補(bǔ)中益氣湯治療脾胃虛型慢性萎縮性胃炎的臨床研究

補(bǔ)中益氣湯治療脾胃虛型慢性萎縮性胃炎的臨床研究

補(bǔ)中益氣湯是金朝著名專家李東元在《脾胃論》中所說的。這是治療各種氣虛證的經(jīng)典方劑。主要用于慢性循環(huán)系統(tǒng)疾病的治療。本研究觀察補(bǔ)中益氣湯對脾氣虛型慢性萎縮性胃炎大鼠外周血T淋巴細(xì)胞亞群的影響,探討該方治療本病的作用機(jī)理。1材料和方法1.1動物清潔級12周齡Wistar大鼠50只,體重180-220g,雌雄各半,分籠飼養(yǎng),每籠5只,常規(guī)喂養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)飼料。1.2中藥傳統(tǒng)水煮法補(bǔ)中益氣湯(由黃芪、甘草(炙)各1.5g,人參(去蘆)0.9g,當(dāng)歸身(酒焙干或曬干)0.6g,橘皮(不去白)0.9g,升麻0.9g,柴胡0.9g,白術(shù)0.9g組成),按照中藥傳統(tǒng)水煮方法煎煮,100℃恒溫水浴加熱濃縮,分別得到含生藥1g/mL(高劑量)、0.5g/mL(中劑量組)、0.25g/mL(低劑量組)的藥液。1.3中藥浸食,喂飼參照文獻(xiàn)方法略有改進(jìn)。動物適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,隨機(jī)分為5組,即:空白組、模型組和四君子湯低、中、高劑量治療組,每組10只。除空白組外,其余動物造模:給予0.2%的去氧膽酸鈉溶液代水自飲,45d后,加中藥煎劑(厚樸、枳實(shí)、大黃以3∶3∶2比例制成)給大鼠灌胃,共45d,同時(shí)隔日喂飼,日食不限量。自飲去氧膽酸鈉14d后,足部皮內(nèi)注射30%胃組織懸液與等量完全弗氏佐劑混合乳劑0.1mL,7d后再腹腔注射30%胃組織懸液0.1mL,確認(rèn)模型制作成功。造模后大鼠整體反應(yīng)判斷標(biāo)準(zhǔn):精神倦怠,嗜臥,懶動,拱背,蜷縮,扎堆;舌淡苔少,眼瞇,耳尾色白、毛無光澤;嚴(yán)重時(shí)出現(xiàn)受驚動時(shí)無神,抓取時(shí)掙扎無力;軟便,溏便,泄瀉,受激排便率增高;食量減少,體重增長減慢或體重下降;體溫小變或略有降低。如出現(xiàn)上述表現(xiàn),則可確認(rèn)造模成功。1.3補(bǔ)中益氣湯藥液制備于造模90d開始,補(bǔ)中益氣湯各劑量組灌服相應(yīng)濃度補(bǔ)中益氣湯藥液1.2mL,模型組灌服1.2mL蒸餾水,每天1次,連續(xù)42d。各組動物常規(guī)喂養(yǎng),給藥結(jié)束后進(jìn)行有關(guān)指標(biāo)檢測。1.4t細(xì)胞亞群檢測治療結(jié)束后,大鼠禁食不禁水12h,按45mg/kg體重腹腔注射戊巴比妥鈉將動物麻醉,摘眼球取血,置于肝素抗凝的試管中,應(yīng)用EPICS-XL型流式細(xì)胞儀(美國Bec:kananCoulLea公司)檢測T淋巴細(xì)胞亞群(試劑盒由浙江杭州聯(lián)科生物技術(shù)工程公司提供),全部操作按照說明書進(jìn)行。1.5肝胰腺指數(shù)和脾指數(shù)的測定大鼠脫頸椎處死,將腹腔打開,切取大鼠胸腺、脾臟,并用濾紙吸干表面的血液,用十萬分之一電子天平稱重。計(jì)算胸腺指數(shù)和脾指數(shù):胸腺指數(shù)=胸腺重量/大鼠體重×100%;脾指數(shù)=脾重量/大鼠體重×100%。1.6統(tǒng)計(jì)處理各組數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,組間比較采用方差分析。所有數(shù)據(jù)輸入SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理。