了不同的分布情況,α-吡喃葡萄糖、α-甘露糖更多的分布在顆粒的外層,而脂類的數(shù)量相對(duì)較少,推測這與B反應(yīng)器的添加的附加碳源為葡萄糖有一定的關(guān)系.使用甲醛+氫氧化鈉法對(duì)A、B反應(yīng)器中的AGS進(jìn)行EPS提取,并且對(duì)多糖、蛋白質(zhì)、脂類以及核酸進(jìn)行測量后得到:A反應(yīng)器中(VSS)的蛋白質(zhì)平均值為243.67mg/g,多糖平均值為49.35mg/g,核酸平均值為1.24mg/g;B中蛋白質(zhì)平均值為254.52mg/g,多糖平均值為71.83mg/g,核酸平均值為1.57mg/g.2個(gè)反應(yīng)器AGS的EPS蛋白質(zhì)含量沒有明顯區(qū)別,而B反應(yīng)器中EPS多糖則明顯高于A反應(yīng)器中AGS所含胞外多糖的量,認(rèn)為與B反應(yīng)器添加葡萄糖作為外加碳源相關(guān).McSwain等發(fā)現(xiàn)活細(xì)菌主要分布在AGS的外側(cè);Adav等的研究發(fā)現(xiàn)處理含酚廢水的AGS,內(nèi)部主要是死細(xì)菌,而活細(xì)菌主要分布在顆粒的外側(cè)與本研究結(jié)果相似;而Chen等發(fā)現(xiàn)處理含酚廢水的AGS,無論死細(xì)菌還是活細(xì)菌均分布在顆粒的外側(cè);處理醋酸鈉廢水的AGS,死細(xì)菌和活細(xì)菌都分布均勻,本研究與此不同.添加不同碳源的反應(yīng)器(A、B)中AGS的EPS均呈現(xiàn)出蛋白質(zhì)多,分布均勻的情況.McSwain等對(duì)多種AGS的EPS成分進(jìn)行分析后認(rèn)為蛋白質(zhì)成分占EPS總量50%以上,且分布在AGS的內(nèi)核處,是保持AGS穩(wěn)定性的重要原因;Zhang等也認(rèn)為胞外蛋白質(zhì)是維持AGS穩(wěn)定的主要原因;Chen等發(fā)現(xiàn)處理含酚廢水的AGS中胞外蛋白質(zhì)位于其內(nèi)核處,而處理乙酸鈉廢水的AGS中的胞外蛋白質(zhì)在AGS內(nèi)均勻分布.因此,本試驗(yàn)研究結(jié)果可以認(rèn)為無論以何種碳源培養(yǎng)AGS,分布最廣泛的EPS均為蛋白質(zhì).A反應(yīng)器中以乙酸鈉和丙酸鈉作為附加碳源培養(yǎng)的AGS中α-吡喃葡萄糖和α-甘露糖成分分布較為均勻.B反應(yīng)器中以葡萄糖作為附加碳源的AGS則呈現(xiàn)出α-吡喃葡萄糖和α-甘露糖存在于顆粒外部的特點(diǎn),與McSwain等、Chen等和Adav等的試驗(yàn)結(jié)果相似.Chen等和Adav等研究發(fā)現(xiàn)脂類主要分布在AGS的外側(cè),與本研究結(jié)果不同.A、B反應(yīng)器中AGS的β-D-吡喃葡萄糖均大量存在于相對(duì)外層位置,AGS內(nèi)部較少,Chen等發(fā)現(xiàn)處理含酚廢水的AGS,β-D-吡喃葡萄糖在顆粒的內(nèi)核處;處理醋酸鈉廢水的AGS,β-D-吡喃葡萄糖均勻分布.Adav等對(duì)添加了不同的水解酶的AGS進(jìn)行了EPS染色,結(jié)果認(rèn)為β-D-吡喃葡萄糖對(duì)于構(gòu)建AGS有著非常重要的作用.對(duì)比中外研究并結(jié)合本試驗(yàn)研究結(jié)果,可以發(fā)現(xiàn),AGS所含的EPS呈現(xiàn)出與碳源相關(guān)的特點(diǎn).AGS中分布最廣泛且數(shù)量最多的EPS是蛋白質(zhì);而脂類物質(zhì)也呈均勻分布狀態(tài),并沒受到碳源等不同條件的影響,但數(shù)量最少;B反應(yīng)器的多糖高于A反應(yīng)器中的,且不同的多糖(α-吡喃葡萄糖、α-甘露糖和β-D-吡喃葡萄糖)呈現(xiàn)出不同的分布特點(diǎn),因此認(rèn)為EPS中多糖對(duì)AGS的形成、穩(wěn)定維持具有直接的聯(lián)系.