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一實驗原理細胞內(nèi)各種結構的比重和大小等都不相同,在同一離心場內(nèi)的沉降速度也不相同,根據(jù)這一原理,常用不同介質(zhì)和不同轉速的離心,將細胞各種組分分級分離出來(cellfractionation)。組織細胞勻漿分級分離分析細胞器(細胞核和線粒體)的分級分離和鑒定差速離心法differentialcentrifugation原理:由低速到高速逐漸沉降將不同大小的顆粒分離。勻漿離心1000G20分鐘細胞核線粒體等離心15000G120分鐘微粒體離心0.26%脫氧膽酸鈉15000G20分鐘核糖體等離心20分鐘10000G差速離心法1取兔肝,用生理鹽水反復洗滌2稱取濕重約1g的兔肝置培養(yǎng)皿中,量取8ml預冷的勻漿緩沖液(蔗糖-氯化鈣溶液)加入,盡量剪碎肝組織3將剪碎的肝組織倒入勻漿器勻漿(勻漿器下段浸入盛有冰塊的小燒杯中保持低溫),勻漿徹底后,8層紗布過濾(先用少量勻漿緩沖液潤濕紗布),濾液轉移至玻璃離心管中。4平衡、離心,2500rpm,10min(上離心機前注意平衡每對離心管),將上清移入另一玻璃離心管中,沉淀用殘余液體吹打均勻涂片①,做好標記。5將上清按4步驟重新離心一次。棄沉淀,將上清移入用于高速離心的塑料管。6離心,13500rpm,10min(離心前注意平衡每對離心管),棄上清,留沉淀,用殘余液體吹打均勻涂片②7直接在剩余沉淀中加入0.5ml詹納斯綠染液染10min(吹打均勻),滴一滴在載玻片上,蓋上蓋玻片(吸水紙吸去多余染液),用油鏡觀察8在涂片①、②滴加甲苯胺蘭染液染10min,沖去染液,在高倍鏡下觀察二實驗方法三.實驗作業(yè):1.你
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