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免疫學(xué)及實(shí)驗(yàn)薛雅蓉O:83685469Cellphone/p>
前言學(xué)習(xí)免疫學(xué)的意義教材理論課計(jì)劃授課內(nèi)容實(shí)驗(yàn)理論課考核實(shí)驗(yàn)課考核一、學(xué)習(xí)免疫學(xué)的意義你為什么選修免疫學(xué)?列出你能想到的兩種疾病,查找其與免疫學(xué)的關(guān)系?截至11年2月2日,已有84人死亡幾篇免疫相關(guān)文章抑郁癥的免疫學(xué)研究及心理治療再談糖尿病免疫學(xué)研究的趨向腰椎間盤突出癥相關(guān)免疫學(xué)國(guó)內(nèi)研究概況腦出血的免疫學(xué)研究進(jìn)展慢性心力衰竭的免疫學(xué)研究進(jìn)展反復(fù)流產(chǎn)的免疫學(xué)研究進(jìn)展免疫學(xué)方法在有害赤潮藻細(xì)胞檢測(cè)中的應(yīng)用轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展魚蝦貝類的主要過(guò)敏原分子免疫學(xué)特性研究進(jìn)展課程簡(jiǎn)介:醫(yī)學(xué)免疫學(xué)是現(xiàn)代生命科學(xué)的前沿學(xué)科,是醫(yī)學(xué)和生物科學(xué)中的一門重要的專業(yè)基礎(chǔ)學(xué)科,免疫學(xué)理論和其獨(dú)特的研究技術(shù)方法使其在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)、生物技術(shù)、分子生物學(xué)等領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用。本課程針對(duì)的教學(xué)對(duì)象主要為學(xué)習(xí)生命科學(xué)的非醫(yī)學(xué)專業(yè)學(xué)生,因此,擬通過(guò)理論課教學(xué)和實(shí)驗(yàn)訓(xùn)練達(dá)到如下教學(xué)目的。教學(xué)目的與要求
1.使學(xué)生了解免疫學(xué)在現(xiàn)代生物科學(xué)中的重要作用并系統(tǒng)掌握免疫學(xué)的基本理論、基本概念、基礎(chǔ)知識(shí)、基本技能及現(xiàn)代免疫學(xué)發(fā)展的新理論,從生物機(jī)體的不同層次水平認(rèn)識(shí)免疫應(yīng)答的基本規(guī)律,了解免疫系統(tǒng)在生命活動(dòng)中的重要地位;
2、使學(xué)生了解重要疾病相關(guān)的免疫學(xué)知識(shí),為以后研究疾病的免疫學(xué)發(fā)病機(jī)理及免疫學(xué)方法控制打下良好的基礎(chǔ)。3、使學(xué)生掌握基本的免疫學(xué)技術(shù)原理及操作方法,有能力在以后的學(xué)習(xí)、工作中進(jìn)行免疫功能的檢測(cè)及將免疫學(xué)原理技術(shù)用于分子生物學(xué)、組織化學(xué)等檢測(cè)。理論課教材及參考書教材:《醫(yī)學(xué)免疫學(xué)》第四版,陳慰峰主編,人民衛(wèi)生出版社參考書:1、劉建欣、鄭昌學(xué)編《現(xiàn)代免疫學(xué)》第1版,清華大學(xué)出版社,20022、周光炎主編《免疫學(xué)原理》第1版,上??茖W(xué)技術(shù)出版社,20073、金伯泉《細(xì)胞及分子免疫學(xué)》第2版,科學(xué)出版社,20014、GabrielVirella《MedicalImmunology》,MARCELDEKKER,INC.,2001中國(guó)科學(xué)院院士,北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部免疫學(xué)系教授。系統(tǒng)從事胸腺內(nèi)T淋巴細(xì)胞分化研究。09年去世。陳慰峰周光炎上海交通大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院教授。主要研究領(lǐng)域:免疫調(diào)節(jié)和移植免疫金伯泉第四軍醫(yī)大學(xué)免疫學(xué)教研室教授。