局部用藥的毒性研究課件

第十九章

局部用藥的毒性研究局部用藥的毒性研究1第十九章

局部用藥的毒性研究局部用藥的毒性研究1

局部用藥的毒性試驗是根據(jù)局部用藥部位的解剖和生理特點設計的。

涂劑、擦劑皮膚用藥膏劑、凝膠劑

其他透皮吸收制劑常用局部用藥制劑滴眼劑、滴鼻劑噴霧劑、肌內注射直腸和陰道制劑局部用藥的毒性研究2局部用藥的毒性試驗是根據(jù)局部用藥部局部用藥的第一節(jié)皮膚用藥（制劑）的毒性研究一、皮膚組織結構表皮真皮皮下組織局部用藥的毒性研究3第一節(jié)皮膚用藥（制劑）的毒性研究一、皮膚組織結構局部用皮膚覆蓋全身。表皮較薄，厚為0.1-0.2mm。角質層

表皮顆粒層生發(fā)層真皮依附于皮下組織，厚約2mm。膠原

真皮彈性硬蛋白纖維母細胞局部用藥的毒性研究4皮膚覆蓋全身。局部用藥的毒性研究4二、化學物質對皮膚毒性作用的類型皮膚具有一定的保護作用，藥物及其他化學物質對皮膚產生的損害損害主要為：一）皮膚原發(fā)性刺激原發(fā)性刺激—--藥物直接作用于皮膚引起的病理性反應。紅斑、水腫原發(fā)性刺激的表現(xiàn)水皰瘡潰瘍局部用藥的毒性研究5二、化學物質對皮膚毒性作用的類型皮膚具有一定強堿脂溶性溶劑

原發(fā)性刺激機理

鎘酸鹽銀、汞、砷等金屬鹽

特征

有明確的毒理學量-效關系。首次接觸即可產生某種特征。局部用藥的毒性研究6局部用藥的毒性研究6二）皮膚致敏皮膚致敏為變態(tài)反應，包括藥物致敏和光敏反應。作用機制藥物與蛋白以共價鍵結合，具用免疫原性。藥物在光的作用下，形成半抗原性物質。

特征沒有明確的毒理學量-效關系。再次接觸該藥物才能激發(fā)特定癥狀。局部用藥的毒性研究7二）皮膚致敏局部用藥的毒性研究7三）皮膚致癌有機大分子化合物----多環(huán)芳烴類金屬鹽----無機砷鹽局部用藥的毒性研究8三）皮膚致癌局部用藥的毒性研究8三、皮膚用藥（制劑）毒性研究一）皮膚用藥急性毒性試驗

1、試驗目的-觀察完整與非完整皮膚短期內接觸受試物所產生的毒性反應。

2、實驗材料1）動物-家兔、豚鼠、大鼠2）受試藥物-膏劑、液體或粉末

3、試驗方法1）劑量選擇-3個劑量組2）給受試物方法和觀察-涂敷固定

4、結果判斷局部用藥的毒性研究9三、皮膚用藥（制劑）毒性研究一）皮膚用藥急性毒性試驗局部用藥二）皮膚用藥長期毒性試驗

1、試驗目的-觀察動物皮膚長期接觸受試物，對機體產生的異常毒性反應。

2、實驗材料1）動物-家兔、豚鼠或大鼠2）受試藥物-膏劑、液體幾粉末

3、試驗方法1）劑量選擇-3個劑量計對照組2）給受試物方法及時間-涂敷固定、每日一次至少6小時，按臨床用藥時間的3倍時間。局部用藥的毒性研究10二）皮膚用藥長期毒性試驗1、試驗目的-觀察動物皮膚長期接3）檢測項目-每日觀察皮膚臨床癥狀、皮膚病力學檢查；一般癥狀、血液學、血液生化指標及病理學檢查。

4、結果判斷

進行統(tǒng)計學計算，并應寫明安全劑量、中毒劑量、中毒的靶器官以及中毒的可逆性。局部用藥的毒性研究113）檢測項目-每日觀察皮膚臨床癥狀、局部用藥的毒性三）皮膚刺激性試驗

