生物堿類藥物的分析（藥物分析檢驗(yàn)課件）

生物堿的含量測(cè)定非水滴定法提取酸堿滴定法酸性染料比色法紫外分光光度法高效液相色譜法（一）非水滴定法1.基本原理高氯酸置換出與生物堿結(jié)合的較弱的酸的反應(yīng)。BH+·A-：表示生物堿鹽類；

HA：表示被置換出的弱酸；不同HA在醋酸中的酸性情況如示：

HClO4

＞HBr＞H2SO4

＞HCl＞HSO4－＞HNO3

＞H3PO4及其它弱酸置換出的弱酸

生物堿類鹽

2．基本方法取經(jīng)適當(dāng)方法干燥的供試品適量，加冰醋酸10～30mL，溶解。若供試品為氫鹵酸鹽，應(yīng)再加5％醋酸汞的冰醋酸溶液3～5mL，用高氯酸滴定液滴定至終點(diǎn)，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。（一）非水滴定法1.基本原理⑴溶劑的選擇Kb在10－8~10－10時(shí)，宜選冰醋酸作溶劑；Kb處于10－10~10－12時(shí)，宜選冰醋酸–醋酸酐作溶劑；Kb＜10－12時(shí)，選用酸性更強(qiáng)的醋酸酐作溶劑。⑵酸根的影響生物堿鹽類滴定反應(yīng)的實(shí)質(zhì)是置換滴定，為保證滴定反應(yīng)進(jìn)行完全，滴定生物堿的氫鹵酸鹽時(shí)，向冰醋酸中加入一定量的醋酸汞冰醋酸溶液，使氫鹵酸生成難解離的鹵化汞，再用高氯酸滴定，從而消除干擾。⑶指示終點(diǎn)的方法非水溶液滴定法采用電位法和指示劑法指示終點(diǎn)。3．問題討論常見生物堿非水滴定法終點(diǎn)判定藥物終點(diǎn)指示方法終點(diǎn)顏色鹽酸麻黃堿硫酸阿托品氫溴酸東莨菪堿硫酸奎寧硫酸奎尼丁鹽酸嗎啡硫酸嗎啡磷酸可待因咖啡因結(jié)晶紫結(jié)晶紫結(jié)晶紫結(jié)晶紫結(jié)晶紫結(jié)晶紫結(jié)晶紫結(jié)晶紫結(jié)晶紫翠綠色純藍(lán)純藍(lán)藍(lán)綠色綠色綠色綠色綠色黃方法：取本品約0.15g，精密稱定，加冰醋酸10ml，加熱溶解后，加醋酸汞試液4ml與結(jié)晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液顯翠綠色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正1mol的鹽酸麻黃堿與1mol的高氯酸反應(yīng)，每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于20.17mg的C10H15NO·HCl。中國藥典鹽酸麻黃堿原料的含量測(cè)定含量（％）＝

