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文檔簡(jiǎn)介
-.z.1.簡(jiǎn)述Chargaff定律的主要容。答案:(1〕不同物種生物的DNA堿基組成不同,而同一生物不同組織、器官的DNA堿基組成一樣。(2〕在一個(gè)生物個(gè)體中,DNA的堿基組成并不隨年齡、營(yíng)養(yǎng)狀況和環(huán)境變化而改變。(3〕幾乎所有生物的DNA中,嘌呤堿基的總分子數(shù)等于嘧啶堿基的總分子數(shù),腺嘌呤(A)和胸腺嘧啶(T)的分子數(shù)量相等,鳥嘌呤(G)和胞嘧啶(C)的分子數(shù)量相等,即A+G=T+C。這些重要的結(jié)論統(tǒng)稱為Chargaff定律或堿基當(dāng)量定律。2.簡(jiǎn)述DNA右手雙螺旋構(gòu)造模型的主要容。答案:DNA右手雙螺旋構(gòu)造模型的主要特點(diǎn)如下:(1〕DNA雙螺旋由兩條反向平行的多核苷酸鏈構(gòu)成,一條鏈的走向?yàn)?′→3′,另一條鏈的走向?yàn)?′→5′;兩條鏈繞同一中心軸一圈一圈上升,呈右手雙螺旋。(2〕由脫氧核糖和磷酸構(gòu)成的骨架位于螺旋外側(cè),而堿基位于螺旋側(cè)。(3〕兩條鏈間A與T或C與G配對(duì)形成堿基對(duì)平面,堿基對(duì)平面與螺旋的虛擬中心軸垂直。(4〕雙螺旋每旋轉(zhuǎn)一圈上升的垂直高度為3.4nm(即34?〕,需要10個(gè)堿基對(duì),螺旋直徑是2.0nm。(5〕雙螺旋外表有兩條深淺不同的凹溝,分別稱為大溝和小溝。3.簡(jiǎn)述DNA的三級(jí)構(gòu)造。答案:在原核生物中,共價(jià)閉合的環(huán)狀雙螺旋DNA分子,可再次旋轉(zhuǎn)形成超螺旋,而且天然DNA中多為負(fù)超螺旋。真核生物線粒體、葉綠體DNA也是環(huán)形分子,能形成超螺旋構(gòu)造。真核細(xì)胞核染色體是DNA高級(jí)構(gòu)造的主要表現(xiàn)形式,由組蛋白H2A、H2B、H3、H4各兩分子形成組蛋白八聚體,DNA雙螺旋纏繞其上構(gòu)成核小體,核小體再經(jīng)多步旋轉(zhuǎn)折疊形成棒狀染色體,存在于細(xì)胞核中。4.簡(jiǎn)述tRNA的二級(jí)構(gòu)造與功能的關(guān)系。答案:的tRNA都呈現(xiàn)三葉草形的二級(jí)構(gòu)造,根本特征如下:(1〕氨基酸臂,由7bp組成,3′末端有-CCA-OH構(gòu)造,與氨基酸在此縮合成氨基酰-tRNA,起到轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸的作用;(2〕二氫尿嘧啶環(huán)(DHU、I環(huán)或D環(huán)〕,由8~12個(gè)核苷酸組成,以含有5,6-二氫尿嘧啶為特征;(3〕反密碼環(huán),其環(huán)中部的三個(gè)堿基可與mRNA的三聯(lián)體密碼子互補(bǔ)配對(duì),在蛋白質(zhì)合成過(guò)程中可把正確的氨基酸引入合成位點(diǎn);(4)額外環(huán),也叫可變環(huán),通常由3~21個(gè)核苷酸組成;(5)TψC環(huán),由7個(gè)核苷酸組成環(huán),和tRNA與核糖體的結(jié)合有關(guān)。5.簡(jiǎn)述真核生物mRNA3′端polyA尾巴的作用。答案:真核生物mRNA的3′端有一段多聚腺苷酸(即polyA)尾巴,長(zhǎng)約20~300個(gè)腺苷酸。該尾巴與mRNA由細(xì)胞核向細(xì)胞質(zhì)的移動(dòng)有關(guān),也與mRNA的半衰期有關(guān);研究發(fā)現(xiàn),polyA的長(zhǎng)短與mRNA壽命呈正相關(guān),剛合成的mRNA壽命較長(zhǎng),“老〞的mRNA壽命較短。6.簡(jiǎn)述分子雜交的概念及應(yīng)用。答案:把不同來(lái)源的DNA(RNA〕鏈放在同一溶液中進(jìn)展熱變性處理,退火時(shí),它們之間*些序列互補(bǔ)的區(qū)域可以通過(guò)氫鍵重新形成局部的DNA-DNA或DNA-RNA雙鏈,這一過(guò)程稱為分子雜交,生成的雙鏈稱雜合雙鏈。DNA與DNA的雜交叫做Southern雜交,DNA與RNA雜交叫做Northern雜交。核酸雜交已被廣泛應(yīng)用于遺傳病的產(chǎn)前診斷、致癌病原體的檢測(cè)、癌基因的檢測(cè)和診斷、親子鑒定和動(dòng)植物檢疫等方面。7.DNA熱變性有何特點(diǎn)?答案:將DNA溶液加熱到70~100℃幾分鐘后,雙螺旋構(gòu)造即發(fā)生破壞,氫鍵斷裂,兩條鏈彼此分開,形成無(wú)規(guī)則線團(tuán)狀,此過(guò)程為DNA的熱變性。有以下特點(diǎn):變性溫度圍很窄;260nm處的紫外吸收增加;粘度下降;生物活性喪失;比旋度下降;酸堿滴定曲線改變。
8.試述以下因素如何影響DNA的復(fù)性過(guò)程:(1〕陽(yáng)離子的存在;(2〕低于Tm的溫度;(3〕高濃度的DNA鏈。答案:(1〕陽(yáng)離子可中和DNA分子中磷酸基團(tuán)的負(fù)電荷,減弱DNA鏈間的靜電作用,促進(jìn)DNA的復(fù)性;(2〕低于Tm的溫度可以促進(jìn)DNA復(fù)性;(3〕DNA鏈濃度增高可以加快互補(bǔ)鏈隨機(jī)碰撞的速度和時(shí)機(jī),從而促進(jìn)DNA復(fù)性。9.對(duì)一雙鏈DNA而言,假設(shè)一條鏈中(A+G)/(T+C)=0.8,則:
(1〕互補(bǔ)鏈中(A+G)/(T+C)=?
