免疫課件細(xì)胞因子

史偉峰

科主任、副教授

蘇州大學(xué)《醫(yī)學(xué)免疫學(xué)》課程細(xì)胞因子蘇州大學(xué)附屬第三醫(yī)院個(gè)人簡介1.史偉峰，副教授，主任技師，臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)碩士生導(dǎo)師，檢驗(yàn)科主任。江蘇省重點(diǎn)醫(yī)學(xué)人才，江蘇省有突出貢獻(xiàn)的中青年專家，常州市衛(wèi)生系統(tǒng)領(lǐng)軍人才。2.學(xué)會任職中國微生物學(xué)會臨床微生物專業(yè)委員會委員江蘇省醫(yī)學(xué)會檢驗(yàn)學(xué)分會常務(wù)委員江蘇省醫(yī)學(xué)會微生物學(xué)與免疫學(xué)分會委員江蘇省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)委員會常務(wù)委員《臨檢雜志》常務(wù)編委常州市檢驗(yàn)專業(yè)委員會主任委員細(xì)胞因子概念

由免疫細(xì)胞及組織細(xì)胞經(jīng)刺激而合成、分泌在細(xì)胞間發(fā)揮相互調(diào)控作用的一類具有多種生物活性的小分子蛋白質(zhì)；通過結(jié)合相應(yīng)受體調(diào)節(jié)細(xì)胞生長分化和效應(yīng)、調(diào)控免疫應(yīng)答。

細(xì)胞因子的來源活化的免疫細(xì)胞：淋巴細(xì)胞尤其是T細(xì)胞、單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞、粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞等。基質(zhì)細(xì)胞類：血管內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞、中樞神經(jīng)系統(tǒng)的小膠質(zhì)細(xì)胞等。某些腫瘤細(xì)胞。細(xì)胞因子分布多數(shù)細(xì)胞因子是以可溶性蛋白的形式分布于組織間質(zhì)和體液中，但某些細(xì)胞因子如TNF可以跨膜分子形式表達(dá)于產(chǎn)生細(xì)胞的表面。6細(xì)胞因子的結(jié)構(gòu)7通過受體發(fā)揮作用一、研究簡史第一個(gè)時(shí)期：50－70年代中期1974細(xì)胞因子1957

Isaacs發(fā)現(xiàn)IFN1962巨噬細(xì)胞移動抑制因子1969單核因子，淋巴因子第二個(gè)時(shí)期：70年代中后期－80年代初期一、研究簡史主要問題：一種因子多種名稱一種作用一種因子重點(diǎn)研究了其產(chǎn)生及其靶細(xì)胞、性質(zhì)、作用、檢測方法1979年，統(tǒng)一命名白細(xì)胞介素

二、細(xì)胞因子的共同特點(diǎn)（一）基本特征*屬低分子量（8-30kD）的多肽或糖蛋白*分型：分泌型和跨膜型（TNF；TGF-α；SCF）*通過結(jié)合細(xì)胞表面相應(yīng)受體發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)*高效性*誘導(dǎo)產(chǎn)生；半衰期短；效應(yīng)范圍小自分泌autocrine內(nèi)分泌endocrine血液循環(huán)(TNF)遠(yuǎn)距離作用旁分泌paracrine作用于比鄰細(xì)胞(IL-12)作用于分泌細(xì)胞自身（IL2)（二）細(xì)胞因子的分泌方式12（三）細(xì)胞因子的功能特點(diǎn)1.高效性：靶細(xì)胞-受體；高親和力結(jié)合2.分泌性：旁分泌、自分泌、內(nèi)分泌；短時(shí)自限3.多效性：一CK多靶多效4.重疊性：多CK一靶一效5.協(xié)同性：一CK強(qiáng)化它CK6.拮抗性：一CK抑制它CK7.網(wǎng)絡(luò)性：多CK互相平衡8.同源性和多源性13

IL-2IFN-TNF-細(xì)胞因子的同源性與多源性IFN-

T細(xì)胞T細(xì)胞NK細(xì)胞14IL-4Th細(xì)胞肥大細(xì)胞Th細(xì)胞B細(xì)胞細(xì)胞因子的多效性15Th細(xì)胞B細(xì)胞細(xì)胞因子的協(xié)同性IL-4IL-516Th細(xì)胞B細(xì)胞細(xì)胞因子的重疊性IL-2IL-4IL-5

重疊性IL-2,4,7,9,12↓T細(xì)胞增殖

雙向性抗腫瘤↑適量

TNF↓過量

BSS(細(xì)菌性膿毒血癥休克)

協(xié)同作用

IL-1IL-4↓↓B細(xì)胞增殖

拮抗作用

IFN-

↓+

LAK細(xì)胞增殖↑ˉ

TGF-多效性IFN-

LAKBTh2NK增殖分化分泌活性殺傷活性(IL-1+IL-4)網(wǎng)絡(luò)性

NK1+TTH1MΦIL-4

骨髓基質(zhì)細(xì)胞IL-1IL-6IL-7SCF

造血干細(xì)胞IL-1IL-6IL-11TNF-aGM-CSFG-CMFM-CSF單核細(xì)胞TH2B中性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞IL-1IL-8TNF-aIL-1TNF-aIL-10IL-4IL-4IL-6IL-10IL-13IL-4TGF-bIL-4IL-5IL-6IL-13IL-10TGF-bIL-4IL-4內(nèi)皮細(xì)胞IL-4TcIL-4IL-2IFN-gIL-10IL-13IL-4

NK細(xì)胞IFN-gIL-2IL-2IFN-gIL-2IL-2IL-12G-CMFIFN-gGM-CSFIL-12IL-1TNF-aTGF-bPDGFFGFM-CSFGM-CSF內(nèi)皮細(xì)胞纖維母細(xì)胞下丘腦IL-1TNF-aM-CSFGM-CSFIL-1IL-6TNF-aIL-4IL-6IL-4CK介導(dǎo)免疫細(xì)胞間的通訊(1)直接(direct):表面分子(2)間接(indirect):CKs20

細(xì)胞因子特性

細(xì)胞因子間可相互誘生：

IL-1能誘生IFN、IL-1、IL-2、IL-4等，

IL-2能誘生TNF、IL-2、LT等。細(xì)胞因子可調(diào)節(jié)細(xì)胞因子受體的表達(dá)：

IL-1、IL-5、IL-6等可促進(jìn)IL-2受體的表達(dá)；

IL-1能降低TNF受體的密度，細(xì)胞因子與生物活性之間的相互影響。

B細(xì)胞和T細(xì)胞活化過程中，常需要兩種以上細(xì)胞因子的協(xié)同作用或彼此調(diào)節(jié)。21細(xì)胞因子特性細(xì)胞因子間可相互誘生：

IL-1能誘生IFN、IL-1、IL-2、IL-4等；

IL-2能誘生TNF、IL-2、LT等。細(xì)胞因子可調(diào)節(jié)細(xì)胞因子受體的表達(dá)

