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序號:編碼: “挑戰(zhàn)杯”第十七屆云南師范大學(xué)學(xué)生課外學(xué)術(shù)科技作品競賽參作品名稱:昆明鯽魚寄生原蟲的調(diào)查與研究報告作品類別:□V自然科學(xué)類學(xué)術(shù)論文□哲學(xué)社會科學(xué)類社會調(diào)查報告和學(xué)術(shù)論文□發(fā)明制作昆明鯽魚的寄生原蟲的調(diào)查與研究報告楊紅琴 謝紅梅(云南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院昆明)(云南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院昆明)摘要:漁業(yè)是中國的傳統(tǒng)產(chǎn)業(yè),然而隨著集約化水產(chǎn)養(yǎng)殖的發(fā)展,由寄生蟲引發(fā)的魚類流行病頻繁暴發(fā),造成了較大的經(jīng)濟損失,國內(nèi)的許多學(xué)者對魚類寄生蟲進行了大量研究,但至今在云南開展對魚寄生蟲病的調(diào)查和研究較少,本文對我們的動物學(xué)綜合性實驗以及科研項目關(guān)于鯽魚的寄生原蟲的調(diào)查與研究做了簡略的報告,并對魚類寄生蟲病的研究方向做了展望。關(guān)鍵詞:鯽魚、寄生原蟲、魚病、實驗一、魚類寄生蟲研究現(xiàn)狀魚類具有重要的經(jīng)濟意義,漁業(yè)生產(chǎn)有投資少、收效快、效益高和不占用耕地等特點。隨著我國淡水漁業(yè)技術(shù)的不斷發(fā)展,養(yǎng)殖密度越來越大,魚病發(fā)生幾率和危害性也不斷提高,已逐漸成為制約國內(nèi)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的重要因素之一,其中寄生蟲病占據(jù)了一定的比例(宋選清,2003)。通常情況下,大多數(shù)寄生蟲對魚類不會產(chǎn)生明顯的危害,在穩(wěn)定的水生態(tài)系統(tǒng)中,宿主和寄生蟲種群之間常處于平衡狀態(tài);然而當環(huán)境與生態(tài)急劇改變時,寄生蟲就有可能大量侵入宿主,從而導(dǎo)致寄生蟲病暴發(fā),影響魚類生長、導(dǎo)致魚體消瘦、免疫力下降、抗病力差,而且魚品質(zhì)也極差,影響商品價格,給漁業(yè)生產(chǎn)造成很大損失,廣大漁戶迫切要求解決魚病防治問題(朱定貴,2007;鄒鶴寬等,2006)。早在公元前5世紀,我國就有關(guān)于魚類人工養(yǎng)殖的經(jīng)驗記錄,指出人工養(yǎng)殖魚類的環(huán)境必須適合養(yǎng)殖魚類的生活習(xí)性,魚才能健康成長。將魚病作為一門學(xué)科進行研究始于19世紀。20世紀30年代國際上很多學(xué)者對癤瘡病、粘細菌性魚病的病原學(xué)、病理學(xué)、流行病學(xué)和藥物防治等作了較多的研究。50年代初期,中科院水生生物研究所率先在國內(nèi)開展了魚類病害方面的研究,主要以四大家魚為對象,在病原體(蟲)的分離鑒定和有效殺滅藥物的篩選等方面取得了較大進展。50年代后歐、美國家又研究了普遍流行的魚類寄生蟲病,如由粘孢子蟲引起的旋轉(zhuǎn)病、小瓜蟲病、車輪蟲病、復(fù)口吸蟲病和錨頭鯉病等的生物學(xué)和防治方法。據(jù)黃立峰等1987年在《常見魚類寄生蟲病》記載,我國魚類常見寄生原蟲病有鞭毛蟲?。ㄥF體蟲病、隱鞭蟲病)、根足蟲病、孢子蟲?。ㄇ蛳x病、粘孢子蟲?。?、纖毛蟲?。ㄐ」舷x病、車輪蟲病……)和吸管蟲病等(黃立峰等,1987)。近幾年,昆明市的水產(chǎn)養(yǎng)殖行業(yè)的發(fā)展很快,特別是鯽魚養(yǎng)殖業(yè)。