《家用和類似用途洗碗機的抗菌、除菌功能技術(shù)要求及試驗方法》

QB/T5133—****家用和類似用途洗碗機的抗菌、除菌功能技術(shù)要求及試驗方法本文件規(guī)定了家用和類似用途電動洗碗機的除菌、除病毒、抗菌、防霉、抗病毒等性能的要求，描述了相應(yīng)的試驗方法，規(guī)定了標(biāo)志和說明的內(nèi)容。本文件適用于在器具上或其使用說明中明示具有上述一種或多種功能的，在家庭和類似場合使用的電動洗碗機的設(shè)計、制造和檢驗等。在器具上或使用說明中明示具有上述一種或多種功能的其他類似器具以及組合功能器具中的洗碗機的相關(guān)功能的設(shè)計、制造和檢驗等參照使用。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T1355小麥粉GB4789.2食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗菌落總數(shù)測定GB/T5296.2消費品使用說明第2部分：家用和類似用途電器GB19489實驗室生物安全通用要求GB/T20290—2016家用電動洗碗機性能測試方法GB21551.1—2008家用和類似用途電器的抗菌、除菌、凈化功能通則GB21551.2家用和類似用途電器的抗菌、除菌、凈化功能抗菌材料的特殊要求GB38383—2019洗碗機能效水效限定值及等級QB/T1520—XXXX家用和類似用途電動洗碗機《消毒技術(shù)規(guī)范》（2002年版）3術(shù)語和定義GB21551.1—2008界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1電動洗碗機electricaldishwasher使用電能驅(qū)動，依靠化學(xué)、物理等方法對餐具進行洗滌、漂洗、干燥等處理的器具，以下簡稱“洗碗機”。[來源：QB/T1520—XXXX，3.1]3.2除菌microbialreduction采用化學(xué)、物理等方法去除或減少作用對象上細(xì)菌、真菌等微生物的過程。[來源：GB21551.1—2008，3.7，有修改]3.3除菌率microbialreductionrate除菌性能試驗后，相比對照組，試驗組細(xì)菌或真菌數(shù)量減少的百分比。QB/T5133—****3.4除病毒virusreduction采用化學(xué)、物理等方法去除或減少作用對象上病毒的過程。3.5除病毒率virusreductionrate除病毒性能試驗后，相比對照組，試驗組病毒滴度減少的百分比。3.6抗菌anti-microbial材料成分采用化學(xué)、物理等方法作用于材料本體，殺滅或妨礙細(xì)菌、真菌等微生物生長繁殖及其活性的過程。[來源：GB21551.1—2008，3.2，有修改]3.7防霉等級anti-mildewlevel在防霉菌性能試驗中用霉菌生長面積表示防霉效果的級別。[來源：GB21551.1—2008，3.5，有修改]3.8抗病毒antiviral材料成分采用化學(xué)、物理等方法作用于材料本體，殺滅或使病毒失去感染活性的過程。3.9抗病毒率anti-viralrate抗病毒性能試驗后，相比對照組，試驗組病毒滴度減少的百分比。3.10中式標(biāo)準(zhǔn)餐具Chinesestandardtableware符合GB38383—2019中附錄B規(guī)格要求的餐具，簡稱“中式餐具”。3.11西式標(biāo)準(zhǔn)餐具westernstandardtableware符合GB/T20290—2016中附錄A規(guī)格要求的餐具，簡稱“西式餐具”。