2000年在國(guó)際上為我國(guó)獲得第一個(gè)新的膜分子(人血小板/T細(xì)胞活化抗原1-PTA1)編號(hào)。實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)及參考書實(shí)驗(yàn)指導(dǎo):自編《免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)講義》參考書:1、實(shí)驗(yàn)者系列:免疫學(xué)。WernerLuttmann(德),KaiBratke,MichaelKupper等著,沈倍奮譯,科學(xué)出版社,2007第一版2、免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)。朱道銀,
吳玉章主編,科學(xué)出版社,2008第一版。《實(shí)驗(yàn)者系列:免疫學(xué)》譯者(沈倍奮)的話就像實(shí)驗(yàn)者系列叢書中其他的書一樣,本書注重以簡(jiǎn)單易懂的方式闡釋各種現(xiàn)代方法,并討論每種方法的優(yōu)點(diǎn)和不足。
該書所介紹的實(shí)驗(yàn)方法雖然不都是最新的,而且也沒(méi)有對(duì)當(dāng)今免疫學(xué)的所有領(lǐng)域面面俱到,但是本書中介紹的方法都是最實(shí)用最可靠的,不僅闡述了方法的原理,而且還詳細(xì)地介紹了實(shí)驗(yàn)步驟,分析了實(shí)驗(yàn)成敗的原因,與其它方法的比較。沈倍奮中國(guó)工程院院士,免疫生物化學(xué)專家。軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所研究員,全軍分子免疫學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室分子免疫學(xué)學(xué)科學(xué)術(shù)帶頭人。多年來(lái)從事生物化學(xué)和免疫學(xué)方面的工作,特別在單克隆抗體的研制和應(yīng)用上有很深的造詣。理論課計(jì)劃講課內(nèi)容第一章:概述第二章:免疫系統(tǒng)的組成、功能及相互關(guān)系第三章:抗原(antigen,Ag)第四章:免疫球蛋白第五章:補(bǔ)體系統(tǒng)第六章:細(xì)胞因子第七章:白細(xì)胞分化抗原及粘附分子第八章:主要組織相容性復(fù)合體及其編碼分子第九章:固有免疫的組成細(xì)胞及固有免疫應(yīng)答(第九、第十三)第十章:特異性免疫抗原提呈細(xì)胞與抗原的處理提呈(十四)T細(xì)胞與特異性細(xì)胞免疫(十和十五)B細(xì)胞與特異性體液免疫(十一和十六)第十一章:免疫調(diào)節(jié)(十七)第十二章:免疫耐受
(十八)第十三章:超敏反應(yīng)(十九)第十四章:自身免疫和自身免疫?。ǘ┑谑逭拢耗[瘤免疫(二十二)第十六章:抗感染免疫(另加)第十七章:免疫檢測(cè)技術(shù)(二十四)第十八章、免疫預(yù)防及免疫治療(二十五)計(jì)劃實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)一:弗氏佐劑的制備(第1周)實(shí)驗(yàn)二:抗血清制備第一次免疫動(dòng)物(第2周)實(shí)驗(yàn)三:小鼠脾淋巴細(xì)胞分離及活率檢測(cè)(第3周)實(shí)驗(yàn)四:體外中性紅法檢測(cè)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬能力另:兔子第一次加強(qiáng)免疫(第4周)實(shí)驗(yàn)五和六:T淋巴細(xì)胞數(shù)量(E花環(huán)形成實(shí)驗(yàn))及轉(zhuǎn)化功能的檢測(cè)(形態(tài)法),另:兔子第二次加強(qiáng)免疫
(第5~6周)實(shí)驗(yàn)七:免疫血清分離及保存(第7周)實(shí)驗(yàn)八:瓊脂雙擴(kuò)散檢測(cè)抗體效價(jià)(第8周)實(shí)驗(yàn)九和十:細(xì)菌凝集實(shí)驗(yàn)和酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)(第9、第10周)計(jì)劃實(shí)驗(yàn)內(nèi)容第9周:1、凝集實(shí)驗(yàn)-反應(yīng);2、ELISA檢測(cè)兔抗羊IgG抗體效價(jià):抗原稀釋及包板