V：供試液消耗高氯酸的體積；V0:空白試驗(yàn)驗(yàn)消耗的高氯酸的體積；F:高氯酸（0.1mol/L）濃度校正系數(shù)；W：供試品取量。本法是利用生物堿鹽類可溶于水，游離堿不溶于水而溶于有機(jī)溶劑的一般通性，將生物堿鹽堿化、提取后滴定而建立的一種分析方法。基本方法是：將供試品溶于水或礦酸中，加入適當(dāng)?shù)膲A性試劑使生物堿游離出來，用適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑提取后，經(jīng)洗滌、脫水、過濾等處理后，采用：⑴直接滴定法；⑵剩余滴定法或；⑶返提取法。(二)提取酸堿滴定法1．基本原理與方法⑴堿化試劑能使生物堿游離的堿性試劑有氨水、碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉以及氫氧化鉀等。氨水的pkb＝4.76，屬于弱堿，不能使酚結(jié)構(gòu)成鹽，不能使酯鍵水解，也不易發(fā)生乳化現(xiàn)象，但其堿性強(qiáng)于大部分生物堿（pkb＝6～9），足以使生物堿游離出來，同時(shí)易于除去而對(duì)測(cè)定無干擾，是首選的堿化試劑。⑵提取溶劑：①沸點(diǎn)低，與水不相混溶，對(duì)生物堿具有極大的溶解度而對(duì)其他物質(zhì)不溶或幾乎不溶，可以是單一溶劑，也可是混合溶劑。②與生物堿及堿化試劑不發(fā)生任何反應(yīng)。⑶提取溶劑的用量和提取終點(diǎn)的確定⑷指示劑的選擇2．問題討論取本品15片（30mg規(guī)格）或25片（15mg規(guī)格），精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于磷酸可待因15g），置100ml量瓶中，加水適量使成混懸液，加0.25mol/L硫酸溶液20ml，時(shí)時(shí)振搖約30min，使磷酸可待因溶解，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液50ml，置分液漏斗中，加氨試液使成堿性，用三氯甲烷振搖提取至少4次，第一次25ml，以后每次各15ml，至可待因提盡為止，每次得到的三氯甲烷液均用同一份水10ml洗滌，洗液用三氯甲烷5ml振搖提取，合并三氯甲烷液，置水浴上蒸干，精密加硫酸滴定液（0.01mol/L）25ml，加熱使溶解，放冷，加甲基紅指示液2滴，用氫氧化鈉滴定液（0.02mol/L）滴定，每1ml硫酸滴定液（0.01mol/L）相當(dāng)于8.488mg的磷酸可待因。磷酸可待因片的含量測(cè)定在適當(dāng)?shù)膒H條件下，生物堿類藥物（B）可與氫離子結(jié)合成鹽（BH+），一些酸性染料（如溴酚藍(lán)、溴麝香草酚藍(lán)、溴甲酚綠等）可解離成陰離子（In－）。陽離子與陰離子定量結(jié)合成有色離子對(duì)化合物（BH+?In－），可以定量的被有機(jī)溶劑提取，在一定波長(zhǎng)處測(cè)定該有色溶液的吸收度，即可測(cè)定生物堿的含量。（三）酸性染料比色法1．基本原理⑴水相最佳pH值的選擇水相pH值的選擇極為重要，要求選擇的pH值既使生物堿完全解離成陽離子，同時(shí)又能使酸性染料解離出足夠的陰離子，陰陽離子定量結(jié)合形成離子對(duì)并完全溶于有機(jī)溶劑中，而過量的酸性染料完全保留在水相中，才能定量測(cè)定。⑵酸性染料的選擇本法所選用的酸性染料不但要求與生物堿定量結(jié)合，而且生成的離子對(duì)在有機(jī)相中溶解度大，染料本身易溶于水而在有機(jī)相中不溶或微溶；生成的離子對(duì)在其最大吸收波長(zhǎng)處有較大的吸收度。常用的酸性染料有溴麝香草酚藍(lán)、甲基橙、溴甲酚綠等。酸性染料的濃度對(duì)測(cè)定結(jié)果影響不大，只要足夠量即可。2．影響因素⑶有機(jī)溶劑的選擇一般選擇對(duì)離子對(duì)提取率高，不與或少與水混溶，或能與離子對(duì)形成氫鍵的有機(jī)溶劑作為溶劑。常用的有機(jī)溶劑有三氯甲烷、二氯甲烷、二氯乙烷、苯、甲苯、四氯化碳等。⑷水分的影響提取過程中，應(yīng)嚴(yán)防水分混入有機(jī)溶劑中。因?yàn)槲⒘克謺?huì)使有機(jī)溶劑混濁而影響比色；此外水分也會(huì)帶入一定量的酸性染料，產(chǎn)生吸收使測(cè)定結(jié)果偏高。因此要用脫水劑或干燥濾紙過濾以除去水分。⑸有色雜質(zhì)的影響在加入供試品之前，將緩沖液與酸性染料的混合液先用所選用的有機(jī)溶劑提取，以消除有色雜質(zhì)的干擾。精密量取本品適量（約相當(dāng)于硫酸阿托品2.5mg），置50ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，另取硫酸阿托品對(duì)照品25mg，精密稱定，置25ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加水稀釋釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。精密量取對(duì)照品溶液與供試品溶液各2ml，分別置預(yù)先精密加入三氯甲烷10ml的分液漏斗中，各加溴甲酚綠溶液2.0ml，振搖提取2分鐘后，靜置使分層，分取澄清的三氯甲烷液，照紫外-可見分光光度法，在420nm的波長(zhǎng)處分別測(cè)定吸光度，依法計(jì)算含量。硫酸阿托品注射劑的含量測(cè)定含量計(jì)算Ax和AR

