土壤全氮的測定-凱氏定氮法-蘭州大學(xué)草地農(nóng)業(yè)科技學(xué)院

土壤學(xué)實驗講義（修訂版）吳彩霞王靜李旭東蘭州大學(xué)草地農(nóng)業(yè)科技學(xué)院2012年10月#實驗一、土壤分析樣品采集與制備實驗二、土壤全氮的測定—凱氏定氮法實驗三、土壤速效鉀的測定實驗四、土壤有效磷的測定實驗五、土壤有機質(zhì)的測定實驗六、土壤酸度的測定實驗一土壤分析樣品采集與制備一、實驗?zāi)康暮驼f明為開展土壤科學(xué)實驗，合理用土和改土，除了野外調(diào)查和鑒定土壤基礎(chǔ)性狀外，還須進行必要的室內(nèi)常規(guī)分析測定。而要獲得可靠的科學(xué)分析數(shù)據(jù)，必須從正確地進行土壤樣品（簡稱土樣）的采集和制備做起。一般土樣分析誤差來自采樣、分樣和分析三個方面，而采樣誤差往往大于分析誤差，如果采樣缺乏代表性即使室內(nèi)分析人員的測定技術(shù)如何熟練和任何高度精密的分析儀器，測定數(shù)據(jù)相當(dāng)準(zhǔn)確，也難于如實反映客觀實際情況。故土樣采集和制備是一項十分細(xì)致而重要的工作。二、實驗方法步驟一）土（樣采集分析某一土壤或土層，只能抽取其中有代表性的少部份土壤，這就是土樣。采樣的基本要求是使土樣具有代表性，即能代表所研究的土壤總體。根據(jù)不同的研究目的，可有不同的采樣方法。1土.壤剖面樣品土壤剖面樣品是為研究土壤的基本理化性質(zhì)和發(fā)生分類。應(yīng)按土壤類型，選擇有代表性的地點挖掘剖面，根據(jù)土壤發(fā)生層次由下而上的采集土樣，一般在各層的典型部位采集厚約厘米的土壤，但耕作層必須要全層柱狀連續(xù)采樣，每層采一公斤；放入干凈的布袋或塑料袋內(nèi)，袋內(nèi)外均應(yīng)附有標(biāo)簽，標(biāo)簽上注明采樣地點、剖面號碼、土層和深度。圖1土壤剖面坑示意圖

土壤混合樣品混合土樣多用于耕層土壤的化學(xué)分析，一般根據(jù)不同的土壤類型和土壤肥力狀況，按地塊分別采集混合土樣。一般要求是：采）樣點應(yīng)避免田邊、路旁、溝側(cè)、糞底盤以及一些特殊的地形部位。采（樣2面）積一般在采（樣2面）積一般在采（樣3采（樣3深）度依不同分析要求而定，一般土壤表層取,取樣點不少于點?？捎猛零@或鐵鏟取樣，特殊的微量元素分析，如鐵元素需改用竹片或塑料工具取樣，以防污染。每（點4?。由疃群蛿?shù)量應(yīng)相當(dāng)，集中放入一土袋中，最后充分混勻碾碎，用四分法取對角二組，其余淘汰掉。取樣數(shù)量約1公斤左右為宜。采）樣線路通常采用對角線、棋盤式和蛇形取樣法。明采樣地點、深度、采集人和日期，帶回室內(nèi)明采樣地點、深度、采集人和日期，帶回室內(nèi)樣品處，理過程中不能發(fā)生任何物理和化學(xué)變化，以免造成分析誤差。樣品要均一化,使測定結(jié)果能代表整個樣品和田間狀態(tài)。樣品制備過程包括：風(fēng)干一分選一去雜一磨碎一過篩一混勻一裝瓶一保存一登記。風(fēng)干一將取回的土樣放在通風(fēng)、干燥和無陽光直射的地方，或攤放在油布、牛皮紙、塑料布上，盡可能鋪平并把大土塊捏碎，以便風(fēng)干快些。分選一若取的土樣太多，可在土樣均勻攤開后，用“四分法”去掉一部分，留下克左右供分析用。