4技術(shù)要求4.1除菌性能明示具有除菌功能的洗碗機，中式餐具的除菌率應(yīng)不小于99.99%，可用對數(shù)值表示。可裝載西式餐具的洗碗機，其西式餐具的除菌試驗可參考本條要求。4.2除病毒性能明示具有除病毒功能的洗碗機，其除病毒率應(yīng)不小于99.99%，可用對數(shù)值表示。4.3材料抗菌性能明示使用抗菌材料的洗碗機，其抗菌材料的抗菌率應(yīng)不小于99.0%。4.4材料防霉性能明示使用防霉材料的洗碗機，其防霉材料的防霉等級應(yīng)不大于1級。3QB/T5133—****4.5材料抗病毒性能明示使用抗病毒材料的洗碗機，其抗病毒材料的抗病毒率應(yīng)不小于99.0%。5試驗方法5.1試驗環(huán)境實驗室環(huán)境應(yīng)符合GB19489和GB/T20290—2016的相關(guān)要求。5.2除菌試驗方法明示裝載中式餐具的洗碗機，按照附錄A進行試驗；明示裝載西式餐具的洗碗機，參考附錄B進行試驗。5.3除病毒試驗方法按照附錄C進行試驗。5.4材料抗菌試驗方法5.4.1形狀規(guī)則、可制成特定面積的吸水性或非吸水性抗菌材料，按照GB21551.2進行試驗。5.4.2形狀不規(guī)則的抗菌材料，按照附錄D進行試驗。5.5材料防霉試驗方法具有防霉功能的材料，按照GB21551.2進行試驗。5.6抗病毒試驗方法具有抗病毒功能的材料，按照附錄E進行試驗。6標(biāo)志和說明6.1一般要求明示具有除菌、除病毒、材料抗菌、材料防霉、材料抗病毒功能的洗碗機產(chǎn)品，其使用說明應(yīng)符合GB/T5296.2和GB21551.1。6.2標(biāo)志和說明的要求和內(nèi)容明示具有除菌、除病毒、材料抗菌、材料防霉、材料抗病毒功能的洗碗機產(chǎn)品，符合4.1、4.2、4.3、4.4、4.5的要求并對功能進行標(biāo)識時，至少在本體、包裝箱、使用說明三者之一中，應(yīng)包括以下內(nèi)容：——明示功能的種類；——應(yīng)標(biāo)注細(xì)菌、真菌、病毒、霉菌的種類，試驗負(fù)載容量，試驗程序；——使用壽命內(nèi)需要更換、清洗的零部件，應(yīng)予以說明零部件名稱、更換、清洗的頻次。6.3標(biāo)志和說明的使用符合4.1要求的洗碗機，可在其本體、包裝箱或使用說明上標(biāo)注“除菌”或類似字樣。符合4.2要求的洗碗機，可在其本體、包裝箱或使用說明標(biāo)注“除病毒”或類似字樣。符合4.3要求的洗碗機，可在其本體、包裝箱或使用說明上標(biāo)注“抗菌”或類似字樣。符合4.4要求的洗碗機，可在其本體、包裝箱或使用說明上標(biāo)注“防霉”或類似字樣。符合4.5要求的洗碗機，可在其本體、包裝箱或使用說明上標(biāo)注“抗病毒”或類似字樣。4QB/T5133—****附錄A（規(guī)范性）中式餐具除菌性能試驗方法A.1試驗菌種和儀器A.1.1試驗菌種A.1.1.1菌種的選擇試驗用菌種首選：——大腸埃希氏菌EscherichiacoliCGMCC1.90——金黃色葡萄球菌StaphylococcusaureusCGMCC1.89如有需要，也可選用其他菌種或菌株作為試驗用菌。所有菌種或菌株應(yīng)由國家相應(yīng)菌種保藏管理中心提供，并在報告中明示試驗用菌種名稱及菌株編號。實驗室應(yīng)依據(jù)國家相關(guān)安全規(guī)定使用試驗微生物，并盡量選擇非致病或低致病微生物。培養(yǎng)菌種使用的各種培養(yǎng)基組份，應(yīng)符合菌種保藏管理中心的要求。所有涉及微生物操作的器皿和材料應(yīng)在試驗前進行滅菌處理。