第二章蛋白質(zhì)與非蛋白含氮化合物的代謝紊亂1

第九章血漿蛋白質(zhì)檢驗三、血漿蛋白主要組分的生物化學(xué)檢驗

二、血清蛋白質(zhì)電泳組分的臨床分析

第一節(jié)血漿蛋白質(zhì)一、血漿蛋白質(zhì)的功能和分類一、血漿蛋白質(zhì)的功能和分類

（一）血漿蛋白質(zhì)的功能1.營養(yǎng)、修補(bǔ)作用；2.維持血漿膠體滲透壓；3.作為血液pH緩沖系統(tǒng)的一部分；4.載體蛋白；5.抑制組織蛋白酶；6.催化作用7.參與凝血與纖維蛋白溶解8.免疫防御功能（二）血漿蛋白質(zhì)的分類

最簡單：分為清蛋白和球蛋白較實用：由電泳獲得血漿蛋白質(zhì)概貌功能分類：比較復(fù)雜，但方便研究1.電泳分類法

醋纖膜電泳或瓊脂糖電泳：

清蛋白

α1球蛋白

α2球蛋白

β球蛋白

γ球蛋白

分辨率高時：可有β1和β2α2中也可有兩條如果采用聚丙烯酰胺凝膠電泳，在適當(dāng)條件下可以分出30多個區(qū)帶。

正常血清蛋白電泳圖譜示意圖及其掃描曲線

2.功能分類法

運輸載體類補(bǔ)體蛋白類免疫球蛋白類凝血蛋白類蛋白酶抑制物類血清酶類蛋白激素類（三）影響血漿蛋白質(zhì)濃度的因素

1.急性時相反應(yīng)蛋白（APP）：對炎癥和組織損傷的非特異性反應(yīng)，血漿蛋白質(zhì)如α1-抗胰蛋白酶、α1-酸性糖蛋白、觸珠蛋白、銅藍(lán)蛋白、C4、C3、纖維蛋白原、C-反應(yīng)蛋白和血清淀粉樣蛋白A等濃度顯著升高或升高，而血漿前清蛋白、清蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白濃度則出現(xiàn)相應(yīng)下降。這些血漿蛋白質(zhì)統(tǒng)稱為急性時相反應(yīng)蛋白（APP）。這種現(xiàn)象稱為急性時相反應(yīng)（APR）。增加超過25%的蛋白質(zhì)稱為正向APP，下降25%以上的蛋白質(zhì)稱為負(fù)向APP.APR的機(jī)制是對炎癥的一般反應(yīng)。損傷部位釋放的細(xì)胞因子，包括白介素、腫瘤壞死因子α和β、干擾素以及血小板活化因子等，引發(fā)肝細(xì)胞中APP合成量的改變。正向APP是機(jī)體防御機(jī)制的一個部分，尤其是活化補(bǔ)體、蛋白酶抑制劑對酶活性的控制、觸珠蛋白對被破壞紅細(xì)胞中釋放Hb的保護(hù)作用等。作為營養(yǎng)蛋白的負(fù)向APP此時合成減少，可為合成正向APP提供更多的氨基酸原料。APR的時相C-反應(yīng)蛋白首先升高12小時內(nèi)α1-酸性糖蛋白也升高然后α1-抗胰蛋白酶、觸珠蛋白、C4和纖維蛋白原升高最后是C3和銅藍(lán)蛋白升高通常在2～5天內(nèi)這些APP達(dá)到最高值A(chǔ)PP的臨床應(yīng)用幫助監(jiān)測炎癥發(fā)生及過程和觀察治療反應(yīng)

尤其是那些升高最早和最多的蛋白質(zhì)。疾病時血漿蛋白質(zhì)的濃度變化被體內(nèi)類固醇激素的狀態(tài)復(fù)雜化，包括類固醇激素治療、妊娠和口服避孕藥。

