考研生物化學-14-真題-無答案

考研生物化學-14(總分100,考試時間90分鐘)一、問答題1.簡要說明可用于判斷和確定酶活性中心的一些主要方法。2.簡述如何測定一個酶的Km值。3.簡述如何用酶的競爭性抑制劑的理論來尋找合成控制代謝的藥物。4.簡述酶活性調(diào)節(jié)方式有哪些?5.實現(xiàn)酶反應高效率的因素有哪些?它們是怎樣提高酶反應速度的?酶蛋白中既能作為質(zhì)子供體又能作為質(zhì)子受體的最有效又最活潑的催化基團是什么?為什么?6.什么是酶的活性部位，如何用來解釋酶的專一性?7.根據(jù)下圖所示的Lineweaver-Burk雙倒數(shù)曲線：其中直線A是正常的酶催化反應；直線B是加有混合物B的反應；直線C是加有混合物C的反應。請確定有混合物B或C所顯示的抑制反應的類型。Lineweaver-Burk雙倒數(shù)曲線8.生物體必須調(diào)節(jié)酶催化反應的速度，解釋細胞是如何調(diào)控酶催化反應的?9.為什么酶可以通過高濃度的底物來部分的防止熱變性?10.在下面的反應中ΔH=+41.6cal：請解釋在O2環(huán)境中乙醇中的乙烷基會在一定時間內(nèi)保持穩(wěn)定的原因。11.過渡態(tài)金屬作為酶的輔因子作用是什么?12.請列出三個酶催化的生化過程受調(diào)控的重要性的原因。13.寫出催化下列反應的酶的分類名稱(類型)。A．B．C．D．E．F．根據(jù)下列數(shù)據(jù)：[底物]/(mol/L) V/[μmol/(L·min)] V1/[μmol/(L·min)] 6×10-61×10-52×10-56×10-51.8×10-4 20.8294567.687 4.25.8913.616.2 利用數(shù)據(jù)完成下列問題：14.作出Lineweaver-Burk雙倒數(shù)曲線圖。15.解釋：①水平截距；②垂直截距；③斜率的重要性。16.判斷這是哪種類型的抑制。17.用核酸酶做兩個實驗。實驗1是增加底物濃度來測量對反應速率的影響。實驗2是除了向每一試管中額外加了0.1mg的不清楚的混合物外其他的都與實驗1反應混合物一樣。根據(jù)所給數(shù)據(jù)繪出Lineweaver-Burk雙倒數(shù)曲線的方法，來確定不明混合物對酶活性的影響。(底物濃度單位為mmol/L，速率是以每小時光密度的變化來衡量的。)實驗1 實驗2 [S] V [S] V 0.50.6712 0.810.951.251.61 0.50.6712 0.420.530.711.08 18.簡述酶的催化機制。二、論述題1.請解釋什么是酶的活力和比活力，并說出活力和比活力兩個指標在酶的純化過程中分別可以反映什么?2.請你設計測定曠淀粉酶活力的方法。3.畫出底物存在時別構酶的S形動力學曲線，以及同時有別構激活劑或別構抑制劑存在時的曲線。標出坐標及必要的文字說明，并進行簡要地討論。4.簡述酶的三種可逆抑制作用的原理及其在雙倒數(shù)作圖上的差異(要求畫出簡圖并標出主要動力學常數(shù)的求法)。5.以磷酸化酶為例，說明共價調(diào)節(jié)酶的生物學意義。6.簡述關于酶作用專一性的學說。7.如果存在下面的反應：根據(jù)以下測定的酶促反應速度數(shù)據(jù)，確定每一種反應物的反應級數(shù)和整個反應的反應級數(shù)。濃度的單位是mol/L。酶反應的速度單位是mmol/(L·s)。[Gly-Gly] [H2O] 速度 0.10.20.10.2 0.10.10.20.2 1×1022×1022×1024×102 8.思考下面反應：利用下列數(shù)據(jù)，確定每一種底物的反應級數(shù)及整個反應的反應級數(shù)。實驗 [丙酮酸]* [ADP] [Pi] 速率* 1234 0.10.20.20.1 0.10.10.20.1 0.10.10.10.2 8×10-41.6×10-33.2×10-38×10-4 *濃度單位是mol/L，酶的速率單位是mol/(L·s)9.測定酶活力時為什么要測定反應的初速度?并且常以測定產(chǎn)物的增加量為宜?10.如何證明Ser195和His57參與了胰凝乳蛋白酶活性，試分析胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶和彈性蛋白酶的底物專一性，并說明原因。11.試分析胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶和彈性蛋白酶的底物專一性，并說明原因。磷酸吡哆醛(PLP)是鳥氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ornithineaminotransferase)的輔酶。下頁圖是鳥氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶的穩(wěn)定性(有PLP或無PLP)分析結果圖，即將該酶(有PLP或無PLP)分別置37℃溫浴一段時間，并監(jiān)測酶活性的變化情況。問：12.隨著溫浴時間的延長，酶活性為何降低?13.缺少PLP的酶活性為什么降低程度更為明顯?14.這些現(xiàn)象提示我們在酶純化實驗中應該注意什么?15.描述Km值的含義，如何測定一個酶的Km值?16.如何理解在酶催化作用的高效性和專一性理論中論述的“來自酶與底物相互作用的結合賦予了催化反應的高效性和特異性”，并舉例說明。17.作為生物化學實驗室的新手，進入實驗室后，首先你需要幾周的時間刷瓶子和試管等，然后逐漸開始學習配制各種緩沖液和試劑。接下來你要開始一個蛋白質(zhì)的純化實驗。實驗目的是分離一種參與檸檬酸循環(huán)的酶，即位于線粒體基質(zhì)的檸檬酸合成酶。根據(jù)上述要求請設計這個實驗(包括實驗的材料，主要的實驗設備儀器和藥品，蛋白質(zhì)分離純化的技術原理，描述具體的實驗步驟，最后對實驗可能獲得的結果進行分析)。三、計算題1.假設濃度為2×10-4mol/L的抑制劑(Ⅰ)可使酶活力被抑制75%，求這個非競爭性抑制劑的Ki值。注：非競爭性抑制的動力學公式為2.某酶催化底物反應的雙倒數(shù)關系結果見下圖。求該酶的Km及Vmax。3.碳酸酐酶催化，此酶的相對分子質(zhì)量為30000，現(xiàn)有10μg純酶，在37℃下1min催化0.3gCO2發(fā)生水合作用，求此酶的轉(zhuǎn)換數(shù)。4.當一酶促反應的速度為Vmax的80%時，求Km與[S]之間的關系。某酶制劑的比活力為42單位/mg蛋白質(zhì)，每毫升含12mg蛋白質(zhì)。5.計算1ml反應液中含5μl酶制劑時的反應初速度。6.若1ml反應液內(nèi)含5μl酶制劑，在10min內(nèi)消耗底物多少?7.為保證測定酶的初速度，所需要的最低底物濃度是多少?以不同濃度的丙酮酸為底物，測定乳酸脫氫酶酶促反應速度得到以下一些數(shù)據(jù)(見下表)：丙酮酸濃度/(mol/L) 反應速度(V)/[μmol/(L·min)] 6.25×10-67.50×10-51.0×10-41.00×10-31.00