IL-1、IL-5、IL-6等可促進(jìn)IL-2受體的表達(dá)；IL-1能降低TNF受體的密度。細(xì)胞因子生物活性之間的相互影響

B細(xì)胞和T細(xì)胞活化過程中，常需要兩種以上細(xì)胞因子的協(xié)同作用或彼此調(diào)節(jié)。三、細(xì)胞因子的功能分類白細(xì)胞介素(interleukin,IL)干擾素(Interferon,IFN)集落刺激因子(colonystimulatingfactor,CSF)腫瘤壞死因子(Tumornecrosisfactor,TNF)生長因子(Growthfactor,GF)趨化因子(chemokineCK)表4-1白細(xì)胞介素的特性（IL）曾用名稱產(chǎn)生細(xì)胞

效應(yīng)1淋巴細(xì)胞活化因子（LAF）單核巨噬細(xì)胞，樹突狀細(xì)胞，纖維母細(xì)胞內(nèi)皮細(xì)胞T和B細(xì)胞的增殖和分化，刺激造血細(xì)胞，參予炎癥反應(yīng)2T細(xì)胞生長因子活化的T細(xì)胞T和B細(xì)胞的增殖分化，增強(qiáng)NK細(xì)胞，單核細(xì)胞殺傷活性3多集落刺激因子（multi-CSF）活化的T細(xì)胞

多能造血干細(xì)胞增殖，促進(jìn)肥大細(xì)胞，嗜酸，嗜堿性粒細(xì)胞增殖與分化4B細(xì)胞刺激因子（BSF-1）

B細(xì)胞生長因子（BCGF-1）活化的T細(xì)胞B和T細(xì)胞增殖，刺激造血祖細(xì)胞增殖與分化，誘導(dǎo)lgE、lgG產(chǎn)生5B細(xì)胞生長因子-Ⅱ（BCGF-Ⅱ）活化的T細(xì)胞促進(jìn)B細(xì)胞增殖與分化，促進(jìn)嗜酸性粒細(xì)胞增殖與分化，誘導(dǎo)lgA產(chǎn)生6B細(xì)胞刺激因子-2（BSF-2）

B細(xì)胞分化因子（BCDF）淋巴細(xì)胞

單核細(xì)胞/纖維母細(xì)胞促進(jìn)B細(xì)胞分化、促進(jìn)肝細(xì)胞產(chǎn)生急性期蛋白，抑制乳腺癌細(xì)胞、刺激骨髓瘤細(xì)胞、刺激造血細(xì)胞，參與炎癥7淋巴細(xì)胞生素（LPO）骨髓及胸腺基質(zhì)細(xì)胞促進(jìn)前T、前B細(xì)胞增殖，促進(jìn)成熟T細(xì)胞生長，促進(jìn)血小板生成8中性粒細(xì)胞趨化因子（NCF）

粒細(xì)胞活化因子（NAF）單核巨噬細(xì)胞

血管內(nèi)皮細(xì)胞中性粒細(xì)胞活化和趨化作用，T細(xì)胞趨化作用，促進(jìn)血管生成，參與炎癥9

肥大細(xì)胞生長增強(qiáng)活性T細(xì)胞生長因子（TCGFⅢ）活化的T細(xì)胞促進(jìn)TH產(chǎn)生細(xì)胞因子,促進(jìn)肥大細(xì)胞增殖,刺激造血細(xì)胞10細(xì)胞因子合成抑制因子(CSIF)活化的T細(xì)胞,B細(xì)胞單核巨噬細(xì)胞抑制TH產(chǎn)生細(xì)胞因子,促朝進(jìn)胸腺細(xì)胞增殖,促進(jìn)B細(xì)胞增殖11(一)骨髓基質(zhì)細(xì)胞促進(jìn)B細(xì)胞分化,刺激造血細(xì)胞,促進(jìn)血小板生成12細(xì)胞毒性淋巴細(xì)胞成熟因子(CLMF)B細(xì)胞促進(jìn)TC，NK，LAK細(xì)胞殺傷功能，透導(dǎo)細(xì)胞免疫13P600活化的T細(xì)胞抑制細(xì)胞因子分泌和表達(dá)，刺激B細(xì)胞增殖和CD23表達(dá)，透導(dǎo)lgE產(chǎn)生（一）白細(xì)胞介素IL-1β1.產(chǎn)生細(xì)胞：淋巴細(xì)胞、單核吞噬細(xì)胞等2.介導(dǎo)白細(xì)胞間相互作用、調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長分化、參與免疫應(yīng)答和介導(dǎo)炎癥反應(yīng).及造血干細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、纖維母細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、成骨和破骨細(xì)胞等的相互作用。3.種類：IL-1--IL-38251.IL-1（1）發(fā)熱

IL-1是一種內(nèi)源性熱原質(zhì)（endogenouspyrogen),引起發(fā)熱與內(nèi)毒素不同，IL-1對熱敏感，反復(fù)注射不產(chǎn)生耐受。IL-1促進(jìn)單核-巨噬細(xì)胞釋放PGE2，刺激下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞，引起發(fā)熱和感染性休克。（2）促進(jìn)肝細(xì)胞合成急性期蛋白

如C-反應(yīng)蛋白、α酸性糖蛋白以及某些補(bǔ)體的組分，有利于機(jī)體抵抗病原微生物，是非特異性防御因素之一。（3）對間質(zhì)細(xì)胞和其它細(xì)胞的作用：

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，關(guān)節(jié)囊內(nèi)巨噬細(xì)胞受到刺激和活化后可分泌IL-1，刺激滑膜/軟骨/成纖維細(xì)胞分泌大量PGE2、膠原酶和中性蛋白酶等；導(dǎo)致關(guān)節(jié)中的膠原組織降解，骨質(zhì)吸收，局部血管通透性增加，直接參與關(guān)節(jié)的病理損傷。

26

1.IL-1（4）抗腫瘤作用：由于IL-1能協(xié)同IL-2、IFN-γ誘導(dǎo)CTL和NK細(xì)胞的殺傷活性，促進(jìn)殺傷細(xì)胞IL-2受體的表達(dá)以及成纖維細(xì)胞分泌IL-6，因此具有抗腫瘤作用。臨床已試用IL-1治療腫瘤。（5）抗放射作用：小鼠注射IL-1100ng在950R照射條件下，可提高白細(xì)胞水平，延長存活時(shí)間，能預(yù)防放療造成的骨髓抑制。臨床上已試用IL-1治療骨髓移植。最近在動物實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)IL-1能降低血糖水平，有可能成為治療糖尿病的新藥。27疾病IL-1的作用慢性風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和Lyme病發(fā)熱，促骨滑膜細(xì)胞增殖，破壞軟骨和骨髓骨質(zhì)疏松癥促進(jìn)骨吸收川崎病損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞中毒性休克綜合癥損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞痛風(fēng)尿結(jié)晶引起局部產(chǎn)生IL-1，致炎癥腎小球腎炎腎小球細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)產(chǎn)生PGE2肉芽腫促進(jìn)肉芽腫形成2、與IL-1有關(guān)的疾病28某些白血病患者的血清和尿中以及單核細(xì)胞培養(yǎng)上清中，發(fā)現(xiàn)一種多肽性質(zhì)的IL-1特異性抑制因子，稱為IL-1受體拮抗物(IL-1RA,interleukin1receptorantagonist)

