高效液相色譜法測(cè)定化妝品中酮康唑、氯咪巴唑和吡羅克酮乙醇胺鹽

高效液相色譜法測(cè)定化妝品中酮康唑、氯咪巴唑和吡羅克酮乙醇胺鹽

根據(jù)中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，中國(guó)約60%的成年人受到不同程度的癲癇發(fā)作，其中15%的人非常嚴(yán)重。各種去屑劑(酮康唑、氯咪巴唑和吡羅克酮乙醇胺鹽等)曾被廣泛應(yīng)用于洗發(fā)水中,這3種去屑劑雖然去屑效果較好,但長(zhǎng)期使用對(duì)消費(fèi)者健康會(huì)產(chǎn)生一定影響。我國(guó)《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》(2007)中規(guī)定,酮康唑?yàn)榻梦镔|(zhì),氯咪巴唑和吡羅克酮乙醇胺鹽為限用物質(zhì),最大允許濃度均為5g/L。因此,化妝品中去屑劑含量的測(cè)定對(duì)于保護(hù)人體健康具有重要作用。目前,化妝品中的去屑劑和其他有害物質(zhì)成分的檢測(cè)常采用液相色譜法。但關(guān)于測(cè)定化妝品中酮康唑、氯咪巴唑和吡羅克酮乙醇胺鹽的檢測(cè)方法的報(bào)道較少。筆者建立了化妝品中酮康唑、氯咪巴唑和吡羅克酮乙醇胺鹽3種去屑劑含量的液相色譜測(cè)定法。1材料和方法1.1胺鹽、乙腈、米腈、米腈1100型高效液相色譜儀(配自動(dòng)進(jìn)樣器,二極管陣列檢測(cè)器檢測(cè)器,美國(guó)Agilent公司),2-16型離心機(jī)(德國(guó)Sigma公司)。酮康唑、氯咪巴唑和吡羅克酮乙醇胺鹽(純度均大于99%,德國(guó)Dr.Ehrenstorfer公司),乙腈(色譜純,德國(guó)Merck公司),MILLI-QGradient純水(美國(guó)Millipore公司)。0.01mol/L磷酸二氫鉀-1mmol/L乙二胺四乙酸二鈉緩沖溶液的配制:稱取1.3609g的磷酸二氫鉀(光譜純,上海試劑一廠)與0.3722g乙二胺四乙酸二鈉(工作基準(zhǔn)試劑,天津市化學(xué)試劑研究所)于1L容量瓶中,用純水溶解后,定容至刻度,振蕩均勻,再用磷酸調(diào)節(jié)水溶液的pH值至4.0,經(jīng)抽濾后待用。1.2緩沖溶液配制ZORBAXSB-C18高效液相色譜柱(4.6mm×150mm,5μm,美國(guó)Agilent公司),流動(dòng)相為乙腈∶緩沖鹽水溶液(含0.01mol/L磷酸二氫鉀和1mmol/L的乙二胺四乙酸二鈉溶液,磷酸調(diào)節(jié)pH值至4.0)體積比為60∶40,進(jìn)樣量為10μl,流量為1.0ml/min,檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm,柱溫為30℃。1.3腈定容、冷藏稱取酮康唑、氯咪巴唑和吡羅克酮乙醇胺鹽各0.5g于50ml容量瓶中,用乙腈定容,振蕩均勻,置于冰箱冷藏室保存。用乙腈配制酮康唑(1~250mg/L)、氯咪巴唑(1~500mg/L)和吡羅克酮乙醇胺鹽(10~500mg/L)標(biāo)準(zhǔn)系列溶液,以峰面積(y)對(duì)濃度(x)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。以3倍信噪比計(jì)算檢出限。1.4超聲離心時(shí)間稱取化妝品0.500g置于50ml錐形瓶中,準(zhǔn)確加入乙腈50ml,超聲30min,以12000r/min離心(離心半徑為5.5cm)10min,取上清液,經(jīng)0.45μm濾膜過(guò)濾,進(jìn)樣量10μl,根據(jù)峰的保留時(shí)間及光譜圖進(jìn)行定性,以峰面積進(jìn)行定量。2結(jié)果與討論2.1峰拖尾現(xiàn)象嚴(yán)重考察了多種流動(dòng)相條件,選擇甲醇-水(體積比為7∶3)作為流動(dòng)相,酮康唑、氯咪巴唑和吡羅克酮乙醇胺鹽的色譜峰拖尾現(xiàn)象比較嚴(yán)重。選擇甲醇-緩沖鹽水溶液(體積比為7∶3)時(shí),酮康唑與氯咪巴唑分離度差,而體積比改為6∶4時(shí),出峰時(shí)間太長(zhǎng),而且吡羅克酮乙醇胺鹽的峰有拖尾現(xiàn)象。為了改善分離效果,節(jié)約分析時(shí)間,選擇乙腈-緩沖鹽水溶液(體積比為6∶4)作為流動(dòng)相,結(jié)果顯示,3種去屑劑都能基線分離,整個(gè)分析過(guò)程在9min內(nèi)完成。2.2吸收nm上的化合物吡羅克酮乙醇胺鹽在210和300nm處的吸收最強(qiáng),酮康唑和氯咪巴唑在210nm處的吸收最強(qiáng)。因此,選定210nm波長(zhǎng)作為3種去屑劑的檢測(cè)波長(zhǎng)。3種去屑劑的色譜圖見(jiàn)圖1。2.3系數(shù)和檢出限3種去屑劑高效液相色譜測(cè)定法的線性范圍、回歸方程、相關(guān)系數(shù)和檢出限見(jiàn)表1。結(jié)果顯示,該方法測(cè)得的酮康唑、氯咪巴唑、吡羅克酮乙醇胺鹽的線性較好,檢出限分別為0.069、0.12、0.71mg/L,相關(guān)系數(shù)均>0.999。2.4標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制在空白化妝品中分別加入低(50mg/L)、中(100mg/L)、高(200mg/L)濃度的酮康唑、氯咪巴唑和吡羅克酮乙醇胺鹽混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn),重復(fù)測(cè)定6次,結(jié)果見(jiàn)表2。表2可見(jiàn),該方法的平均回收率在91.8%~98.5%之間,RSD在0.38%~0.84%之間。2.5洗發(fā)乳中酮康唑與吡羅克酮乙醇胺鹽的測(cè)定按試驗(yàn)方法對(duì)市售5種去屑洗發(fā)水和2種洗發(fā)乳中的3種去屑劑進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果顯示,5種洗發(fā)水中均未檢出酮康唑與吡羅克酮乙醇胺鹽,2種洗發(fā)乳僅檢出少量氯咪巴唑,含量分別為231與312mg/L,均符合《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》(2007)的限值要求。3去屑劑的選擇采