去雜、磨細(xì)和過篩一將風(fēng)干后土樣先用臺稱稱出總重量，然后將土樣倒在橡皮墊上，碾碎土塊，并盡可能挑出樣品中的石礫、新生體、侵入體、植物根等雜質(zhì)，分別放入表面皿或其它容器中；將土樣鋪平，用木棒輕輕輾壓，將輾碎的土壤用帶有篩底和篩蓋的篩孔的土篩過篩，并蓋好蓋、防止細(xì)土飛揚。不能篩過的部分，再行去雜，余下的土壤鋪開再次碾壓過篩，直至所有的土壤全部過篩，只剩下石礫為止。（樣品通過多大篩孔、應(yīng)依不同分析要求而定）?；靹蜓b瓶一將篩過的土壤全部倒在干凈的紙上，充分混勻后裝入 ?磨口瓶中保存。每個樣品瓶上應(yīng)貼兩個標(biāo)簽，大標(biāo)簽貼在瓶蓋上。書寫標(biāo)簽用 鉛筆或圓珠筆填寫，并在外面涂上一薄層石臘，以供長期保存。樣品保存和登記一大量樣品必須編號，建立樣品總帳，放在干燥的地方，按一定順序排列保存。樣品登記總帳時，應(yīng)記好剖面號數(shù)、采樣詳細(xì)地點、采樣人、處理日期以及石礫、新生體含量％……等詳細(xì)記載，以便隨時查尋。作業(yè)題1．在采集土樣過程中，為什么要強調(diào)代表性，它與室內(nèi)分析數(shù)據(jù)可靠性有何關(guān)系?2.土壤樣品制備包括哪些過程?你認(rèn)為哪一個過程最重要?實驗二、土壤全氮的測定—凱氏定氮法一、目的1、掌握土壤中全氮含量測定的方法。2、了解測定土壤全氮的原理二、原理土壤中的氮大部分以有機態(tài)(蛋白質(zhì)、氨基酸、腐殖質(zhì)、酰胺等)存在，無機態(tài)(、4NO-、NO-)含量極少，全氮量的多少決定于土壤腐殖質(zhì)的含量。3 2土壤中含氮有機化合物在還原性催化劑的作用下，用濃硫酸消化分解，使其中所含的氮轉(zhuǎn)化為氨，并與硫酸結(jié)合為硫酸銨。NH2-CH2-COOH+3H2SO4—NH3+2CO2f+3SO2T+4H2O2NH3+H2SO4—(NH4)2SO42CuSO4+C—Cu2SO4+CO2f+SO2fCu2SO4+2H2SO4—2CuSO4+SO2f+2H2OfSe+H2SO4—H2SeO3+2SO2f+2H2Of

H2SeO3—SeO2+H2Of

C+SeO2—Se+CO2f

加入硫酸鉀是為了提高硫酸的沸點，加快反應(yīng)速度。上述反應(yīng)如此循環(huán)，直至樣品消化完全。注意：加熱的溫度不能過高，時間不能過久，否則會使氨受到損失。(NH4)2SO4+H2SeO3—(NH4)2SeO3+H2SO4(NH4)2SeO3—9H2O+2NH3f+3Se+N2f給消化液加入過量的氫氧化鈉溶液，使銨鹽分解蒸餾出氨，吸收在硼酸溶液中，最后以甲基紅-溴甲酚綠為指示劑，用標(biāo)準(zhǔn)鹽酸滴定至粉紅色為終點，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)鹽酸的用量，求出分析樣品中的含氮全量。三、試劑：1混合催化劑：稱取硫酸鉀 、五水硫酸銅 、硒粉。均勻混合后研細(xì)。貯于瓶中。2、比重1.濃84硫酸。氫氧化鈉：稱 氫氧化鈉于燒杯中，加蒸餾水 、攪拌使之全部溶解。硼酸溶液：稱硼酸溶于 水中，再加入 混合指示劑。(按體積比加入混合指示劑)、混合指示劑：稱取溴甲酚綠 和甲基紅克溶解在的乙醇中用稀氫氧化鈉或鹽酸調(diào)節(jié)使之呈淡紫色，此溶液應(yīng)為.6 的鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：取比重的濃鹽酸，用蒸餾水稀釋至 ，用基準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)定之。