A.1.1.2培養(yǎng)條件除菌種提供機構(gòu)有特殊要求外，試驗菌種的一般性培養(yǎng)條件應(yīng)符合GB21551.2的相關(guān)要本文件的試驗條件均以大腸埃希氏菌和金黃色葡萄球菌為例，如果使用其他試驗菌種，應(yīng)符合對應(yīng)的試驗條件。A.1.1.3試驗菌種的活化和菌液的制備10℃下保藏（不得超過1個月作為斜面保藏菌。將斜面保藏菌轉(zhuǎn)接到平板固體培養(yǎng)基上，在（37±1）℃條件下培養(yǎng)（24±1）h，試驗時應(yīng)采用3代～5代、24h內(nèi)轉(zhuǎn)接的新鮮細(xì)菌培養(yǎng)物。用接種環(huán)從新鮮培養(yǎng)物上刮適量新鮮細(xì)菌，加入到質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.85%的無菌生理鹽水中，將菌液濃度稀釋至1.0×109CFU/mL~9.0×109CFU/mL作為試驗用菌液，按照GB4789.2方法進行菌落總數(shù)測定。A.1.1.4試驗污染物的制備無菌污染物：10g小麥粉（符合GB/T1355中對標(biāo)準(zhǔn)粉的要求100mL蒸餾水，25mL南瓜汁（不加水用慢磨機榨取混合后煮沸攪勻，再放入高壓蒸汽滅菌器內(nèi)，121℃,滅菌20min。無菌污染物冷卻至室溫后，與試驗用菌液1:1混合均勻，作為試驗污染物。A.1.2儀器試驗用儀器及相關(guān)參數(shù)應(yīng)符合以下要求：——生化培養(yǎng)箱37±1）℃;——冷藏箱：5℃~10℃;——干燥箱：0℃~300℃;——二級生物安全柜；——高壓蒸汽滅菌器；——平皿、移液槍、渦旋混勻器、接種環(huán)、酒精燈等實驗室常用器具。A.2試驗要求及預(yù)處理A.2.1試驗條件5QB/T5133—****試驗用水應(yīng)符合GB/T20290—2016中5.6的要求，菌落總數(shù)應(yīng)＜100CFU/mL。A.2.2環(huán)境要求為避免環(huán)境污染，洗碗機餐具的污染、裝載、回收的過程應(yīng)在二級生物安全實驗室（BSL-2）中進行。試驗前后都要徹底進行空間消毒。洗碗機排水應(yīng)進行收集消毒，防止試驗微生物污染環(huán)境。A.2.3試驗預(yù)處理洗碗機應(yīng)按照制造商的要求進行安裝及試運行。試驗用餐具的規(guī)格及裝載方法應(yīng)符合GB38383—2019中附錄B的要求。待測洗碗機：試驗前應(yīng)在空載狀態(tài)下連續(xù)運行2個周期制造商明示的除菌程序，應(yīng)在運行結(jié)束后的4h內(nèi)進行除菌試驗，器具中應(yīng)視檢無污漬、水痕等殘留。餐具預(yù)處理：試驗前采用干燥箱（160℃,2h）對餐具進行干熱滅菌，待餐具溫度降至低于37℃方可使用，餐具中應(yīng)視檢無污漬、水痕等殘留。試驗時，洗碗機不添加任何洗滌劑或漂洗劑等化學(xué)物質(zhì)，建議使用全新樣機。如使用試驗過的樣機，則清空鹽倉、分配器，同時也要視檢器具中無污漬、水痕等殘留。A.3試驗步驟A.3.1餐具的涂覆制備對表A.1中要求的餐具種類和污染量進行涂覆，涂覆餐具套數(shù)應(yīng)為額定容量的50%。如果洗碗機的規(guī)格套數(shù)是奇數(shù)，涂覆試驗污染物的餐具套數(shù)是：(總套數(shù)+1)/2。