2.類固醇激素二、血清蛋白質(zhì)電泳組分的臨床分析

醋纖膜電泳正常百分含量清蛋白：57％～68％α1球蛋白：1.0％～5.7％α2球蛋白：4.9％～11.2％β球蛋白：7％～13％γ球蛋白：9.8％～18.2％

各電泳區(qū)帶的主要蛋白質(zhì)及其含量前清蛋白前清蛋白0.2～0.4g/L清蛋白清蛋白 35～55α1-球蛋白

α1-抗胰蛋白酶

α1-酸性糖蛋白甲胎蛋白高密度脂蛋白0.9～2.00.5～1.53×10～51.7～3.25α2-球蛋白觸珠蛋白

α2-巨球蛋白銅藍(lán)蛋白0.3～2.01.25～4.10.2～0.5β-球蛋白轉(zhuǎn)鐵蛋白低密度脂蛋白

C4 β2-微球蛋白纖維蛋白原

C32.0～3.50.6～1.550.001～0.0022.0～4.00.7～1.5γ-球蛋白

IgAIgGIgMC-反應(yīng)蛋白0.7～4.07.0～160.4～2.30.008正常圖譜腎病綜合征肝硬化(β-γ橋)肝硬化(不典型β-γ橋)

高濃度的甲胎蛋白可表現(xiàn)為清蛋白與α1區(qū)帶間一條清晰的新帶。C-反應(yīng)蛋白異常增高可出現(xiàn)特殊界限的γ區(qū)帶。單核細(xì)胞白血病可出現(xiàn)由于溶菌酶異常增多的γ后區(qū)帶。其他異常區(qū)帶

漿細(xì)胞病與M蛋白正常血清蛋白電泳上顯示的寬γ區(qū)帶主要成分:免疫球蛋白。發(fā)生漿細(xì)胞?。╬lasmacelldyscrasia）時，異常漿細(xì)胞克隆增殖，產(chǎn)生大量單克隆免疫球蛋白或其輕鏈或重鏈片段，病人血清或尿液中可出現(xiàn)結(jié)構(gòu)單一的M蛋白，在蛋白電泳時呈現(xiàn)一個色澤深染的窄區(qū)帶，此區(qū)帶較多出現(xiàn)在γ或β區(qū)，偶見于α區(qū)。漿細(xì)胞病的電泳圖電泳條帶由上至下依次為Alb,α1,α2,β,γ區(qū)帶箭頭所指為可疑M區(qū)帶

血清蛋白電泳圖多發(fā)性骨髓瘤多發(fā)性骨髓瘤IgG型多發(fā)性骨髓瘤IgA型三、血漿蛋白主要組分的生物化學(xué)檢驗1.前清蛋白2.清蛋白3.α1-抗胰蛋白酶4.α1-酸性糖蛋白5.觸珠蛋白6.α2-巨球蛋白7.銅藍(lán)蛋白8.轉(zhuǎn)鐵蛋白9.C-反應(yīng)蛋白10.β2-微球蛋白（一）前清蛋白（prealbumin，PA）＆分子量：54kD；T?：1.9d；＆

主要包括：視黃醇結(jié)合蛋白和甲狀腺素轉(zhuǎn)運蛋白＆

PI=4.7；蛋白電泳時遷移至Alb的前方；＆肝實質(zhì)細(xì)胞合成，可作為組織修補(bǔ)材料和運載蛋白。1.性質(zhì)：2.前清蛋白的臨床意義②營養(yǎng)不良的指標(biāo)③肝功能不全的指標(biāo)敏感①負(fù)性急性時相反應(yīng)蛋白（二）清蛋白（albumin，Alb）分子量66.2kD不含糖，高度溶于水的血漿蛋白質(zhì)在生理pH環(huán)境中為負(fù)離子。肝實質(zhì)細(xì)胞合成T?：19d血漿中含量最多的蛋白質(zhì)1.性質(zhì)：2.清蛋白的生理功能①維持血漿膠體滲透壓：血漿滲透壓的75%～80%由Alb維持②血漿中主要的載體蛋白，具有結(jié)合各種配體分子的能力③緩沖酸堿，維持酸堿平衡作用④營養(yǎng)作用3.清蛋白的臨床意義1）降低◆