它作為人們?nèi)粘J秤敏~之一,與人們的生活密切相關(guān)。但至今在云南開展對魚寄生蟲病的調(diào)查和研究較少,僅馬成倫(馬成倫等,1986;1988;1996)對云南魚類寄生粘孢子蟲進行了調(diào)查研究,記述粘孢子蟲63種,其中新種6種。因此,近20年來,昆明地區(qū)淡水魚類寄生病原蟲的情況需要重新進行調(diào)查研究。二、調(diào)查與研究(一) 、目的通過對昆明鯽魚寄生原蟲的初步調(diào)查與研究,期望能對昆明淡水魚類的寄生原蟲的區(qū)系調(diào)查研究打下一定的理論基礎(chǔ)以及對魚病防治有一定的指導(dǎo)意義,為魚類資源的保護和水產(chǎn)病害的防護提供理論和實驗依據(jù)。(二) 、原理危害魚類的寄生原蟲很多,蟲體較微小。如粘孢子蟲寄生非常廣泛,幾乎對每種魚各種器官都能感染,甚至在同一條魚的同一器官內(nèi)有數(shù)種粘孢子蟲寄生,如球孢蟲,異形磺孢蟲。在鰱、鳙、鯉、鯽等由魚苗至成魚皆可感染。鯽魚為底棲性魚類,主要以底棲生物為食,也食水底的腐蝕碎片,因此極容易因吞入粘孢子成熟的孢囊散出的孢子而被感染。在魚體破損部分更容易被寄生原蟲所侵入,粘孢子蟲感染魚類,在魚皮膚和鰓等部位寄生,形成灰白色的點狀瘤狀囊腫,導(dǎo)致呼吸困難,生長發(fā)育受阻,引起大批死亡;或者引起腸道病如餅形磺泡蟲、鰱粘體蟲、對稱磺泡蟲等,在腸粘膜組織和腸外形成包囊,堵塞腸道并破壞組織細胞,妨礙攝食、消化吸收而消瘦致死。本實驗通過觀察鯽魚類皮膚、鰓和腸道寄生粘孢子蟲的體表特征,如點狀瘤狀囊腫和腸道孢囊來檢查魚是否感染粘孢子蟲,通過肉眼觀察、病原蟲制片和鏡檢觀察等簡單而又有效的方法進行研究,對其進行形態(tài)學(xué)研究,觀察其孢子或孢囊形態(tài)、生活史;對其進行分類研究,記錄和統(tǒng)計常見鯽魚的寄生原蟲種類及鑒別特征;結(jié)合上述兩方面研究,初步提出魚類寄生原蟲蟲防治的原則和方法。(三)、流程(四)、方法1、 查閱資料掌握扎實的專業(yè)理論基礎(chǔ)知識,著手準備實驗所需要的材料和設(shè)備:(1) 、儀器設(shè)備:生物顯微鏡、數(shù)碼互動攝像顯微鏡、數(shù)碼照相機、放大鏡、標簽、記錄本、玻片等。(2) 、藥品試劑:碘液、1%次甲基藍、香柏油、蒸餾水、50%酒精、70%酒精等2、 養(yǎng)殖環(huán)境調(diào)查:去漁場查看水源和塘面,了解常見魚類疾病及其預(yù)防,以及發(fā)病的經(jīng)過及已采取的措施等。觀察魚群的活動及病死情況,調(diào)查飼養(yǎng)管理和飼料情況。3、 魚體肉眼觀察:肉眼檢查是檢查魚病的主要方法之一,是從魚體患病部位找出病源,或由機體因病原體引起的反應(yīng)和表現(xiàn)的各種現(xiàn)象,為診斷魚病提供依據(jù)。對魚體要檢查的部位,主要包括體表、鰓、內(nèi)臟三部分。結(jié)合癥狀進行顯微觀察來辨別和鑒定。4、 病原蟲制片和鏡檢觀察:魚類的寄生蟲病有時會在某些部位出現(xiàn)一定的病理變化和某些特殊癥,可直接用肉眼作初步診斷。但有時有些疾病并無特殊明顯的癥狀,或由于病原體細小或隱藏于組織器官中時,就要制作臨時裝片進行顯微鏡觀察,以保診斷之準確。鏡檢制片方法:A、 水浸片:取少量受檢的組織或病灶,如鰓絲、消化道的內(nèi)含物、體表附著物、體表潰瘍處或粘液等于載玻片上,加上一滴蒸餾水后用鑷子將組織分散,加上蓋玻片,稍壓即可觀察。B、 壓片法:取一點組織塊于載玻片上,輕輕蓋上蓋玻片,輕壓令受檢組織壓成一透明薄片后即可進行檢查。檢查步驟:檢查病魚時,需按一定步驟順序進行,一般先體外,后體內(nèi)(體表、腮、鰭、體腔、腸道)5、 病癥和病原拍照:對有關(guān)病魚感染寄生原蟲后的癥狀用數(shù)碼相機拍照記錄,對個體的寄生原蟲等用數(shù)碼顯微鏡觀察并拍照。