其中：a)米飯碗、筷子、小湯勺的涂覆數(shù)量與涂覆套數(shù)一致；b)馬克杯和玻璃杯的涂覆數(shù)量之和與涂覆套數(shù)相同，且二者數(shù)量相同，如不能均等，則另外涂覆1個玻璃杯；c)深盤和淺盤的涂覆數(shù)量之和與涂覆套數(shù)相同，且二者數(shù)量相同，如不能均等時，則另外涂覆1個淺盤；d)面碗和佐料碟均整體涂覆，涂覆數(shù)量為涂覆套數(shù)的50%；如涂覆套數(shù)為奇數(shù)，面碗和佐料碟的涂覆數(shù)量分別為（涂覆套數(shù)+1）/2。表A.1中式餐具污染物涂覆量123456789盤、杯、碗類等只使用一面的餐具，涂覆試驗污染物時，邊緣保留2cm的空白。筷子、勺類兩面使用的餐具，涂覆試驗污染物時，只涂覆使用位置，手柄處不涂覆，筷子從使用端開始涂覆，涂覆長度為筷子長度的1/4長度。需污染的餐具全部完成涂覆后，在室溫下干燥約1h，待表面無明顯水漬，與未涂覆菌液的餐具交叉排列裝載入洗碗機中，試驗時洗碗機按照滿載運行。A.3.2菌液回收、培養(yǎng)除菌程序運行結(jié)束后，對餐具表面殘留細(xì)菌進行回收?；厥仗讛?shù)等于涂覆套數(shù)。6QB/T5133—****每套回收餐具包含1個米飯碗，1個面碗的1/2內(nèi)表面，1個馬克杯或玻璃杯，1雙筷子，1個小湯勺，1個佐料碟的1/2內(nèi)表面，1個深盤或淺盤。每套餐具使用30mL0.85%的無菌生理鹽水進行回收，按照GB4789.2方法對回收液進行菌落總數(shù)測定。對于需要進行回收1/2個表面的面碗和佐料碟，其具體回收步驟如下：a)每2套餐具作為一組，記為A套和B套；b)A套、B套共用1個面碗和佐料碟，在60mL（2套用量）洗脫液中，用5mL洗脫1個面碗，將洗脫液分成2份，每份2.5mL，另取5mL洗脫佐料碟，分成2份，每個2.5mL；c)將b)其中1份2.5mL面碗洗脫液和一份2.5mL的佐料碟洗脫液混合后，補充25mL洗脫液至30mL，將A套的其他餐具進行洗脫；d)將b)另外1份2.5mL面碗洗脫液和一份2.5mL的佐料碟洗脫液混合后，補充25mL洗脫液至30mL，將B套的其他餐具進行洗脫；e)若涂覆套數(shù)為奇數(shù)套，則缺少一套B套餐具，多余的一份d）不再進行洗脫。常見餐具涂覆及回收見表A.2。表A.2常見套數(shù)涂覆及回收舉例537533773264322744211633665337721163342274432740——1——011111A.3.3陽性對照陽性對照組采用與A.3.1中相同配比的餐具2套。餐具按照表A.1的要求均勻涂覆污染物，與試驗組餐具同時干燥，干燥后按A.3.2的方法進行洗脫、菌落培養(yǎng)，陽性對照組初始含菌量不得小于106CFU/套。A.3.4陰性對照陰性對照采用2個佐料碟，不涂覆菌液直接干燥后，按A.3.2的方法進行洗脫、菌落培養(yǎng)，回收液含菌量應(yīng)小于1CFU/mL，否則試驗無效。A.4計算除菌率和除菌對數(shù)值分別按照公式（A.1）、（A.2）計算：P=根100%………………（A.1）QB/T5133—****=lgT0i-lgTi………………（A.2）式中：i—單次試驗編號；P—第i次試驗的除菌率，以百分?jǐn)?shù)表示；Qi—第i次試驗的除菌對數(shù)值；Ti—第i次試驗，試驗組平均每套餐具殘留的活菌數(shù)，單位為CFU/套；T—第i次試驗，陽性對照組平均每套餐具殘留的活菌數(shù)，單位為CFU/套。相同規(guī)格的洗碗機，應(yīng)在相同條件下至少試驗1臺，每臺進行3次試驗，每次試驗結(jié)果應(yīng)高于限值要求，每次試驗后計算除菌率和除菌對數(shù)值，取全部試驗除菌率和除菌對數(shù)值的算術(shù)平均值作為試驗結(jié)果。試驗結(jié)果按照GB/T8170的要求進行修約并保留兩位小數(shù)。