預購2019年度動物疫病監(jiān)測診斷試劑清單

預購2019年度動物疫病監(jiān)測診斷試劑清單序號種類參數(shù)數(shù)量單價金額1口蹄疫O型ELISA試劑盒1．阻斷ELISA2．保存條件：2~8℃保存；3．敏感性：98%4．特異性：99.2%5．穩(wěn)定性：批內及批間差異≤3%。6．試劑盒規(guī)格：480孔（5板）/盒7．試劑盒組成：O型蛋白包被板，樣品稀釋液，陰性對照血清，陽性對照血清，酶標抗體，底物液，終止液，洗液。8.操作步驟：（1）使用前將試劑盒所有的組成恢復到室溫（25+3℃），取出抗原被板；（2）標記好樣品、陽性對照和陰性對照（對照各做兩孔），每孔加入樣品稀釋液80ul，然后加入樣品血清、陽性對照、陰性對照各20ul后進行震蕩混勻；（3）室溫孵育60分鐘；（4）洗板：每孔加入洗液300ul，洗滌3次，最后在吸水紙上拍干；（5）每孔加入100ul酶標抗體，室溫孵育60分鐘；（6）重復步驟4，洗滌3次；（7）每孔加入TMB底物反應液100ul.室溫暗處放置15分鐘。（8）每孔加入終止液50ul，置酶標儀450nm波長處讀數(shù)。9．結果判定：SN值＞0.6，陰性；SN值≤0.6，陽性。10．試劑盒有效期12個月。2盒2口蹄疫A型ELISA試劑盒1．阻斷ELISA2．保存條件：2~8℃保存；3．敏感性：98%4．特異性：99%5．穩(wěn)定性：批內及批間差異≤3%。6．試劑盒規(guī)格：480孔（5板）/盒7．試劑盒組成：A型蛋白包被板，樣品稀釋液，陰性對照血清，陽性對照血清，酶標抗體，底物液，終止液，洗液。8．操作步驟：（1）使用前將試劑盒所有的組成恢復到室溫（25+3℃），取出抗原被板；（2）標記好樣品、陽性對照和陰性對照（對照各做兩孔），每孔加入樣品稀釋液80ul，然后加入樣品血清、陽性對照、陰性對照各20ul后進行震蕩混勻；（3）室溫孵育60分鐘；（4）洗板：每孔加入洗液300ul，洗滌3次，最后在吸水紙上拍干；（5）每孔加入100ul酶標抗體，室溫孵育60分鐘；（6）重復步驟4洗滌3次；（7）每孔加入TMB底物反應液100ul.室溫暗處放置15分鐘。（8）每孔加入終止液50ul，置酶標儀450nm波長處讀數(shù)。9．結果判定：SN值＞0.6，陰性；SN值≤0.6，陽性。10．試劑盒有效期12個月。3盒3蘭耳病ELISA試劑盒試劑盒內容：PRRSV重組蛋白包被板、酶結合物濃縮液（10X）、陽性對照、陰性對照、稀釋緩沖液14、稀釋緩沖液3、濃縮洗滌液（20X）、底物溶液、終止液1.酶結合物、陰陽性對照以及底物溶液必須在5℃（±3℃）下貯存。2.其它試劑可放置+2℃～+26℃保存。3.96孔╳5板，洗滌液和樣品稀釋液可用于IDVET所有系列產品。檢測步驟：在使用前，所有的試劑盒組分都必須回復到室溫（21℃±5℃）。試劑應通過輕輕渦旋、旋轉混合均勻。1.微孔板樣品預稀釋：1:40倍195μL樣品稀釋液14加入每孔。5μL用于檢測樣品加入對照不需要稀釋加樣：100μL陰性對照（不需稀釋）加入孔A1和B1。100μL陽性對照（不需稀釋）加入孔C1和D1。100μL預稀釋樣品加入剩下孔內提示：加樣后板震蕩混勻（2min,200rpm）效果更佳且不會影響結果。2.21℃（±5℃）下孵育30min±3min。3.用300μL左右的洗滌液洗滌每個板孔5次。在洗滌和加入下一個試劑前，避免孔變干。4.用樣品稀釋液3按照1：10的比例的稀釋濃縮酶標結合物（10X）制備酶標結合物（1X）（1份濃縮洗滌液加9份樣品稀釋液3）。5.吸取100μL的酶標記結合物（1X）加入到每孔中。6.21℃（±5℃）下孵育30min±3min。7.重復步驟3。8.吸取100μL的底物溶液加入到每孔中。9.21℃（±5℃）下暗室內孵育15min±2min。10.在每孔中加入100μL的終止液終止顯色反應。11.在酶標儀的450nm波長讀結果。實驗有效性：在下列情形下實驗有效：陰性對照的平均OD小于等于0.150.ODNC≤≤0.150陽性對照與陰性對照平均OD值差值大于等于0.150ODPC-ODNC≥0.150結果判定：對于每個樣品，計算其S/P比值：每個樣品得出一個（S/P）：S/P≤0.4，陰性；SN值＞04，陽性2盒4豬瘟ELISA試劑盒試劑盒內容：包被的微量滴定板、酶結合物濃縮液（10X）、陽性對照、陰性對照、稀釋緩沖液8、稀釋緩沖液12、濃縮洗滌液（20X）、底物溶液、終止液1.酶結合物、陰陽性對照以及底物溶液必須在5℃（±3℃）下貯存。2.其它試劑可放置+2℃～+26℃保存。3.96孔╳5板，洗滌液和樣品稀釋液可用于IDVET所有系列產品。檢測步驟：在使用前，所有的試劑盒組分都必須回復到室溫（21℃±5℃）。試劑應通過輕輕渦旋、旋轉混合均勻。1.血清1.加樣：50μL8號稀釋液加入每孔。50μL陽性對照加入孔A1和B1。50μL陰性對照加入孔C1和D1。50μL待檢測樣品加入剩下其他孔內。2.2.37℃℃（±±2℃℃））下孵育45±4min（短時孵育）或在21℃℃（±±5℃℃））下孵育16-20小時（過夜孵育）。3.甩干板中液體，用300μL左右的洗滌液洗滌每個板孔3次。在每一次洗滌后，甩去每個板孔中的液體，在最后一次甩干后，在吸干材料上用力扣板，吸去剩余的液體。在洗滌和加入下一個試劑前，避免孔壁變干。4.非常重要：10X濃縮酶標記抗體用稀釋緩沖液12進行10倍稀釋（1份濃縮液+9份稀釋液）。吸取稀釋的100μL的酶標抗體加入到每孔中。5.21℃℃（±±5℃℃））下孵育30±3min。6.甩干板中液體，用300μL左右的洗滌液洗滌每個板孔3次，洗滌過程中避免孔壁變干。7.吸取100μL的底物溶液加入到每孔中。8.21℃℃（±±5℃℃）下暗室避光孵育15min±2min。9.在每孔中加入100μL的終止液終止顯色反應。10.在酶標儀的450nm波長讀取OD值。實驗有效性：在下列情形下實驗有效：陰性對照的平均OD大于0.7ODNC>0.7陽性對照平均OD值小于陰性對照的30%ODPC/ODNC＜0.3結果判定：對于每個樣品，計算其S/N百分比（S/N%）每個樣品得出一個（S/N%）短時孵育或過夜孵育：S/N%≤50%陽性；50%＜S/N%≤60%可疑；S/N%＞60%陰性。3盒5禽流感H5Re-11株抗原禽流感病毒H5亞型（Re-11株）血凝抑制試驗抗原，用于H5亞型（Re-11株）禽流感病原檢測。2ml/瓶。1.抗原為禽流感病毒接種SPF雞胚培養(yǎng)，收獲雞胚尿囊液，經純化、甲醛溶液滅活后，加適宜穩(wěn)定劑，經冷凍真空干燥制成?？乖r不低于7Log2；