：供試品溶液和對(duì)照品溶液的吸光度；

CR

：對(duì)照品溶液的濃度（mg/ml）；

50：供試品溶液的體積（ml）；

Vx：取樣量（ml）；1.027：分子量換算因數(shù)，系1g無水硫酸阿托品相當(dāng)于硫酸阿托品(C17H23NO3)2·H2SO4·H2O的克數(shù)。生物堿分子結(jié)構(gòu)中含有不飽和雙鍵或芳香環(huán)等生色團(tuán)，可在紫外光區(qū)產(chǎn)生吸收，故可用紫外分光光度法測(cè)定這些藥物的含量。常用的方法為對(duì)照品比較法。（四）紫外分光光度法1．基本原理【實(shí)例分析】鹽酸嗎啡片的含量測(cè)定取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于鹽酸嗎啡10mg），置100ml量瓶中，加水50ml，振搖，使鹽酸嗎啡溶解，用水稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液15ml，置50ml量瓶中，加0.2mol/L氫氧化鈉溶液25ml，用水稀釋至刻度，搖勻，照紫外-可見分光光度法，在250nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度；另取嗎啡對(duì)照品適量，精密稱定，用0.1mol/L氫氧化鈉溶液溶解并定量稀釋制成每1ml約含20

g的溶液，同法測(cè)定，計(jì)算，結(jié)果乘以1.317，即得鹽酸嗎啡(C17H19NO3·HCl·3H2O)的含量

高效液相色譜法在生物堿類藥物的含量測(cè)定中，應(yīng)用越來越廣泛。利用本法可以十分有效地分離和測(cè)定本類藥物及其分解物。中國藥典（2015）中，本類藥物多個(gè)制劑品種新增用本法。如《中國藥典》（2015）對(duì)磷酸可待因片的含量測(cè)定采用本法。色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇－0.03mol/L醋酸鈉（用冰醋酸調(diào)解pH值至3.5）（1︰2.5）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm；理論板數(shù)按磷酸可待因峰計(jì)算不低于2000，磷酸可待因峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。五、高效液相色譜法測(cè)定法取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量(約相當(dāng)于磷酸可待因30mg),置100ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過；精密量取10μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖;另取磷酸可待因?qū)φ掌愤m量，精密稱定，加水溶解并定量稀釋成每1ml中含0.3mg的溶液，同法測(cè)定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。計(jì)算磷酸可待因時(shí)乘以換算系數(shù)1.068。