(2〕在整個(gè)DNA分子中(A+G)/(T+C)=?
(3〕假設(shè)一條鏈中(A+T)/(G+C)=0.8,則互補(bǔ)鏈中(A+T)/(G+C)=?
(4〕在整個(gè)DNA分子中(A+T)/(G+C)=?答案:(1〕互補(bǔ)鏈中(A+G)/(T+C)=1/0.8=1.25
(2〕在整個(gè)DNA分子中,因?yàn)锳=T,G=C,所以,A+G=T+C,(A+G)/(T+C)=1
(3〕互補(bǔ)鏈中(A+T)/(G+C)=0.8
(4〕整個(gè)DNA分子中(A+T)/(G+C)=0.810.在pH7.0,0.165mol/LNaCl條件下,測(cè)得*一組織DNA樣品的Tm為89.3℃,求出四種堿基百分組成。答案:大片段DNA的Tm計(jì)算公式為:(G+C)%=(Tm-69.3〕×2.44%,小于20bp的寡核苷酸的Tm的計(jì)算公式為:Tm=4(G+C)+2(A+T)。
(G+C)%=(Tm–69.3)×2.44%=(89.3-69.3)×2.44%=48.8%,則G%=C%=24.4%(A+T)%=1-48.8%=51.2%,A%=T%=25.6%]11.為什么說(shuō)蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)所依賴的重要物質(zhì)根底?答案:1.①論述蛋白質(zhì)的催化、代調(diào)節(jié)、物質(zhì)運(yùn)輸、信息傳遞、運(yùn)動(dòng)、防御與進(jìn)攻、營(yíng)養(yǎng)與貯存、保護(hù)與支持等生物學(xué)功能。②綜上所述,蛋白質(zhì)幾乎參與生命活動(dòng)的每一個(gè)過(guò)程,在錯(cuò)綜復(fù)雜的生命活動(dòng)過(guò)程中發(fā)揮著極其重要的作用,是生命活動(dòng)所依賴的重要物質(zhì)根底。沒有蛋白質(zhì),就沒有生命。12.谷胱甘肽分子在構(gòu)造上有何特點(diǎn)?有何生理功能?答案:
谷胱甘肽(GSH〕是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸組成的三肽。GSH的第一個(gè)肽鍵與一般肽鍵不同,是由谷氨酸以γ-羧基而不是α-羧基與半胱氨酸的α-氨基形成肽鍵。GSH分子中半胱氨酸的巰基是該化合物的主要功能基團(tuán)。GSH的巰基具有復(fù)原性,可作為體重要的復(fù)原劑保護(hù)體蛋白質(zhì)或酶分子中巰基免遭氧化,使蛋白質(zhì)或酶處在活性狀態(tài)。此外,GSH的巰基還有嗜核特性,能與外源的嗜電子毒物如致癌劑或藥物等結(jié)合,從而阻斷這些化合物與機(jī)體DNA、RNA或蛋白質(zhì)結(jié)合,以保護(hù)機(jī)體免遭毒物損害。13.簡(jiǎn)述蛋白質(zhì)變性與沉淀的關(guān)系。答案:
蛋白質(zhì)沉淀和變性的概念是不同的。沉淀是指在*些因素的影響下,蛋白質(zhì)從溶液中析出的現(xiàn)象;而變性是指在變性因素的作用下蛋白質(zhì)的空間構(gòu)造被破壞,生物活性喪失,理化性質(zhì)發(fā)生改變。變性的蛋白質(zhì)溶解度明顯降低,易結(jié)絮、凝固而沉淀;但是沉淀的蛋白質(zhì)卻不一定變性,如加熱引起的蛋白質(zhì)沉淀是由于蛋白質(zhì)熱變性所致,而硫酸銨鹽析所得蛋白質(zhì)沉淀一般不會(huì)變性。14.概述蛋白質(zhì)一級(jí)構(gòu)造測(cè)定的一般程序。答案:
蛋白質(zhì)一級(jí)構(gòu)造測(cè)定的一般程序?yàn)椋孩贉y(cè)定蛋白質(zhì)(要求純度必須到達(dá)97%以上〕的相對(duì)分子質(zhì)量和它的氨基酸組成,推測(cè)所含氨基酸的大致數(shù)目。②測(cè)定多肽鏈N-末端和C-末端的氨基酸,從而確定蛋白質(zhì)分子中多肽鏈的數(shù)目。然后通過(guò)對(duì)二硫鍵的測(cè)定,查明蛋白質(zhì)分子中二硫鍵的有無(wú)及數(shù)目。如果蛋白質(zhì)分子中多肽鏈之間含有二硫鍵,則必須拆開二硫鍵,并對(duì)不同的多肽鏈進(jìn)展別離提純。③用裂解點(diǎn)不同的兩種裂解方法(如胰蛋白酶裂解法和溴化氰裂解法)分別將很長(zhǎng)的多肽鏈裂解成兩套較短的肽段。④別離提純所產(chǎn)生的肽段,用蛋白質(zhì)序列儀分別測(cè)定它們的氨基酸序列。⑤應(yīng)用肽段序列重疊法確定各種肽段在多肽鏈中的排列次序,即確定多肽鏈中氨基酸排列順序。⑥如果有二硫鍵,需要確定其在多肽鏈中的位置。15.試論蛋白質(zhì)一級(jí)構(gòu)造與空間構(gòu)造的關(guān)系。答案:①以RNA酶變性與復(fù)性實(shí)驗(yàn)、有活性牛胰島素的人工合成為例證實(shí)蛋白質(zhì)一級(jí)構(gòu)造決定其空間構(gòu)造。②Anfinsen發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI〕能加速蛋白質(zhì)正確二硫鍵的形成;如RNA酶復(fù)性的過(guò)程是十分緩慢的,有時(shí)需要幾個(gè)小時(shí),而PDI在體外能幫助變性后的RNA酶在2min復(fù)性。分子伴侶在細(xì)胞能夠幫助新生肽鏈正確組裝成為成熟的蛋白質(zhì)。由此可見,蛋白質(zhì)空間構(gòu)造的形成既決定于其一級(jí)構(gòu)造,也與分子伴侶、蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶等助折疊蛋白的助折疊作用密不可分。16.概述凝膠過(guò)濾法測(cè)蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的原理。答案:層析過(guò)程中,混合樣品經(jīng)過(guò)凝膠層析柱時(shí),各個(gè)組分是按分子量從大到小的順序依次被洗脫出來(lái)的;并且蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的對(duì)數(shù)和洗脫體積之間呈線性關(guān)系。