2.試劑在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年；

3.試驗結果陰陽性對照成立；

4.無菌檢驗、剩余水分測定、真空度測定按現(xiàn)行《中國獸藥典》附錄進行檢驗，應符合要求。3瓶6禽流感H7Re-2株抗原禽流感病毒H7亞型（Re-2）株血凝抑制試驗抗原，

用于H7亞型（Re-2）株禽流感病原檢測。2ml/瓶。1.抗原為禽流感病毒接種SPF雞胚培養(yǎng)，收獲雞胚尿囊液，經純化、甲醛溶液滅活后，加適宜穩(wěn)定劑，經冷凍真空干燥制成?？乖r不低于7Log2；2.試劑在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年；

3.試驗結果陰陽性對照成立；

4.無菌檢驗、剩余水分測定、真空度測定按現(xiàn)行《中國獸藥典》附錄進行檢驗，應符合要求。3瓶7禽流感H5Re-12株抗原禽流感病毒H5亞型（Re-12株）血凝抑制試驗抗原，用于H5亞型（Re-12株）禽流感病原檢測。2ml/瓶。1.抗原為禽流感病毒接種SPF雞胚培養(yǎng)，收獲雞胚尿囊液，經純化、甲醛溶液滅活后，加適宜穩(wěn)定劑，經冷凍真空干燥制成?？乖r不低于7Log2；

