農作物種子檢驗規(guī)程 發(fā)芽試驗

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1.主題內容與適用范圍

本標準規(guī)定了種子發(fā)芽試驗的方法。本標準適用于農作物種子質量的檢測。2引用標準

GB/T3543.2農作物種子檢驗規(guī)程扦樣GB/T3543.3農作物種子檢驗規(guī)程凈度分析3術語3.1發(fā)芽

在試驗室內幼苗出現(xiàn)和生長達到一定階段，幼苗的主要構造說明在田間的適合條件下能否進一步生長成為正常的植株。3.2發(fā)芽率

在規(guī)定的條件和時間內(見表1)長成的正常幼苗數(shù)占供檢種子數(shù)的百分率。3.3幼苗的主要構造

因種而異，由根系、幼苗中軸(上胚軸、下胚軸或中胚軸)、頂芽、子葉和芽鞘等構造組成。3.4正常幼苗

在良好土壤及適合水分、溫度和光照條件下，具有繼續(xù)生長發(fā)育成為正常植株的幼苗。

3.5不正常幼苗

生長在良好土壤及適合水分、溫度和光照條件下，不能繼續(xù)生長發(fā)育成為正常植株的幼苗。3.6復胚種子單位

能夠產生一株以上幼苗的種子單位，如傘形科未分開的分果，甜菜的種球等。3.7未發(fā)芽的種子

在表1規(guī)定的條件下，試驗末期仍不能發(fā)芽的種子，包括硬實、新鮮不發(fā)芽種子、死種子(尋常變軟、變色、發(fā)霉，并沒有幼苗生長的跡象)和其他類型(如空的、無胚或蟲蛀的種子)。3.8新鮮不發(fā)芽種子

由生理休眠所引起，試驗期間保持清潔和一定硬度，有生長成為正常幼苗潛力的種子。4發(fā)芽床

按表1規(guī)定，尋常采用紙和砂作為發(fā)芽床。除6.2條所述的特別狀況外，土壤或其他介質不宜用作初次試驗的發(fā)芽床。潮濕發(fā)芽床的水質應純凈、無毒無害，pH值為6.0-7.5。4.1紙床

4.1.1一般要求

具有一定的強度、質地好、吸水性強、保水性好、無毒無菌、清潔清白，不含可溶性色素或其他化學物質，pH值為6.0-7.5。可以用濾紙、吸水紙等作為紙床。

4.1.2生物毒性測定

利用梯牧草、紅頂草、彎葉畫眉草、紫羊茅和獨行菜等種子發(fā)芽時對紙中有毒物質繁感的特性，將品質不明和品質合格的紙進行發(fā)芽比較試驗，依據幼苗根的生長狀況進行鑒定。在表1規(guī)定的第一次計數(shù)時或提前觀測根部病癥。若根縮

短(有時出現(xiàn)根尖變色，根從紙上翹起，根毛成束)或(禾本科)幼苗的芽鞘扁平縮短等病癥，則表示該紙含有有毒物質。4.2砂床

4.2.1一般要求

砂粒大小均勻，其直徑為0.05-0.80mm。無毒無菌無種子。持水力強，pH值為6.0-7.5。使用前必需進行洗滌和高溫消毒。化學藥品處理過的種子樣品發(fā)芽所用的砂子，不再重復使用。4.2.2生物毒性測定4.3土壤

土質疏松良好、無大顆粒、不含種子、無毒無菌、持水力強、pH值為6.0-7.5。使用前，必需經過消毒，一般不重復使用。5儀器與試劑5.1儀器

5.1.1數(shù)種設備

數(shù)粒板、活動數(shù)粒板、真空數(shù)種器或電子自動數(shù)粒儀等。5.1.2發(fā)芽器具

a.發(fā)芽箱：有光照、控溫范圍10-40℃。b.雅可勃遜發(fā)芽器。

c.發(fā)芽室：室內具有可調理溫度和光照的條件。d.發(fā)芽器皿：發(fā)芽皿、發(fā)芽盤等。5.1.3冰箱5.2試劑

硝酸、硝酸鉀、赤霉酸、雙氧發(fā)。6試驗程序

6.1數(shù)取試驗樣品

從經充分混合的凈種子中，用數(shù)種設備或手工隨機數(shù)取400粒。尋常以100粒為一次重復，大粒種子或帶有病原菌的種子，可以再分為50粒、甚至25粒為一副重復。