五、操作步驟1、消煮：在分析天平上準(zhǔn)確稱取通過60號篩的風(fēng)干土0.50左0右0，甲移入干燥的消化管中，加入 的還原性混合催化劑。用注射器加入濃硫酸，放到通風(fēng)柜內(nèi)的消煮器上消煮左右。直至內(nèi)容物呈清徹的淡藍(lán)色為止。2、蒸餾：消煮完畢后冷卻。將三角瓶置于冷凝管的承接管下，管口淹沒在硼酸溶液中（三角瓶用的硼酸作吸收劑），然后打開冷凝器中的水流，進行蒸餾。在整個蒸餾過程中注意冷凝管中水不要中斷，當(dāng)接受液變籃后蒸餾將冷凝管下端離開硼酸液面，再用蒸餾水沖凈管外。3、滴定：用0.0當(dāng)0量1的鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至紅色為止。記錄所消耗的鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積。4、空白：除不加試樣外其余步驟完全相同。六、計算：土壤含氮量（）0滴定試樣時消耗的鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，的滴定空白時消耗的鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，。0鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的當(dāng)量濃度。土壤樣品重，甲0.01氮4的毫滴克當(dāng)量。注：鹽酸溶液的標(biāo)定間接標(biāo)定法：（）基準(zhǔn)物質(zhì)的稱取與溶解：將分析純的鄰苯二甲酸氫鉀于 C的烘箱內(nèi)烘用差減法準(zhǔn)確稱取 左右，共取三份，分別置 三角瓶中，加水 溶解。（）的溶液的配制，稱取分析純的 ，溶于水中，待標(biāo)。（） 溶液的標(biāo)定：給裝有鄰苯二甲酸氫鉀的三角瓶中滴兩滴酚酞指示劑，用 溶液滴定至微紅色，半分鐘顏色不消失即到終點。根據(jù) 的用量計算其準(zhǔn)確的當(dāng)量濃度，平行標(biāo)定的精密度應(yīng)在0.以2內(nèi)%。N__氫_氧_化鈉溶液的當(dāng)量濃度；基準(zhǔn)物質(zhì)的重量（）；E__基_準(zhǔn)_物質(zhì)的克當(dāng)量（甲）；消耗氫氧化鈉溶液的體積（的（）溶液的標(biāo)定：準(zhǔn)確取被標(biāo)定的鹽酸溶液，共份，置于 三角瓶中，加酚酞指示劑兩滴，用 溶液滴定至微紅色，半分鐘不褪色即可。根據(jù)氫氧化鈉的用量計算鹽酸溶液的準(zhǔn)確當(dāng)量濃度，精密度應(yīng)在0.2以內(nèi)%。直接標(biāo)定法：()基準(zhǔn)物質(zhì)的稱取與溶解：用差減法準(zhǔn)確稱取 左右的優(yōu)級純硼砂(四硼酸鈉：? 分子量： ；注意：硼砂的結(jié)晶水很容易風(fēng)化損失，所以稱前不宜烘烤)，247 2共三份，分別置 三角瓶中，加水 溶解。() 溶液的標(biāo)定：給盛硼砂溶液的三角瓶中加甲基紅一一溴甲酚綠混合指示劑兩滴，用鹽酸溶液滴定到淡紫紅色即到終點，根據(jù)鹽酸消耗的體積按間接法步驟(3)計算其準(zhǔn)確的當(dāng)量濃度。實驗三、土壤速效鉀的測定一、實驗?zāi)康囊饬x植物一般直接從土壤中吸收水溶性鉀，但交換性鉀可以很快和水溶性鉀達(dá)到平衡，因此土壤速效鉀包括水溶性鉀和交換性鉀。