第10周:完成凝集實(shí)驗(yàn)的觀察記錄及ELISA檢測(cè)及分析實(shí)驗(yàn)十一:硫酸銨法粗提IgG(11周)實(shí)驗(yàn)十二:抗體純化結(jié)果的凝膠電泳檢測(cè)(12周)實(shí)驗(yàn)十三:免疫單擴(kuò)散法和紫外分光光度法測(cè)定IgG(抗原)含量(13周)實(shí)驗(yàn)十四:流式細(xì)胞儀標(biāo)本的制備(熒光抗體標(biāo)記T細(xì)胞表面CD3分子)(14)實(shí)驗(yàn)十五:移植性腫瘤動(dòng)物模型的建立及藥物抑瘤實(shí)驗(yàn)
(15、16周)實(shí)驗(yàn)十六:免疫酶技術(shù)檢測(cè)組織抗原(17周)考核理論課考核:1、考勤及平時(shí)表現(xiàn):20%2、期末考試:40%3、期末綜述與平時(shí)作業(yè):40%實(shí)驗(yàn)課考核:1、考勤:30%2、實(shí)驗(yàn)表現(xiàn):20%3、實(shí)驗(yàn)報(bào)告:50%第一章:概述第一節(jié)、免疫、免疫系統(tǒng)及免疫學(xué)的概念第二節(jié)、免疫系統(tǒng)的基本功能第三節(jié)、免疫應(yīng)答的類型及特點(diǎn)第四節(jié)、免疫病理及類型第一節(jié):免疫、免疫系統(tǒng)及免疫學(xué)
一、免疫(Immunity)
傳統(tǒng)概念:免疫即免除疾病,指機(jī)體針對(duì)外來(lái)病原微生物產(chǎn)生的抗感染防御能力?,F(xiàn)代概念:機(jī)體免疫系統(tǒng)識(shí)別“自己”或“非己”,并排除“非己”以保護(hù)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的一種防御機(jī)制。什么是“自己”?什么是“非己”?二、免疫系統(tǒng)(immunesystem)
主宰或執(zhí)行機(jī)體免疫功能的器官、組織、細(xì)胞和分子組成的系統(tǒng)稱為免疫系統(tǒng)。是機(jī)體內(nèi)存在的一個(gè)能夠識(shí)別“自己”與“非已”成分,并能破壞和排斥“非已”成分,而對(duì)“自己”成分則能形成免疫耐受,不發(fā)生排斥反應(yīng),以維持機(jī)體的自身穩(wěn)定的系統(tǒng)。免疫系統(tǒng)整體的功能是排斥或耐受,但不是免疫系統(tǒng)每一個(gè)具體組成都有這樣的作用。三、免疫學(xué)及醫(yī)學(xué)免疫學(xué)免疫學(xué)(Immunology):研究機(jī)體免疫系統(tǒng)的組織結(jié)構(gòu)與生理功能的科學(xué)。醫(yī)學(xué)免疫學(xué):研究人體免疫系統(tǒng)的組織結(jié)構(gòu)、生理功能以及有關(guān)疾病的免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制、診斷和防治的一門學(xué)科。醫(yī)學(xué)免疫學(xué)研究?jī)?nèi)容分類1.基礎(chǔ)免疫學(xué)
主要研究抗原物質(zhì)、機(jī)體的免疫系統(tǒng)組成及功能、免疫應(yīng)答過(guò)程及免疫耐受、免疫調(diào)節(jié)、免疫效應(yīng)、免疫遺傳等生理現(xiàn)象。2.臨床免疫學(xué)主要研究人體健康和臨床疾病密切相關(guān)的各種免疫現(xiàn)象,如超敏反應(yīng)、免疫缺陷病、自身免疫病、腫瘤免疫和移植免疫等。自然科學(xué)基金第二節(jié)、免疫系統(tǒng)的基本功能免疫系統(tǒng)具備的能力識(shí)別能力:受體反應(yīng)能力:信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)能力:感知免疫反應(yīng)強(qiáng)度和反饋調(diào)節(jié)記憶能力:再次遇到相同抗原反應(yīng)加強(qiáng)。記憶細(xì)胞和記憶分子發(fā)揮保護(hù)性記憶(效應(yīng)細(xì)胞或效應(yīng)分子立即發(fā)揮作用)或和反應(yīng)性記憶(記憶細(xì)胞增殖分化為效應(yīng)細(xì)胞發(fā)揮作用)第三節(jié)、免疫應(yīng)答的類型及特點(diǎn)一、免疫應(yīng)答的類型固有性免疫應(yīng)答:是生物體在長(zhǎng)期種系發(fā)育和進(jìn)化過(guò)程中形成的不需特異抗原刺激就已存在的一系列防衛(wèi)機(jī)制。適應(yīng)性免疫應(yīng)答:是個(gè)體在生命過(guò)程中接受抗原刺激后發(fā)展而成的免疫力。分類依據(jù):免疫系統(tǒng)是否識(shí)別特異抗原而產(chǎn)生免疫應(yīng)答