因此,將幾種相對(duì)分子質(zhì)量(應(yīng)小于所用葡聚糖凝膠的排阻極限〕的標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)混合溶液上柱洗脫,記錄各種標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的洗脫體積;然后,以每種蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo),以相對(duì)應(yīng)的洗脫體積為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線;再將待測(cè)蛋白質(zhì)溶液在上述一樣的層析條件下上柱洗脫,記錄其洗脫體積,通過(guò)查標(biāo)準(zhǔn)曲線就可求得待測(cè)蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量。17.概述SDS法測(cè)蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的原理。答案:(1〕聚丙烯酰胺凝膠是一種凝膠介質(zhì),蛋白質(zhì)在其中的電泳速度決定于蛋白質(zhì)分子的大小、形狀和所帶電荷數(shù)量。(2〕十二烷基硫酸鈉(SDS〕可與蛋白質(zhì)大量結(jié)合,結(jié)合帶來(lái)兩個(gè)后果:①由于SDS是陰離子,故使不同的亞基或單體蛋白質(zhì)都帶上大量的負(fù)電荷,掩蓋了它們自身所帶電荷的差異;②使它們的形狀都變成桿狀。這樣,它們的電泳速度只決定于其相對(duì)分子質(zhì)量的大小。(3〕蛋白質(zhì)分子在SDS凝膠中的移動(dòng)距離與指示劑移動(dòng)距離的比值稱相對(duì)遷移率,相對(duì)遷移率與蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的對(duì)數(shù)呈線性關(guān)系。因此,將含有幾種相對(duì)分子質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)混合溶液以及待測(cè)蛋白溶液分別點(diǎn)在不同的點(diǎn)樣孔中,進(jìn)展SDS;然后以標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo),以相對(duì)應(yīng)的相對(duì)遷移率為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線;再根據(jù)待測(cè)蛋白的相對(duì)遷移率,即可計(jì)算出待測(cè)蛋白的相對(duì)分子質(zhì)量。18.簡(jiǎn)述蛋白質(zhì)的抽提原理和方法。答案:抽提是指利用*種溶劑使目的蛋白和其他雜質(zhì)盡可能分開的一種別離方法。其原理:不同蛋白質(zhì)在*種溶劑中的溶解度不同,所以可以通過(guò)選擇溶劑,使得目的蛋白溶解度大,而其他雜蛋白溶解度小,然后經(jīng)過(guò)離心,可以去除大多數(shù)雜蛋白。方法:溶劑的選擇是抽提的關(guān)鍵,由于大多數(shù)蛋白質(zhì)可溶于水、稀鹽、稀堿或稀酸,所以可以選擇水、稀鹽、稀堿或稀酸為抽提溶劑;對(duì)于和脂類結(jié)合比擬結(jié)實(shí)或分子中非極性側(cè)鏈較多的蛋白質(zhì)分子可以選用有機(jī)溶劑進(jìn)展抽提。19.根據(jù)蛋白質(zhì)一級(jí)氨基酸序列可以預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)的空間構(gòu)造。假設(shè)有以下氨基酸序列:Ile-Ala-His-Thr-Tyr-Gly-Pro-Glu-Ala-Ala-Met-Cys-Lys-Try-Glu-Ala-Gln-Pro-Asp-Gly-Met-Glu-Cys-Ala-Phe-His-Arg
(1〕預(yù)測(cè)在該序列的哪一部位可能會(huì)出卷曲或β-轉(zhuǎn)角。
(2〕何處可能形成鏈二硫鍵?
(3〕假設(shè)該序列只是大的球蛋白的一局部,試分析在Asp、Try、Gln、Val、Lys、Thr、Leu中,哪些可能分布在該蛋白的外外表,哪些分布在部?
答案:(1〕可能在7位和18位氨基酸打彎,因?yàn)楦彼岢3霈F(xiàn)在打彎處。
(2〕12位和23位的半胱氨酸可形成二硫鍵。
(3〕分布在外外表的為極性帶電荷的殘基:Asp、Gln和Lys;分布在部的是非極性的氨基酸殘基:Try、Leu和Val;Thr盡管有極性,但疏水性也很強(qiáng),因此,它出現(xiàn)在外外表和部的可能性都有。20.簡(jiǎn)述抑制劑對(duì)酶活性的抑制作用與酶變性的不同點(diǎn)。答案:(1〕抑制劑對(duì)酶有一定的選擇性,一種抑制劑只能引起*一類或*幾類酶的抑制;而使酶變性失活的因素,如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等,對(duì)酶沒有選擇性;(2〕抑制劑雖然可使酶失活,但它并不明顯改變酶的構(gòu)造,不引起酶蛋白變性,去除抑制劑后,酶又可恢復(fù)活性。而變性因素常破壞酶分子的非共價(jià)鍵,局部或全部地改變酶的空間構(gòu)造,從而導(dǎo)致酶活性的降低或喪失。21.在很多酶的活性中心均有His殘基參與,請(qǐng)解釋?答案:酶蛋白分子中組氨酸的側(cè)鏈咪唑基pK值為6.0~7.0,在生理?xiàng)l件下,一半解離,一半不解離,因此既可以作為質(zhì)子供體(不解離局部〕,又可以作為質(zhì)子受體(解離局部〕,既是酸,又是堿,可以作為廣義酸堿共同催化反響,因此常參與構(gòu)成酶的活性中心。22.以糖原磷酸化酶激活為例,說(shuō)明級(jí)聯(lián)系統(tǒng)是怎樣實(shí)現(xiàn)反響信號(hào)放大的?