土壤重的交換性鉀是指由于靜電引力兒吸附在土壤膠體表面并能被加到土壤中鹽溶液的陽離子在短時間內(nèi)代換的那部分鉀。在測定土壤交換性鉀的過程當(dāng)中，如果不把水溶性鉀減去，所得的結(jié)果就是速效加了。速效鉀是最能直接反映土壤供鉀能力的指標(biāo)，尤其對季作物而言，速效鉀和作物吸收鉀量之間往往有比較好的相關(guān)性。由于交換性鉀的意義十分明確，因此，凡是能通過交換作用代換這部分鉀的試劑，都可用來作為提取劑。如、、 、、和 等，但用不同浸提3 2 2 43 43劑所得結(jié)果不一致。最常用的提取劑是中性的乙酸銨 1用作為43 4的代換離子有其它離子不能取代的優(yōu)越性，因為與的半徑相似，水化能也相似，這4樣能有效取代土壤礦物表面的交換性鉀，同時進入礦物層間，能有效地引起層間收44縮，不會使礦物層間的非交換性鉀釋放出來。因此將土壤顆粒表面的交換性鉀和礦物層4間的非交換性鉀區(qū)分出來，不會因提取時間和淋洗次數(shù)的增加而顯著增加鉀提取量，所以用作提取劑測得的交換性鉀結(jié)果比較穩(wěn)定，重現(xiàn)性好，而且 提取劑對火焰光度4 43計測鉀沒有干擾。在一些沒有火焰光度計的實驗室，速效鉀可用硝酸鈉溶液提取四苯硼鈉比濁法測定，用 提取是因為 在化學(xué)方法測定中對3 34的測定有干擾。但結(jié)果和乙酸銨提取法不一樣。二、方法原理：當(dāng)中性乙酸銨溶液與土壤樣品混合后，溶液中的與土壤顆粒表面的進行交換，取4代下來的和水溶性一起進入溶液，提取液中的鉀可直接用火焰光度計測定。三、試劑：乙酸銨溶液 ：稱取 溶于近水中，用稀43 43或氨水調(diào)至 ，然后定溶。鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液 ：稱取 (在 ℃下烘)溶于水中，定溶至L即為鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液。鉀標(biāo)準(zhǔn)系列溶液：吸取 的標(biāo)準(zhǔn)液、 、 、 、 分別放入容量瓶中，用乙酸銨溶液定溶，即得到： ?、 ?、 ?、 ?、?的鉀標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。四、操作步驟：稱取風(fēng)干土樣（顆粒小于）于塑料瓶中，加乙酸銨溶液 ，蓋緊瓶塞，在往復(fù)式振蕩機上振蕩 ，振蕩時最好恒溫，，但對溫度的要求不太嚴(yán)格，一般在20-℃2即5可。然后懸浮液用干燥濾紙過濾，其濾液可直接用火焰光度計測定鉀。同時測定鉀標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，在方格紙上以鉀數(shù)為橫坐標(biāo)，檢流計讀數(shù)為縱坐標(biāo)，繪成標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后用待測液的讀數(shù)在曲線上查出其數(shù)。五、結(jié)果計算：?pxX式中：一一速效鉀的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，-1p——儀器直接測得或從工作曲線上查得的測定液的濃度，-1——加入浸提液定溶體積，l——分取倍數(shù)，原待測液總體積和吸取的待測液體積之比，以原液直接測定時，比值為1；——樣品質(zhì)量，g注釋：（） 法測定結(jié)果的評價標(biāo)準(zhǔn)是：? < >供鉀水平 極低 中 高 極高作業(yè)：土壤中速效鉀包括那幾種形態(tài)？