藥物含量測(cè)定方法鹽酸麻黃堿硫酸阿托品氫溴酸東莨菪堿消旋山莨菪堿硫酸奎寧硫酸奎尼丁非水溶液滴定法（原料、注射液）、比色法（滴鼻液）非水溶液滴定法（原料）、酸性染料比色法（片劑、注射液）非水溶液滴定法（原料）、酸性染料比色法（片劑、注射液）酸堿滴定法（原料）、高效液相色譜法（片劑）、提取酸堿滴定法（注射液）非水溶液滴定法（原料）、堿化，三氯甲烷提取—非水溶液滴定法（片劑）非水溶液滴定法（原料、片劑）常用生物堿藥物含量測(cè)定方法藥物含量測(cè)定方法鹽酸嗎啡硫酸嗎啡磷酸可待因鹽酸小檗堿硝酸士的寧利血平非水溶液滴定法（原料）、紫外-可見分光光度法（片劑、注射液）高效液相色譜法（緩釋片）非水溶液滴定法（原料）、高效液相色譜法（緩釋片）非水溶液滴定法（原料）、提取酸堿滴定法（片劑）氧化還原滴定法（原料）、高效液相色譜法（片劑、膠囊劑）非水溶液滴定法（原料）、紫外-可見分光光度法（注射液）比色法（原料）、熒光分光光度法（片劑）常用生物堿藥物含量測(cè)定方法生物堿的鑒別試驗(yàn)（一）一般鑒別試驗(yàn)熔點(diǎn)法顯色反應(yīng)沉淀反應(yīng)紫外分光光度法紅外光譜法色譜法固體生物堿類藥物大多具有一定的熔點(diǎn)某些生物堿藥物采用測(cè)定游離生物堿熔點(diǎn)的鑒別方法1.熔點(diǎn)測(cè)定磷酸可待因的鑒別取本品約0.2g，加水4ml溶解后，在不斷攪拌下滴加20％氫氧化鈉溶液至出現(xiàn)白色沉淀，用玻璃棒摩擦器壁使沉淀完全，濾過；沉淀用水洗凈，在105℃干燥1小時(shí)，測(cè)定熔點(diǎn)為154～158℃。常用顯色試劑有濃硫酸、濃硝酸、鉬硫酸、礬硫酸、甲醛-硫酸、硫酸鈰銨等顯色反應(yīng)的機(jī)制可能是脫水、氧化、縮合等。2.生物堿顯色反應(yīng)取硝酸士的寧0.5mg，置蒸發(fā)皿中，加硫酸1滴溶解后，加重鉻酸鉀的結(jié)晶一小粒，周圍即顯紫色硝酸士的寧的鑒別常見生物堿的顯色鑒別試驗(yàn)表1生物堿類藥物鑒別顯色試劑試驗(yàn)現(xiàn)象茶堿磷酸可待因鹽酸小檗堿利血平硝酸士的寧重氮苯磺酸試液銅-吡啶試液亞硒酸硫酸液5％沒食子酸0.1％鉬酸鈉的硫酸溶液紅色三氯甲烷萃取層綠色即顯綠色，漸變藍(lán)色翠綠色即顯黃色，漸變藍(lán)色；生物堿類藥物鑒別顯色試劑試驗(yàn)現(xiàn)象硫酸長(zhǎng)春新堿硫酸長(zhǎng)春堿硫酸奎寧、奎尼丁硝酸毛果蕓香堿重鉻酸鉀1％硫酸鈰銨磷酸液1％硫酸鈰銨磷酸液溴試液、氨試液重鉻酸鉀、過氧化氫紫色即顯藍(lán)色，放置后漸變?yōu)樽陷郎达@紫紅色至暗紫紅色翠綠色三氯甲烷萃取層紫色常見生物堿的顯色鑒別試驗(yàn)表2常用的生物堿沉淀劑有：碘化鉍鉀、碘化汞鉀、碘-碘試液、二氯化汞等此反應(yīng)專屬性不高3.生物堿沉淀反應(yīng)常用的生物堿沉淀試劑為：1.重金屬鹽類，如K2HgI4、KBiI4、I2-KI、二氯化汞等；2.大分子酸類，如磷鉬酸、硅鎢酸等。如：咖啡因+碘紅棕色生物堿類藥物大都含有芳環(huán)、芳雜環(huán)以及共軛雙鍵結(jié)構(gòu)，具有特征的紫外吸收，可供鑒別。4.紫外分光光度法（1）對(duì)比吸收光譜的特征參數(shù)。（2）對(duì)比吸收光譜的一致性。（3）對(duì)比吸光度比值的一致性。生物堿類藥物大都含有芳環(huán)、芳雜環(huán)以及共軛雙鍵結(jié)構(gòu)，具有特征的紫外吸收，可供鑒別。4.紫外分光光度法（1）對(duì)比吸收光譜的特征參數(shù)。（2）對(duì)比吸收光譜的一致性。（3）對(duì)比吸光度比值的一致性。常見生物堿類藥物的紫外鑒別藥物溶劑濃度紫外鑒別秋水仙堿鹽酸偽麻黃堿硫酸嗎啡硫酸長(zhǎng)春堿磷酸川芎嗪

