西紅花玉米黃質(zhì)裂解酶基因轉(zhuǎn)化番茄的研究的開題報(bào)告

西紅花玉米黃質(zhì)裂解酶基因轉(zhuǎn)化番茄的研究的開題報(bào)告【題目】西紅花玉米黃質(zhì)裂解酶基因轉(zhuǎn)化番茄的研究【問題背景】西紅花是一種名貴的藥材和調(diào)料，其主要成分為黃酮類化合物和紅黃色素。其中，紅黃色素以西紅花中的“玉米黃質(zhì)”為主要成分，具有很高的營養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值。但是，由于其產(chǎn)量較低、采摘成本高等原因，使得其價(jià)格昂貴，難以普及。而番茄是人們?nèi)粘Ｉ钪谐Ｒ姷氖卟耍揖哂懈弋a(chǎn)、生長周期短等優(yōu)點(diǎn)，因此本研究將嘗試將西紅花的“玉米黃質(zhì)裂解酶”基因轉(zhuǎn)化到番茄中，來提高西紅花中“玉米黃質(zhì)”的產(chǎn)量，降低成本，以便推廣其應(yīng)用。【研究目的】本研究旨在通過基因轉(zhuǎn)化技術(shù)，將西紅花中的“玉米黃質(zhì)裂解酶”基因轉(zhuǎn)化到番茄中，來提高西紅花中“玉米黃質(zhì)”的產(chǎn)量，降低成本，以便推廣其應(yīng)用?！狙芯績?nèi)容】1.西紅花中的“玉米黃質(zhì)裂解酶”基因克隆與序列分析2.制備適合轉(zhuǎn)化的載體3.基因轉(zhuǎn)化的操作和條件優(yōu)化4.相關(guān)基因表達(dá)的分析和鑒定5.轉(zhuǎn)化后番茄中“玉米黃質(zhì)”的生物活性測定和與野生型番茄的比較【研究意義】本研究將采用基因轉(zhuǎn)化技術(shù)將西紅花中的“玉米黃質(zhì)裂解酶”基因轉(zhuǎn)化到番茄中，以提高其“玉米黃質(zhì)”的產(chǎn)量，降低成本，有著十分重要的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)意義。本研究同時(shí)也探究了將不同物種基因進(jìn)行相互轉(zhuǎn)化的科學(xué)方法，有著十分重要的科學(xué)意義?！狙芯糠椒ā?.從西紅花的cDNA中克隆出“玉米黃質(zhì)裂解酶”基因序列，并進(jìn)行序列比對和分析；2.構(gòu)建適合轉(zhuǎn)化的載體，篩選出含有待轉(zhuǎn)化基因的克隆載體；3.通過基因轉(zhuǎn)化技術(shù)將載體轉(zhuǎn)化到番茄的體細(xì)胞中；4.優(yōu)化轉(zhuǎn)化工藝和培養(yǎng)條件，篩選出含有目標(biāo)基因的穩(wěn)定轉(zhuǎn)化植株；5.利用PCR、南方雜交等技術(shù)的檢測，分析目標(biāo)基因進(jìn)入番茄基因組的情況；6.分析轉(zhuǎn)化植株中相關(guān)基因的表達(dá)情況，并進(jìn)行生物活性測定和與野生型番茄的比較?！绢A(yù)期結(jié)果】1.克隆出西紅花中“玉米黃質(zhì)裂解酶”基因并進(jìn)行了序列分析；2.成功構(gòu)建了適合轉(zhuǎn)化的載體；3.對基因轉(zhuǎn)化過程進(jìn)行了優(yōu)化，并獲得了含有目標(biāo)基因的穩(wěn)定轉(zhuǎn)化植株；4.轉(zhuǎn)化后番茄中“玉米黃質(zhì)”的生物活性能夠明顯增強(qiáng)，且成本降低；5.相關(guān)基因表達(dá)情況的分析和鑒定。【研究計(jì)劃】1.第一年：收集西紅花樣本，提取RNA并進(jìn)行cDNA合成；通過PCR方法克隆目標(biāo)基因，并進(jìn)行序列分析；構(gòu)建載體；2.第二年：初步篩選得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)化植株，進(jìn)行基因擴(kuò)增及相關(guān)分析；3.第三年：對轉(zhuǎn)化后的番茄進(jìn)