6、 寄生原蟲的染色及鑒定:(1) 寄生原蟲染色方法有吉姆薩染色法、硝酸銀染色法,但是實驗過程中一般直接滴加碘液進行鏡檢觀察,既節(jié)約又方便。(2) 蟲體鑒定方法:根據(jù)鏡檢染色、封固的裝片,查閱資料和圖譜,以鑒定其分類地位。三、結(jié)果分析1、通過調(diào)查與研究觀察到以下四個科六個種的寄生原蟲:粘體科粘體蟲屬中華粘體蟲MyxosomasinensisNieetLi,1973單極科單極蟲屬光滑單極蟲ThelohanellushovorkaeAchmerov,1960兩極科兩極蟲屬云南兩極蟲MyxidiumyunnannenseMa,sp.nov1,碘泡科碘泡蟲屬餅形碘泡蟲Myxobolusartus(Achmerov,1960)Chen,1990碘泡科碘泡蟲屬異形碘泡蟲MyxobolusdisparThelohan碘泡科碘泡蟲屬鯽碘泡蟲 Myxoboluscarassiiklokacewa,1914,2、上述寄生原蟲多寄生在魚體的腮、腎、膽囊等部位。3、 由此可以看出鯽魚的寄生原蟲多以碘泡科為主。4、 除了上述已鑒定出的七種外,在調(diào)查與研究過程中還觀察到寄生原蟲的孢囊、營養(yǎng)體、滋養(yǎng)體等以及多種未能鑒定出的蟲體。5、 防治建議:清塘?xí)r挖去過多的淤泥,再用生石灰或含氯消毒劑徹底消毒,殺滅池塘中冬眠的孢囊。做好苗種的檢疫工作,不能從寄生原蟲蟲高發(fā)區(qū)進魚種,魚種放養(yǎng)前用高錳酸鉀或敵百蟲和硫酸銅合劑浸洗,殺滅孢子,防止隨魚種進池。及時處理病死魚,患病的死魚,要及時從池塘中撈出埋掉,以避免病死魚體表的蟲體孢子散落池水中,被其他魚體接觸或吞食而感染。同時對接觸過患病魚的工具,需用濃石灰水或0.5克/平方米晶體敵百蟲與0.5克/平方米硫酸銅混合溶液浸泡,以防再度感染。投喂優(yōu)質(zhì)餌料,加強管理,增強魚體抗病力。目前尚無專門治療的理想藥物,發(fā)病時常采用0.5克/平方米晶體敵百蟲(含90%)與硫酸銅0.5克/平方米合劑,全池均勻潑灑3?4次,每次約間隔5天。保證水源清潔衛(wèi)生。四、討論通過上述結(jié)果分析我們可以看出不僅僅是對昆明鯽魚的寄生原蟲進行調(diào)查與研究,還需要對云南淡水魚類的寄生蟲有廣泛而又精確的調(diào)查與研究,當前我國各地魚類養(yǎng)殖業(yè)蓬勃發(fā)展,進行魚類寄生蟲區(qū)系調(diào)查,搞好魚類寄生蟲病的防治,顯得尤為重要。我們此次的調(diào)查與研究由于條件限制,涉及的面比較窄,做的實驗也屬于比較簡單的范疇,因此我們相信在更充分的實驗條件和資源下,對魚類的寄生蟲這一塊的研究有很大的潛力,可以從寄生蟲種類著手,或是很廣泛的魚病防治方面,粘孢子蟲的起源這個分類學(xué)方面,還有寄生蟲的寄生和生活史免疫以及孢子蟲的孢子散發(fā)機制等分子生物學(xué)角度進行研究,只有把寄生蟲研究透徹了,才能找到有效而又便捷的防治魚病的方法,進而對社會經(jīng)濟做出一定貢獻。參考文獻黃立峰,葉金云.常見魚類寄生蟲病[M].農(nóng)業(yè)出版社,1987馬成倫,陳啟瑬.中國動物志粘體動物門粘孢子綱[M].科學(xué)出版社,1998馬成倫,王慈生,蔡志華.云南省魚類寄生粘孢子蟲.動物分類學(xué)報,1986(7):236-243馬成倫.云南省魚類寄生粘孢子蟲[J].重慶師范學(xué)院學(xué)報(自然科學(xué)版),1996(6):1-9宋選清.魚病防治除蟲為先[J].北京水產(chǎn),2003(4):1朱定貴.我國魚類寄生蟲病研究概述[J].漁業(yè)致富指南,2007(13-14):48-57鄒鶴寬,鄒勇.幾
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