答案:(1〕級(jí)聯(lián)系統(tǒng):在連鎖代反響中一個(gè)酶被激活后,連續(xù)地發(fā)生其它酶被激活,導(dǎo)致原始調(diào)節(jié)信號(hào)的逐級(jí)放大,這樣的連鎖代反響系統(tǒng)稱為級(jí)聯(lián)系統(tǒng)。糖原磷酸化酶的激活過(guò)程就是一個(gè)例子。
(2〕放大過(guò)程:激素(如腎上腺素〕使腺苷酸環(huán)化酶活化,催化ATP和生成cAMP;
cAMP使蛋白激酶活化,使無(wú)活力的磷酸化酶b激酶轉(zhuǎn)變成有活力的磷酸化酶b激酶;磷酸化酶b激酶使磷酸化酶b轉(zhuǎn)變成激活態(tài)磷酸化酶a;磷酸化酶a使糖原分解為磷酸葡萄糖。23.對(duì)活細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)測(cè)定說(shuō)明,酶的底物濃度通常就在這種底物的Km值附近,請(qǐng)解釋其生理意義?為什么底物濃度不是大大高于Km或大大低于Km呢?答案:據(jù)V-[S]的米氏曲線可知,當(dāng)?shù)孜餄舛却蟠蟮陀贙m值時(shí),酶不能被底物飽和,從酶的利用角度而言,很不經(jīng)濟(jì);當(dāng)?shù)孜餄舛却蟠蟾哂贙m值時(shí),酶趨于被飽和,隨底物濃度改變,反響速度變化不大,不利于反響速度的調(diào)節(jié);當(dāng)?shù)孜餄舛仍贙m值附近時(shí),反響速度對(duì)底物濃度的變化較為敏感,有利于反響速度的調(diào)節(jié)。
24.舉例說(shuō)明競(jìng)爭(zhēng)性抑制的特點(diǎn)及實(shí)際意義。有時(shí)別構(gòu)酶的活性可以被低濃度的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑激活,請(qǐng)解釋?答案:競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑的特點(diǎn):(1〕抑制劑以非共價(jià)鍵與酶結(jié)合,用超濾、透析等物理方法能夠解除抑制;(2〕抑制劑的構(gòu)造與底物構(gòu)造相似,可與底物競(jìng)爭(zhēng)酶的活性中心;(3〕抑制劑使反響速度降低,Km值增大,但對(duì)Vma*并無(wú)影響,(4〕增加底物濃度可降低或解除對(duì)酶的抑制作用。競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用的原理可用來(lái)說(shuō)明*些藥物的作用原理和指導(dǎo)新藥合成。例如*些細(xì)菌以對(duì)氨基苯甲酸、二氫喋呤啶及谷氨酸為原料合成二氫葉酸,并進(jìn)一步生成四氫葉酸,四氫葉酸是細(xì)菌核酸合成的輔酶?;前匪幬锱c對(duì)氨基苯甲酸構(gòu)造相似,是細(xì)菌二氫葉酸合成酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑。它通過(guò)降低菌體四氫葉酸的合成能力,阻礙核酸的生物合成,抑制細(xì)菌的繁殖,到達(dá)抑菌的作用。25.在一個(gè)符合米氏方程的酶促反響體系中,:無(wú)抑制劑時(shí),雙倒數(shù)圖中橫軸的截距是-2L/mmol,縱軸的截距是2min.L/mmol,當(dāng)參加可逆抑制劑后,橫軸的截距沒有變,而縱軸的截距是3min.L/mmol。問(wèn):(1〕上述雙倒數(shù)示意圖怎么表示?(2〕無(wú)抑制劑時(shí),反響最大速度和米氏常數(shù)各是多少?(3〕有抑制劑時(shí),反響最大速度和米氏常數(shù)又分別是多少?(4)該抑制劑是何種類型的?
答案:(略〕26.簡(jiǎn)述G蛋白耦聯(lián)受體介導(dǎo)的跨膜信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的根本過(guò)程。激素是第一信使,與靶細(xì)胞膜上的受體結(jié)合,使G蛋白活化,進(jìn)而激活膜上的腺苷酸環(huán)化酶(AC〕系統(tǒng)。AC催化ATP轉(zhuǎn)變?yōu)閏AMP。cAMP作為第二信使可激活蛋白激酶A(PKA〕,繼而激活磷酸化酶并催化細(xì)胞磷酸化反響,引起靶細(xì)胞特定的生理效應(yīng):腺細(xì)胞分泌、肌細(xì)胞收縮與舒、神經(jīng)細(xì)胞膜電位變化、細(xì)胞通透性改變、細(xì)胞分裂與分化以及各種酶促反響等。(該題也可問(wèn):簡(jiǎn)述依賴于cAMP的蛋白激酶A的激活機(jī)制〕
