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文檔簡介
實驗二
果蠅唾腺染色體的觀察一、實驗目的1觀察認識果蠅唾腺染色體2學習解剖果蠅三齡幼蟲的唾腺及唾腺染色的制片方法
二、實驗原理剖取果蠅唾腺細胞進行制片觀察,可見到一個由4對染色體著絲粒結合形成的染色中心,以及向四周伸展的5條染色體臂(X、2L、2R、3L、3R),其中第4對染色體為粒狀,與染色中心密切相聯(lián),總稱為唾腺染色體。果蠅的唾腺位于幼蟲前端的食道兩側和神經球附近。其中第4對染色體為粒狀,與染色中心密切相聯(lián),總稱為唾腺染色體一個由4對染色體著絲粒結合形成的染色中心,以及向四周伸展的5條染色體臂(X、2L、2R、3L、3R),1881年意大利的細胞學家巴爾比尼(Balbiani)在雙翅目昆蟲搖蚊(chironmus)幼蟲的唾液腺細胞間期核中發(fā)現(xiàn)了一種巨大染色體。由于存在于唾液腺細胞,所以又稱為唾液腺染色體。1933年美國學者貝特恩(Painter)等又在果蠅和其它雙翅目昆蟲的幼蟲唾液腺細胞核中發(fā)現(xiàn)了巨大染色體。果蠅三齡幼蟲的唾液腺細胞處于永久早期,染色體解旋呈伸展狀態(tài).在幼蟲發(fā)育過程中細胞核中的DNA多次復制,但細胞、細胞核不分裂。復制后的染色單體DNA不分開,這種現(xiàn)象叫做核內有絲分裂,從而形成了多線染色體。加之唾液腺細胞中同源染色體互相靠攏在一起呈現(xiàn)一種聯(lián)會狀態(tài),而使其比一般體細胞中的染色體粗果蠅唾腺染色體特征1典型的多線染色體。它是果蠅睡腺細胞核內有絲分裂所致,即核內染色體中的染色線連續(xù)復制而染色體并不分裂.2巨型染色體:染色線可多達500-1000條,其長度和體積分別比其它細胞的染色體長100-200倍、大1000-2000倍3橫紋特征:由于每條染色體的染色線在不同的區(qū)段螺旋化程度不一,因而出現(xiàn)一系列寬窄不同、染色深淺不一或明暗相間的橫紋。不同物種染色體的橫紋數(shù)量、形狀和排列順序是恒定的。4可以結合遺傳實驗結果進行基因定位,易于進行染色體的缺失、重復、倒位和易位的細胞學觀察和研究。三、實驗材料黑腹果蠅的三齡幼蟲活體Drosophilamelanogaster
幼蟲:一齡(24小時)→二齡(24小時)→三齡,三齡體長4-5mm,幼蟲頭尖尾鈍,頭上有一黑色鉤狀口器。四、實驗用具及試劑1,用具:
解剖鏡、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、解剖針、吸水紙。2,試劑:0.9%生理鹽水,1mol/L鹽酸、1%醋酸洋紅染色液五、實驗步驟-取唾液腺1,
選取發(fā)育良好、蟲體肥大的三齡幼蟲,置于載玻片上,1滴生理鹽水;2,在雙筒解剖鏡下左手持鑷子壓住蟲體中后部,右手持解剖針按住頭部(即口器銷后處),輕輕向前拉動,使頭部扯離蟲體,從而拉出唾腺。3,這時可看到一對透明微白的長形小囊,即是由單細胞層構成的唾腺,在解剖鏡下隱約可其細胞界限;4,唾腺的一側有一條泡沫狀脂肪體,可用解剖針剔除。.選取發(fā)育良好、蟲體肥大的三齡幼蟲,置于載玻片上,加1生理鹽水,在雙筒解剖鏡下左手持鑷子壓住蟲體中后部,右手持解剖針按住頭部(即口器銷后處),輕輕向前拉動,使頭部扯離蟲體,從而拉出唾腺。這時可看到一對透明微白的長形小囊,即是由單細胞層構成的唾腺唾腺的一側有一條泡沫狀脂肪體,可用解剖針剔除制片及鏡檢1,解離:加1滴1mol/L鹽酸,放置3分鐘;2,染色:加1滴1%醋酸洋紅染色15-20mi
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