QB/T5133—****（資料性)西式餐具除菌性能試驗方法B.1試驗菌種和儀器B.2試驗要求及預(yù)處理B.2.1試驗條件同A.2.1。B.2.2環(huán)境要求同A.2.2。B.2.3試驗預(yù)處理洗碗機應(yīng)該按照制造商的要求進行安裝試運行。試驗用餐具的規(guī)格及裝載方法符合GB/T20290—2016中附錄A（西式餐具）的要求。待測洗碗機：試驗前應(yīng)在空載狀態(tài)下連續(xù)運行2個制造商聲明的除菌程序，應(yīng)在運行結(jié)束后的4h內(nèi)進行除菌試驗。器具中應(yīng)視檢無污漬、水痕等殘留。餐具預(yù)處理：試驗前采用干燥箱（160℃、2h）對餐具進行干熱滅菌。待餐具溫度降至低于37℃方可使用。試驗時，洗碗機不添加任何洗滌劑或漂洗劑等化學(xué)物質(zhì)，建議使用全新樣機。如使用試驗過的樣機，則清空鹽倉、分配器，同時也要視檢器具中無污漬、水痕等殘留。B.3試驗步驟B.3.1餐具的涂覆制備對50%的個人餐具均勻涂覆試驗污染物，每個餐具涂覆污染物的量見表B.1；如果洗碗機的規(guī)格套數(shù)是奇數(shù)，涂覆試驗污染物的餐具套數(shù)是：(總套數(shù)+1)/2。盤、杯類等只使用一面的餐具，涂覆試驗污染物時，邊緣保留2cm的空白。刀、叉類兩面使用的餐具，涂覆試驗污染物時，只涂覆使用位置，手柄處不涂覆。涂覆污染物后，在室溫下干燥約1h，待表面無明顯水漬，然后與未涂覆菌液的餐具交叉排列放置于洗碗機中，試驗時洗碗機按照滿載容量運行。表B.1西式餐具污染物涂覆量122232415161789B.3.2菌液回收、培養(yǎng)除菌程序運行結(jié)束后，對餐具表面殘留細(xì)菌進行回收。選取每1套個人餐具，使用30mL0.85%的無菌生理鹽水進行回收，按照GB4789.2方法對回收液進行菌落計數(shù)。QB/T5133—****B.3.3陽性對照陽性對照采用與B.3.2中相同配比的餐具2套。餐具按照表B.1的要求均勻涂覆污染物，與試驗組餐具同時干燥，干燥后按B.3.2的方法進行洗脫、菌落培養(yǎng)，含菌量不應(yīng)小于106CFU/套。B.3.4陰性對照陰性對照采用2個茶托，不涂覆菌液直接干燥后，按B.3.2的方法進行洗脫、菌落培養(yǎng)，回收液含菌量應(yīng)小于1CFU/mL，否則試驗無效。B.4計算QB/T5133—****（規(guī)范性)除病毒性能試驗方法C.1試驗病毒和儀器C.1.1一般要求實驗室環(huán)境應(yīng)符合GB19489的相關(guān)要求。病毒試驗應(yīng)符合世界衛(wèi)生組織（WHO）及我國衛(wèi)生健康委員會對于病原體等管理及使用相關(guān)的最新要求。C.1.2試驗病毒試驗用病毒株首選：——噬菌體：Phi-X174（ATCC13706-B1，NBRC103405）——宿主菌：大腸埃希氏菌（EscherichiacoliATCC13706，NBRC13898）本文件的試驗條件均以噬菌體病毒為例，如果使用其他試驗病毒，應(yīng)符合對應(yīng)的試驗條件。所有的病毒應(yīng)有相應(yīng)的保藏機構(gòu)提供，并在報告中標(biāo)明名稱及宿主菌和病毒株編號。如選用其他病毒株，實驗室應(yīng)具備與其危害性相適應(yīng)的生物安全防護等級。C.1.3儀器——離心機：轉(zhuǎn)速為500r/min～10000r/min，準(zhǔn)確度1%；——振蕩培養(yǎng)箱：100r/min37±1）℃;——二級生物安全柜；——冷藏箱：5℃~10℃;——高壓蒸汽滅菌器；——生化培養(yǎng)箱37±1）℃;——干燥箱：0℃~300℃。