答案:(略〕27.簡(jiǎn)述酶耦聯(lián)受體介導(dǎo)的跨膜信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的根本過(guò)程。答案:(1〕具有酪氨酸激酶的受體:該受體簡(jiǎn)單,只有一個(gè)橫跨細(xì)胞膜的α螺旋,有兩種類型,①受體具有酪氨酸激酶的構(gòu)造域,即受體與酪氨酸激酶是同一個(gè)蛋白質(zhì)分子;當(dāng)與相應(yīng)的化學(xué)信號(hào)結(jié)合時(shí),直接激活自身的酪氨酸激酶構(gòu)造域,導(dǎo)致受體自身或細(xì)胞靶蛋白的磷酸化。②受體本身沒有酶的活性,但當(dāng)它被配體激活時(shí)立即與酪氨酸激酶結(jié)合,并使之激活,通過(guò)對(duì)自身和底物蛋白的磷酸化作用,把信號(hào)傳入細(xì)胞。(2〕具有鳥苷酸環(huán)化酶的受體:該受體也只有一個(gè)跨細(xì)胞膜的α螺旋,其膜側(cè)有鳥苷酸環(huán)化酶,當(dāng)配體與它結(jié)合后,即將鳥苷酸環(huán)化酶激活,催化細(xì)胞GTP生成cGMP,cGMP又可激活蛋白激酶G(PKG〕,PKG促使底物蛋白質(zhì)磷酸化,產(chǎn)生效應(yīng)。
上述幾種跨膜信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程并不是截然分開的,相互之間存在著錯(cuò)綜復(fù)雜的聯(lián)系,形成所謂的信號(hào)網(wǎng)絡(luò)。28.1分子乙酰CoA徹底氧化生成CO2和H2O,可提供幾分子ATP?為什么?答案:可提供10分子ATP。具體情況如下:(1)在異檸檬酸脫氫酶作用下,異檸檬酸脫下兩個(gè)氫生成α-酮戊二酸和NADH+H+;(2〕在α-酮戊二酸脫氫酶系作用下,α-酮戊二酸脫氫生成琥珀酰CoA和NADH+H+;(3〕在琥珀酰CoA合成酶作用下,琥珀酰CoA水解生成琥珀酸,產(chǎn)生1分子GTP;(4〕在琥珀酸脫氫酶作用下,琥珀酸脫氫生成延胡索酸和FADH2;(5〕在蘋果酸脫氫酶催化下,蘋果酸脫氫生成草酰乙酸和NADH+H+。1分子NADH進(jìn)入NADH呼吸鏈氧化可提供2.5分子ATP,而1分子FADH2進(jìn)入FADH2呼吸鏈氧化可提供1.5分子ATP,所以1分子乙酰CoA徹底氧化生成CO2和H2O,可提供10分子ATP(3×2.5+1.5+1〕。29.何謂三羧酸循環(huán)"它有何生理意義"答案:在線粒體中,乙酰CoA和草酰乙酸縮合生成檸檬酸,經(jīng)過(guò)一系列酶促反響重新生成草酰乙酸,而將乙酰CoA徹底氧化生成H2O和CO2,并釋放能量。這個(gè)循環(huán)反響稱為三羧酸循環(huán),又稱檸檬酸循環(huán)或Krebs循環(huán)。生理學(xué)意義:(1〕糖的有氧分解是產(chǎn)生動(dòng)物生理活動(dòng)所需能量的主要來(lái)源;(2〕三羧酸循環(huán)是糖、脂肪、蛋白質(zhì)在體徹底氧化的共同代途徑;(3〕三羧酸循環(huán)是糖、脂肪、蛋白質(zhì)及其他有機(jī)物質(zhì)代的聯(lián)系樞紐。30.為什么說(shuō)三羧酸循環(huán)是糖類、脂類和蛋白質(zhì)分解的共同通路?答案:(1〕葡萄糖經(jīng)甘油醛-3-磷酸、丙酮酸等物質(zhì)生成乙酰CoA,而乙酰CoA必須進(jìn)入三羧酸循環(huán)才能被徹底氧化分解。(2〕脂肪分解產(chǎn)生的甘油和脂肪酸,甘油可以經(jīng)磷酸二羥丙酮進(jìn)入糖有氧氧化途徑,最終的氧化分解也需要進(jìn)入三羧酶循環(huán)途徑;而脂肪酸經(jīng)β-氧化途徑產(chǎn)生乙酰CoA,乙酰CoA可進(jìn)入三羧酸循環(huán)氧化。(3〕蛋白質(zhì)分解產(chǎn)生氨基酸,氨基酸脫去氨基后產(chǎn)生的碳骨架可進(jìn)入三羧酸循環(huán),同時(shí),三羧酸循環(huán)的中間產(chǎn)物可作為氨基酸的碳骨架,承受NH3重新生成氨基酸。所以,三羧酸循環(huán)是三大物質(zhì)共同通路。31.磷酸戊糖途徑的主要生理意義是什么?答案:(1〕中間產(chǎn)物核糖-5-磷酸是動(dòng)物體合成多種物質(zhì)的重要原料;(2〕產(chǎn)生的NADPH(復(fù)原力〕參與多種代反響;(3〕磷酸戊糖途徑與糖的有氧分解及糖的無(wú)氧分解相互聯(lián)系;(4〕通過(guò)轉(zhuǎn)酮基和轉(zhuǎn)醛基反響,使丙糖、丁糖、戊糖、己糖、庚糖互相轉(zhuǎn)化。32.簡(jiǎn)述葡萄糖激酶和己糖激酶的差異。答案:己糖激酶和葡萄糖激酶的主要差異在于:①葡萄糖激酶只存在于肝臟中,而己糖激酶在肝臟和肌肉中都存在;②己糖激酶的Km值為0.1mmol/L,葡萄糖激酶的Km值為10mmol/L;③己糖激酶受產(chǎn)物葡萄糖-6-磷酸的反響抑制,葡萄糖激酶不受產(chǎn)物葡萄糖-6-磷酸的反響抑制。所以,當(dāng)血液中葡萄糖濃度低時(shí),己糖激酶起主要作用;當(dāng)血液中葡萄糖濃度高時(shí),葡萄糖激酶起主要作用,結(jié)果肝臟糖原濃度高于肌肉糖原濃度。33.試述丙酮酸氧化脫羧反響受哪些因素調(diào)控"答案:(1〕變構(gòu)調(diào)控:丙酮酸氧化脫羧作用的兩個(gè)產(chǎn)物乙酰CoA和NADH都抑制丙酮酸脫氫酶復(fù)合體,乙酰CoA抑制二氫硫辛酰胺乙酰轉(zhuǎn)移酶(E2〕,NADH抑制二氫硫辛酰胺脫氫酶(E3〕組分。(2〕化學(xué)修飾調(diào)控:丙酮酸脫氫酶磷酸化后,酶活性受到抑制,去磷酸化后活性恢復(fù)。