臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)十六 藥物敏感性試驗(yàn)(二)

實(shí)驗(yàn)十六藥物敏感性試驗(yàn)(二)[目的要求]1.熟悉細(xì)菌藥物敏感性試驗(yàn)的方法和臨床意義；2.掌握細(xì)菌藥物敏感性試驗(yàn)K-B法和微孔板稀釋法的操作方法和結(jié)果判斷。[實(shí)驗(yàn)內(nèi)容]1.K-B法測(cè)定青霉素、慶大霉素、新諾明、環(huán)丙沙星對(duì)金葡、大腸埃希菌的藥物敏感性（結(jié)果觀察）；2.微孔稀釋法測(cè)定慶大霉素對(duì)大腸埃希菌的MIC（結(jié)果觀察）；[結(jié)果觀察]1K-B法藥敏結(jié)果判斷測(cè)量抑菌圈直徑大?。╩m），判斷敏感性藥敏試驗(yàn)結(jié)果（紙片法）金黃色葡萄球菌大腸桿菌抑菌圈直徑判斷抑菌圈直徑判斷青霉素慶大霉素環(huán)丙沙星新諾明（單位：mm）藥敏結(jié)果判斷依據(jù)金黃色葡萄球菌其它細(xì)菌青霉素慶大霉素環(huán)丙沙星新諾明細(xì)菌藥物含量抑菌圈直徑（mm)耐藥中度敏感敏感10u<28>29<1111-21>22所有細(xì)菌所有細(xì)菌所有細(xì)菌10ug5ug23.75ug<1213-14>15<1516-20>21<1011-15>162.微孔稀釋法測(cè)定慶大霉素對(duì)大腸埃希菌的MIC（結(jié)果觀察）；能抑制細(xì)菌生長(zhǎng)但藥物濃度最低的該藥物濃度為MIC[實(shí)驗(yàn)報(bào)告]1.藥物的MIC測(cè)量結(jié)果(液體連續(xù)稀釋法）？2.藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果（紙片法）？補(bǔ)充：部分生化試驗(yàn)的原理p251.糖發(fā)酵試驗(yàn)：原理：細(xì)菌

糖、醇或糖苷-----------分解產(chǎn)酸、產(chǎn)氣（葡萄糖酸堿指示劑（酚紅-酸黃堿紅乳糖溴甲酚紫-酸黃堿紫木糖…）溴麝香草酚藍(lán)-酸黃堿藍(lán)結(jié)果描述：陰性；產(chǎn)酸產(chǎn)氣；只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣2.吲哚試驗(yàn)（靛基質(zhì)試驗(yàn)）原理：細(xì)菌柯氏試劑色氨酸---吲哚（無色）---玫瑰吲哚（紅）結(jié)果描述：陰性；陽性3.苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)原理：脫氨酶FeCL3苯丙氨酸---苯丙酮酸---螯合呈綠色化合物結(jié)果描述：綠色陽性；無色為陰性

4.脲酶試驗(yàn)原理：脲素酶尿素-------產(chǎn)氨（使培養(yǎng)基呈堿性）酚紅指示劑變紅結(jié)果描述：變紅陽性5.氨基酸脫羧酶試驗(yàn)（賴氨酸、鳥氨酸、精氨酸）原理：脫羧酶氨基酸--------產(chǎn)生胺（呈堿性）+CO2

溴甲酚紫（酸黃堿紫）由淺紫紅變紫溴麝香草酚藍(lán)（酸黃堿藍(lán)）由綠變藍(lán)結(jié)果描述：陽性；陰性6.枸櫞酸鹽（檸檬酸鹽）利用試驗(yàn)原理：培養(yǎng)基不含糖類，枸櫞酸鹽是唯一碳源，磷酸二氫銨是唯一氮源。細(xì)菌枸櫞酸鹽-------------分解利用產(chǎn)堿磷酸二氫銨溴麝香草酚藍(lán)由綠變深藍(lán)結(jié)果描述：陽性；陰性7.硝酸鹽還原試驗(yàn)原理：細(xì)菌還原某些細(xì)菌還原N2/NO硝酸鹽-------亞硝酸鹽、氨和氮.

培養(yǎng)基中的醋酸-------------亞硝酸

試劑A（對(duì)氨基苯磺酸）重氮苯磺酸

試劑B（a-萘酚）

N-a-萘酚偶氮苯磺酸（紅）結(jié)果描述：10分鐘內(nèi)紅色為陽性；陰性無色。假陰性排除：如細(xì)菌不還原，加鋅粉促進(jìn)硝酸鹽還原，再加AB出現(xiàn)紅色，為真正陰性不分解；如細(xì)菌還原了產(chǎn)生了氨和氮，但沒產(chǎn)生亞硝酸鹽，加鋅粉后仍沒亞硝酸鹽產(chǎn)生，加AB不變色，故為陽性，還原亞硝酸鹽。8.DNA酶試驗(yàn)