C.2試驗要求及預(yù)處理C.2.1試驗條件試驗用水應(yīng)符合GB/T20290—2016中5.6的要求，菌落總數(shù)應(yīng)＜100CFU/mL。C.2.2環(huán)境要求為避免環(huán)境污染，洗碗機餐具的污染、裝載、回收的過程應(yīng)在二級生物安全實驗室（BSL-2）中進行。試驗前后都要徹底進行空間消毒。洗碗機排水應(yīng)進行收集消毒，防止試驗微生物污染環(huán)境。C.2.3樣機預(yù)處理樣機試驗前應(yīng)在空載狀態(tài)下連續(xù)運行2個周期制造商明示的除病毒程序，應(yīng)在運行結(jié)束后的4h內(nèi)進行除病毒試驗，器具中應(yīng)沒有殘留上一次使用時的殘留。保證樣機可觸及位置沒有微生物，可采用臭氧法或紫外線照射。C.2.4餐具預(yù)處理按照產(chǎn)品使用說明上的要求，滿載容量裝載洗碗機。使用符合GB38383—2019中附錄B要求的中式標(biāo)準(zhǔn)餐具，或符合GB/T20290—2016中附錄A要求的西式標(biāo)準(zhǔn)餐具。所有試驗負(fù)載要在試驗前進行滅菌，建議使用高溫烘干方法，采用烘箱（160℃、2h）對餐具進行干熱滅菌，待餐具溫度降至37℃以下方可使用。對于不能高溫處理的塑料餐具，可用75%的酒精擦拭3遍，無菌水沖洗后晾干。QB/T5133—****C.2.5病毒載體需要用玻璃片（尺寸10mm×10mm，厚度0.5mm~1.0mm）作為病毒載體進行試驗。使用前應(yīng)按原中華人民共和國衛(wèi)生部《消毒技術(shù)規(guī)范》（2002年版）的要求進行脫脂處理。C.3試驗步驟C.3.1噬菌體懸液制備噬菌體懸液的制備按照如下步驟進行：a）將宿主菌大腸埃希氏菌接種于營養(yǎng)瓊脂（NA）平板上，于（37±1）℃培養(yǎng)（24±1）h，取單菌落接種于營養(yǎng)肉湯（NB）中，在（37±1）℃,100r/min條件下振蕩（5±1）h；b）將15mL~20mL營養(yǎng)瓊脂傾注于培養(yǎng)皿中，凝固后，制備成營養(yǎng)瓊脂（NA）平板；c）將5mL濃度為1.0×108CFU/mL~1.0×109CFU/mL的大腸埃希氏菌菌懸液與5mL濃度為1.0×105PFU/mL～1.0×106PFU/mL的噬菌體懸液混合（濃度按照大腸埃希氏菌：噬菌體=1000：1的比例在（37±1）℃條件下靜置10min～20min；d）在步驟c）的混合液中加入10mL營養(yǎng)半固體瓊脂（NSA混勻后傾注于步驟b）中制備的營養(yǎng)瓊脂（NA）平板上，在（37±1）℃條件下，正置培養(yǎng)（24±1）h；e）將步驟d）的上層液體移至50mL離心管內(nèi)，10000r/min離心10min，將上清液轉(zhuǎn)移到另一50mL離心管內(nèi)，再以相同的條件離心處理，反復(fù)離心2次；f）利用孔徑0.22μm的濾膜對上清液進行過濾，獲得試驗用噬菌體原液。原液濃度應(yīng)為9PFU/mL～1.0×1010PFU/mL；試驗用噬菌體懸液應(yīng)在當(dāng)日使用。C.3.2試驗操作除病毒性能試驗步驟如下：a）將經(jīng)滅菌的載體片平鋪于無菌平皿內(nèi)，逐片滴加病毒懸液，每片滴加量為10μL。置室溫下自然陰干后再使用。b）洗碗機滿載的情況下，將滴染病毒的載體放置于透水的網(wǎng)狀容器，固定于洗碗機內(nèi)。在洗碗機每層的內(nèi)、外兩部位各放一個含有病毒載體的容器。c）關(guān)閉洗碗機門/蓋，按照制造商明示具有除病毒功能的程序進行除病毒試驗。d）程序結(jié)束后，打開洗碗機門/蓋，取出載體容器，將載體移入含有5mLPBS的試管中，振蕩洗滌后，按照C.3.3進行病毒滴度測定。