(3〕丙酮酸脫氫酶(E1〕組分受GTP抑制,為AMP所活化。34.呼吸鏈?zhǔn)怯赡男┏煞纸M成的?各有何作用?答案:主要有五大類:①NAD+,在呼吸鏈中傳遞氫,傳遞氫和電子;②FMN和FAD,傳遞氫;③鐵硫蛋白,傳遞電子;④CoQ,傳遞氫;⑤細(xì)胞色素體系,是一類以鐵卟啉為輔基的結(jié)合蛋白,傳遞電子,電子在細(xì)胞色素中的傳遞順序?yàn)閎→c1→c→aa3。35.為什么說(shuō)在呼吸鏈中,輔酶Q是一種特殊靈活的載體"答案:輔酶Q是呼吸鏈中唯一的非蛋白質(zhì)組分,其構(gòu)造中含有由數(shù)目不同的類異戊二烯組成的側(cè)鏈,所以它是非極性分子,可以在線粒體膜的疏水相中快速擴(kuò)散,也有的CoQ結(jié)合于膜上。另外,它也是呼吸鏈中惟一不與蛋白質(zhì)嚴(yán)密結(jié)合的傳遞體,因此,可以在黃素蛋白和細(xì)胞色素類之間作為一種特殊靈活的載體而起作用。36.鐵硫蛋白和細(xì)胞色素是如何傳遞電子的"答案:鐵硫蛋白和細(xì)胞色素傳遞電子的方式是一樣的,都是通過(guò)鐵的價(jià)變,即Fe2+和Fe3+的互變來(lái)進(jìn)展電子的傳遞。這兩類蛋白質(zhì)的差異在于細(xì)胞色素中的鐵是血紅素鐵,鐵與血紅素分子嚴(yán)密結(jié)合;而鐵硫蛋白中的鐵是非血紅素鐵,與蛋白質(zhì)中半胱氨酸的硫和無(wú)機(jī)硫原子結(jié)合在一起,形成一個(gè)鐵硫中心。37.試述體能量的生成方式以及水的生成。答案:ATP的生成有兩種方式,分別為底物水平磷酸化作用和氧化磷酸化作用(二者概念略〕,后者是主要的。
體水的生成方式主要是代物脫氫經(jīng)呼吸鏈傳遞與激活的氧化合;除此以外,非線粒體氧化體系中的氧化酶、過(guò)氧化氫酶等催化的反響也能生成水。38.闡述一對(duì)電子從NADH傳遞至氧是如何生成2.5個(gè)ATP的?答案:每對(duì)電子通過(guò)呼吸鏈傳遞復(fù)合體I、復(fù)合體Ⅲ和復(fù)合體Ⅳ時(shí),分別有4個(gè)H+、4個(gè)H+和2個(gè)H+從基質(zhì)泵出,導(dǎo)致線粒體膜兩側(cè)形成跨膜的質(zhì)子梯度。當(dāng)這些質(zhì)子通過(guò)ATP合酶返回基質(zhì)時(shí),能夠促使ATP合成。每3個(gè)H+通過(guò)ATP合酶可促使1分子ATP合成,同時(shí),產(chǎn)生的ATP從線粒體基質(zhì)進(jìn)入胞質(zhì)需消耗1個(gè)H+,所以每形成1個(gè)ATP需4個(gè)H+,這樣一對(duì)電子從NADH傳遞至氧共生成2.5個(gè)ATP[(4+4+2)/439.一對(duì)電子從FADH2傳遞至氧可產(chǎn)生多少分子ATP"為什么"答案:一對(duì)電子從FADH2傳遞至氧產(chǎn)生1.5個(gè)ATP。由于FADH2直接將電子傳送給呼吸鏈傳遞復(fù)合體II,不經(jīng)過(guò)呼吸鏈傳遞復(fù)合體I,所以當(dāng)一對(duì)電于從FADH2傳遞至氧時(shí)只有6個(gè)H+由基質(zhì)泵出,合成1分子ATP需4個(gè)H+,共形成1.5個(gè)ATP[(4+2)/4]。40.化學(xué)滲透學(xué)說(shuō)的要點(diǎn)是什么"答案:化學(xué)滲透學(xué)說(shuō)的要點(diǎn)是:(1〕呼吸鏈中各遞氫體和遞電子體按特定的順序排列在線粒體膜上;(2〕呼吸鏈中復(fù)合體Ⅰ、復(fù)合體Ⅲ和復(fù)合體Ⅳ都具有質(zhì)子泵的作用,在傳遞電子的過(guò)程中將H+泵出膜,所以呼吸鏈的電子傳遞系統(tǒng)是一個(gè)主動(dòng)運(yùn)輸質(zhì)子的體系;(3〕質(zhì)子不能自由通過(guò)線粒體膜,泵出膜外的H+不能自由返回膜側(cè),使膜外形成H+濃度的跨膜梯度;(4〕線粒體膜上有ATP合酶,當(dāng)質(zhì)子通過(guò)ATP合酶返回線粒體基質(zhì)時(shí),釋放出自由能,驅(qū)動(dòng)ADP和Pi合成ATP。41.簡(jiǎn)述ATP合成酶的構(gòu)造特點(diǎn)及功能。答案:ATP合酶主要有兩個(gè)功能單位:F1和F0。(1〕F1由5種亞基組成(α3β3γδε〕,是一種可溶性的膜周邊蛋白,具有催化ATP合成的功能;其中,α和β亞基上有ADP和ATP結(jié)合位點(diǎn);β亞基為催化亞基,單獨(dú)存在時(shí),不具有ATP合酶的作用,但能使ATP水解。(2〕F0是由多亞基組成的不溶于水的跨膜蛋白,含有大量的疏水性氨基酸,在膜中形成了跨膜的質(zhì)子通道,便于質(zhì)子回流。42.試述影響氧化磷酸化的因素及其作用機(jī)制。答案:(1〕呼吸鏈抑制劑:魚藤酮、殺粉蝶菌素、安密妥與復(fù)合體I中的鐵硫蛋白結(jié)合,抑制電子傳遞;抗霉素A、二巰基丙醇抑制復(fù)合體Ⅲ;一氧化碳、氰化物、疊氮化物、硫化氫抑制復(fù)合體Ⅳ。(2〕解偶聯(lián)劑:該類典型代表是2,4-二硝基苯酚。