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淺析杜鵑的市場前景
杜鵑花是多年生落葉灌木,花大而多,花期長。它是世界著名的花之一,所有植物都具有很高的欣賞和藥用價值。它的花很漂亮,植物很緊湊,深受花愛好者的喜愛。除了花的美之外,它的葉子、新梢、新葉和菖蒲也非常美麗,葉子總是變紅。一些品種的秋海棠花一開花就變成了紅色,被稱為“第二次開花”。杜鵑花特別適用于園林大面積栽培,也可與其他園林植物一起種植。種植的植物也可以分類為不同的形狀,具有很高的花園應用價值。全世界的花卉都很受歡迎。病人的生活水平越來越高。它的獨特性越來越受到許多苗族和許多消費者的喜愛。市場非常高。近年來,廣東省僅有45-60萬件池塘,年銷售額接近100萬元。杜鵑為雜合體,種子繁殖后代發(fā)生嚴重分離,故只在育種時采用.通常靠扦插繁殖,但生長周期長,繁殖系數(shù)低,同時受母株材料和繁殖季節(jié)的影響.難以繁殖的杜鵑采用組織培養(yǎng)的方法可進行大量快速繁殖,例如西洋杜鵑(Rhododendronhybridn)無性快繁的年理論增殖系數(shù)可達到2.6×10,從母體得到較多的外植體,所以有利于杜鵑的推廣和大規(guī)模的商品化生產(chǎn).杜鵑的組織培養(yǎng),國外有Anderson,Economou,Fordham,Dai等人對幾個品種無性快繁成功的試驗報告;我國從20世紀80年代開始杜鵑組織培養(yǎng)的研究,但進展緩慢,目前僅見楊乃博、闕國寧、董春枝、陳震光等對春夏鵑(Rhododendronindicum)、錦繡杜鵑(Rhododendronpulchrum)和Rhododendronhybridn的少數(shù)品種進行過組織培養(yǎng)體系的研究.1外植體的選擇杜鵑是多年生木本植物,由于多毛、發(fā)粘、材料大,消毒困難,因此大多數(shù)組織培養(yǎng)外植體取自幼嫩的組織,染菌較少,消毒容易,且易于分化形成愈傷組織或直接分化成芽.1975年Anderson幼嫩莖尖培養(yǎng)成功,以后多用杜鵑莖尖進行初代培養(yǎng).1985年陳云志培養(yǎng)莖尖成功率只有4%~5%,轉而用杜鵑種子下胚軸為外植體.隨著杜鵑組織培養(yǎng)研究的深入,外植體來源不斷擴大.1985年楊乃博成功誘導毛葉杜鵑(Rhododendronmollicomum)嫩葉表皮分化出不定芽.1996年范玉清用杜鵑的7個栽培品種組培苗葉片作為外植體進行苗誘導培養(yǎng),其中Paloma、Aline和M.Depaepe3個品種誘導出不定芽,但誘導出的不定芽的數(shù)量和質(zhì)量,在三品種間差異很大.1982年Meyer等以花芽作外植體,成功的培養(yǎng)了NovaZembla、RoseumElegans和Sefon品種杜鵑.為減少污染,改良消毒的效果,將要取材的杜鵑母株事先栽種在溫室中.不同來源的外植體材料培養(yǎng)產(chǎn)生的嫩莖數(shù)目有明顯差異.用側芽,每個側芽只能產(chǎn)生3~4條嫩莖;用嫩莖莖尖,則每個莖尖可以產(chǎn)生30~50條嫩莖,但苗細弱.2培養(yǎng)基成分對公水雙公培養(yǎng)基生長的影響基本培養(yǎng)基是植物組織培養(yǎng)中重要的基質(zhì),為植物生長發(fā)育提供無機鹽、有機物、能源物質(zhì)等,由于植物的遺傳特征、生理狀態(tài)、生態(tài)特性不同,因而不同品種的杜鵑要求的最佳基本培養(yǎng)基成分也有差異.2.1培養(yǎng)基的選擇與生根鐘宇采用無機鹽離子濃度差異明顯的5種基本培養(yǎng)基MS(高鹽,NH+4/NO-3=0.5)、改良的MS(高鹽,NH+4/NO-3=1)、1/4MS(低鹽,NH+4/NO3-=0.5)、Anderson(中鹽,NH+4/NO-3=0.7)和Read(低鹽,NH+4/NO-3=1)培養(yǎng)Rhododendronhybridn莖尖,試驗結果表明,基本培養(yǎng)基中以Read培養(yǎng)基的無機鹽離子濃度對Rhododendronhybridn莖尖的生長最為有利.Lioyd和McCown研制的木本植物培養(yǎng)基WPM對杜鵑花科植物比較有效.