e）陽性對照組，將染有病毒的載體3片，放置于洗碗機外室溫下，待試驗組運行完畢后，立即將載體移入含有5mLPBS的試管中，振蕩洗滌后，進行病毒滴度測定。C.3.3噬菌體滴度測定除病毒性能試驗按照如下操作進行：a）將回收的噬菌體懸液作為原液，使用PBS進行10倍稀釋。取1.0mL稀釋后的噬菌體懸液與100μL的1.0×108～9.0×108CFU/mL的大腸埃希氏菌菌液混合，在（37±1）℃條件下靜置10min～20min。b）將靜置后的菌懸液與營養(yǎng)半固體瓊脂（NSA）混合，傾注于營養(yǎng)瓊脂（NA）平板表面，在（37±1）℃條件下，正置培養(yǎng)（24±1）h。c）培養(yǎng)完成后，計算試驗組和對照組的噬菌體數(shù)量，對照組回收滴度應(yīng)＞1.0×105PFU/mL，否則試驗無效。C.4計算除病毒率和病毒去除對數(shù)值按公式（C.1）和（C.2）計算：P=100%............................................................（C.1）QB/T5133—****=lg(Voi)-lg(Vi)..........................................................式中：Pvi——第i次試驗的除病毒率；i——單次試驗編號；Uvi——第i次試驗的除病毒對數(shù)值；oi——第i次試驗中對照組回收的病毒滴度，單位為PFU/mL；i——第i次試驗中試驗組回收的病毒滴度，單位為PFU/mL。相同規(guī)格的洗碗機應(yīng)在相同條件下至少試驗1臺，每臺進行3次試驗，每次試驗結(jié)果應(yīng)高于限值要求，每次試驗后計算出除病毒率和除病毒對數(shù)值，取全部試驗除病毒率和除病毒對數(shù)值的算術(shù)平均值作為試驗結(jié)果。試驗結(jié)果按照GB/T8170要求進行修約并保留兩位小數(shù)。QB/T5133—****（規(guī)范性）不規(guī)則形狀抗菌材料的抗菌試驗方法D.1試驗菌種和儀器D.1.1試驗菌種D.1.1.1菌種的選擇同A.1.1.1。D.1.1.2培養(yǎng)條件D.1.1.2.1菌種培養(yǎng)條件同A.1.1.2。D.1.1.2.2磷酸鹽緩沖液（PBS）磷酸鹽緩沖液（PBS）的成分應(yīng)符合表D.1的要求。表D.1磷酸鹽緩沖液（PBS）的成分將上述成分混合后加入到1000mL蒸餾水中，充分?jǐn)嚢枞芙夂?，調(diào)節(jié)溶液pH在7.2～7.4，以121℃條件下，在高壓蒸汽滅菌器內(nèi)20min后備用。D.1.1.3試驗菌種的活化和菌液的制備10℃條件下保藏（不應(yīng)超過1個月作為斜面保藏菌。將斜面保藏菌轉(zhuǎn)接到平板固體培養(yǎng)基上，在（37±1）℃條件下培養(yǎng)（24±1）h。試驗時應(yīng)采用3代～5代、24h內(nèi)轉(zhuǎn)接的新鮮細(xì)菌培養(yǎng)物。用接種環(huán)從新鮮培養(yǎng)物上刮適量新鮮細(xì)菌，加入適量磷酸鹽緩沖液中，將菌液濃度稀釋至5.0×105~1.0×106CFU/mL作為試驗用菌液，按照GB4789.2方法進行菌落總數(shù)測定。D.1.2儀器試驗用儀器及相關(guān)參數(shù)應(yīng)符合以下要求：——生化培養(yǎng)箱37±1）℃;——振蕩培養(yǎng)箱：150r/min37±1）℃;——冷藏箱：5℃~10℃;——干燥箱：0℃~300℃;——二級生物安全柜；——高壓蒸汽滅菌器；——平皿、移液槍、渦旋混勻器、接種環(huán)、酒精燈等實驗室常用器具。