評價你所測定的土壤其速效含量的水平。實驗四、土壤有效磷的測定（ 浸提一鉬銻抗比色法）一、實驗?zāi)康募罢f明土壤中有效磷的含量，隨土壤類型、氣候、施肥水平、灌溉、耕作栽培措施等條件的不同而異。通過土壤有效磷的測定，有助于了解近期內(nèi)土壤供應(yīng)磷的情況，為合理施用磷肥及提高磷肥利用率提供依據(jù)。土壤速效磷的測定中，浸提劑的選擇主要是根據(jù)土壤的類型和性質(zhì)決定。浸提劑是否適用，必須通過田間試驗來驗證。浸提劑的種類很多，近20年各國漸趨于使用少數(shù)幾種浸提劑，以利于測定結(jié)果的比較和交流。我國目前使用最廣泛的浸提劑是 溶液法）測定結(jié)果與作物反應(yīng)有良好的相關(guān)性注,適用于石灰性土壤、中性土壤及酸性水稻土。此外還使用 一 溶液法為浸提劑，適用于酸4性土壤和中性土壤。同一土壤用不同的方法測得的有效磷含量可以有很大差異，即使用同一浸提劑，而浸提時的土液比、溫度、時間、振蕩方式和強度等條件的變化，對測定結(jié)果也會產(chǎn)生很大的影響。所以有效磷含量只是一個相對的指標(biāo)。只有用同一方法，在嚴(yán)格控制的相同條件下，測得的結(jié)果才有相對比較的意義。在報告有效磷測定的結(jié)果時，必須同時說明所使用的測定方法。二、方法原理石灰性土壤中磷主要以一磷酸鈣鹽的形態(tài)存在。中性土壤中一、一磷酸鋁鹽、一磷酸鐵鹽都占有一定的比例。 、可以抑制 的活性，3使某些活性更大的與結(jié)合的浸提出來；同時，也可使比較活性的一和一起水解作用而被浸出。在浸體液中由于、、濃度較低，不會產(chǎn)生磷的再沉淀。須用靈敏的鉬藍(lán)比色法測定。在一定酸度和三價銻離子存在下，磷酸與鉬酸銨形成銻磷鉬混合雜多酸，由于銻磷鉬雜多酸在20-℃6時0易為抗壞血酸還原為磷鉬藍(lán)，使顯色速度加快。磷含量高顏色則深，因而可用比色法測定磷的含量。當(dāng)土樣含有機質(zhì)較多時，會使浸出液顏色變深而影響吸光度，或在顯色出現(xiàn)渾濁而干擾測定，此時可在浸提振蕩前，向土壤懸液中加入活性碳脫色，振蕩浸提并脫色，或在分光光度計 波長處測定以消除干擾。三、試劑配制浸提劑 分析純?nèi)苡诩s 水中，稀釋33至，用濃調(diào)節(jié)至用計測定、貯于聚乙稀瓶或玻璃瓶中，用塞塞緊。該溶液久置因失去而使升高，所以如貯存期超過天，在使用前必須檢查并校準(zhǔn)值。磷2無、磷的活性碳粉和濾紙須做空白試驗，證明無磷存在。如含磷較多，須先用浸泡過夜，用水沖洗多次后再用 浸泡過夜，在布氏漏斗上抽濾，用水沖洗幾次，最后用蒸餾水淋洗三次，烘干備用。如含磷較少，則直接用3處理。鉬銻貯存液： 分析純濃硫酸，邊攪拌邊緩緩加入到 蒸餾水中冷卻。另稱取分析純鉬酸銨克溶于約℃的 蒸餾水中冷卻。然后，將硫酸溶液緩緩到入鉬酸銨溶液中不斷攪拌再加 酒石酸銻鉀溶液，冷卻后，用蒸餾水稀釋至搖勻，貯于棕色試劑瓶中。鉬銻抗顯色劑：于 鉬銻貯存液中加入抗壞血酸，此試劑有效期小時，宜配前使用。在室溫下有效期為 4在一C冰箱中可貯存天。磷標(biāo)準(zhǔn)貯備液= g稱取℃烘干的磷酸二氫鉀 ，分析24純 溶于 水中，加入 濃分析純、轉(zhuǎn)入容量瓶中，用水定容，24該貯備液可長期保存。