6.2選用發(fā)芽床

各種作物的適合發(fā)芽床已在表1中作了規(guī)定。尋常小粒種子選用紙床；大粒種子選用砂床或紙間；中粒種子選用紙床、砂床均可。

表1農作物種子發(fā)芽的技術規(guī)定種名學名發(fā)芽床溫度初次計末次計附加數(shù)天數(shù)d數(shù)天數(shù)d說明124玉米ZeamaysL.紙間砂20-302025476.2.1紙床紙床包括紙上和紙間。

紙上(TP)是將種子放在一層或多層紙上發(fā)芽，紙可放在：a.培養(yǎng)皿內。

b.光照發(fā)芽箱內，箱內的相對濕度接近飽和。c.雅可勃遜發(fā)芽器上。

紙間(BP)是將種子放在兩層紙中間。可用以下方法：a.另外用一層紙松松地蓋在種子上。b.紙卷，把種子均勻置放在潮濕的發(fā)芽紙上，再用另一張同樣大小的發(fā)芽紙覆蓋在種子上，然后卷成紙卷，兩端用皮筋扣住，豎放。紙間可直接放在保濕的發(fā)芽箱盤內。6.2.2砂床砂床包括：

a.砂上(TS)：種子壓入砂的表面。

b.砂中(S)：種子播在一層平整的濕砂上，然后根據種子大小加蓋10-20mm厚度的松散砂。6.2.3土壤

當在紙床上幼苗出現(xiàn)植物中毒病癥或對幼苗鑒定發(fā)生懷疑時，為了比較或有某些研究目的，才采用土壤作為發(fā)芽床。6.3置床培養(yǎng)

按6.2的要求，將數(shù)取的種子均勻地排在潮濕的發(fā)芽床上，粒與粒之間應保持一定的距離。在培養(yǎng)器具上貼上標簽，按表1規(guī)定的條件進行培養(yǎng)。發(fā)芽期間要經常檢查溫度、水分和通氣狀況。如有發(fā)霉的種子應取出沖洗，嚴重發(fā)霉的應更換發(fā)芽床。見表１6.4控制發(fā)芽條件6.4.1水分和通氣

根據發(fā)芽床和種子特性決定發(fā)芽床的加水量。如砂床加水為其飽和含水量的60%-80%(禾谷類等中小粒種子為60%，豆類等大粒種子為80%)；如紙床，吸足水分后，瀝去多余水即可；如用土壤作發(fā)芽床，加水至手握土粘成團，再手指輕輕一壓就碎為宜。發(fā)芽期間發(fā)芽床必需始終保持潮濕。發(fā)芽應使種子周邊有足夠的空氣，注意通氣。特別是在紙卷和砂床中應注意：紙卷須相當疏松；用砂床和土壤試驗時，覆蓋種子的砂或土壤不要緊壓。6.4.2溫度

發(fā)芽應按表1規(guī)定的溫度進行，發(fā)芽器、發(fā)芽箱、發(fā)芽室的溫度在發(fā)芽期間應盡可能一致。表1規(guī)定的溫度為最高限度，有光照時，應注意不應超過此限度。儀器的溫度變幅不應超過±1℃。

當規(guī)定用變溫時，尋常應保持低溫16h及高溫8h。對非休眠的種子，可以在3h內逐漸變溫。如是休眠種子，應在1h或更短時間內完成急劇變溫或將試驗移到另一個溫度較低的發(fā)芽箱內。6.4.3光照

表1中大多數(shù)種的種子可在光照或黑暗條件下發(fā)芽，但一般采用光照。需光種子的光照強度為750-1250勒克司(Lx)，如在變溫條件下發(fā)芽，光照應在8h高溫時進行。

6.5休眠種子和處理

當試驗終止還存在硬實或新鮮不發(fā)芽種子時，可采用以下一種或幾種方法進行處理(詳見表1)。

6.5.1破除生理休眠的方法a.預先冷凍b.硝酸處理c.硝酸鉀處理

d.赤霉酸處理e.雙氧水處理f.去稃殼處理g.加熱枯燥

表2各種作物種子加熱枯燥的溫度和時間

作物名稱溫度，℃時間,d大麥，小麥30-353-5高粱302水稻405-7花生4014大豆300．5向日葵307棉花401煙草30-407-10胡羅卜、芹菜、菠菜、洋303-5蔥、黃瓜、甜瓜、西瓜6.5.2破除硬實的方法

a.開水燙種b.機械損傷

6.5.3除去抑制物質的方法

甜菜、菠菜等種子單位的果皮或種皮內有發(fā)芽抑制物質時，可把種子浸在溫水或流水中預先洗滌，甜菜復胚種子洗滌2h，遺傳單胚種子洗滌4h，菠菜種子洗滌1-2h。然后將種子枯燥，枯燥最高溫度不得超過25℃。6.6幼苗鑒定