D.2樣品要求及預(yù)處理D.2.1試驗組樣品試驗組樣品從經(jīng)抗菌處理的待檢樣品上直接剪取。將試驗組樣品剪成（10±1）mm×（10±1）mm大小的樣塊，若樣品原本的面積不足以剪成該尺寸，則按照樣品原狀進行試驗。樣品用量為（1.0±0.05）g，若原狀態(tài)樣品不足或超過1.0g且不方便剪裁或重新制備，可直接使用原樣品，并按照相應(yīng)的質(zhì)量等比例調(diào)整PBS和菌懸液（VPBS:V菌懸液=19:1）的用量。QB/T5133—****式中：V0——正常條件下使用的菌懸液與PBS溶液總體積，常數(shù)，取100mL；V1——實際使用的菌懸液與PBS溶液的總體積，單位為毫升（mLm0——正常條件下使用的樣品質(zhì)量，常數(shù)，取1.0g；m1——實際使用的樣品質(zhì)量，單位為克（g）。D.2.2對照組樣品高密度聚乙烯（HDPE）注射成型，制成（10±1）mm×（10±1）mm大小的樣塊。質(zhì)量為（1.0±0.05）g，若試驗樣品不足或超過1.0g且不方便剪裁或重新制備時，對照組樣品的質(zhì)量應(yīng)與試驗組樣品相同。D.2.3樣品預(yù)處理試驗前，試驗組樣品在121℃條件下，在高壓滅菌器內(nèi)20min，于干燥箱中干燥備用。對照樣品用75%乙醇溶液浸泡10min，然后用無菌水沖洗3次，自然晾干備用。若試驗樣品不能耐受高溫高壓，應(yīng)選用紫外線、臭氧、75%乙醇、無菌水沖洗等方式進行無菌預(yù)處理，選用的無菌預(yù)處理方式不應(yīng)影響試驗結(jié)果，處理后放置于試驗條件下自然干燥。D.3試驗步驟D.3.1試驗樣液的制備將對照組樣品和試驗組樣品放入三角燒瓶中，當(dāng)樣品質(zhì)量為1.0g時，加入95mL含0.1%（體積分?jǐn)?shù)）的PBS，混勻后，再加入5.0mL菌懸液。當(dāng)樣品質(zhì)量不足或超過1.0g時，按照D.2.1的要求進行調(diào)整。每次對照組樣品和試驗組樣品均設(shè)置3片，且每對試驗組樣品和對照組樣品的質(zhì)量應(yīng)相等。D.3.2對照組初始菌液濃度的確定振蕩前，取1mL對照組樣液，經(jīng)過適當(dāng)稀釋，選取合適的稀釋度，傾注平板37±1）℃條件下培養(yǎng)（24±1）h后計數(shù)。D.3.3振蕩培養(yǎng)將對照組和試驗組的三角瓶置于振蕩培養(yǎng)箱中，在（37±1）℃、150r/min條件下震蕩培養(yǎng)(24±1)h。D.3.4回收對照組和試驗組振蕩培養(yǎng)結(jié)束后，分別進行10倍梯度稀釋，選取合適的稀釋度，傾注平板37±1）℃條件下培養(yǎng)（24±1）h后計數(shù)。對照組樣品經(jīng)振蕩回收后的菌落數(shù)應(yīng)不低于2.5×103CFU/mL。D.4計算抗菌率按照公式（D.1）計算：R=根100%……（D.式中：R——抗菌率，以百分?jǐn)?shù)表示；A——試驗樣品平均回收菌數(shù)，單位為CFU/mL；B——對照樣品平均回收菌數(shù)，單位為CFU/mL。試驗結(jié)果按照GB/T8170要求進行修約并保留兩位小數(shù)。QB/T5133—****（規(guī)范性)抗病毒性能試驗方法E.1試驗病毒和儀器E.1.1一般要求實驗室環(huán)境、試驗操作及其他涉及生物安全的部分應(yīng)符合GB19489的要求。試驗用病毒株應(yīng)符合世界衛(wèi)生組織（WHO）及我國衛(wèi)生健康委員會對于病原體等管理及使用相關(guān)的最新要求