水水水0.1mol/LNaOH無水乙醇水10μg/ml0.5mg/ml0.015％0.015％20μg/ml15

g/mlA243/A350比值為1.70～2.00251nm、257nm、263nm處有最大吸收285nm處有最大吸收，吸光度為0.65，298nm處有最大吸收，吸光度為1.1215nm、264nm處有最大吸收295nm處有最大吸收5.紅外分光光度法紅外吸收光譜較紫外吸收光譜豐富，能反映分子結(jié)構(gòu)的細(xì)微特征，準(zhǔn)確度高，專屬性強(qiáng)?！吨袊幍洹罚?015）中收載的利用該法進(jìn)行鑒別的生物堿有茶堿、氨茶堿、嗎啡、阿托品、秋水仙堿等。薄層色譜法是藥物鑒別常用的分析方法，各國藥典采用薄層色譜法鑒別生物堿類藥物的品種正逐步增加。注意：硅膠是弱酸性吸附劑，對(duì)堿性化合物以及極性較大的化合物吸附力強(qiáng)，易造成嚴(yán)重的脫尾現(xiàn)象。應(yīng)用本法進(jìn)行鑒別時(shí)，生物堿應(yīng)保持游離狀態(tài)，同時(shí)加堿中和硅膠表面的弱酸性，以克服色斑拖尾現(xiàn)象。如USP〔38〕對(duì)硫酸阿托品注射液的鑒別即采用硅膠薄層板色譜法。6.薄層色譜法（二）生物堿特征鑒別試驗(yàn)雙縮脲反應(yīng)維他立（Vitaili）反應(yīng)氯奎寧（Thaqqeioquin）反應(yīng)甲醛–硫酸（Marquis）反應(yīng)Frohde反應(yīng)紫脲酸銨反應(yīng)Cu2+與仲胺基形成紫堇色配位化合物，溶于乙醚層顯紫紅色，四水配合物溶于水層呈藍(lán)色。無水配合物及一水配合物四水配合物乙醚水層雙縮脲反應(yīng)中國藥典（2015年版）鹽酸麻黃堿的鑒別取鹽酸麻黃堿約10mg，加水1ml溶解后，加硫酸銅試液2滴與20％的氫氧化鈉溶液1ml，即顯藍(lán)紫色；加乙醚1ml，振搖后，放置，乙醚層即顯紫紅色，水層變?yōu)樗{(lán)色。Vitali反應(yīng)酸性條件下，托烷類生物堿酯鍵水解，生成莨菪酸，莨菪酸為硝酸硝化為三硝基衍生物，在醇制氫氧化鉀堿性條件下，轉(zhuǎn)變?yōu)樽仙孽臀镔|(zhì)。Vitali反應(yīng)取供試品約10mg，加發(fā)煙硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黃色的殘?jiān)?，放冷，加乙?～3滴濕潤(rùn)，加固體氫氧化鉀一小粒，即顯深紫色?？鼘幒涂岫≡谒嵝匀芤褐?，與溴水（或氯水）及氨水發(fā)生綠奎寧反應(yīng)綠奎寧（Thalleioquin）反應(yīng)中國藥典（2015年版）硫酸奎寧鑒別取本品約20mg，加水20ml溶解后，分取溶液5ml，加溴試液3滴與氨試液1ml，即顯翠綠色嗎啡為含有酚羥基的異喹啉類生物堿，可與甲醛－硫酸反應(yīng)，產(chǎn)物為具有特征紫紅色的醌式化合物。甲醛-硫酸（Marquis）反應(yīng)方法：取本品約1mg，加甲醛硫酸試液1滴，即顯紫堇色嗎啡與鉬硫酸試液發(fā)生顯色反應(yīng)，呈紫色-藍(lán)色-棕綠色的漸變。