1、試驗目的-觀察動物皮膚接觸受試物后所產生的刺激反應情況。

2、實驗材料1）動物-家兔、豚鼠2）受試藥物-膏劑、液體或粉末

3、試驗方法-1g或1ml涂敷固定、于去除受試物后1、24、48和72小時觀察涂敷部位紅腫、紅斑以及上述變化的恢復情況和時間。局部用藥的毒性研究12三）皮膚刺激性試驗1、試驗目的-觀察動物皮膚接觸受試物后皮膚刺激反應評分反應分值反應分值紅斑水腫無紅斑0無水腫0略見紅斑1稍有水腫1中度紅斑2明顯可見(邊緣高出皮膚)2嚴重紅斑3皮膚隆起水腫輪廓清晰3紫色紅斑并有焦痂形成4水中隆起＞1mm4

總分8局部用藥的毒性研究13皮膚刺激反應評分局部用藥的毒性研究134、結果判斷與評價強度平均分值無刺激＜0.5(0-0.5)輕度刺激＜2.0(0.5-2.0)中度刺激＜4.0(0.5-4.0)嚴重刺激＜6.0(0.5-6.0)極嚴重刺激＞6.0(6.0-8.0)局部用藥的毒性研究144、結果判斷與評價局部用藥的毒性研究14四）皮膚過敏試驗1、試驗目的-通過動物皮膚重復接觸受試物，觀察機體免疫系統(tǒng)反映在皮膚上的表現(xiàn)。2、實驗材料1）動物-豚鼠2）受試藥物-膏劑、液體不稀釋直接涂敷3）陽性致敏物-2,4-而硝基氯代苯1%-致敏濃度0.1%-激發(fā)濃度局部用藥的毒性研究15四）皮膚過敏試驗1、試驗目的-通過動物皮膚重復接觸受試物，局3、試驗方法1）試驗分組隨機分成三組，給藥組、賦形劑組、陽性對照組2）致敏接觸0.1-0.2ml(g)涂于脫毛區(qū)，接觸6小時，第七天和14天亦同樣方法重復。3）激發(fā)接觸末次給藥后第14天，激發(fā)給藥，6、24、48和72小時觀察皮膚過敏情況。局部用藥的毒性研究163、試驗方法局部用藥的毒性研究164、結果判斷與評價皮膚過敏反應評分標準刺激反應程度分值刺激反應程度分值紅斑形成水腫形成無紅斑0無水腫0輕度紅斑1輕度水腫1中度紅斑2中度水腫2重度紅斑3重度水腫3水腫性紅斑4最高總分值7局部用藥的毒性研究174、結果判斷與評價局部用藥的毒性研究17致敏率分類過敏反應強度致敏率%弱致敏性0-10輕度致敏性10-30中度致敏性30-60高度致敏性60-80極度致敏性80-100紅斑形成總分+水腫形成總分反應平均值=合計動物總數(shù)局部用藥的毒性研究18致敏率分類局部用藥的毒性研究18皮膚涂抹致癌試驗1、試驗目的2、實驗材料1）動物-敏感品系鼠2）受試物3）陽性對照藥-苯比、巴豆油3、試驗方法1）試驗分組-陰性、陽性、實驗組2）給藥量-每周1-2次局部用藥的毒性研究19皮膚涂抹致癌試驗1、試驗目的局部用藥的毒性研究193）給藥方法4）給藥后觀察4、結果判斷與評價1）皮膚損傷程度2）組織病理學檢查3）皮膚腫瘤發(fā)生率計發(fā)生率與時間的關系，評定皮膚致癌的效應。局部用藥的毒性研究203）給藥方法局部用藥的毒性研究20五）皮膚吸收試驗1、整體皮膚吸收試驗

化合物經皮滲透的量同皮膚微灌流量直接相關，通過測量與皮膚灌流量相關的電壓，測算出化學經皮吸收速率。

1）LDV法

用643.8nm氦-氖激光，照射血管中流動中的紅細胞，測量用藥前后變化，測定出皮膚吸收速度。局部用藥的毒性研究21五）皮膚吸收試驗1、整體皮膚吸收試驗局部用藥的毒性研究212）PPG法