磷標(biāo)準(zhǔn)工作液 ：將一定量的磷標(biāo)準(zhǔn)貯備液用 一 溶液準(zhǔn)確稀釋20倍，該標(biāo)準(zhǔn)工作液不宜久存（此溶液有效期只有半年）。三、操作步驟稱取通過 篩孔的風(fēng)干土樣 ，置于 塑料瓶中，加入 碳酸氫鈉浸提劑，在20-℃2下5振蕩30分鐘。取出后用干燥漏斗過濾于 干燥的三角瓶中同時做試劑空白。吸取浸體液 ，于 容量瓶中，加 鉬銻抗顯色劑（小心慢加，邊加邊搖，防止產(chǎn)生的使溶液噴出瓶口），等充分放出后，用水定溶至刻度。在室溫高于℃的條件下放置吩鐘，在分光光度計上于波長660I處比色，以空白實驗溶液為參比溶液調(diào)零點，讀取吸光度值，在工作曲線上查出顯色液的Pmg/ml數(shù)。顏色在內(nèi)保持穩(wěn)定。工作曲線的繪制：吸取磷標(biāo)準(zhǔn)溶液（mg/）0,i2 3 4 ,6ml分別置于個01容量瓶中，加入m鉬銻抗顯色劑，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。放置（分鐘，與試樣一同比色。標(biāo)液的濃度分別為0,0.i0.20.30.40.50.6%/ml。在坐標(biāo)紙上以P（唬/ml）為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)。繪制工作曲線。四、結(jié)果計算3（P）pXX/m式中：3（P）——土壤有效磷質(zhì)量分?jǐn)?shù)，mg/gp—-從工作曲線上查得顯色液中磷的濃度mg/；——顯色液體積，ml；——分取倍數(shù)，浸提液總體計/吸取浸體液體積；——風(fēng)干土質(zhì)量，g;平行測定的允許差測定值＜0mg/甄允許絕對差值＜0.mg/；g0 0mg/時絕對差值為＜mg/gP＞0mg/g時允許相對差＜%。注釋（）用0.m- 浸提一鉬銻抗比色法測定結(jié)果的評價標(biāo)準(zhǔn)如下: 土壤有效P（mg/g）＜ —0 ＞0 土壤有效P供應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)低（缺磷） 中等（邊緣值） 高（不缺磷）（溫度對測定結(jié)果影響較大，據(jù)北京地區(qū)土樣測定結(jié)果表明，溫度每升高℃,磷的含量相對增加約%,因此統(tǒng)一規(guī)定，在土l℃的恒溫條件下浸提。（振蕩機的振蕩頻率最好是約 0/m但—0/m勺振蕩機也可使用。（4）如果土壤有效磷含量較高,應(yīng)改為吸取較少量的濾出液（如土壤有效磷在30一60mg/g之間者吸ml在60—0mg/之間者吸ml并用0.ml 浸提劑補足至0.00ml后顯色。（當(dāng)顯色液中磷的濃度很低時，可與標(biāo)準(zhǔn)系列顯色液一起改用或 光徑比色杯測定。（6）鉬銻抗比色法磷顯色液在波長為 處有一個最大吸收峰，在波長為 - 0m處還有一個略低的吸收峰。因此最好選擇波長 處進行測定，此時靈敏度高，且浸出液中有機質(zhì)的黃色也不干擾測定。如所用的分光光度計無 波長，則可選在波長為660—0處或用紅色濾光片測定，此時浸出液中有機質(zhì)的顏色干擾較大，需用活性碳粉脫色后再顯色。（如果吸取濾出液少于0ml則測定結(jié)果應(yīng)再乘以稀釋倍數(shù)（0吸取濾出液體積ml）作業(yè)題1．土壤中磷的形態(tài)有哪幾種?有效磷的含義是什么?2．土壤中磷素的分布特征是什么?3．施用磷肥應(yīng)注意什么問題?