6.6.1試驗持續(xù)時間

每個種的試驗持續(xù)時間詳見表1。試驗前或試驗間用于破除休眠處理所需時間不作為發(fā)芽試驗時間的一部分。

假使樣品在規(guī)定試驗時間內只有幾粒種子開始發(fā)芽，則試驗時間可延長7d，或延長規(guī)定時間的一半。根據試驗狀況，可增加計數(shù)的次數(shù)。反之，假使在規(guī)定試驗時間終止前，樣品已達到最高發(fā)芽率，則該試驗可提前終止。6.6.2鑒定

每株幼苗都必需按附錄A(補充件)規(guī)定的標準進行鑒定。鑒定要在主要構造已發(fā)育到一定時期進行。

在計數(shù)過程中，發(fā)育良好的正常幼苗應從發(fā)芽床中揀出，對可疑的或損傷、畸形或不均衡的幼苗，尋常到末次計數(shù)。嚴重腐爛的幼苗或發(fā)霉的種子應從發(fā)芽床中除去，并隨時增加計數(shù)。6.7重新試驗

當試驗出現(xiàn)以下狀況進，應重新試驗。

a.懷疑種子有休眠(即有較多的新鮮不發(fā)芽種子)，可采用表2或6.5所述的方法進行試驗，將得到的最正確結果填報，應注明所用的方法。

b.由于真菌或細菌的曼延而使試驗結果不一定可*時，可采用砂床或土壤進行試驗。如有必要，應增加種子之間的距離。

c.當正確鑒定幼苗數(shù)有困難時，可采用表1中規(guī)定的一種或幾種方法在砂床或土壤上進行重新試驗。d.當發(fā)現(xiàn)試驗條件、幼苗鑒定或計數(shù)有過錯時，應采用同樣方法進行重新試驗。

e.當100粒種子重復間的差距超過表3最大容許差距時，應采用同樣的方法行重新試驗。假使其次次結果與第一次結果相一致，即其差異不超過表4中所示的容許差距，則將兩次試驗的平均數(shù)填報在結果單上。假使其次次結果與第一次結果不相符合，其差異超過表4所示的容許差距，則采用同樣的方法進行第三次試驗，填報符合要求的結果平均數(shù)。

表3同一發(fā)芽試驗四次重復間的最大容許差距

(2.5%顯著水平的兩尾測定)

平均發(fā)芽率最大容許差50%以上50%以下距992598369747

9658

9569

93-947-810

91-929-1011

89-9011-1212

87-8813-1413

84-8615-1714

81-8318-2015

78-8021-2316

73-7724-2817

67-7229-3418

56-6635-4519

51-5546-5020

表4同一或不同試驗室來自一致或不同送驗樣品間發(fā)芽試驗的容許差距

(2.5%顯著水平的兩尾測定)

平均發(fā)芽率50%以上50%以下98-992-395-974-691-947-1085-9011-1677-8417-24最大容許差距2345660-7625-41751-5942-508

7結果計算和表示

試驗結果以粒數(shù)的百分率表示。當一個試驗的四次重復(每個重復以100粒計，相鄰的副重復合并成100粒的重復)正常幼苗百分率都在最大容許差距內(表3)，則其平均數(shù)表示發(fā)芽百分率。不正常幼苗、硬實、新鮮不發(fā)芽種子和死種子的百分率按四次重復平均數(shù)計算。正常幼苗、不正常幼苗和未發(fā)芽種子百分率的總和必需為100，平均數(shù)百分率修約到最近似的整數(shù)，修約0.5進入最大值中。8結果報告

填報發(fā)芽結果時，須填報正常幼苗、不正常幼苗、硬實、新鮮不發(fā)芽種子和死種子的百分率。假使其中任何一項結果為零，則將符號“-0-〞填入該格中。同時還須填報采用的發(fā)芽床和溫度、試驗持續(xù)時間以及為促進發(fā)芽所采用的處理方法。

表5同一或不同試驗室不同送驗樣品間發(fā)芽試驗的容許差距

(5%顯著水平的一尾測定)

平均發(fā)芽率最大容許差距

50%以上50%以下

99,22

97-983-43

94-955-74

91-938-105

87-