又稱IL-1受體拮抗蛋白（IL-1receptorantagonistprotein,IRAP)。3、IL-1受體拮抗物29

（二）IL-2

1976年Morgan等，發(fā)現(xiàn)小鼠脾細(xì)胞培養(yǎng)上清中含有一種刺激胸腺細(xì)胞生長的因子，由于這種因子能促進(jìn)和維持T細(xì)胞長期培養(yǎng)，稱為T細(xì)胞生長因子（tcellgrowthfactor,TCGF）；

1979年統(tǒng)一命名為白細(xì)胞介素2（IL-2)

1、IL-2生物學(xué)效應(yīng)促進(jìn)Ｔ細(xì)胞活化增殖增強(qiáng)ＮＫ細(xì)胞活性促進(jìn)Ｂ細(xì)胞增殖和分泌抗體31IL-2RβIL-2RγIL-2IL-2Rα32SLE(系統(tǒng)紅斑狼瘡)RA（類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎）何杰金病Ⅰ型糖尿病AIDS活動性內(nèi)臟利什曼病尖銳濕疣成年人T細(xì)胞白血病2、與IL-2產(chǎn)生和表達(dá)異常有關(guān)的疾病33IL-2IL-2Rα成年人T細(xì)胞白血病發(fā)生機(jī)制IL-4活化Th2細(xì)胞B細(xì)胞巨噬細(xì)胞T細(xì)胞活化干細(xì)胞分化表達(dá)MHC-II，表達(dá)CD23，分泌IgG1，IgE，IgA促進(jìn)：分化，細(xì)胞毒活性（LAK），巨細(xì)胞形成促進(jìn)：抗原呈遞，MHC表達(dá)，殺傷腫瘤活性促進(jìn)：

（三）IL-4IL-5

Th2細(xì)胞T細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞B細(xì)胞促進(jìn)：細(xì)胞增殖IgM，IgG，IgA的分泌，IL-2受體表達(dá)細(xì)胞分化促進(jìn)分化趨化作用增強(qiáng)細(xì)胞毒性

（四）IL-5IL-10

Th2細(xì)胞B細(xì)胞肥大細(xì)胞B細(xì)胞活化巨噬細(xì)胞促進(jìn)增殖巨噬細(xì)胞促進(jìn)MHC-II表達(dá)和細(xì)胞擴(kuò)增抑制：IL-1，IL-12TNF-a和MHC-II等分子的表達(dá)抑制Th1細(xì)胞功能

（五）IL-1037IL產(chǎn)生細(xì)胞AAMW（kDa)主要生物學(xué)活性IL-1單核/巨噬細(xì)胞IL-1α159IL-1β153

17.517.5

（1）促進(jìn)胸腺細(xì)胞、T細(xì)胞活化、增殖和分化（2）增強(qiáng)CTL和NK殺傷活性（3）協(xié)同IL-4刺激B細(xì)胞增殖、分化和Ig產(chǎn)生（4）協(xié)同CSF促進(jìn)造血功能（5）刺激干細(xì)胞產(chǎn)生SCFIL-2

活化T

133

15.5

（1）促進(jìn)活化T細(xì)胞增殖、分化和細(xì)胞因子產(chǎn)生（2）增強(qiáng)CTL、NK和LAK殺傷活性（3）促進(jìn)B細(xì)胞增殖、分化和抗體分泌（4）活化巨噬細(xì)胞IL-3

活化T

133

15（1）促進(jìn)多能干細(xì)胞、定向祖細(xì)胞、髓樣、紅樣、巨核、前單、單核、中性、嗜酸、肥大細(xì)胞增殖和分化（2）促進(jìn)T細(xì)胞增殖（3）增強(qiáng)外周血PMN、Mo、Eo的數(shù)量，促進(jìn)Eo的ADCC小結(jié)38IL產(chǎn)生細(xì)胞AAMW（kDa)主要生物學(xué)活性IL-4

活化T細(xì)胞（Th2)129

20

（1）促活化B增殖、Ig產(chǎn)生和轉(zhuǎn)換為IgE和IgG1（2）T細(xì)胞生長因子（3）促進(jìn)肥大細(xì)胞增殖（4）增強(qiáng)巨噬細(xì)胞功能（5）協(xié)同CSF刺激造血細(xì)胞IL-5活化T細(xì)胞（Th2)115×2

45

（1）誘導(dǎo)B細(xì)胞分化為抗體分泌細(xì)胞、IgA合成（2）協(xié)同IL-2促進(jìn)CTL分化（3）促進(jìn)人Eo激活、增殖和分化IL-6單核細(xì)胞

巨噬細(xì)胞

成纖維細(xì)胞18426（1）刺激T、B細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞和干細(xì)胞增殖（2）促進(jìn)B細(xì)胞Ig產(chǎn)生（3）促進(jìn)CTL、NK干細(xì)胞和巨核細(xì)胞分化IL-7

骨髓和胸腺中基質(zhì)細(xì)胞152

25（1）刺激B細(xì)胞前體、前B細(xì)胞的增殖（2）促進(jìn)前T細(xì)胞、胸腺細(xì)胞和T細(xì)胞增殖（3）誘導(dǎo)LAK活性39IL-8

單核細(xì)胞內(nèi)皮細(xì)胞69,72,77,798-10

趨化中性、嗜堿性粒細(xì)胞IL-9

活化T

12614.2

（1）T細(xì)胞生長因子（2）協(xié)同IL-3刺激肥大細(xì)胞IL-10

活化Th2

2×160

35～40

（1）抑制Th1細(xì)胞分泌CK（2）促進(jìn)胸腺和肥大細(xì)胞增殖（3）協(xié)同IL-2促進(jìn)CTL分化IL-11基質(zhì)纖維樣17823（1）促進(jìn)B細(xì)胞抗體分泌（2）促進(jìn)漿細(xì)胞瘤生長（3）協(xié)同IL-3等刺激骨髓干細(xì)胞和巨核細(xì)胞生長40IL-12B細(xì)胞197/306

35/40

（1）協(xié)同IL-2促CTL、NK、LAK分化（2）促進(jìn)PHA活化T細(xì)胞增殖（3）促進(jìn)B細(xì)胞Ig產(chǎn)生和類型轉(zhuǎn)換IL-13活化T13217（1）刺激B細(xì)胞增殖和CD23表達(dá)（2）抑制單核-巨噬細(xì)胞炎癥性細(xì)胞因子產(chǎn)生IL-14活化T