2.試劑在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年；

3.試驗結果陰陽性對照成立；

4.無菌檢驗、剩余水分測定、真空度測定按現(xiàn)行《中國獸藥典》附錄進行檢驗，應符合要求。2瓶8禽流感H9抗原1.抗原為禽流感病毒接種SPF雞胚培養(yǎng)，收獲雞胚尿囊液，經純化、甲醛溶液滅活后，加適宜穩(wěn)定劑，經冷凍真空干燥制成?？乖r不低于7Log2；2.試劑在-20℃以下保存，有效期不少于2年；3.試驗結果陰陽性對照成立；4.無菌檢驗、剩余水分測定、真空度測定按現(xiàn)行《中國獸藥典》附錄進行檢驗，應符合要求。2瓶9新城疫抗原1.抗原為雞新城疫病毒LaSota株接種SPF雞胚培養(yǎng)，收獲雞胚尿囊液，經純化、甲醛溶液滅活后，加適宜穩(wěn)定劑，經冷凍真空干燥制成?？乖r不低于9Log2；2.試劑在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年；3.試驗結果陰陽性對照成立；4．無菌檢驗、剩余水分測定、真空度測定按現(xiàn)行《中國獸藥典》附錄進行檢驗，應符合要求。2瓶10布病虎紅平板凝集抗原1.主要成分及含量：含滅活的布氏菌菌株2.性狀：紅色均勻懸浮液，久置后，上不澄清，底部有少量紅色菌體沉淀。3.作用與用途：用于虎紅平板凝集試驗診斷布氏菌病。4.用法與判定取被檢血清0.03mL與抗原0.03mL相混合，4分鐘內觀察結果。凡出現(xiàn)“+”以上反應者判為陽性。對出現(xiàn)陽性反應的動物，須進一步作補體結合試驗或其他輔助診斷試驗。凝集反應判定標準：++++

凝集塊呈菌叢狀，凝塊間液體明顯清亮。+++

凝集反應較強，液體較清亮。++

形成較明顯卷邊，凝集塊間液體稍清亮。+稍能查到凝集，稍有卷邊形成：凝集物間液體呈紅色。－

無凝集，呈均勻粉紅色。5.規(guī)格：10mL/瓶6.貯藏與有效期：2～8℃保存，有效期為12個月。7.有經農業(yè)部頒發(fā)的獸藥生產的批準文號。2瓶11禽流感H5Re-11株陽性血清禽流感病毒H5亞型陽性血清（Re-11株），用于血凝抑制試驗檢測H5亞型（Re-11株）禽流感病毒試驗的陽性對照。2ml/瓶1.

陽性血清系用禽流感病毒滅活疫苗接種SPF雞，采血、分離血清，經冷凍真空干燥制成。血凝一抑制效價不低于7Log2；2.試劑在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年；

3.試驗結果陰陽性對照成立；

4.無菌檢驗、剩余水分測定、真空度測定按現(xiàn)行《中國獸藥典》附錄進行檢驗，應符合要求。1瓶12禽流感H5Re-12株陽性血清禽流感病毒H5亞型陽性血清（Re-12株），用于血凝抑制試驗檢測H5亞型（Re-12株）禽流感病毒試驗的陽性對照。2ml/瓶1.

陽性血清系用禽流感病毒滅活疫苗接種SPF雞，采血、分離血清，經冷凍真空干燥制成。血凝一抑制效價不低于7Log2；2.試劑在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年；