靈敏度為0.05μg。Frohde反應(yīng)方法：取本品約1mg，加鉬硫酸試液0.5ml，即顯紫色，繼變?yōu)樗{(lán)色，最后變?yōu)樽鼐G色。黃嘌呤生物堿與鹽酸及氯酸鉀加熱后，咪唑環(huán)開環(huán)，遇氨氣即縮合生成四甲基紫脲酸銨，顯紫色紫脲酸銨反應(yīng)方法：取本品約10mg，加鹽酸1ml與氯酸鉀0.1g，置水浴上蒸干，遺留淺紅色的殘?jiān)?，遇氨氣即變?yōu)樽仙辉偌託溲趸c試液數(shù)滴，紫色即消失（三）無機(jī)酸根鑒別試驗(yàn)氯化物的鑒別試驗(yàn)硫酸鹽的鑒別試驗(yàn)硝酸鹽的鑒別試驗(yàn)磷酸鹽的鑒別試驗(yàn)溴化物的鑒別試驗(yàn)鹽酸麻黃堿硫酸阿托品硝酸士的寧磷酸川芎嗪氫溴酸東莨菪堿①取供試品試液，加硝酸使成酸性后，加硝酸銀試液，即生成白色凝乳狀沉淀；分離，沉淀加氨試液即溶解，再加硝酸，沉淀復(fù)生成。如供試品為生物堿或其他有機(jī)堿的鹽酸鹽，須先加氨試液使成堿性，將析出的沉淀濾過除去，取濾液進(jìn)行試驗(yàn)。②取供試品少量，置試管中，加等量的二氧化錳，混勻，加硫酸濕潤(rùn)，緩緩加熱，即發(fā)生氯氣，能使?jié)駶?rùn)的碘化鉀淀粉試紙顯藍(lán)色氯化物的鑒別反應(yīng)①取供試品溶液，滴加氯化鋇試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀在鹽酸或硝酸中均不溶解。②取供試品溶液，滴加醋酸鉛試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀在醋酸銨試液或氫氧化鈉試液中溶解。③取供試品溶液，加鹽酸，不生成白色沉淀（與硫代硫酸鹽區(qū)別）硫酸鹽的鑒別反應(yīng)①取供試品溶液，置試管中，加等量的硫酸，小心混合，冷后，沿管壁加硫酸亞鐵試液，使成兩液層，接界面顯棕色。②取供試品溶液，加硫酸與銅絲，加熱，即發(fā)生紅棕色的蒸汽。③取供試品溶液，滴加高錳酸鉀試液，紫色不應(yīng)褪去（與亞硝酸鹽區(qū)別）硝酸鹽的鑒別反應(yīng)①取供試品的中性溶液，加硝酸銀試液即生成淺黃色沉淀；分離，沉淀在氨試液或稀硝酸中均易溶解。②取供試品溶液，加氯化銨鎂試液，即生成白色結(jié)晶性沉淀。③取供試品溶液，加鉬酸銨試液與硝酸后，加熱即生成黃色沉淀；分離，沉淀能在氨試液中溶解。磷酸鹽的鑒別反應(yīng)①取供試品溶液，加硝酸銀試液，即生成淡黃色凝乳狀沉淀；分離，沉淀能在氨試液中微溶，但在硝酸中幾乎不溶。②取供試品溶液，滴加氯試液，溴即游離，加三氯甲烷振搖，三氯甲烷層顯黃色或紅棕色溴化物的鑒別反應(yīng)生物堿的結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)什么是生物堿生物堿是生物體內(nèi)含氮有機(jī)化合物的總稱，大都具有特殊而顯著的生理活性，絕大多數(shù)存在于植物體內(nèi)，治療劑量與中毒劑量較接近苯烴胺類托烷類喹啉類異喹啉類吲哚類黃嘌呤類