468-（1）刺激活化B細(xì)胞增殖（2）抑制絲裂原誘導(dǎo)B細(xì)胞Ig的分泌細(xì)胞因子在TH細(xì)胞分化中的作用（二）干擾素(Interferon,IFN)具有干擾病毒感染和復(fù)制功能的細(xì)胞因子。能刺激多種細(xì)胞（單核巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞以及體細(xì)胞）產(chǎn)生一種糖蛋白I型干擾素：IFN-α（20多個(gè)亞型）,IFN-β（4個(gè)亞型）,IFN-ω產(chǎn)生細(xì)胞：白細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、病毒感染細(xì)胞等；作用：抗病毒。IFN-α是最早發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞因子。應(yīng)用：病毒感染性疾病等，肝炎、SARS

II型干擾素：IFN-γ1.產(chǎn)生細(xì)胞：活化T細(xì)胞和NK細(xì)胞；2.作用：重要的免疫調(diào)節(jié)功能。56℃1h滅活V加入碎片雞胚絨毛尿囊膜吸附病毒的膜片沖洗37℃

培養(yǎng)12h加入新膜片37℃培養(yǎng)12h吸取培養(yǎng)液V活流感病毒活流感病毒V攻擊病毒繁殖被抑制IFN的發(fā)現(xiàn)刺激細(xì)胞產(chǎn)生抑制蛋白激活因子抗病毒蛋白酶抑制生物合成I型干擾素產(chǎn)生以及作用機(jī)理示意圖干擾素激活干擾素基因具有種屬特異性抗病毒蛋白酶基因活化干擾素抗病毒作用的機(jī)理——抑制病毒蛋白生物合成名稱氨基酸數(shù)受體產(chǎn)生細(xì)胞功能IFN-α166CD118白細(xì)胞抗病毒，促進(jìn)MHCI類分子的表達(dá)IFN-β166CD118成纖維細(xì)胞抗病毒，促進(jìn)MHCI類分子的表達(dá)IFN-

143CD119T細(xì)胞、NK細(xì)胞激活巨噬細(xì)胞，促進(jìn)MHC分子表達(dá)和抗原提呈，抑制Th2細(xì)胞干擾素

表1干擾素生產(chǎn)車間臨床上常用的干擾素有哪些制劑自然干擾素：人體淋巴母細(xì)胞樣多亞型天然干擾素（IFN-N1），葛蘭素威康公司（英國）生產(chǎn)，商品名為惠福仁。

人體白細(xì)胞重組干擾素（IFNα1b）：世界上第一個(gè)采用中國人干擾素基因克隆和表達(dá)的IFNα1b型干擾素，商品名為賽若金，深圳科興生物制品有限公司生產(chǎn)

IFN-α2a：羅氏公司（瑞士）生產(chǎn)的羅擾素；沈陽三生公司生產(chǎn)的因特芬；遼寧衛(wèi)星生物研究所生產(chǎn)的迪恩安。

IFNα2b：先靈葆雅（美國）公司生產(chǎn)的干擾素；天津華立達(dá)公司生產(chǎn)的安福??；安徽安科公司生產(chǎn)的安達(dá)芬。復(fù)合干擾素：安進(jìn)公司（美國）生產(chǎn)的復(fù)合干擾素C-IFN，商品名為干復(fù)津。其為針對治療目的而設(shè)計(jì)的一種非人體能自然產(chǎn)生的生物合成干擾素。

干擾素-α/β的生理作用1.干擾素-α/β的生理作用⑴廣譜的抗病毒作用；⑵抑制某些細(xì)胞的生長，如抑制成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和造血細(xì)胞的增殖；⑶免疫調(diào)節(jié)作用；⑷抑制和殺傷腫瘤細(xì)胞。干擾素制劑有自然的和重組的兩類。臨床應(yīng)用的干擾素主要是從大腸桿菌中獲得的基因重組蛋白，僅表現(xiàn)單一亞型，如α-1b。2.干擾素的臨床應(yīng)用

⑴

治療病毒性感染，干擾素對乙肝、丙肝、病毒性角膜炎、慢性宮頸炎、新生兒病毒性腦炎以及病毒性感冒均有一定療效。⑵治療腫瘤，干擾素對多種腫瘤近期有良好療效，如白血病、淋巴瘤、乳腺癌、食道癌、艾滋病等。干擾素有哪些不良反應(yīng)1、發(fā)熱：治療第一針常出現(xiàn)高熱現(xiàn)象。以后逐漸減輕或消失；2、感冒樣綜合征：多在注射后2～4個(gè)小時(shí)出現(xiàn)。有發(fā)熱、寒戰(zhàn)、乏力、肝區(qū)痛、背痛和消化系統(tǒng)癥狀，如惡心、食欲不振、腹瀉及嘔吐。治療2～3次后逐漸減輕。對感冒樣綜合征可于注射后2小時(shí)，給撲熱息痛等解熱鎮(zhèn)痛劑，對癥處理，不必停藥；或?qū)⒆⑸鋾r(shí)間安排在晚上。3、骨髓抑制：出現(xiàn)白細(xì)胞及血小板減少，一般停藥后可自行恢復(fù)。治療過程中白細(xì)胞及血小板持續(xù)下降，要嚴(yán)密觀察血象變化。當(dāng)白細(xì)胞計(jì)數(shù)＜3.0×10^9/L或中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)＜1.5×10^9/L，或血小板計(jì)數(shù)＜40×10^9/L時(shí)，需停藥，并嚴(yán)密觀察，對癥治療，注意出血傾向。血象恢復(fù)后可重新恢復(fù)治療。但需密切觀察。4、神經(jīng)系統(tǒng)癥狀：如失眠、焦慮、抑郁、興奮、易怒、精神病。出現(xiàn)抑郁及精神病癥狀應(yīng)停藥。5、少見的副反應(yīng)有：如癲癇、腎病綜合征、間質(zhì)性肺炎和心律失常等。出現(xiàn)這些疾病和癥狀時(shí)，應(yīng)停藥觀察。6、誘發(fā)自身免疫性疾?。喝缂谞钕傺?、血小板減少性紫癜、溶血性貧血、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、紅斑狼瘡樣綜合征、血管炎綜合征和Ⅰ型糖尿病等，停藥可減輕。（三）腫瘤壞死因子家族可以直接誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的細(xì)胞因子。分類：1.TNF

：活化的單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生亦稱惡液質(zhì)素2.TNF：活化的T細(xì)胞產(chǎn)生，亦稱淋巴毒素。TNF-α和TNF-β共用受體，功能相似，直接誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡；引起發(fā)熱、誘導(dǎo)急性期蛋白合成、介導(dǎo)內(nèi)毒素性休克。

