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文檔簡介

《磁性微球與離子交換分離純化生物大分子》Part1

基于磁性微球吸附的DNA純化Part2離子交換色譜在蛋白質(zhì)分離中的應用磁性微球吸附純化DNA

從復雜生物樣品中分離純化核酸或者制備核酸模板是許多分子生物學技術(shù)中的關(guān)鍵步驟。由于樣品基質(zhì)中存在大量的細胞裂解產(chǎn)物如蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì)，它們可能抑制下游處理中使用的聚合酶和限制性內(nèi)切酶的活性，也可能導致目標核酸的降解，因此，在進行核酸測序、擴增、雜交、酶切等操作之前都需要首先采取適當?shù)姆椒▽⒑怂釓幕旌衔镏蟹蛛x出來。常規(guī)的核酸提取方法涉及細胞裂解、有機溶劑萃取、沉淀和離心等步驟。這個過程費時費力，不易自動化。而新近發(fā)展起來的基于磁性微粒的固相提取方法使得核酸純化過程大為簡化，已經(jīng)在歐美國家獲得了廣泛的應用！磁性微球吸附純化DNA

種類大致以下幾種：二氧化硅磁性微球脲醛樹脂磁性微球聚苯乙烯磁性微球四氧化三鐵磁性納米微球g-Fe2O3磁性微球磁性微球吸附純化DNA

原理大多數(shù)的磁性微球分別以球形脲醛樹脂、二氧化硅和聚苯乙烯為基質(zhì)，通過在其中均勻分散納米磁性氧化鐵制備而成，具有粒徑分布均勻、磁場中沉降速度一致和超順磁響應性等特點。在磁性微球表面通過化學修飾結(jié)合上一系列不同的化學官能團及具有特異性的抗體、蛋白和核酸，可應用于核酸純化、細胞篩選、免疫分析、臨床診斷等多個領(lǐng)域，是醫(yī)學、分子生物學研究中不可或缺的分離純化工具。磁性微球吸附純化DNA

優(yōu)點基于磁性微粒的核酸純化技術(shù)是利用親水性磁性微粒吸附樣品溶液中的核酸分子，在外加磁場作用下將負載核酸的磁性微粒從樣品溶液中分離出來，經(jīng)適當清洗后，加入適當?shù)娜芤菏沟煤怂釓拇判晕⒘Ｉ厦摳郊吹玫郊兓怂?。核酸純化步驟不僅可以在常規(guī)的試管中以手工方式進行，也可以在96孔或382孔微孔板中以自動化方式進行。這些新型儀器使得核酸純化的基本步驟實現(xiàn)了自動化，無需進行乙醇沉淀、苯酚/氯仿萃取、離心和柱層析處理，從而避免連續(xù)重復的手工抽提，不僅減少了樣品損失與污染，還極大地提高了樣品處理的通量?；诖判晕⒘５暮怂岱蛛x純化試劑盒以其操作簡便快捷和省時省力的特點，成為目前分子生物學和臨床醫(yī)學研究的理想的輔助工具。磁性微球吸附純化DNA

目前已經(jīng)有基于磁性微球技術(shù)純化核酸與蛋白質(zhì)的試劑盒。一次操作的時間大約為1-2個小時。純化回收率約為80%以上。其A280/260值在1.7-2.0之間，可直接應用于后續(xù)核酸操作如

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