LED射出的800-940nm紅外線照射，收集反射光轉變成電壓波譜，通過電壓波譜變化，計算皮膚吸收量的大小。局部用藥的毒性研究222）PPG法局部用藥的毒性研究222、離體皮膚吸收試驗1）靜態(tài)滲透裝置上室防藥劑，下室接受液，下室中間方皮膚并密封，藥劑放于皮膚之上，每隔一定時間后，測定接受液，計算皮膚滲透率。2）流動滲透裝置上述方法的改進，接受液為血漿或白蛋白，以5ml/小時的速度灌流，測定不同時間灌流液的藥量。以次測定皮膚的透過率。局部用藥的毒性研究232、離體皮膚吸收試驗局部用藥的毒性研究23六）皮膚光敏試驗1、試驗目的-觀察受試物接觸皮膚后遇光照是否有光敏反應2、試驗方法1）光敏反應試驗評價標準2）光毒性試驗評價標準局部用藥的毒性研究24六）皮膚光敏試驗1、試驗目的-觀察受試物接觸皮膚后遇光照局部第二節(jié)眼睛用藥刺激性試驗眼睛的結構局部用藥的毒性研究25第二節(jié)眼睛用藥刺激性試驗眼睛的結構局部用藥的毒性研究2

角膜結膜炎炎癥角膜表面水腫上皮脫落刺激作用結膜充血、水腫灼痛、流淚、畏光

慢性結膜炎、瞼腺炎、分泌物增多局部用藥的毒性研究26局部用藥的毒性研究26

試驗目的角膜渾濁刺激性試驗試驗方法虹膜結果與評價結膜水腫分泌物局部用藥的毒性研究27局部用藥的毒性研究27一）試驗目的-觀察動物眼睛接觸受試物所產生的刺激反應二）試驗方法家兔，原液（原膏）加入眼睛腫0.1ml(0.1g)，閉合5-10分鐘。6、24、48和72小時至7天眼刺激情況。三）結果與評價局部用藥的毒性研究28一）試驗目的-觀察動物眼睛接觸受試物所產局部用藥的毒性研究2眼刺激反應評分眼刺激反應分值角膜渾濁0-4虹膜0-2結膜0-3水腫0-4分泌物0-3總分16局部用藥的毒性研究29眼刺激反應評分局部用藥的毒性研究29眼刺激性評價標準刺激程度積分無刺激性0-3輕度刺激性4-8中度刺激性9-12重度刺激性13-16局部用藥的毒性研究30眼刺激性評價標準刺激程度第三節(jié)肌內注射用藥局部刺激性試驗試驗目的-肌內注射后藥物對肌肉的刺激性反應情況。試驗方法

家兔6只，一側骨四頭肌注射供試物，另一側注射生理鹽水1-2ml作為對照，48小時處死動物，取骨四頭肌縱向剖開，肉眼觀察，觀察注射部位刺激情況，必要時作組織病理學檢查。局部用藥的毒性研究31第三節(jié)肌內注射用藥局部刺激性試驗試驗目的-肌內注射后藥家兔股四頭肌肌肉組織局部用藥的毒性研究32家兔股四頭肌肌肉組織局部用藥的毒性研究32結果與評價肌內注射刺激反應評分標準反應級數(shù)刺激反應0給藥部位無明顯反應1給藥部位輕度充血，直徑0.5cm以下2給藥部位中度充血，直徑1.0cm以下3給藥部位中度充血，紅腫，肌肉有變性4出現(xiàn)肌肉褐色變性，壞死0.5cm以下5肌肉嚴重變性，出現(xiàn)大片壞死超過2認為不符合規(guī)定，不可進行肌內注射局部用藥的毒性研究33結果與評價局部用藥的毒性研究33第四節(jié)靜脈給藥局部刺激性試驗

見第十七章：全身用藥毒性試驗中-血管刺激性試驗局部用藥的毒性研究34第四節(jié)靜脈給藥局部刺激性試驗見第十七章：局部用藥的毒第五節(jié)滴鼻劑和吸入劑的毒性試驗一、滴鼻劑和吸入劑急性毒性試驗

1、試驗目的–觀察受試物一次滴入或吸入后對動物產生的毒性反應或死亡情況。2、試驗方法3個劑量組，組距0.65-0.85,滴入或吸入4小時后即可以及7-14天觀察動物。3、結果評價局部用藥的毒性研究35第五節(jié)滴鼻劑和吸入劑的毒性試驗一、滴鼻劑和吸入劑急性毒性試二、滴鼻劑和吸入劑刺激性試驗

1、試驗目的-觀察受試物一次滴入或吸入后對動物產生的刺激反應。2、試驗方法將受試物滴入或噴霧與動物，24小時后處死動物，觀