123多數(shù)具有堿性，且可以和酸成鹽大部分為雜環(huán)化合物，且氮原子在雜環(huán)內(nèi)生物堿的特點(diǎn)多數(shù)具有較強(qiáng)的生理活性罌粟是兩年生草本植物，內(nèi)含30多種生物堿，其中主要含嗎啡，含量為10-15%，此外還含有少量的罌粟堿（約1%）、可待因（約1%）等。麻黃作為一種傳統(tǒng)中藥材，至今已有四千多年的應(yīng)用歷史。麻黃中含有一種叫麻黃素的生物堿有顯著的中樞興奮作用，長(zhǎng)期使用可引起病態(tài)嗜好及耐受性，是制造冰毒的前體，被納入我國二類精神藥品進(jìn)行管制長(zhǎng)春花不僅姿態(tài)優(yōu)美，花期長(zhǎng)，還是一種防治癌癥的良藥。據(jù)現(xiàn)代科學(xué)研究，長(zhǎng)春花中含有55種生物堿，其中長(zhǎng)春新堿對(duì)治療絨毛癌等惡性腫瘤、淋巴瘤及兒童急性白血病等都有一定療效，是目前國際上應(yīng)用最多的抗癌植物藥源。顛茄含顛茄生物堿，主要有效成分為莨菪堿，此外還有微量東莨菪堿等。一般制成顛茄膏、顛茄酊等制劑服用，有解除平滑肌痙攣、鎮(zhèn)痛、抑制腺體分泌、擴(kuò)大瞳孔等功效。主要用于治療胃及十二指腸潰瘍病等。一、基本結(jié)構(gòu)（一）苯烴胺類結(jié)構(gòu)特點(diǎn)N在側(cè)鏈上脂肪胺化學(xué)性質(zhì)堿性，與酸成鹽手性中心雙縮脲反應(yīng)紫外吸收鹽酸麻黃堿鹽酸偽麻黃堿****一、基本結(jié)構(gòu)（二）托烷類結(jié)構(gòu)特點(diǎn)莨菪醇莨菪烷化學(xué)性質(zhì)堿性，與酸成鹽手性中心維他立反應(yīng)硫酸阿托品氫溴酸東莨菪堿*一、基本結(jié)構(gòu)（三）喹啉類結(jié)構(gòu)特點(diǎn)苯并吡啶衍生物N在α位化學(xué)性質(zhì)堿性，與酸成鹽手性中心氯奎寧反應(yīng)硫酸奎寧硫酸奎尼丁一、基本結(jié)構(gòu)（四）異喹啉類結(jié)構(gòu)特點(diǎn)苯并吡啶衍生物N在β位化學(xué)性質(zhì)酸堿兩性手性中心磷酸可待因鹽酸嗎啡一、基本結(jié)構(gòu)（五）吲哚類結(jié)構(gòu)特點(diǎn)苯并吡咯衍生物硝酸士的寧·HNO3·H2O利血平·H2O一、基本結(jié)構(gòu)（六）黃嘌呤類結(jié)構(gòu)特點(diǎn)雙雜環(huán)化合物咪唑并嘧啶化學(xué)性質(zhì)游離堿紫脲酸銨反應(yīng)茶堿咖啡因二、生物堿的通性通性多與酸成鹽堿性多為左旋體有效旋光性游離堿難溶于水，成鹽后易溶于水溶解性生物堿的特殊雜質(zhì)檢查藥物特殊雜質(zhì)鹽酸嗎啡阿撲嗎啡、罌粟酸、有關(guān)物質(zhì)硫酸阿托品莨菪堿、有關(guān)物質(zhì)硫酸奎寧三氯甲烷-乙醇中不溶物、其他金雞納堿磷酸可待因有關(guān)物質(zhì)硝酸士的寧馬錢子堿利血平氯化物、有關(guān)物質(zhì)（一）生物堿中存在的主要特殊雜質(zhì)（二）檢查方法利用物理性質(zhì)差異利用化學(xué)性質(zhì)差異利用色譜行為差異⑴溶解行為的差異硫酸奎寧中“三氯甲烷–乙醇中不溶物”的檢查。檢查方法為：取供試品2g，溶于氯仿–無水乙醇（2∶1）混合溶液中，不溶物經(jīng)105℃干燥至恒重，殘?jiān)坏贸^2mg。