結(jié)合SEM圖(圖6)中2個(gè)反應(yīng)器的球菌和桿菌數(shù)量的差異,認(rèn)為不同的碳源對(duì)AGS的菌種、形成特點(diǎn)、EPS會(huì)造成不同的影響,但根據(jù)FISH分析以及2個(gè)反應(yīng)器出水效果結(jié)果可以認(rèn)為不同的菌種以及有機(jī)物,主要是多糖的不同對(duì)于AGS本身的去除能力沒有明顯影響,但是2個(gè)反應(yīng)器中AGS在同樣的運(yùn)行條件下,污泥濃度卻始終有所區(qū)別,不同反應(yīng)器對(duì)抗低溫的能力以及恢復(fù)也存在差異,因此認(rèn)為在同樣的簡單運(yùn)行模式下丙酸鈉+乙酸鈉的外加碳源模式更有利于AGS的培養(yǎng)和馴化,污泥生長較快,去除速度以及對(duì)抗外部條件改變的能力也就越強(qiáng).本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與文獻(xiàn)不同的原因可能源自顆粒的不同(底物、培養(yǎng)條件等),因此顆粒內(nèi)部結(jié)構(gòu)亦有重大差異.2.3ags的組織組成主要由細(xì)菌和菌圖6為2個(gè)反應(yīng)器AGS的SEM圖.2個(gè)反應(yīng)器雖然添加了不同的碳源,但仍然是以生活污水為主要底物,在這種條件下,除了進(jìn)行污水處理的細(xì)菌之外,存在相當(dāng)多的原后生動(dòng)物,如鐘蟲、累枝蟲和纖毛蟲等,這說明在這種進(jìn)水中有毒有害的物質(zhì)較少,大量的原后生動(dòng)物位于AGS的表層,與大量細(xì)菌以及產(chǎn)生的EPS共同構(gòu)成了AGS.A反應(yīng)器中AGS的表面細(xì)菌以桿菌為主,結(jié)合非常緊密,致使整個(gè)顆粒結(jié)構(gòu)緊湊.B反應(yīng)器的AGS表面主要細(xì)菌包括大量球菌.桿菌和球菌的不同分布特點(diǎn)與進(jìn)水碳源類型相關(guān),葡萄糖有利于球菌的生長而乙酸丙酸類物質(zhì)則有利于桿菌的生長,不同的菌種也會(huì)產(chǎn)生不同的EPS.而2種顆粒表面同時(shí)存在大量的孔洞,認(rèn)為這樣的結(jié)構(gòu)有利于養(yǎng)分和氧氣進(jìn)入AGS內(nèi)部,對(duì)AGS的整體活性提供外部條件.Weber等認(rèn)為纖毛蟲在顆粒形成過程中起到非常重要的作用.本試驗(yàn)中培養(yǎng)的AGS外部同樣存在大量的纖毛蟲等原后生動(dòng)物,外部由纖毛蟲和細(xì)菌組成較松散的結(jié)構(gòu),內(nèi)部則是由細(xì)菌和EPS組成緊致的結(jié)構(gòu),這說明纖毛蟲對(duì)AGS的結(jié)構(gòu)和形態(tài)起到一定的作用,但是從FISH、EPS和SEM圖中可以明顯看到細(xì)菌仍然是形成AGS形態(tài)的最重要因素,EPS起到重要的“膠水”作用,將不同的細(xì)菌連接在一起,共同構(gòu)成了AGS.同樣從由FISH結(jié)果可知(圖1),細(xì)胞主要聚集在顆粒外圍及空隙周圍,以簇狀生存,但是沒有在顆粒內(nèi)形成連續(xù)的一層.顆粒外層比較疏松,內(nèi)部比較致密,內(nèi)外不同;顆粒內(nèi)有較多的空隙,有利于底物的進(jìn)入.本試驗(yàn)在生活污水添加一定量碳源條件下