.用法測定土壤有效磷有何優(yōu)點.用法測定土壤有效磷有何優(yōu)點實驗五、土壤有機質(zhì)的測定有機質(zhì)是土壤的重要組成部分，其含量雖少，但在土壤肥力上的作用卻很大，它不僅含有各種營養(yǎng)元素，而且還是微生物生命活動的能源。土壤有機質(zhì)的存在對土壤中水、肥、氣、熱等各種肥力因素起著重要的調(diào)節(jié)作用，對土壤結(jié)構(gòu)、耕性也有重要的影響。因此土壤有機質(zhì)含量的高低是評價土壤肥力的重要指標(biāo)之一［注1］，是經(jīng)常需要分析的項目。測定土壤有機質(zhì)的方法很多，有重量法、滴定法和比色法等。重量法包括古老的干燒法和濕燒法，此法對于不含碳酸鹽的土壤測定結(jié)果準(zhǔn)確，但由于方法要求特殊的儀器設(shè)備、操作繁瑣、費時間，因此一般不作例行方法來應(yīng)用。滴定法中最廣泛使用的是鉻酸氧還滴定法，該法不需要特殊的儀器設(shè)備，操作簡便，快速、測定不受土壤中碳酸鹽的干擾，測定的結(jié)果也很準(zhǔn)確。重鉻酸鉀氧化還原滴定法根據(jù)加熱的方式不同又可分為外熱源法 法和稀釋熱法 一法，前者操作不如后者簡便，但有機質(zhì)的氧化比較完全是干燒法的90—9％5）．后者操作較簡便，但有機質(zhì)氧化程度較低（是干燒法的7—086％），而精密度較高，測定受室溫的影響大。比色法是將被土壤還原成的綠色或在測定中氧化劑一橙色的變化，用比色法測定之。這種方法的測定結(jié)果準(zhǔn)確性較差。本實驗選用鉻酸27氧還滴定的兩種方法。用鉻酸氧還滴定法測定土壤有機質(zhì)，實際上測得的是“可氧化的有機碳”，所以在結(jié)果計算時要乘以一個由有機碳換算為有機質(zhì)的換算因數(shù)。換算因數(shù)隨土壤有機質(zhì)的含碳率而定。各地土壤有機質(zhì)的組成不同，含碳率亦不一致，如果都用同一換算因數(shù)，勢必會產(chǎn)生一些誤差，但是為了便于各地資料的相互比較和交流，統(tǒng)一使用一個公認(rèn)的換算因數(shù)還是必要的，目前國際上仍然一致沿用古老的所謂“VanBemmelen”因數(shù)即1.724,這是假設(shè)土壤有機質(zhì)含碳為58％計算的。一、原理:在一定的溫度下,用一定量的氧化劑（標(biāo)準(zhǔn)重鉻酸鉀-硫酸溶液）來氧化土壤有機質(zhì),多余的重鉻酸鉀則用硫酸亞鐵來滴定。從消耗的氧化劑的量來計算有機碳和有機質(zhì)的含量。氧化有機質(zhì)： t返滴定：指示劑：鄰啡羅啉是常用的氧化還原指示劑，在滴定過程中，顏色逐漸由橙一綠一淡綠一橙紅即到終點。二、試劑：1.0.8N重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取經(jīng)過℃烘小時，的分析純重鉻酸鉀（ ）227克,溶解于40毫0升水中,必要時可加熱溶解,冷卻后稀釋定溶到1升,搖勻備用。2.0.2N硫酸亞鐵溶液：稱取化學(xué)純硫酸亞鐵（ - ）55.6克，（或硫酸亞鐵銨78.4克），42加6N硫酸30毫升溶解，加水稀釋定溶到1升，搖勻備用。.鄰啡羅啉指示劑：稱取化學(xué)純硫酸亞鐵0指6克9和5分析純鄰啡啰啉1指4克8溶5于10毫0升水中，此時試劑與硫酸亞鐵形成紅棕色絡(luò)合物，即 12（N2）3]+.石蠟（固體）或植物油4-5市斤.濃硫酸（比重1.84，化學(xué)純）。三、操作步驟:.