Alb合成不足◆

Alb的分布異常◆

Alb過度丟失◆

Alb分解代謝增加2）升高：少見蛋白質(zhì)攝入不足肝功減退（三）α1-抗胰蛋白酶（α1—antitrypsin，AAT）分子量52kD；pI為4.8含糖10%～12%在醋纖膜電泳中位于α1區(qū)帶（α1區(qū)帶的主要組分）主要由肝細(xì)胞合成，單核細(xì)胞、肺泡巨噬細(xì)胞和上皮細(xì)胞也能合成1.性質(zhì)：

AAT是一種蛋白酶抑制劑，主要對抗多形核白細(xì)胞起吞噬作用時釋放的溶酶體蛋白水解酶。所以當(dāng)AAT缺乏時，可使蛋白水解酶過份地作用于肺泡壁的彈力纖維而導(dǎo)致肺氣腫的發(fā)生。2.AAT的生理功能

AAT發(fā)揮作用具有PH依賴性：中性或弱堿性時，顯示最大抑制；PH<4.5時活性表失。AAT具有多種遺傳表型，其中以PiMM型（正常的等位基因）最多見，占人群的90%以上根據(jù)等位基因出現(xiàn)頻率的不同，缺陷變體可進(jìn)一步分為常見和少見兩部分，最常見的缺陷變體為Z和S型,

可表現(xiàn)為以下遺傳分型：PiZZ、PiSS、PiSZ、PiMZ、PiMS。以MM型的蛋白酶抑制能力作為100%，ZZ型的相對活力僅為15%、SS為60%、MZ為57%、MS為80%，SZ為35%。3.AAT的遺傳表型◆PiZZ型、PiSS型甚至PiMS型常伴有早年出現(xiàn)的肺氣腫◆低血漿AAT可發(fā)現(xiàn)于胎兒呼吸窘迫綜合征◆PiZZ表型會發(fā)生肝損害，導(dǎo)致肝硬化3.AAT的臨床意義

AAT屬APRP，在炎癥、感染、腫瘤、肝病時均顯著增加。1）AAT缺陷：

2）AAT增加：（四）α1-酸性糖蛋白(α1–AcidGlycoprotein,AAG)分子量約40kD；pI為2.7～4.0屬血漿中含糖量最高（達(dá)45%）、酸性最強(qiáng)的糖蛋白典型的APRP主要在肝臟產(chǎn)生,某些腫瘤組織也可產(chǎn)生可結(jié)合利多卡因和普萘洛爾等藥物1.性質(zhì)：2.AAG的臨床意義④雌激素使AAG降低。

①AAG目前主要作為急性時相反應(yīng)的指標(biāo)，

AAG增高是活動性潰瘍性結(jié)腸炎最可靠的指標(biāo)之一。②糖皮質(zhì)激素增加，可引起AAG升高。③在營養(yǎng)不良、嚴(yán)重肝損害、腎病綜合征以及胃腸道疾病致蛋白嚴(yán)重丟失等情況下AAG降低。（五）結(jié)合珠蛋白（haptoglobin，Hap）（觸珠蛋白）一種APRP和轉(zhuǎn)運蛋白（與紅細(xì)胞釋放的游離Hb結(jié)合，每分子Hp可結(jié)合兩分子Hb，結(jié)合不可逆）。電泳中位于α2區(qū)帶。個體間有多種遺傳表現(xiàn)。分子中有α、β亞基，形成α2β2