⑵旋光性質(zhì)的差異《中國藥典》（2015）對(duì)硫酸阿托品中莨菪堿的檢查：供試品溶液濃度為50mg/mL時(shí)，旋光度不得超過–0.4°。⑶對(duì)光選擇性的差異《中國藥典》（2015）對(duì)利血平中氧化物的檢查：取本品20mg，置100mL量瓶中，加冰醋酸溶解并稀釋至刻度，搖勻，照紫外-可見分光光度法，在388nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，不得過0.10。1．利用物理性質(zhì)的差異⑴沉淀反應(yīng)由于本法專屬性和靈敏度較低，新版藥典收載較少?！吨袊幍洹罚?015）對(duì)磷酸可待因中“溶液的澄清度與顏色檢查”采用本法。⑵顯色反應(yīng)鹽酸嗎啡中阿撲嗎啡的檢查：?jiǎn)岱仍谒嵝匀芤褐屑訜?，可以?jīng)脫水、分子重排生成具還原性的阿撲嗎啡，其水溶液在碳酸氫鈉堿性條件下經(jīng)碘試液氧化生成水溶性綠色化合物，此產(chǎn)物能溶于乙醚，乙醚層顯深寶石紅色，水層仍顯綠色?！吨袊幍洹罚?015）規(guī)定50mg藥物經(jīng)處理后檢查，乙醚層不得顯紅色，水層不得顯綠色。2．利用化學(xué)性質(zhì)的差異《中國藥典》（2015）對(duì)包括秋水仙堿、鹽酸嗎啡、硫酸阿托品以及利血平等多個(gè)品種在內(nèi)的生物堿類藥物新增了“有關(guān)物質(zhì)”檢查。如利血平中“有關(guān)物質(zhì)檢查”：照含量測(cè)定項(xiàng)下的色譜條件，取對(duì)照溶液10μL注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的10%～20%。精密量取供試品溶液與對(duì)照溶液各10μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的2倍。供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰（扣除溶劑峰），單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液的1/2（0.5%），各雜質(zhì)峰面積之和不得大于對(duì)照溶液主峰面積的1.5倍（1.5%）。3.利用色譜行為的差異硫酸阿托品的質(zhì)量分析【性狀】本品為無色結(jié)晶或白色結(jié)晶性粉末；無臭。本品在水中極易溶解，在乙醇中易溶。熔點(diǎn)取本品，在120℃干燥4小時(shí)后，立即依法測(cè)定（通則0612），熔點(diǎn)不得低于189℃，熔融時(shí)同時(shí)分解。（1）托烷生物堿類的反應(yīng)（Vitali反應(yīng)）【鑒別】取供試品約10mg，加發(fā)煙硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黃色的殘?jiān)?，放冷，加乙?～3滴濕潤(rùn)，加固體氫氧化鉀一小粒，即顯深紫色。硫酸阿托品的水解產(chǎn)物莨菪酸黃色的三硝基衍生物醌型產(chǎn)物深紫色（2）紅外光譜法（3）水溶液顯硫酸鹽的鑒別反應(yīng)【鑒別】（1）莨菪堿方法：旋光度測(cè)定法取本品，按干燥品計(jì)算，加水溶解并制成每1ml中含50mg的溶液，依法測(cè)定（通則0621），旋光度不得過-0.40°?！緳z查】（2）有關(guān)物質(zhì)方法：HPL