二、固有性免疫應(yīng)答的主要特點(diǎn)
遺傳獲得,出生時(shí)即具有,也稱為先天性免疫(innateimmunity)反應(yīng)迅速受體識(shí)別抗原無(wú)特異性,也稱非特異性免疫(nonspecificimmunity)
。無(wú)免疫記憶,再次遭遇相同抗原反應(yīng)不增強(qiáng)三、適應(yīng)性免疫應(yīng)答(adaptiveresponse)的主要特點(diǎn)
個(gè)體出生后,由于接觸抗原而獲得,稱為獲得性免疫(acquiredimmunity)
識(shí)別特異抗原反應(yīng),也稱特異性免疫(specificimmunity)
。有潛伏期,反應(yīng)較慢有免疫記憶現(xiàn)象適應(yīng)性免疫組成1、體液免疫:由B細(xì)胞轉(zhuǎn)化為漿細(xì)胞所分泌的抗體介導(dǎo)的免疫應(yīng)答稱為體液免疫。2、細(xì)胞免疫:T細(xì)胞經(jīng)其自身分化為效應(yīng)細(xì)胞后執(zhí)行免疫功能而介導(dǎo)的免疫稱為細(xì)胞免疫。第四節(jié):免疫病理免疫系統(tǒng)不正?;蛘卟贿m當(dāng)?shù)拿庖叻磻?yīng)均可導(dǎo)致免疫性疾病。包括超敏反應(yīng)性疾病、免疫缺陷病、自身免疫病。超敏反應(yīng)性疾?。河煽乖禺惲馨图?xì)胞激發(fā)的過(guò)高的反應(yīng)過(guò)程而導(dǎo)致的疾病。免疫缺陷病:免疫系統(tǒng)結(jié)構(gòu)或功能缺陷導(dǎo)致的免疫功能低下或缺失。自身免疫?。簷C(jī)體免疫系統(tǒng)對(duì)自身成分發(fā)生免疫而導(dǎo)致的疾病。第二章、免疫系統(tǒng)的發(fā)生、組成、功能及相互關(guān)系免疫系統(tǒng)的系統(tǒng)發(fā)生哺乳動(dòng)物免疫系統(tǒng)的組成免疫系統(tǒng)各組成的基本功能第一節(jié)、免疫系統(tǒng)的系統(tǒng)發(fā)生遵循從非特異性免疫到特異性免疫的規(guī)律,各成分的系統(tǒng)發(fā)生順序?yàn)椋和淌杉?xì)胞、細(xì)胞介導(dǎo)免疫、體液免疫。無(wú)脊椎動(dòng)物(原生動(dòng)物、海綿動(dòng)物、環(huán)節(jié)動(dòng)物、節(jié)肢動(dòng)物):只有發(fā)揮非特異免疫的吞噬細(xì)胞脊椎動(dòng)物從軟骨魚開(kāi)始有非特異免疫的其他細(xì)胞和特異免疫的效應(yīng)分子產(chǎn)生,且種類隨系統(tǒng)發(fā)育由低級(jí)到高級(jí)逐漸增多,抗體產(chǎn)生的順序是IgM、IgD、IgG、IgA、IgE免疫應(yīng)答的種系進(jìn)化示意圖第二節(jié)、哺乳動(dòng)物免疫系統(tǒng)的組成
第三節(jié)、免疫系統(tǒng)各組成的基本功能一、中樞免疫器官及作用中樞免疫器官(centralimmuneorgan)又稱為一級(jí)免疫器官,是免疫細(xì)胞發(fā)生、分化、成熟的場(chǎng)所。哺乳動(dòng)物:骨髓和胸腺鳥(niǎo)類:骨髓、胸腺、法氏囊(腔上囊)(一)骨髓(bonemarrow)骨髓是液狀柔軟、富于血管的造血組織。存在部位:長(zhǎng)骨骨髓腔和各種骨骨松質(zhì)的網(wǎng)眼中。