在線粒體膜外側(cè)pH較低,2,4-二硝基苯酚的羥基不能解離,可自由進(jìn)入線粒體;進(jìn)入線粒體后,2,4-二硝基苯酚的羥基解離帶負(fù)電荷。1分子2,4-二硝基苯酚進(jìn)入線粒體就相當(dāng)于從膜外側(cè)帶入線粒體1個(gè)H+,破杯了膜兩側(cè)的H+梯度,使ATP不能合成,而電子傳遞繼續(xù)進(jìn)展,結(jié)果使電子傳遞的氧化和磷酸化兩個(gè)過(guò)程別離。(3〕氧化磷酸化抑制劑:寡霉素可阻止質(zhì)子從F0質(zhì)子通道回流,抑制磷酸化并間接抑制電子在呼吸鏈上傳遞。(4〕ADP的調(diào)節(jié)作用:ADP濃度升高,氧化磷酸化速度加快,反之,氧化磷酸化速度減慢。43.試比擬電子傳遞抑制劑、氧化磷酸化抑制劑和解偶聯(lián)劑對(duì)生物氧化作用的影響。答案:(1〕電子傳遞抑制劑使電子傳遞鏈的*一部位阻斷,電子不能傳遞,氧的消耗停頓,同時(shí)ATP的合成停頓。(2〕氧化磷酸化抑制劑的作用位點(diǎn)在ATP合酶,使ATP合酶被抑制,而不能合成ATP,結(jié)果電子傳遞也被抑制,氧消耗停頓。(3〕解偶聯(lián)劑的作用是使電子傳遞和氧化磷酸化兩個(gè)過(guò)程別離,結(jié)果是電子傳遞失去控制,氧消耗增加,ATP卻不能合成,產(chǎn)生的能量以熱的形式散失,使體溫升高。44.在脂肪酸合成中,乙酰CoA.羧化酶起什么作用?乙酰CoA羧化酶受哪些因素調(diào)控?答案:乙酰CoA羧化酶的作用是催化乙酰CoA和CO2合成丙二酸單酰CoA,為脂肪酸合成提供二碳化合物。乙酰CoA羧化酶是脂肪酸合成反響中的一種限速調(diào)節(jié)酶,檸檬酸和異檸檬酸可增強(qiáng)該酶的活性,而長(zhǎng)鏈脂肪酸則抑制該酶的活性。此酶經(jīng)磷酸化后活性喪失,胰高血糖素及腎上腺素等能促進(jìn)這種磷酸化作用,從而抑制脂肪酸的合成;而胰島素則能促進(jìn)酶的去磷酸化作用、增強(qiáng)乙酰CoA羧化酶的活性。45.試比擬脂肪酸β-氧化與其生物合成的差異。答案:(1〕進(jìn)展的部位不同,脂肪酸β-氧化在線粒體進(jìn)展,脂肪酸的合成在胞液中進(jìn)展。(2〕主要中間代物不同,脂肪酸β-氧化的主要中間產(chǎn)物是乙酰CoA,脂肪酸合成的主要中間產(chǎn)物是丙二酸單酚CoA。(3〕脂肪?;霓D(zhuǎn)運(yùn)載體不同,脂肪酸β-氧化的脂肪?;D(zhuǎn)運(yùn)載體是CoA,脂肪酸合成的脂肪?;D(zhuǎn)運(yùn)載體是ACP。(4〕參與的輔酶不同,參與脂肪酸β-氧化的輔酶是FAD和NAD+,參與脂肪酸合成的輔酶是NADPH。(5〕脂肪酸β-氧化不需要CO2,而脂肪酸的合成需要CO2。(6〕反響發(fā)生時(shí)ADP/ATP比值不同,脂肪酸β-氧化在ADP/ATP比值高時(shí)發(fā)生,而脂肪酸合成在ADP/ATP比值低時(shí)進(jìn)展。(7〕檸檬酸發(fā)揮的作用不同,檸檬酸對(duì)脂肪酸β-氧化沒有激活作用,但能激活脂肪酸的生物合成。(8〕脂酰CoA的作用不同,脂酰輔酶A對(duì)脂肪酸β-氧化沒有抑制作用,但能抑制脂肪酸的生物合成。46.圖示鳥氨酸循環(huán)的過(guò)程,并簡(jiǎn)述該途徑的生理意義。答案:圖略意義:(1〕機(jī)體,氨是有毒化合物,通過(guò)該途徑合成尿素,尿素是中性無(wú)毒物質(zhì),從而起到解氨毒的作用,這是哺乳動(dòng)物最終排出氨的方式;(2〕通過(guò)該途徑也可以去除氨基氮及二氧化碳,能夠減少體CO2溶于血液所造成的酸性。47.簡(jiǎn)述天冬氨酸在體轉(zhuǎn)變成葡萄糖的主要代途徑。答案:(1〕天冬氨酸經(jīng)轉(zhuǎn)氨基作用或聯(lián)合脫氨基作用形成草酰乙酸;(2〕草酰乙酸由磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶催化形成磷酸烯醇式丙酮酸;(3〕然后沿著糖酵解途徑的逆反響,依次生成甘油酸-2-磷酸、甘油酸-3-磷酸、甘油酸-1,3-二磷酸、甘油醛-3-磷酸、磷酸二羥丙酮和果糖-1,6-二磷酸;果糖-1,6-二磷酸在果糖二磷酸酶的催化下形成果糖-6-磷酸、葡萄糖-6-磷酸;(4〕葡萄糖-6-磷酸水解生成葡萄糖,反響由葡萄糖-6-磷酸酶催化。48.鳥氨酸循環(huán)、三羧酸循環(huán)和轉(zhuǎn)氨基作用是如何聯(lián)系的?答案:圖略,鳥氨酸循環(huán)過(guò)程中,天冬氨酸不斷被消耗轉(zhuǎn)變?yōu)檠雍魉帷Q雍魉峥梢越?jīng)過(guò)三羧酸循環(huán)轉(zhuǎn)化為蘋果酸,蘋果酸再氧化成草酰乙酸,后者可再與谷氨酸進(jìn)展轉(zhuǎn)氨基反響,重新生成天冬氨酸。而谷氨酸又可通過(guò)其他的各種氨基酸把氨基轉(zhuǎn)移給α-酮戊二酸生成。因此,其他的各種氨基酸的氨基可以通過(guò)天冬氨酸的形式用于合成尿素。天冬氨酸和延胡索酸可使尿素循環(huán)、三羧酸循環(huán)和轉(zhuǎn)氨基作用聯(lián)系起來(lái)。50.簡(jiǎn)述保證DNA復(fù)制忠實(shí)性的因素及其功能?(1〕半保存復(fù)制的原則,(2〕堿基互補(bǔ)配對(duì)的規(guī)律,A-T