在杜鵑無性快繁中,用其它培養(yǎng)基也有成功培養(yǎng)的報道,如1/4MS培養(yǎng)基培養(yǎng)毛葉杜鵑成功.(p38)宗憲春在杜鵑的組織培養(yǎng)中,用B5培養(yǎng)基進行增殖培養(yǎng),MS培養(yǎng)基生根培養(yǎng).在杜鵑花的組織培養(yǎng)中,增殖與生根所要求的無機鹽離子濃度不同,生根要求鹽離子濃度降低.Anderson用A和1/3A培養(yǎng)基分別進行增殖和生根培養(yǎng),并且在生根培養(yǎng)基中去掉了KI.(P138)Economon和Read用1/2A培養(yǎng)基進行杜鵑芽增殖培養(yǎng),1/3A培養(yǎng)基進行生根培養(yǎng).(P61)鄧百萬用N培養(yǎng)基誘導不定芽發(fā)生所需時間要短于Read培養(yǎng)基和Aderson培養(yǎng)基.2.2碳培養(yǎng)基培養(yǎng)基碳源以蔗糖為主,無論誘導芽、愈傷組織,還是誘導根的形成,蔗糖效果較好.其常用濃度為30mg/L.2.3培養(yǎng)基對水生動物芽伸長的影響前述各培養(yǎng)基瓊脂含量一般為0.7%-0.8%.瓊脂含量對組織培養(yǎng)的幼苗的生理狀態(tài)和解剖形態(tài)影響很大.Strode比較了固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基對高山杜鵑的叢生芽伸長的影響,一個月后觀察的結果表明:液體培養(yǎng)基上的芽的整體高度,高于2cm的小苗的數(shù)量及其生長速度顯著好于固體培養(yǎng)基.3.1生物固養(yǎng)及光照影響杜鵑組織培養(yǎng)的外界條件主要有光照時間、光照強度、光質(zhì)、溫度等.光對于植物的光形態(tài)建成對植物的進一步生長發(fā)育有著重要作用,它可以控制試管苗的生長發(fā)育狀態(tài).杜鵑增殖培養(yǎng)以中光強為好,低光強次之,高光強最差,而生根培養(yǎng)中則是低光處理較好.低輻射的白熾燈補充夜間光照,刺激杜鵑栽培品種Unique的生根.(P138)1982年Martin等人用花芽作外植體培養(yǎng)時,先在黑暗的環(huán)境下培養(yǎng)兩周,促進了芽的分化率和增殖數(shù).目前,杜鵑組織培養(yǎng)常用的光照培養(yǎng)條件為:日光燈2000~3000lx,每日光照16h,溫度為25℃~28℃.3.2土壤ph值對杜仲生根的影響在培養(yǎng)基中,pH值是影響杜鵑的一個重要因素.杜鵑原產(chǎn)于酸性土壤,pH值應控制在5.0左右,pH超過6.0時杜鵑的芽的增殖及生根率、生根數(shù)量急劇下降.(P183)4生長素類和細胞分裂素類植物組織培養(yǎng)中的生長調(diào)節(jié)物質(zhì)主要是生長素和細胞分裂素.杜鵑組織培養(yǎng)中使用的生長素類有IBA、IAA、NAA等,細胞分裂素有ZT、KT、6-BA、2iP等.TDZ(苯基噻二唑尿)有很強的細胞分裂素的活性,是誘導和繁殖落葉杜鵑的得力工具.4.1春夏觀幼苗愈傷組織的誘導誘導楊乃博用ZT2mg/L培養(yǎng)毛葉杜鵑全展葉在葉表皮產(chǎn)生愈傷組織,(P38)2,4-D1mg/L和NAA5mg/L+6-BA0.5mg/L誘導春夏鵑幼苗莖端形成致密的淡黃色愈傷組織.(54-55)誘導愈傷組織進一步分化芽的激素為6-BA1mg/L或2mg/L.從愈傷組織獲得完整植株所需時間長,培養(yǎng)程序復雜,易發(fā)生變異,不利于保持親本的性狀,不利于擴大繁殖.因此,在杜鵑組織培養(yǎng)中多采用外植體直接誘導生成不定芽或芽生芽的途徑.4.2不同細胞分裂素對種子芽孢的影響誘導不同品種杜鵑外植體形成芽的最適激素種類及濃度差異很大.