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一、從試管牛說起試管動物技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精,并通過培養(yǎng)發(fā)育成早期胚胎后,再經(jīng)移植產(chǎn)生后代的技術(shù)。快速繁殖動物優(yōu)良品種。目的:技術(shù)手段:體外受精和早期胚胎培養(yǎng)。采集良種母牛的卵母細胞卵母細胞的體外培養(yǎng)采集良種公牛精子精子體外獲能體外受精良種牛體外受精胚胎胚胎移植受體牛良種犢牛成熟期牛屠宰加工廠市場采集卵巢中的卵母細胞試管牛工廠化生產(chǎn)流程:二、體外受精體外受精1、卵母細胞的采集2、精子的獲取3、受精1、卵母細胞的采集:小型動物:注射促性腺激素,超數(shù)排卵后,從輸卵管中沖取卵子。超數(shù)排卵:給供體注射促性腺激素,使一頭母畜一次排出比自然情況下多幾倍的卵子。大型動物:從屠宰母畜的卵巢中采集,也可以借助超聲波探測儀、內(nèi)窺鏡或腹腔鏡等工具,直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細胞。2、精子的獲?。杭訇幍婪ǎ治辗ê碗姶碳しǖ?。①收集的方法:②獲能處理:培養(yǎng)法:將取自附睪的精子,放入人工配制的獲能液中,培養(yǎng)一段時間后,精子就可獲能。(嚙齒動物、家兔和豬等)化學(xué)誘導(dǎo)法:將精子放在一定濃度的肝素或鈣離子載體溶液中,用化學(xué)藥物誘導(dǎo)精子獲能。(牛、羊)電刺激法3、受精:獲能的精子和培養(yǎng)成熟的卵子,一般情況下都可以在獲能溶液或?qū)S玫氖芫芤褐型瓿墒芫^程。精子和卵子一般要放在培養(yǎng)液小滴內(nèi)共同培養(yǎng)一段時間才能完成受精。1、離心的目的是什么?2、卵母細胞的培養(yǎng)的目的是什么?獲得精子培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期(卵子獲能)牛卵巢牛卵巢中采卵B超活采儀培養(yǎng)液小滴卵母細胞的成熟培養(yǎng):CO2培養(yǎng)箱三、胚胎的早期培育無機鹽有機鹽維生素激素氨基酸核苷酸水血清發(fā)育培養(yǎng)液精子與卵子在體外受精后,應(yīng)將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng),以檢查受精情況和受精卵的發(fā)育能力。
當(dāng)胚胎發(fā)育到適宜的階段時,可將其取出向受體移植,或冷凍保存。不同動物胚胎移植時間不同桑椹胚階段或囊胚階段:牛、羊4~8個細胞階段:小鼠、家兔8~16個細胞階段:試管嬰兒獲能的精子+成熟的卵子(MII)受精卵發(fā)育培養(yǎng)液獲能液或受精液胚胎胚胎移植采集卵母細胞體外培養(yǎng)采集精子體外獲能體外受精早期胚胎培養(yǎng)受體牛本節(jié)小結(jié)①超數(shù)排卵(試劑)②活體取卵(儀器)③屠宰的卵巢中取卵發(fā)育培養(yǎng)液獲能的卵子獲能的精子①假陰道法②手握法③電刺激法MII中期①培養(yǎng)法②化學(xué)誘導(dǎo)法受精溶液培養(yǎng)條件目的階段1、從試管牛說起;2、體外受精;3、胚胎的早期培養(yǎng)??偨Y(jié)1、總結(jié)本節(jié)課的主要內(nèi)容;2、完成P73的課后練習(xí)題;3、完成本節(jié)課的導(dǎo)學(xué)案和課時作業(yè);4、預(yù)習(xí)第三章第三節(jié)《胚胎工程的應(yīng)用及前景》。課下作業(yè)本章總結(jié)概念圖本節(jié)概念圖本節(jié)概念圖胚胎移植的概念及過程:胚胎移植技術(shù)是將經(jīng)濟價值較高、遺傳性狀優(yōu)秀的母畜,經(jīng)過激素處理,使其超數(shù)排卵后受精,然后將發(fā)育的早期胚胎移植到同期發(fā)情的代孕母的子宮內(nèi),通過代孕母妊娠產(chǎn)仔的技術(shù)。因此胚胎移植也被稱做“借腹懷胎”“借腹生子”,提供胚胎的動物為供體,接受胚胎的動物叫受體(又叫代孕母),兩種雌性動物可以專門提供胚胎,而代孕母讓健康的一般品種的雌性動物來完成。1992年我國首例三胞胎試管嬰兒比較項目試管嬰兒克隆動物生物學(xué)原理體外
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