4種化風(fēng)丹對sd大鼠空間記憶能力的影響

4種化風(fēng)丹對sd大鼠空間記憶能力的影響

化風(fēng)丹是國務(wù)院最保護(hù)的四大藥物之一。它是由15種貴重的中藥組成的，如香茶、天麻、硬蠶、蝎子、雄黃、朱沙等。主要治療風(fēng)粘液閉阻（頭痛、耳鳴、腦動脈、四肢癱瘓、腦萎縮）、癲癇、中風(fēng)癱瘓、面部癱瘓等。它是世界上最長的治療腦損傷的中醫(yī)藥?；L(fēng)丹中含礦物藥朱砂和雄黃,是其治療腦部疾病產(chǎn)生藥理作用的重要成分。然而,朱砂、雄黃各自的主要成分HgS、α-As4S4是國際公認(rèn)毒物汞、砷元素的化合物,其安全性問題深受國內(nèi)外關(guān)注。由化風(fēng)丹主治病癥可知,神經(jīng)系統(tǒng)是其發(fā)揮藥效的重要靶器官,對于這方面的研究,目前少有相關(guān)報道。本研究從長期用藥角度,給予大鼠喂食臨床等效劑量萬勝化風(fēng)丹、廖元和堂化風(fēng)丹和去朱砂化風(fēng)丹60天,觀察其與HgCl2、NaAsO2對大鼠空間記憶能力影響的異同。Morris水迷宮(MWM)是英國心理學(xué)家Morris于20世紀(jì)80年代初設(shè)計的,用于研究實驗室大鼠空間學(xué)習(xí)與記憶能力以及評價神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)、藥物作用之間的關(guān)系的裝置,在當(dāng)代神經(jīng)科學(xué)研究中占據(jù)十分重要的位置。目前,有相當(dāng)多的試驗者利用水迷宮來評價動物的學(xué)習(xí)與記憶能力,最常用的評價指標(biāo)是定位航行實驗的“逃避潛伏期”。另外,我們采用每天第1次訓(xùn)練的成績作為評價指標(biāo),這樣反映出的是大鼠對前一天的記憶力。1材料和方法1.1動物及實驗環(huán)境健康清潔級SD大鼠,雄性,160~200g,清潔級,購自重慶滕鑫比爾實驗動物銷售有限公司,動物許可證號SCXK(渝)2007-0005。大鼠在實驗環(huán)境中適應(yīng)性常規(guī)喂養(yǎng)3d,保證大鼠每天充足的飼料和飲水,光照12h。篩選出達(dá)到學(xué)習(xí)標(biāo)準(zhǔn)的大鼠30只,將其隨機(jī)分為5組(n=6)為萬勝化風(fēng)丹組(萬勝組)、廖元和堂化風(fēng)丹組(廖元和堂組)、HgCl2組、NaAsO2組和對照組。1.2萬勝化風(fēng)丹及hcgl2廖元和堂化風(fēng)丹購自貴州廖元和堂藥業(yè)公司,批號120315;萬勝化風(fēng)丹購自貴陽萬勝藥業(yè)有限責(zé)任公司,批號120307;HgCl2購自貴州省萬山特區(qū)礦產(chǎn)公司,批號1110003;NaAsO2購自山東西亞化學(xué)工業(yè)有限公司,批號20130301。1.3移動圖像采集系統(tǒng)Morris水迷宮由不銹鋼水池(圓柱狀)、可移動平臺和圖像自動采集、處理系統(tǒng)等組成。水池直徑150cm,高70cm;平臺直徑15cm,高40cm;水池四個象限有不同符號的導(dǎo)航標(biāo)識。1.4下一種動物的時間定位航行實驗是通過大鼠在水中尋找平臺的逃避潛伏期來檢測大鼠學(xué)習(xí)能力的,方法如下:(1)將大鼠頭朝池壁放入水中,放入位置取第二象限起始位置。記錄動物找到水下平臺的時間(s),即逃逸潛伏期。在前幾次訓(xùn)練中,如果這個時間超過90s,則引導(dǎo)動物到平臺,在平臺上停留30s。(2)將大鼠移開,放在150W的白熾燈下5min,放回籠內(nèi)。1只動物每天訓(xùn)練2次,上午、下午各1次,連續(xù)訓(xùn)練5d,并記錄訓(xùn)練成績。1.5統(tǒng)計分析實驗數(shù)據(jù)以(ue0af±s)表示,應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件中單因素方差分析進(jìn)行統(tǒng)計分析,α=0.05水平檢驗。2結(jié)果2.1一般情況下各給藥組大鼠每日食量、飲水量以及排便均未發(fā)現(xiàn)異常,毛色柔順有光澤,體重穩(wěn)定上升,各給藥組無顯著性差異,實驗過程中無死亡。2.2各組用藥前后比較用藥前大鼠潛伏期在第1天至第4天無明顯變化,訓(xùn)練第5天各組潛伏期顯著下降;用藥后訓(xùn)練第1~5天各組潛伏期呈明顯的下降趨勢,且萬勝化風(fēng)丹組、廖元和堂化風(fēng)丹組、NaAsO2組以及正常組在第2~5天與用藥前比較均具有顯著性差異(P<0.05)(見表2~5),HgCl2組僅在第4天與用藥前比較有顯著性差異(P<0.05)(見表4);與正常組比較,用藥前各組在第1~5天均無顯著差異,用藥后HgCl2組在第2~5天均有顯著性差異(P<0.05)(見表2~5),萬勝化風(fēng)丹組、廖元和堂化風(fēng)丹組和NaAsO2僅在第4天差異顯著(P<0.05)(見表4);與HgCl2組比較,用藥前各組在第1~5天均無顯著差異,用藥后萬勝化風(fēng)丹組、廖元和堂化風(fēng)丹組和NaAsO2組在第2~5天均差異顯著(P<0.05)(見表2~5)。3空間記憶的穩(wěn)定性用藥前,各組大鼠每天訓(xùn)練的潛伏期無顯著差異,即各組大鼠在用藥前的空間記憶能力相當(dāng),表明篩選方式是正確且成功的,這為后期實驗的順利進(jìn)行奠定了堅實的基礎(chǔ)。3.1遠(yuǎn)期記憶能力與用藥前訓(xùn)練成績比較,用藥后各組大鼠的潛伏期均有明顯的下降趨勢,表明大鼠在喂養(yǎng)60天后,經(jīng)過1天的適應(yīng)性訓(xùn)練,對給藥前的訓(xùn)練結(jié)果具備一定程度的遠(yuǎn)期記憶能力。而HgCl2組大鼠的這一能力與其他組比較并不顯著,從這一角度來看,HgCl2的長期應(yīng)用減弱了大鼠的空間記憶能力。3.2對大鼠空間記憶能力的影響用藥后,正常組大鼠每天訓(xùn)練的潛伏期呈顯著下降趨勢,萬勝組、廖元和堂組和NaAsO2組與正常組的趨勢相同,且無顯著性差異,表明兩種化風(fēng)丹和NaAsO2對大鼠空間記憶能力無明顯影響。而HgCl2組在第2~5天的潛伏期均顯著高于正常組及其他給藥組,