G-C。(3〕DNA聚合酶I的校對(duì)作用,(4〕引物的切除,51.簡(jiǎn)述DNA復(fù)制時(shí)所需的主要酶類及其功能。答案:(1〕DNA聚合酶:催化核苷酸之間生成磷酸二酯鍵,也具有一定的校正功能;(2)拓?fù)洚悩?gòu)酶:催化DNA超螺旋解開,使之變?yōu)殡p螺旋;(3〕解旋酶:解開DNA雙鏈,使之變?yōu)閱捂?(4〕單鏈結(jié)合蛋白:和單鏈DNA結(jié)合,使之變?yōu)槟軌蜃鳛閺?fù)制模板的穩(wěn)定單鏈;(5〕引物酶:以解旋后的單鏈DNA為模板,催化合成一小段帶有3′-OH的RNA;(6〕DNA連接酶:催化DNA雙鏈中的一條單鏈缺口處游離的3′末端-OH與5′末端磷酸形成磷酸二酯鍵,從而把兩段相鄰的DNA鏈連成完整的鏈。52.真核生物染色體的端粒是怎樣復(fù)制的?答案:(1〕端粒DNA的3′端和端粒酶所含的RNA分子的3′端形成堿基配對(duì);(2〕端粒酶利用RNA為模板,將dNTP加到端粒DNA的3′端,這個(gè)逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程一直進(jìn)展到RNA模板的第35位;(3〕DNA-RNA雜交鏈之間發(fā)生相對(duì)滑動(dòng),新生長(zhǎng)的端粒DNA鏈3′端再和RNA3′端形成新的堿基配對(duì),重新暴露出局部RNA模板序列;(4〕繼續(xù)逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程。該結(jié)合→聚合→轉(zhuǎn)位的過(guò)程周而復(fù)始,直至在端粒DNA的3′端形成了足夠長(zhǎng)度(提供后隨鏈盤旋時(shí)所需的長(zhǎng)度〕的單鏈突出;(5〕該3′突出端能夠彎轉(zhuǎn)過(guò)來(lái)成為后隨鏈合成的起始端,然后由DNA聚合酶復(fù)制DNA5′端空缺的DNA,最后由連接酶連接。53.簡(jiǎn)述轉(zhuǎn)錄過(guò)程和復(fù)制過(guò)程的不同點(diǎn)。答案:(1〕復(fù)制時(shí)兩條DNA鏈均為模板,轉(zhuǎn)錄時(shí)一條DNA鏈均為模板;(2〕復(fù)制時(shí)dNTP為底物,轉(zhuǎn)錄時(shí)NTP為底物;(3〕復(fù)制時(shí)需要DNA聚合酶、連接酶等,轉(zhuǎn)錄時(shí)僅需要RNA聚合酶;(4〕復(fù)制產(chǎn)物為子產(chǎn)物代雙鏈DNA,轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為mRNA、tRNA、rRNA;(5〕復(fù)制時(shí)A=T、G≡C配對(duì),轉(zhuǎn)錄時(shí)A=U、G≡C、T=A配對(duì);(6〕復(fù)制時(shí)需要一小段RNA為引物,轉(zhuǎn)錄時(shí)不需引物。54.簡(jiǎn)述轉(zhuǎn)錄起始階段的幾個(gè)反響。答案:起始階段包括下面幾個(gè)反響:①RNA聚合酶全酶的σ亞基識(shí)別模板DNA的啟動(dòng)子,并與之嚴(yán)密結(jié)合;②局部解開雙螺旋,以使模板鏈可與核糖核苷酸進(jìn)展堿基配對(duì);③RNA聚合酶催化底物核苷酸脫去焦磷酸形成磷酸二酯鍵,合成RNA鏈最初的2~9個(gè)核苷酸后,σ亞基脫離,起始階段完畢。55.簡(jiǎn)述真核生物與原核生物轉(zhuǎn)錄的不同點(diǎn)。答案:真核生物的轉(zhuǎn)錄在很多方面與原核生物不同,具有*些特殊規(guī)律,主要包括:(1〕轉(zhuǎn)錄單位一般為單基因(單順?lè)醋印?,而原核生物的轉(zhuǎn)錄單位多為多基因(多順?lè)醋印?(2〕真核生物的三種成熟的RNA分別由三種不同的RNA聚合酶催化合成;(3〕在轉(zhuǎn)錄的起始階段,RNA聚合酶必須在特定的轉(zhuǎn)錄因子的參與下才能起始轉(zhuǎn)錄;(4〕組織或時(shí)間特異表達(dá)的基因轉(zhuǎn)錄常與增強(qiáng)子有關(guān),增強(qiáng)子是位于轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游的遠(yuǎn)程調(diào)控元件,具有增強(qiáng)轉(zhuǎn)錄效率的作用;(5〕轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)方式以正調(diào)節(jié)為主,調(diào)節(jié)蛋白的種類是轉(zhuǎn)錄因子或調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子活性的蛋白因子。56.簡(jiǎn)述操縱子模型,并說(shuō)明各組分的功能。答案:操縱子是原核生物基因表達(dá)調(diào)控的功能單位,由調(diào)節(jié)基
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