3.試驗結果陰陽性對照成立；

4.無菌檢驗、剩余水分測定、真空度測定按現(xiàn)行《中國獸藥典》附錄進行檢驗，應符合要求。1瓶13禽流感禽流感H7Re-2株陽性血清禽流感病毒H7亞型陽性血清，用于H7亞型禽流感病原檢測的陽性對照，2ml/瓶。1.陽性血清系用禽流感病毒滅活疫苗接種SPF雞，采血、分離血清，經冷凍真空干燥制成。血凝一抑制效價不低于7Log2；2.試劑在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年；3.試驗結果陰陽性對照成立；4.無菌檢驗、剩余水分測定、真空度測定按現(xiàn)行《中國獸藥典》附錄進行檢驗，應符合要求。1瓶14禽流感H9陽性血清1.陽性血清系用禽流感病毒滅活疫苗接種SPF雞，采血、分離血清，經冷凍真空干燥制成。血凝一抑制效價不低于7Log2；2.試劑在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年；3.試驗結果陰陽性對照成立，2ml/瓶；4.無菌檢驗、剩余水分測定、真空度測定按現(xiàn)行《中國獸藥典》附錄進行檢驗，應符合要求。1瓶15新城疫陽性血清1.陽性血清系用雞新城疫滅活疫苗接種SPF雞，采血、分離血清，經冷凍真空干燥制成。血凝一抑制效價不低于8Log2；2.試劑在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年；3.試驗結果陰陽性對照成立，2ml/瓶；4.無菌檢驗、剩余水分測定、真空度測定按現(xiàn)行《中國獸藥典》附錄進行檢驗，應符合要求。1瓶16偽狂犬ELISA試劑盒（gB）試劑盒內容：gB病毒抗原包被、酶結合物濃縮液（10X）、陽性對照、陰性對照、稀釋緩沖液4、稀釋緩沖液3、濃縮洗滌液（20X）、底物溶液、終止液。1.酶結合物、陰陽性對照以及底物溶液必須在5℃（±3℃）下貯存。2.其它試劑可放置+2℃～+26℃保存。3.96孔╳5板，相同名稱的洗滌液和樣品稀釋液可用于IDVET所有系列產品。檢測步驟：在使用前，所有的試劑盒組分都必須回復到室溫（21℃±5℃）。試劑應通過輕輕渦旋、旋轉混合均勻。1.血清1.1短時間孵育1.加樣：每孔加入50μL樣品稀釋液4?？譇1和B1分別加入50μL陽性對照?？證1和D1分別加入50μL陰性對照。剩下其他孔內加入50μL待檢測樣品2.37℃（±2℃）下孵育45min±4min。1.2過夜孵育1.加樣：每孔加入75μL樣品稀釋液4?？譇1和B1分別加入25μL陽性對照。孔C1和D1分別加入25μL陰性對照。剩下其他孔內加入25μL待檢測樣品2.21℃（±5℃）下過夜孵育16-20小時。1.3不過過夜孵育或是短時間孵育，以下1-9步驟相同1.甩干板中液體，用300μL左右的洗滌液洗滌每個板孔3次。在每一次洗滌后，甩去每個板孔中的液體，在最后一次甩干后，在吸干材料上用力扣板，吸去剩余的液體。在洗滌和加入下一個試劑前，避免孔壁變干。2.用稀釋液緩沖液3按照1：10的比例的稀釋濃縮酶標結合物（10X）制備酶標結合物（1X）（1份濃縮洗滌液加9份樣品稀釋液）。3.吸取100μL的酶標記結合物（1X）加入到每孔中。4.37℃（±2℃）下孵育30min。5.甩干板中液體，用300μL左右的洗滌液洗滌每個板孔3次，洗滌過程中避免孔壁變干。6.吸取100μL的底物溶液加入到每孔中。7.21℃（±5℃）下暗室避光孵育15min。8.在每孔中加入100μL的終止液終止顯色反應。9.在酶標儀的450nm波長讀結果。實驗有效性：在下列情形下實驗有效：陰性對照的平均OD大于0.7ODNC>0.7陽性對照平均OD值小于陰性對照的30%ODPC/ODNC＜0.3結果判定：對于每個樣品，計算其S/N百分比（S/N）每個樣品得出一個（S/N）：短時孵育：S/N≤40%陽性；40%＜S/N%≤50%可疑；S/N%＞50%陰性。過夜孵育：S/N%≤30%陽性；30%＜S/N%≤40%可疑；S/N%＞40%陰性1盒17偽狂犬ELISA試劑盒（gE）試劑盒內容：gE病毒抗原包被、酶結合物標準液、陽性對照、陰性對照、樣品稀釋液13、稀釋緩沖液12、濃縮洗滌液（20X）、底物溶液、終止液1.酶結合物、陰陽性對照以及底物溶液必須在5℃（±3℃）下貯存。2.其它試劑可放置+2℃～+26℃保存。3.規(guī)格：96孔╳5板，相同名稱的洗滌液和樣品稀釋液可用于IDVET所有系列產品。檢測步驟：在使用前，所有的試劑盒組分都必須回復到室溫（21℃±5℃）。試劑應通過輕輕渦旋、旋轉混合均勻。1.血清1.1短時間孵育1.加樣：每孔加入20μL樣品稀釋液13?？譇1和B1分別加入50μL陽性對照?？證1和D1分別加入50μL陰性對照。剩下其他孔內加入50μL待檢測樣品。2.37℃（±2℃）下孵育1h30±6min。1.2過夜孵育(可以提高檢測能力)1.加樣：每孔加入80μL樣品稀釋液4。孔A1和B1分別加入20μL陽性對照?？證1和D1分別加入20μL陰性對照。剩下其他孔內加入20μL待檢測樣品。2.21℃（±5℃）下過夜孵育（16-20小時）。1.3不管過夜孵育或是短時間孵育，以下1-8步驟相同1.甩干板中液體，用300μL左右的洗滌液洗滌每個板孔3次。在每一次洗滌后，甩去每個板孔中的液體，在最后一次甩干后，在吸干材料上用力扣板，吸去剩余的液體。在洗滌和加入下一個試劑前，避免孔壁變干。44002.吸取100μL的酶標記結合物（直接使用）加入到每孔中。3.21℃（±5℃）下孵育30±3min。4.甩干板中液體，用300μL左右的洗滌液洗滌每個板孔3次，洗滌過程中避免孔壁變干。5.吸