2結(jié)果2.1補(bǔ)中益氣湯治療cd3+、cd4+陽性細(xì)胞數(shù)由表1可見,造模后模型組CD3+、CD4+陽性細(xì)胞數(shù)目明顯下降,CD8+陽性細(xì)胞數(shù)明顯升高,CD4+/CD8+比值降低,經(jīng)補(bǔ)中益氣湯治療后,治療組CD3+、CD4+陽性細(xì)胞數(shù)目明顯升高,CD8+陽性細(xì)胞數(shù)明顯減少,CD4+/CD8+比值升高,與模型組比較,補(bǔ)中益氣湯低、中劑量組有顯著差異(P<0.05),高劑量組有極顯著性差異(P<0.01),提示補(bǔ)中益氣湯有治療作用。低劑量組與高劑量組補(bǔ)中益氣湯比較(P<0.05),提示補(bǔ)中益氣湯高劑量組有較好的療效。2.2補(bǔ)中益氣湯對大鼠尾腺指數(shù)、脾指數(shù)的影響由表2可見,造模后模型組胸腺指數(shù)、脾指數(shù)明顯下降,經(jīng)補(bǔ)中益氣湯治療后,治療組胸腺指數(shù)、脾指數(shù)明顯升高,與模型組比較,補(bǔ)中益氣湯低、中劑量組有顯著差異(P<0.05),高劑量組有極顯著差異(P<0.01),提示補(bǔ)中益氣湯有治療作用。低劑量與高劑量組比較(P<0.05),提示補(bǔ)中益氣湯高劑量有較好的療效。3cd4+、cd8+與cd8+的聯(lián)系,原理如下大量的研究表明,慢性萎縮性胃炎患者存在免疫功能低下,并與胃病的嚴(yán)重程度有關(guān)。T細(xì)胞分化抗原相應(yīng)單抗的臨床意義主要在于評估機(jī)體免疫狀態(tài)。T淋巴細(xì)胞亞群相作用維持著機(jī)體的正常免疫功能,在保護(hù)機(jī)體免受各種病原體感染的過程中起著重要的作用。CD3+是與T細(xì)胞抗原受體相關(guān)連的一種表面膜抗原,常用于檢測成熟T細(xì)胞數(shù);CD4+代表輔助性T細(xì)胞,功能為協(xié)助B細(xì)胞、單核及巨噬細(xì)胞、殺傷性T細(xì)胞發(fā)揮免疫功能;CD8+代表抑制和細(xì)胞毒性T細(xì)胞。在T細(xì)胞亞群中,CD4+/CD8+的數(shù)量和適當(dāng)?shù)谋壤敲庖哒{(diào)節(jié)的關(guān)鍵。CD4+、CD8+彼此相互調(diào)節(jié),能表現(xiàn)輔助和抑制的作用,是免疫系統(tǒng)的核心。檢測T淋巴細(xì)胞亞群可以反映機(jī)體的免疫功能狀態(tài)。胸腺和脾臟是機(jī)體重要的免疫器官,兩者的臟器系數(shù)常被用作衡量機(jī)體免疫功能的初步指標(biāo)。補(bǔ)中益氣湯是治療脾氣中氣下陷的基本方,對于此種病癥者臨床療效顯著。方中黃芪補(bǔ)中益氣、升陽固表為君;人參、白術(shù)、甘草甘溫益氣,補(bǔ)益脾胃為臣;陳皮調(diào)理氣機(jī),當(dāng)歸補(bǔ)血和營為佐;升麻、柴胡協(xié)同參、芪升舉清陽為使。綜合全方,一則補(bǔ)氣健脾,使后天生化有源,脾胃氣虛諸證自可痊愈;二則升提中氣,恢復(fù)中焦升降之功能,使下脫、下垂之證自復(fù)其位。有研究表明,補(bǔ)中益氣湯有抗基因突變及抗腫瘤作用,強(qiáng)于四君子湯。同時(shí),本方還能調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能,延長動物存活時(shí)間。提示在臨床上使用抗腫瘤化療藥物時(shí),配合應(yīng)用本方,可提高療效,降低化療藥物毒副反應(yīng)。補(bǔ)中益氣湯能使脾虛證患者減退的免疫功能得以在體液和細(xì)胞免疫功能方而全而明顯提高,尤其是細(xì)胞免疫功能,其原因在于補(bǔ)中益氣湯直接促進(jìn)表現(xiàn)為特異性免疫淋巴細(xì)胞的分化、增殖,提高非特異免疫的NK細(xì)胞活性,嗜中性細(xì)胞吞噬指數(shù),同時(shí)還能改善消化功能,增加免疫球蛋白的產(chǎn)生。本研究結(jié)果表明,慢性萎縮性胃炎外周血CD3+、CD4+陽性細(xì)胞數(shù)顯著降低,CD8+升高,CD