四聚體。1.性質(zhì)：2.結(jié)合珠蛋白的功能

運輸血管內(nèi)游離Hb到網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞降解，防止Hb從腎臟丟失而為機(jī)體保留鐵，并能避免Hb對腎臟的損傷。3.結(jié)合珠蛋白的臨床評價Hp下降：①溶血性疾病。Hp參考范圍較寬，須連續(xù)觀察溶血是否處于進(jìn)行狀態(tài)。血管外溶血不會使Hp發(fā)生變化。②嚴(yán)重肝病患者，Hp合成減少。Hp升高：屬APRP，燒傷和腎病綜合征等情況下，血Hp常明顯升高。觸珠蛋白的幾種遺傳表型

表型亞單位的結(jié)構(gòu)組成Hp1-1(α1F)2β2α1Fα1Sβ2(α1S)2β2分子量約為80kD，α鏈含氨基酸殘基83個，β鏈含氨基酸殘基245個Hp2-1(α1Sα2β2)n(α1Fα2β2)n分子量為120kD-200kD的聚合體，由于n不同，可以在電泳中出現(xiàn)多條帶Hp2-2(α2β)nN=3-8分子量為160kD-400kD，由于n

不同，可在電泳中出現(xiàn)多條帶（六）α2-巨球蛋白（α2-macroglobulin,α2-MG）

血漿中分子量最大的糖蛋白，相對分子質(zhì)量約為720kD，由肝細(xì)胞、單核細(xì)胞和星形細(xì)胞合成，半衰期約5d,1.性質(zhì)：2.α2-巨球蛋白的功能α2MG分子內(nèi)部有內(nèi)環(huán)硫酯鍵，能與多種離子和分子結(jié)合，特別是能與蛋白水解酶結(jié)合，結(jié)合的復(fù)合物引起α2MG的分子構(gòu)象的改變，從而抑制了pro水解酶的活性，導(dǎo)致酶不易作用于大分子底物。（酶未失活）若底物為分子量小的蛋白質(zhì)，則能被α2MG-蛋白酶復(fù)合物所催化而水解。因此，α2-MG可選擇性地保護(hù)某些蛋白酶的活性。α2-MG增高：低清蛋白血癥，尤其是腎病綜合征時，顯著增高。α2-MG降低：嚴(yán)重的急性胰腺炎和進(jìn)展型前列腺癌治療前。3.α2-巨球蛋白的臨床意義（七）銅藍(lán)蛋白（ceruloplasmin,Cp，CER）含銅的α2球蛋白，肝臟合成每分子結(jié)合6～8個銅原子，因含銅而呈藍(lán)色95%的血清銅存在于Cp中，其余5%呈可擴(kuò)散狀態(tài)血循環(huán)中的Cp可認(rèn)為是銅的無毒性代謝庫1.性質(zhì)：2.銅藍(lán)蛋白的功能特征①血漿銅的轉(zhuǎn)運②具有氧化酶活性：對鐵（可催化Fe2+氧化為Fe3+）、多胺和多酚類底物有催化其氧化的能力。③具有抗氧化作用，可防止組織中脂質(zhì)過氧化物和自由基的生成，特別在炎癥時具有重要意義。3.銅藍(lán)蛋白的臨床評價Cp濃度減少有關(guān)的疾?。喊╓ilson病、營養(yǎng)性銅缺乏和Menkes病（遺傳性銅吸收不良）。屬于急性時相反應(yīng)蛋白：在妊娠、感染、創(chuàng)傷和腫瘤時血漿濃度增加。但在營養(yǎng)不良、嚴(yán)重肝病及腎病綜合征時往往下降。

4.Wilson病的診斷標(biāo)準(zhǔn)定義：Wilson病是一種常染色體隱性遺傳病，即患者血漿Cp含量明顯減少，血漿游離銅增加，銅沉積在肝可引起肝硬化，沉積在腦基底節(jié)的豆?fàn)詈藙t導(dǎo)致豆?fàn)詈俗冃?，因而該病又稱為肝豆?fàn)詈俗冃浴ilso