3.TRAIL、FasL、CD40L腫瘤壞死家族細(xì)胞因子名稱氨基酸數(shù)受體產(chǎn)生細(xì)胞功能TNF-α157CD120aCD120b巨噬細(xì)胞NK細(xì)胞T細(xì)胞局部炎癥激活內(nèi)皮細(xì)胞TNF-β171CD120aCD120bT細(xì)胞B細(xì)胞殺傷激活內(nèi)皮細(xì)胞CD40L261CD40T細(xì)胞肥大細(xì)胞B細(xì)胞激活類別轉(zhuǎn)換FasL278CD95T細(xì)胞誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡57生物學(xué)性質(zhì)IL-1TNFIL-6內(nèi)源性熱原質(zhì)引起發(fā)熱+++肝急性期蛋白+++T細(xì)胞活化+++B細(xì)胞活化+++B細(xì)胞免疫球蛋白合成+-+成纖維細(xì)胞增殖++-干細(xì)胞活化+-+非特異性抗感染+++抗放射++-滑膜細(xì)胞活化++-內(nèi)皮細(xì)胞活化++-休克綜合征++-誘導(dǎo)IL-1、TNF、IL-6和IL-8++-表.TNF與IL-1、IL-6的生物學(xué)性質(zhì)比較TNF的生物學(xué)活性1殺瘤、抑瘤作用（1）直接殺傷或抑制腫瘤細(xì)胞（2）激活NK細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，間接發(fā)揮作用（3）損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)血栓的形成，阻斷腫瘤組織的血流供應(yīng)，導(dǎo)致腫瘤出血壞死

2免疫調(diào)節(jié)作用（1）刺激靶細(xì)胞合成分泌細(xì)胞因子，如IL-1、IL-6、IL-8等（2）增強(qiáng)T、B細(xì)胞對抗原和有絲分裂原的增殖反應(yīng)（3）增強(qiáng)Tc細(xì)胞對靶細(xì)胞的殺傷活性TNF的生物學(xué)活性3、促進(jìn)炎癥反應(yīng)（1）誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞間粘附分子－1（ICAM-1)（2）分泌IL-1、IL-8等炎癥分子和趨化因子（3）增強(qiáng)中性粒細(xì)胞和單核吞噬細(xì)胞的吞噬功能4、抗病毒作用（1）類似于IFN的作用（2）直接殺傷病毒感染細(xì)胞5、致熱作用內(nèi)熱性熱源質(zhì)

(1)直接作用于下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞（2）刺激巨噬細(xì)胞釋放IL-16、引發(fā)惡液質(zhì)由TNF

引起，能夠促進(jìn)蛋白脂肪消耗、分解，引起代謝紊亂。表現(xiàn)為厭食、惡心、消瘦、衰弱和貧血

骨髓MjT細(xì)胞B細(xì)胞巨噬細(xì)胞中性粒細(xì)胞IL-2IL-4g-IFNTNF-a上調(diào)細(xì)胞因子產(chǎn)生水平（IL-2，IL-4，g-IFN，CSF）上調(diào)IL-2

受體的表達(dá)誘導(dǎo)分化上調(diào)抗體產(chǎn)生數(shù)量上調(diào)前列腺素產(chǎn)生水平上調(diào)細(xì)胞因子產(chǎn)生水平（IL-1，IL-6，IL-8，GM-CSF）趨化并活化中性粒細(xì)胞體內(nèi)刺激產(chǎn)生CSF上調(diào)造血功能TNF-a對淋巴組織的作用分類粒細(xì)胞集落刺激因子（granulocyte-CSF,G-CSF)巨噬細(xì)胞集落刺激因子（macrophage-CSF，M－CSF)粒細(xì)胞－巨噬細(xì)胞集落刺激因子（granulocyte-maceophage-CSF,GM-CSF)紅細(xì)胞生成素（erythropoietin,EPO)干細(xì)胞生成因子（stemcellfactor,SCF)多能集落刺激因子（multi-CSF)

（四）集落刺激因子(Colonystimulatingfactor,CSF)

能夠刺激不同發(fā)育階段的造血干細(xì)胞和祖細(xì)胞(增殖分化并在半固體培養(yǎng)基中形成相應(yīng)細(xì)胞集落的細(xì)胞因子。62M增加MCSF臨床治療疾病使用情況外顯子/內(nèi)含子人與鼠同源性（%）人與鼠活性交叉G-CSF（CSF-β）增加化療作用，艾滋病，白血病，再生障礙性貧血、癌癥，骨髓移植FDA已批準(zhǔn)5/473+M-CSF

（CSF-1）Ⅰ期臨床80+GM-CSF（CSF-α，CSF-2）二次化療所致中性粒細(xì)胞減少癥，異體和自體骨髓移植，再生障礙性貧血，燙傷骨髓功能衰竭，血小板減小FDA已批準(zhǔn)4/354-IL-3（multi-CSF)Ⅰ、Ⅱ期臨床試驗(yàn)5/429_EPO貧血FDA已批準(zhǔn)5/480+SCF癌癥Ⅰ期臨床

80

集落形成實(shí)驗(yàn)半固體瓊脂糖(0.3%)培養(yǎng)系統(tǒng)加入待測CSF培養(yǎng)集落刺激因子的作用（五）趨化因子趨化因子（chemokines,chemoattractantcytokines

，CK）是能使細(xì)胞發(fā)生趨化運(yùn)動的小分子細(xì)胞因子。趨化運(yùn)動是指細(xì)胞向高濃度刺激物方向的定向運(yùn)動。功能：招募血液中的單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等進(jìn)入感染發(fā)生部位。

根據(jù)蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)進(jìn)行分類：

CXC（

）趨化因子；

CC（

）趨化因子；

C（

）趨化因子；

CX3C（

）趨化因子。C為半胱氨酸,X為任意氨基酸趨化因子類名稱受體產(chǎn)生細(xì)胞功能CXCIL-8CXCR1CXCR2巨噬細(xì)胞，單核細(xì)胞角化細(xì)胞，內(nèi)皮細(xì)胞成纖維細(xì)胞趨化激活中性粒細(xì)胞，刺激血管生成CCMIP-1

CCR1,3,5T細(xì)胞，單核細(xì)胞肥大細(xì)胞，成纖維細(xì)胞抗病毒，與HIV-1競爭結(jié)合受體，促進(jìn)Th1反應(yīng)MIP-1

CCR1,3,5巨噬細(xì)胞，單核細(xì)胞中性粒細(xì)胞，內(nèi)皮細(xì)胞與HIV-1競爭結(jié)合受體MCP-1CCR2B巨噬細(xì)胞，單核細(xì)胞成纖維細(xì)胞，角化細(xì)胞刺激骨髓巨核細(xì)胞的分化成熟RANTSCCR1,3,5T細(xì)胞，血小板內(nèi)皮細(xì)胞刺激嗜堿性細(xì)胞脫顆粒，激活T細(xì)胞CLymphotactinT細(xì)胞淋巴細(xì)胞的移行CX3CFanctalkine單核細(xì)胞，內(nèi)皮細(xì)胞白細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的黏附

（六）生長因子(Growthfactor)

具有促進(jìn)不同類型細(xì)胞生長效應(yīng)的細(xì)胞因子分類：1.轉(zhuǎn)化生長因子（transforminggrowthfactor-,TGF)2.表皮生長因子（epidermalgrowthfactor,EGF)3.血管內(nèi)皮生長因子（vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)4.成纖維細(xì)胞生長因子（fibroblastgrowthfactor,FGF)5.神經(jīng)生長因子(nervegrowthfactor,NGF)6.血小板衍生的生長因子（plateletderivedgrowthfactor,PDGF)7.肝細(xì)胞生長因子（hepaticgrowthfactor,HGF)TGF-