邵帥捐髓救母骨髓作用1、造血:由造血干細(xì)胞在造血誘導(dǎo)微環(huán)境作用下產(chǎn)生除成熟T細(xì)胞外的各種成熟血細(xì)胞(成熟B細(xì)胞、紅細(xì)胞、單核細(xì)胞、粒細(xì)胞、血小板)2、生成成熟T細(xì)胞的前體細(xì)胞-祖T細(xì)胞3、產(chǎn)生體液免疫應(yīng)答的場(chǎng)所:活化記憶B細(xì)胞返回骨髓,繼續(xù)分化為漿細(xì)胞分泌抗體胚胎和嬰幼兒:所有骨髓均有造血功能,含有豐富紅細(xì)胞,呈紅色,稱紅骨髓;約6歲以后:長(zhǎng)骨骨髓逐漸由脂肪組織代替,稱黃骨髓,暫時(shí)失去造血功能;扁骨骨松質(zhì)網(wǎng)眼的紅骨髓一直具有造血功能。成熟淋巴細(xì)胞指能夠識(shí)別特定抗原并產(chǎn)生免疫應(yīng)答的淋巴細(xì)胞,實(shí)質(zhì)是淋巴細(xì)胞表面表達(dá)抗原識(shí)別受體。造血干細(xì)胞分化多能造血干細(xì)胞分化圖(二)胸腺(thymus)P15人胸腺位于胸骨后,分為左右兩葉。外包結(jié)締組織被膜,被膜下由外向內(nèi)分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。功能:產(chǎn)生成熟T淋巴細(xì)胞的場(chǎng)所;T細(xì)胞由皮質(zhì)到髓質(zhì)逐漸成熟。胸腺的組織結(jié)構(gòu)裸鼠(nudemouse)
特點(diǎn):無(wú)胸腺或胸腺發(fā)育不全;無(wú)成熟T細(xì)胞;無(wú)毛;免疫(尤其細(xì)胞免疫)缺陷人胸腺隨胎齡和年齡的變化胚胎第9周出現(xiàn)胚胎第20周發(fā)育成熟出生后15~20g,逐漸增大至青春期重量可達(dá)30~40g青春期后逐漸緩慢退化至老年期胸腺組織大部分被脂肪代替,功能大部分喪失。老年充滿脂肪的胸腺二、外周免疫器官(peripheralimmuneorgan)及其作用外周免疫器官又稱為次級(jí)淋巴器官(secondarylymphoidorgan),是成熟T細(xì)胞、B細(xì)胞等免疫細(xì)胞定居并識(shí)別抗原產(chǎn)生免疫應(yīng)答的場(chǎng)所。包括脾(spleen)、淋巴結(jié)(lymphnodes)、粘膜伴隨淋巴組織(MALT)(一)脾位于腹腔左側(cè),由紅髓(充斥紅細(xì)胞)和白髓(富含淋巴細(xì)胞)及邊緣區(qū)組成。脾組織結(jié)構(gòu)1、白髓(密集的淋巴組織構(gòu)成)(1)動(dòng)脈周圍淋巴鞘:中央動(dòng)脈穿行其中,周圍由大量T細(xì)胞及少量巨噬細(xì)胞、交錯(cuò)突細(xì)胞構(gòu)成鞘,屬胸腺依賴區(qū);有一條盲端毛細(xì)淋巴管為脾內(nèi)T細(xì)胞遷出的通道。(2)淋巴小結(jié)(脾小體):位于動(dòng)脈周圍淋巴鞘旁,帽部朝向紅髓,主要為B細(xì)胞。2、紅髓
(1)脾索:富含血細(xì)胞的淋巴組織,是脾濾血的場(chǎng)所(2)脾竇:血竇,竇壁為長(zhǎng)桿狀內(nèi)皮細(xì)胞,基膜不完整,外有網(wǎng)狀纖維環(huán)繞的;細(xì)胞間有裂隙。3、邊緣區(qū):位于白、紅髓交界處,由淋巴組織(細(xì)胞較密集,含B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及少量紅細(xì)胞)和邊緣竇組成。中央動(dòng)脈分支的毛細(xì)血管開(kāi)口此處,為血液中淋巴細(xì)胞進(jìn)入脾臟的通道。(捕捉、識(shí)別抗原和誘發(fā)免疫反應(yīng)的重要部位)脾的功能1、過(guò)濾血液。M
和網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞吞噬清除衰老死亡的血細(xì)胞及血流中的大部分抗原。2、免疫細(xì)胞定居和發(fā)生免疫應(yīng)答(血源抗原)的場(chǎng)所。3、合成某些重要的免疫活性物質(zhì)(如補(bǔ)體)。(二)淋巴結(jié)(lymphnodes)淋巴結(jié)是高度器官化的淋巴組織,是淋巴管向心行程中不斷經(jīng)過(guò)的淋巴器官,為哺乳類特有的淋巴器官。數(shù)量:人體約有500~600個(gè)分布:身體淺表部位的凹陷隱蔽處,如頸部、腋窩、腹股溝等處;內(nèi)臟的器官門附近,如肺門;體腔內(nèi)血管干周圍淋巴結(jié)組織結(jié)構(gòu)示意圖淋巴結(jié)組織結(jié)構(gòu)1.皮質(zhì):皮質(zhì)淺區(qū):B細(xì)胞區(qū)(或非胸腺依賴區(qū))大量B細(xì)胞聚集形成淋巴小結(jié)(lymphnodule)或稱淋
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