映山紅,迎紅杜鵑的初代培養(yǎng)以2ip5mg/L最好,錦繡杜鵑以ZT5mg/L為好.Fordnam等進行了不同細胞分裂素對各杜鵑無性系的不定芽形成的作用對比試驗,發(fā)現(xiàn)ZT處理過的外植體產(chǎn)生的新梢最多,其次是2ip,最差是6-BA.6-BA對西洋杜鵑的芽分化有副作用.(P738)在杜鵑組織培養(yǎng)中,類細胞分裂素TDZ誘導產(chǎn)生生長異常的低質(zhì)苗,TDZ和2ip混合使用可產(chǎn)生大量的優(yōu)質(zhì)苗.4.3插條生根的設備杜鵑組織培養(yǎng)中,很多品種無誘導根的形成,而是直接切割形成的嫩梢扦插于基質(zhì),更多的研究工作集中在小插條生根方面,[31,32,33,34,35,36]但是插條生根需要投資溫室等一系列新的設備,增加了生產(chǎn)成本;扦插于田地,又受季節(jié)、場地等條件限制,無法常年供貨.因此,在實驗室誘導杜鵑新形成嫩梢生根具重要的實用價值.目前,誘導杜鵑生根的激素或激素組合主要有:NAA、IBA、NAA+IBA.IBA和NAA共同作用比單獨用每一種都好,可以提高根的數(shù)量、質(zhì)量.IBA5mg/L為Anderson生根培養(yǎng)基的最佳激素濃度.(P138)5杜鵑組織培養(yǎng)方案5.1材料的消毒3-5月份杜鵑生長旺盛,細胞分裂快,帶菌少,易消毒,接種后生長能力強,不易發(fā)生褐變.如果是野外生長的杜鵑,采集要在晴天的中午進行.(P49)采集的材料要經(jīng)過嚴格的消毒:(1)將材料放在自來水下,沖洗20-60min,然后無菌水沖洗1-3次;(2)將材料浸入75%的酒精10-20s,無菌水漂洗1次;(3)轉入0.1%的HgCl2溶液消毒4min,無菌水漂洗2次;(4)用0.1%的HgCl2溶液消毒4min,無菌水漂洗4次,然后切除變黑的基部,放入培養(yǎng)皿備用,用頂芽和花芽作為外植體,消毒前要剝掉外面的鱗片.5.2菌種的增殖培養(yǎng)初代培養(yǎng)主要是芽誘導培養(yǎng).將處理過的無菌材料放入初代培養(yǎng)基中進行芽的增殖.范玉清(P30)推薦葉外植體培養(yǎng)的三步驟培養(yǎng)程序,即在苗增殖前進行預培養(yǎng)兩周.5.3不同培養(yǎng)次數(shù)組培苗產(chǎn)生插條數(shù)目的情況.在發(fā)生EconomouandRead對3種杜鵑品系莖尖培養(yǎng)結果表明,隨培養(yǎng)次數(shù)的增加,組織培養(yǎng)幼苗產(chǎn)生可用插條數(shù)目逐漸增加,第三、四代組培苗產(chǎn)生插條數(shù)目最多,第五代明顯下降.不同品種有差異.(P138)5.4誘導生根、移栽基質(zhì)將形成的小幼苗經(jīng)生長素、VB1等預處理后,直接扦插于生根基質(zhì)中,也可在實驗室誘導生根,然后進行移栽.因為第四代小插條生根的效果最好,生根率100%,且根生長良好.(139)一般要等到培養(yǎng)到第四代后再誘導生根.移栽基質(zhì)有以下幾種配比(對不同杜鵑,基質(zhì)略有差異):5.5移民6前引力對組織培養(yǎng)成功的影響我國從80年代開始研究杜鵑的組織培養(yǎng),但進展緩慢,雖然對幾種常見的杜鵑的繁殖通過組織培養(yǎng)獲得成功,但大多數(shù)品種尚未見組織培養(yǎng)成功的報告;研究方法比較簡單,多為單因子變化研究試驗;且研究層次較低,多集中于組織培養(yǎng)的增殖和生根的研究,幾乎未見任何基礎研究或更高層次的研究,如胚狀體的誘導,花藥培養(yǎng)獲得單倍體培養(yǎng),原生質(zhì)體培養(yǎng),誘變育種,基因工程的研究等.綜觀其它植物組織培養(yǎng)研究的成果,考慮杜鵑的實際利用價值,筆者認為今后應注重以下方面的工作:6.1組培成功完成的杜鵑的再植研究提高組培苗的數(shù)量和質(zhì)量,建立適合各品系的無性快繁體系.6.2誘導杜鵑的胚胎組織培養(yǎng)的組織或器官形成完整植株的過程中,胚狀體繁殖系數(shù)高,變異小,同步好.這應是今后研究的重點.6.3花藥培訓用花
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