1.細(xì)胞來源：T、B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞等。為同源二聚體，MW＝25kD。TGF-

1、TGF-

2和TGF-

3

2.生物學(xué)功能（免疫抑制調(diào)節(jié)劑）

(1)抑制T細(xì)胞增殖和細(xì)胞因子產(chǎn)生；

(2)抑制B細(xì)胞增殖和T細(xì)胞依賴性多克隆抗體的產(chǎn)生；

(3)抑制NK細(xì)胞活化和IL-2的LAK細(xì)胞誘導(dǎo)作用；

(4)抑制Mφ活化和前炎性細(xì)胞因子產(chǎn)生；

(5)抑制多種細(xì)胞增殖（如內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞），但促成纖維細(xì)胞增殖，加速傷口愈合；

(6)某些腫瘤細(xì)胞分泌TGF-

，可逃避免疫應(yīng)答。74四、細(xì)胞因子受體從細(xì)胞因子結(jié)合其受體開始，到某些基因轉(zhuǎn)錄的啟動，要經(jīng)歷復(fù)雜的細(xì)胞內(nèi)分子間的相互作用，這樣的作用過程稱為細(xì)胞因子的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。細(xì)胞因子受體都是跨膜蛋白，由胞膜外區(qū)、跨膜區(qū)和胞漿區(qū)組成。751.免疫球蛋白超家族

(1)

結(jié)構(gòu)特點(diǎn)膜外區(qū)具有免疫球蛋白樣功能區(qū)。

(2)

成員包括IL-1、IL-6、M-CSF、SCF的受體2.Ⅰ型細(xì)胞因子受體家族(造血因子受體家族)

（1）結(jié)構(gòu)特點(diǎn)膜外區(qū)近氨基端有二個(gè)不連續(xù)保守半胱氨酸殘基（C），其羧基端存在Trp-Ser-X-Trp-Ser（WSXWS，X代表任一氨基酸）殘基序列。（2）成員包括

IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-9、

IL-11、IL-13、IL-15、GM-CSF、G-CSF的受體等。3.Ⅱ型細(xì)胞因子受體家族(干擾素受體家族)（1）結(jié)構(gòu)特點(diǎn)膜外區(qū)近氨基端含有四個(gè)不連續(xù)保守半胱氨酸殘基。（2）成員包括I型、II型IFN的受體。

（一）細(xì)胞因子受體分類4.Ⅲ型細(xì)胞因子受體家族(TNF/NGF受體家族)

（1）結(jié)構(gòu)特點(diǎn)膜外區(qū)富含半胱氨酸基序。（2）成員包括TNF受體、NGF受體、Fas蛋白及

CD40分子。5.趨化因子受體家族(G蛋白偶聯(lián)受體家族)

（1）結(jié)構(gòu)特點(diǎn)含有7個(gè)疏水性跨膜區(qū)(

-螺旋結(jié)構(gòu))，胞質(zhì)區(qū)與G蛋白(結(jié)合GTP的蛋白)結(jié)合，將信號轉(zhuǎn)導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)部。（2）成員包括CXCR---結(jié)合CXC型趨化因子（如

IL-8）CCR---結(jié)合CC型趨化因子（如MCP-1）。-S-S--S-S--S-S-CC

CCC1C3C2C1C3C2C1C3C2C1C3C2G蛋白免疫球蛋白超家族受體

I類細(xì)胞因子受體（血細(xì)胞受體家族）II類細(xì)胞因子受體TNF-R趨化因子受體（7次跨膜的G蛋白偶聯(lián)受體）IL-1M-CSFIL-18SCFIL-2IL-3IL-4IL-5IL-6IL-7IL-9IL-11IL-12IL-13IL-15OSMGM-CSFG-CSFLIFCNTF生長激素催乳素IFN-aIFN-bIFN-gIL-10TNF-aTNF-b

CD40L神經(jīng)生長因子（NGF）FASLIL-8RANTESMIP-1PF4MCAFNAP-2

細(xì)胞因子受體結(jié)構(gòu)圖

CC家族趨化因子受體及與其相作用配體趨化因子受體配體CCReceptors

CCR1MIP-1α,RANTES,MCP-1,CCR2A&BCCR3Eotaxin,RANTES,MCP-2,3,4CCR4MIP-1α,RANTES,MCP-1,CCR5CCR6MIP-3α/LARC/Exodus-1CCR7/EBI1MIP-3β/ELCCCR8I-309/mTCA-3CCR9/10MCP-1,3MCP-1,MCP-3,MCP-5MIP-1α,MIP-1β,RANTES81（二）細(xì)胞因子受體的結(jié)構(gòu)特征1、多亞單位受體2、共用亞單位細(xì)胞因子受體共同鏈

兩個(gè)或更多細(xì)胞因子受體亞單位組成異聚或多聚體形式，包括：一個(gè)特異性配體結(jié)合（鏈,低親和力受體）和一個(gè)參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)鏈（鏈，高親和力受體）。

（二）細(xì)胞因子受體的結(jié)構(gòu)特征1.肽鏈組成

(1)一條肽鏈---如EPO、G-CSF的受體及趨化因子受體家族成員；

(2)二條肽鏈---如IL-3、IL-5、GM-CS的受體等；

(3)三條肽鏈---如IL-2及IL-15的受體。2．共同信號鏈(或共同亞單位)(1)指不同細(xì)胞因子受體共用的一條相同的與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)有關(guān)的肽鏈。目前發(fā)現(xiàn)有三種共同亞單位

1)γ鏈（γc）IL-2、IL-4、IL-7、IL-9、IL-15的受體共有；

2)β鏈IL-3、IL-5、GM-CSF的受體共有；

3)gp130IL-6、IL-12的受體共有。

IL-2受體

IL-2受體由3條肽鏈組成，包括（CD25）、（CD122）、（CD132）86IL-4RIL-15RIL-2RIL-9R

鏈

鏈

鏈

鏈87IL-6RIL-7RIL-2RIL-11R

鏈

鏈

鏈

鏈

鏈

鏈

鏈gp130gp1303.可溶性細(xì)胞因子受體(sCKR)產(chǎn)生方式：存在血清、尿液等體液。

大部分為膜受體脫落，如SIL-1R、SIL-2R、sTNFR、sIFNrR、sGM-CSFR、sIL-5R、sIL-6R等

小部分為分泌型，如sIL-4R、sG-CSFR、sIL-5R、sIL-6R生物學(xué)活性：

與膜受體競爭結(jié)合細(xì)胞因子，抑制細(xì)胞因子的作用。

與細(xì)胞因子結(jié)合,轉(zhuǎn)運(yùn)至機(jī)體相關(guān)部位，增加局部細(xì)胞因子的濃度，發(fā)揮其生物學(xué)作用”4.細(xì)胞因子受體拮抗劑