稱樣：用分析天平準(zhǔn)確稱取通過孔徑0.2篩的風(fēng)干土0.000于20的硬質(zhì)試管中，加入0.1硫酸銀用移液管加入0.000重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液，再用注射器注入濃硫酸，小心搖勻。.預(yù)先將石蠟油浴鍋升溫至18—5190℃,將試管插入鐵絲籠中，并將鐵絲籠放入上述油浴鍋中加熱，此時溫度應(yīng)控制在170-18℃0，使溶液保持沸騰5分鐘，然后取出鐵絲籠,冷卻。.滴定：冷卻后，將試管內(nèi)溶物洗入20三角瓶中，使瓶內(nèi)總體積在0 左右，加鄰啡羅啉指示劑3滴，用0.2N硫酸亞鐵滴定，溶液由黃色經(jīng)過綠色突變到紅棕色，即為終點。記錄所消耗的硫酸亞鐵體積數(shù)。.在測定樣品的同時，必須同時做三個空白試驗，取其平均值。（可用純砂或燒土代替樣品，以免濺出溶液，其它同上）四、結(jié)果計算有機質(zhì)（） （NX（VV）X0.003X1.724X1.1X100]/Wo式中：0.003—碳的毫克當(dāng)量；1.724—由碳換算成有機質(zhì)的經(jīng)驗常數(shù)；1.1—校正常數(shù)；N- 的當(dāng)量濃度即：N 的當(dāng)量濃度*加入 的體積/VTOC\o"1-5"\h\z4 2 27 2 27 0V0一空白所耗的 4量；V一樣品耗的 量；4注釋（1）華北地區(qū)土壤有機質(zhì)含量一般約為0.6一1.5％，不同肥力等級的土壤有機質(zhì)含量約為：高肥力地上等肥力地中等肥力地低肥力地薄沙地2.%1.-2.0%1.0—1.%0.—1.0%〈0.5%⑵為了消除土壤中少量1的干擾，可以加入少量（約1. ），它不僅能沉淀-還24能促進有機質(zhì)分解。據(jù)研究，當(dāng)使用 時，氧化校正系數(shù)應(yīng)為1.04,不使用時為1.1。2424的用量不能太多，否則會生成2r沉淀而影響測定結(jié)果。水稻土或長期處于漬水條件下的土壤中，由于含有2和其它還原性物質(zhì)會影響測定結(jié)果，產(chǎn)生誤差，為了消除2的干擾,必須將新采回的土壤晾干壓碎、平鋪成薄層,每天翻動1一2次,在空氣中暴露十天左右之后,方可進行分析。⑶為了保證有機質(zhì)能被氧化完全。反應(yīng)終了時2r的濃度應(yīng)維持0. （1/2207）以上。據(jù)此，土樣的稱量應(yīng)視有機質(zhì)含量而定：含有機質(zhì)％左右的土樣約取0.2—4%的取樣0.3；2%的取樣0. %的取樣1左右。（4）土樣消煮時也可以采用石臘浴或其他油浴,由于磷酸不是有機質(zhì),可避免因污染而造成的誤差；器皿用后也易洗滌。但磷酸的腐蝕性較強,必須用玻璃容器裝置磷酸。（5必）須在試管內(nèi)溶液沸騰或有大氣泡生成時才開始計算時間。掌握沸騰的標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)盡量一致，繼續(xù)煮沸的5分鐘也應(yīng)盡量讀記準(zhǔn)確。（6本）實驗指導(dǎo)的各項實驗中用水，除冷卻水外，一律為普通蒸餾水或無離子水。作業(yè)題1．土壤有機質(zhì)含量不同對土壤肥力有什么影響？2.如何消除在測定過程中C1-、Fe2+的干擾及氧化不完全等問題？實驗六、土壤酸度的測定一、目的.了解土壤的酸堿性。.了解電位法測定土壤酸度的原理。二、原理土壤酸度的大小是用值的高低來表示，值越小，酸性越強。值是