濾膜吸附在制劑溶出方法開發(fā)中的應(yīng)用

在一定程度上，體外溶出方法已經(jīng)作為評價制劑質(zhì)量一致（當制劑研發(fā)過程中，發(fā)生生產(chǎn)場地，生產(chǎn)設(shè)備，生產(chǎn)處方與工藝變更，制劑溶出一致性，可以保證治療質(zhì)量的一致性。），保證批次間質(zhì)量不發(fā)生變化，甚至指導(dǎo)創(chuàng)新藥制劑研發(fā)（一般情況下，創(chuàng)新藥開發(fā)過程中，溶出度最大化作為追求，進而提高藥物在體內(nèi)的釋放與吸收，增加藥物在體內(nèi)的暴露量，進而可以考察創(chuàng)新藥在患者中的療效）。如何開發(fā)出穩(wěn)健的溶出方法，在創(chuàng)新藥開發(fā)中起到舉足輕重的作用。介紹如何去開發(fā)溶出方法的文章不勝枚舉，而濾膜吸附作為溶出開發(fā)中至關(guān)重要的一步，卻鮮有人去介紹。不同時間點的溶出液溶解不同量原料藥，其中亦包含難以溶解的輔料。包含難溶性顆粒的溶出液是不能直接進高效液相色譜去檢測的，即使是使用紫外分光光度計去檢測，難溶性顆粒也會導(dǎo)致檢測基線不穩(wěn)定，進而影響檢測結(jié)果的真實性與重現(xiàn)性。這個時候，通常會使用濾膜過濾其溶出液。那么就牽涉到濾膜的選擇性問題。一般濾膜可以分為水膜系和有機膜系。水膜系可以過濾水性介質(zhì)，過濾有機溶劑易于造成濾膜溶解，介質(zhì)中會增加不必要的雜質(zhì)。有機膜系作為疏水的濾膜，一般過濾有機溶劑，當然可以也可以用于水性介質(zhì)的過濾，只是在過濾水性介質(zhì)的時候，會有吃力感覺。所以如果水膜滿足過濾要求，還是建議用水膜。水膜系濾膜中具有不同的孔徑，一般為0.22μm、0.45μm和0.8μm。以前在學(xué)校養(yǎng)細胞的時候，通常會使用0.22μm的膜去過濾PBS和細胞培養(yǎng)液，制備無菌溶液。0.8μm少用。目前在制劑溶出開發(fā)中，多見0.45μm，可以過濾去難溶性的顆粒，滿足液相以及紫外檢測的需要，對于特殊的檢測儀器可能要對溶液中的顆粒大小要求更加嚴格，具體情況具體分析。建議在研發(fā)過程中，使用同一廠家的濾膜，畢竟不能決定每個廠家的質(zhì)量標準是否一致，生產(chǎn)的濾膜的質(zhì)量是否有差異。當我們選擇多個不同材質(zhì)的0.45μm的水系濾膜，就可以開展濾膜吸附研究了。有的制劑研究工作者通過制備原料藥的溶液，然后原料藥溶液過膜與離心，比較這兩種處理所帶來的差異，去判斷藥物的吸附情況。還有研發(fā)人員通過制備原料藥與空白全輔料（制劑處方中可能用到的全部輔料）的混和溶液，混和溶液通過過濾與離心處理，比較這兩種處理方式對溶出液所造成的差異，進而判斷藥物的吸附情況。無論上述操作方法對錯與否，我們不妨從濾膜過濾的原理以及其影響因素的角度去探究一下。一般情況下，濾膜主要是通過孔徑的大小來限制溶液通過的。難溶性顆粒大于濾膜控制，將被濾膜拒之門外。濾膜的表面化學(xué)官能團與原料藥間的作用力亦影響著藥物的通過。當藥物以及輔料分散在溶出介質(zhì)中，輔料特別是具有酸堿性輔料，將會影響溶出介質(zhì)的pH大小，進而影響原料藥在溶液中的電荷情況，最終影響藥物與濾膜的作用力，抑制藥物吸附濾膜或增加藥物與濾膜的作用力。在USP1092中介紹到，過濾器的選擇是根據(jù)評價過程中溶出程序開發(fā)的早期階段，在后期試驗中可能需要重新考慮，比如藥品或成分的變化以及輔料質(zhì)量的變化（微晶纖維素粒徑的改變）。這句話也就表明了，輔料對于濾膜吸附的重要影響，在制劑開發(fā)過程中，關(guān)注處方變化，同時需要驗證濾膜吸附試驗是否匹配新的處方；同時，也表明我們在濾膜吸附實驗中使用空白全輔料似乎不能代替處方中輔料對于原料藥的影響。建議在處方尚未確定之前，可以離心處理溶出液，避免多次開發(fā)的麻煩。當我們確定制劑開發(fā)處方，使用原料藥與處方量輔料配制混和溶液，當然我們可以平行配制原料藥溶液。兩種溶液分別通過離心與過濾濾膜才處理。通過比對，兩種溶液吸附情況，探究輔料是否對于原料吸附有影響。當然，實際實驗中，我們可以直接使用原料藥與處方量輔料配制混和溶液，分別離心與過膜處理即可。我們通常會比較通過濾膜0、3、7ml的出液與離心處理的溶出液的差異，進而判斷通過多少溶出液后，濾膜達到飽和。溶出試驗時，會采用不同的取樣時間點，開始的幾個點制劑一般難以溶出完全，溶出液中藥物濃度也相對較低。一般情況下，溶出液濃度越高，濾膜越快達到飽和。濾膜吸附實驗中所采用的溶出液濃度應(yīng)該囊括最低與最高溶出量所對應(yīng)的溶出液濃度。一般情況，可以根據(jù)前期研究，制劑溶出情況，來確定最低溶出量與最高溶出量，具體范圍可以稍微往外擴延。溶出方法的開發(fā)在制劑研究中不可被取代，濾膜吸附試驗雖然在溶出開發(fā)過程中微不足道，但