93五、細(xì)胞因子免疫學(xué)功能

（一）調(diào)控免疫細(xì)胞的發(fā)育、分化和功能1.調(diào)控免疫細(xì)胞在中樞免疫器官的發(fā)育、分化2.調(diào)控免疫細(xì)胞在外周免疫器官的發(fā)育、分化和活化和功能（二）調(diào)控機(jī)體的免疫應(yīng)答1.抗感染作用（1）抗菌免疫：Mφ釋放IL-1/TNF/IL-6/IL-8/IL-12

清除病原體；IFN-γ上調(diào)DCsMHC-I和II表達(dá)初始T細(xì)胞適應(yīng)性免疫；IL-1IL-2、IL-4、IL-5、IL-6T/B細(xì)胞活化；IL12激活NK細(xì)胞，誘導(dǎo)Th1生成。（2）抗病毒免疫：

IFN-α、IFN-β對細(xì)胞產(chǎn)生抗病毒蛋白酶；TNF-α和LT直接殺傷病毒感染細(xì)胞；IL-2、IL-12、IFN-α、IFN-β、IFN-γ激活NK細(xì)胞殺傷病毒感染細(xì)胞；IL-1、TNF-α、IFN-γ激活單核巨噬細(xì)胞（二）調(diào)控機(jī)體的免疫應(yīng)答2.抗腫瘤作用：TNF-α和LT直接殺傷腫瘤細(xì)胞；IFN-γ和IL4抑制多種腫瘤細(xì)胞；IL-1、IL-2、IL-15、IFN-γ激活CTL和NK細(xì)胞殺傷活性；IFN-γ誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞表達(dá)MHC-I和II。3.誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡：TNF-α和LT直接殺傷腫瘤細(xì)胞或病毒感染細(xì)胞；Fas/FasLα、TNF-α/TNFR誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。六、細(xì)胞因子與臨床（一）細(xì)胞因子與疾病發(fā)生1.細(xì)胞因子風(fēng)暴:高細(xì)胞因子血癥。

機(jī)體感染微生物、GVHR等后引起體液中多種細(xì)胞因子如TNF-α、IL-1、IL-6、IL-12、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、MCP-1和IL-8等迅速大量產(chǎn)生的現(xiàn)象。（1）微生物：禽流感、非典、埃博拉病毒、細(xì)菌等（2）血管壁通透性增加，一氧化氮的大量釋放，血壓下降，組織細(xì)胞損傷，急性呼吸窘迫綜合癥和多器官衰竭。

2.致熱與炎癥病理損害IL-1、TNF-α、IL-6下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞發(fā)熱TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8等細(xì)胞因子刺激宿主細(xì)胞產(chǎn)生炎癥介質(zhì)組織損傷3.腫瘤的發(fā)生與逃逸1.骨髓基質(zhì)細(xì)胞分泌IL-6刺激骨髓溜細(xì)胞生長。2.IL-1刺激白血病細(xì)胞、漿細(xì)胞、卵巢癌細(xì)胞生長3.TGF-β、IL-10抑制機(jī)體免疫功能。4.免疫系統(tǒng)相關(guān)疾?。?）超敏反應(yīng)：IL-4、IL-5、IL-6促進(jìn)IgE合成。（2）自身免疫?。篢NF-α、IL-17、IL-6、IL-23升高。（3）免疫缺陷?。杭?xì)胞因子及其受體基因缺陷可導(dǎo)致細(xì)胞、體液免疫異常。（4）器官移植排斥反應(yīng)：IL-1、IL-6、IL-12、TNF-α、IFN-γ在急性移植排斥時(shí)升高。（二）細(xì)胞因子與疾病治療1.細(xì)胞因子補(bǔ)充和添加療法通過各種途徑使患者體內(nèi)細(xì)胞因子水平增加，充分發(fā)揮細(xì)胞因子的生物學(xué)作用，從而抗御和治療疾病。2.細(xì)胞因子阻斷和拮抗療法抑制細(xì)胞因子的產(chǎn)生和阻斷細(xì)胞因子與其相應(yīng)受體的結(jié)合及受體后信號傳導(dǎo)過程，使細(xì)胞因子的病理性作用難以發(fā)揮。適用于自身免疫性病、移植排斥反應(yīng)、感染性休克等的治療。例如抗TNF單克隆抗體可以減輕甚至阻斷感染性休克的發(fā)生，IL-1受體拮抗劑對于炎癥、自身免疫性疾病等具有較好的治療效果。

細(xì)胞因子在疾病治療中的作用分類疾病細(xì)胞因子治療手段補(bǔ)充療法阻斷療法炎癥反應(yīng)皰疹性角膜炎乙型肝炎等IFN-α類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎IL-10惡性腫瘤腎細(xì)胞癌黑色素瘤IL-2

多種腫瘤IL-1～8、IL-10、IL-12、G-CSF、IFN-α、IFN-γ、TNF-α等(轉(zhuǎn)基因)自身免疫性疾病多發(fā)性硬化癥IFN-βSLE抗IL-6McAb類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎IFN-γ、IL-1抑制劑和抗TNF-αMcAb分類疾病細(xì)胞因子治療手段補(bǔ)充療法阻斷療法移植排斥骨髓移植IL-2、IL-3、IL-6、GM-CSF等移植排斥IL-10抗IL-2受體γ鏈McAb造血系統(tǒng)疾病造血功能異常CSFs腎性貧血EPO白細(xì)胞減少M(fèi)-CSF

細(xì)胞因子在疾病治療中的作用批準(zhǔn)上市的重組細(xì)胞因子藥物

IFNα白血病、Kaposi肉瘤、肝炎、癌癥、AIDS IFNγ慢性肉芽腫、生殖器疣、過敏性皮炎、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎G-CSF自身骨髓移植、化療導(dǎo)致的粒細(xì)胞減少癥、再生障礙性貧血GM-CSF自身骨髓移植、化療導(dǎo)致的血細(xì)胞減少癥、再生障礙性貧血Epo 慢性腎衰導(dǎo)致貧血、癌癥或癌癥化療導(dǎo)致的貧血、失血后貧血IL-2 癌癥、免疫缺陷、疫苗佐劑 IFNβ多發(fā)性硬化癥 IL-11放化療所致血小板減少癥 SCF與G-CSF聯(lián)合應(yīng)用與外周血干細(xì)胞移植

EGF外用藥治療燒傷、潰瘍

bFGF外用藥治療燒傷、外周神經(jīng)炎

細(xì)胞因子在疾病診斷中的作用診斷指標(biāo)T細(xì)胞活化及功能缺陷IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ等類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、感染性休克TNF-α（血清）↑類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎IL-1、IL-6及TNF-α（關(guān)節(jié)囊滑液）↑白血病、多發(fā)性硬化、AIDS、移植排斥反應(yīng)等sIL-2R（血清）↑慢性血清病、免疫復(fù)合物腎病IL-1（血清）↑七、細(xì)胞因子檢測常用方法1、細(xì)胞增殖或增殖抑制試驗(yàn)2、細(xì)胞毒活性測定3、抗病毒活性測定法4、細(xì)胞趨化活性測定法（一）細(xì)胞生物學(xué)檢測1、細(xì)胞增殖和增殖抑制測定法

以細(xì)胞因子依賴性細(xì)胞株為靶向，通過觀察特定的細(xì)胞因子刺激或抑制依賴性細(xì)胞株增殖來評估細(xì)胞因子的活性水平。常用的檢測細(xì)胞增殖的方法有3H-TdR摻入法、比色法、染色法和直接計(jì)數(shù)法等。其中測定細(xì)胞代謝酶反應(yīng)細(xì)胞增殖數(shù)的比色法包括MTT、XTT、MTS和NAG等方法。通過檢測細(xì)胞DNA合成的增加或減少來判斷細(xì)胞增殖的方法。在細(xì)胞的增殖過程中，DNA合成的增加使得指示細(xì)胞對核苷或堿基的需求增多，若將核苷標(biāo)記上可以示蹤的同位素（3H/125I），通過檢測細(xì)胞內(nèi)的同位素含量，則可反映細(xì)胞增殖的程度。結(jié)果客觀易于自動化；適用于大標(biāo)本量的測定

優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)方法的特異性受依賴細(xì)胞株影響；放射性污染(1)放射性核素?fù)饺敕ㄌ攸c(diǎn)：不使用放射性核素，以細(xì)胞代謝變化為增殖指征指示細(xì)胞的增殖情況與線粒體代謝活性相關(guān)測定步驟類似相同點(diǎn)不同點(diǎn)與同位素?fù)饺敕ㄏ啾葥饺胛铮篗TT而非3H-TdR；反應(yīng)條件：選用的細(xì)胞及其濃度、培養(yǎng)時(shí)間不同(2)MTT比色法2、細(xì)胞毒活性測定對指示細(xì)胞具有破壞作用的細(xì)胞因子，若與細(xì)胞共育將會導(dǎo)致細(xì)胞死亡。因此，待測細(xì)胞因子作一系列稀釋后加至指示細(xì)胞培養(yǎng)體系，以檢測培養(yǎng)細(xì)胞的死細(xì)胞數(shù)作為判斷指標(biāo)，死細(xì)胞數(shù)量與細(xì)胞因子的活性呈正比。應(yīng)用系列稀釋的細(xì)胞因子標(biāo)準(zhǔn)品，制作其活性與劑量關(guān)系的標(biāo)準(zhǔn)曲線，以此作為待測品活性的定量測定的基礎(chǔ)。本法常用于TNF等的測定Wish、Hep2/c人干擾素L929小鼠干擾素Ratec大鼠干擾素A549MDBK多種族的IFN-α和IFN-γ本法常用于IFN等的測定，IFN可誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生抑制病毒RNA和DNA合成的酶，保護(hù)細(xì)胞不受病毒感染，產(chǎn)生細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE）。

VSV、EMCV及Sindbisvirus等細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE)、抑制病毒蝕斑形成或抑制病毒的產(chǎn)量3、抗病毒活性測定法常用于檢測抗病毒活性的細(xì)胞株常用于攻擊細(xì)胞的病毒檢測抗病毒活性的方法趨化性(chemotaxis)：誘導(dǎo)細(xì)胞向由趨化因子低濃度處向趨化因子高濃度處作定向移動的特性,可采用瓊脂糖和微孔小室趨化試驗(yàn)?；瘜W(xué)增活性(chemokinesis)：細(xì)胞因子增強(qiáng)細(xì)胞的隨機(jī)運(yùn)動能力的特性,可采用瓊脂糖小滴化學(xué)動力學(xué)試驗(yàn)檢測。趨化因子誘導(dǎo)細(xì)胞移動的方式4、趨化活性測定法濾膜：計(jì)數(shù)受趨化細(xì)胞趨化因子細(xì)胞趨化試驗(yàn)原理示意靶細(xì)胞的選擇與培養(yǎng)1、對所測的細(xì)胞因子有特異的敏感性2、易培養(yǎng)、保存、生物學(xué)特性穩(wěn)定3、有良好的生長狀態(tài)4、種屬適配各類細(xì)胞因子檢測的常用靶細(xì)胞細(xì)胞因子實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)干擾因素IL-1D10（M）增殖法IL-2、IL-4EL-4（M）增殖法IL-4A352（H）增殖抑制法IL-2CTLL（M）增殖法IL-4IL-3KG-1（H）增殖法

TF-1（H）增殖法GN-CSF、IL-5IL-6、EPOIL-4CTLL（M）增殖法IL-2IL-5BCL-1（M）增殖法IL-4各類細(xì)胞因子檢測的常用靶細(xì)胞細(xì)胞因子實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)干擾因素IL-6B9（M）增殖法IL-4、IL-11BM60（H）增殖法IL-7Clone-IXN/2b（M）增殖法IL-8中性粒細(xì)胞（M、H）趨化法GM-CSFTF-1（H）增殖法IL-3、IL-5IL-6、IL-5TNF/L929（M、H）細(xì)胞毒法IFNwish（H）病變保護(hù)法IFN-、IFN-L929（M）病變保護(hù)法IFN-、IFN-

敏感性較高特異性不高操作繁瑣易受干擾生物學(xué)活性測定方法學(xué)評價(jià)（二）免疫學(xué)檢測細(xì)胞因子(或受體)與相應(yīng)的特異性抗體(單克隆抗體或多克隆抗體)結(jié)合，通過同位素、熒光或酶等標(biāo)記技術(shù)加以放大和顯示，從而定性或定量顯示細(xì)胞因子(或受體)的水平。1、ELISA法2、酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)3、流式細(xì)胞分析法1、ELISA方法ELISA法是應(yīng)用最為廣泛的非均相酶標(biāo)免疫分析技術(shù)，一步或多步的抗原抗體反應(yīng)和一步酶促反應(yīng)構(gòu)成ELISA的基本步驟，可作定性或定量分析。ELISA法不僅可以用于細(xì)胞因子檢測，也可用于可溶性細(xì)胞因子受體或可溶性粘附因子的測定敏感性偏低不能判斷細(xì)胞因子的生物學(xué)活性。ELISA特異、簡便易于推廣和標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)可同時(shí)檢測大量標(biāo)本且試驗(yàn)廢棄物便于處理細(xì)胞因子測定的首選方法優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)2、酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)(ELISPOT或ElisaSpot)在包被有待測細(xì)胞因子抗體的微孔板上，加入可分泌相應(yīng)細(xì)胞因子的待測細(xì)胞，經(jīng)在有或無刺激物存在的條件下培養(yǎng)，待測細(xì)胞分泌細(xì)胞因子于其周圍，并被板上的特異性抗體捕獲。后續(xù)的反應(yīng)如同ELISA，即在洗去細(xì)胞后視用于試驗(yàn)的酶標(biāo)抗體為一抗或二抗，分別作直接或間接法。一個(gè)斑點(diǎn)代表一個(gè)細(xì)胞因子分泌細(xì)胞，斑點(diǎn)的顏色深淺程度與細(xì)胞分泌的細(xì)胞因