第十章 管理毒理學(xué)毒理學(xué)基礎(chǔ)

第十章

管理毒理學(xué)第一節(jié) 概述第二節(jié) 危險(xiǎn)度評(píng)論第三節(jié) 安全性評(píng)價(jià)教學(xué)目的：1、掌握管理毒理學(xué)及危險(xiǎn)度評(píng)價(jià)、危險(xiǎn)度評(píng)價(jià)組成2、掌握安全性評(píng)價(jià)的意義及基本內(nèi)容3、熟悉安全性評(píng)價(jià)注意事項(xiàng)第一節(jié)概述一、管理毒理學(xué)(regulatory

toxicology

)

管理毒理學(xué)是毒理學(xué)的一門(mén)新興分支學(xué)科，其工作內(nèi)容已超出了經(jīng)典毒理學(xué)以及生命學(xué)科的范疇，成為具有一定綜合性的科學(xué)。

在管理毒理學(xué)中，有一重要的概念與工作內(nèi)容，即危險(xiǎn)度評(píng)定（risk

assessment）。危險(xiǎn)度評(píng)定是衛(wèi)生決策的主要依據(jù)。由于危險(xiǎn)度評(píng)定使衛(wèi)生決策具有充分的科學(xué)依據(jù)，因而可使衛(wèi)生決策更為客觀，從而減少工作中的失誤。在管理毒理學(xué)實(shí)際工作中，毒理學(xué)工作者的主要任務(wù)是提供有關(guān)化學(xué)品的毒理學(xué)資料以及危險(xiǎn)度的評(píng)定。管理毒理學(xué)工作者則以此種資料以及化學(xué)品危險(xiǎn)度的評(píng)定為依據(jù)，并結(jié)合其它有關(guān)因素和實(shí)際情況，制訂有關(guān)毒理學(xué)的法規(guī)，對(duì)化學(xué)品進(jìn)行衛(wèi)生管理。管理毒理學(xué)工作是一項(xiàng)新的工作，在我國(guó)以及其它國(guó)家都是如此，尚需在有關(guān)理論和實(shí)際工作方面，不斷累積經(jīng)驗(yàn)，充實(shí)提高。二、國(guó)內(nèi)有關(guān)毒化學(xué)品的衛(wèi)生管理法規(guī)

我國(guó)自1982年以年，也陸續(xù)制訂了一些暫行規(guī)定或程序。例如，我國(guó)衛(wèi)生部曾在1983年公布《食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序（試行）》，1985年又經(jīng)修訂，并正式公布[（85）衛(wèi)防字第78號(hào)文件]。1992年又對(duì)其進(jìn)行修訂。1982年農(nóng)牧漁業(yè)部頒布《農(nóng)藥毒性試驗(yàn)方法暫行規(guī)定（試行）》，這一規(guī)定主要以《食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序》。其中并包括《環(huán)境安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序》。

中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部和農(nóng)業(yè)部為了配合其它部門(mén)共同做好我國(guó)農(nóng)藥管理工作，于1991年6月頒布了新的《農(nóng)藥安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序》。該程序是在1982年頒布的《農(nóng)藥毒性試驗(yàn)方法暫行規(guī)定（試行）》和《食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序（試行）的基礎(chǔ)上，收集并參考了國(guó)內(nèi)外有關(guān)農(nóng)藥和化學(xué)物品的管理經(jīng)驗(yàn)和安全評(píng)價(jià)資料，較全面地考慮到農(nóng)藥安全性的各個(gè)方面，提出了符合農(nóng)藥特點(diǎn)的各項(xiàng)要求，協(xié)調(diào)了這些程序和國(guó)內(nèi)現(xiàn)有法規(guī)的關(guān)系。在充分運(yùn)用國(guó)內(nèi)原有法規(guī)和經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，結(jié)合我國(guó)

國(guó)情，引用國(guó)外資料制定的。在以上規(guī)定或管理中，

均要求對(duì)藥品、農(nóng)藥、工業(yè)化學(xué)品以及用于食品接觸

的化學(xué)物質(zhì)（如食品添加劑、食品污染物等）必須經(jīng)

過(guò)安全性評(píng)價(jià)，才能被允許投產(chǎn)、進(jìn)入市場(chǎng)或進(jìn)出口。此外，1985年頒布的《新藥審批辦法》中，對(duì)藥物的毒理學(xué)評(píng)價(jià)也作出了規(guī)定。1990年又公布了新藥（西藥）毒理研究指導(dǎo)原則（討論稿）。1987年衛(wèi)

生部發(fā)布了《化妝品安全性評(píng)價(jià)程序和方法》規(guī)定于

1987年10月1日實(shí)施，進(jìn)一步加強(qiáng)了對(duì)化妝品的安全管理。1990年我國(guó)國(guó)家環(huán)境保護(hù)局正式公布出版了《國(guó)家

環(huán)境保護(hù)局化學(xué)品測(cè)試準(zhǔn)則》，它是國(guó)家環(huán)境保護(hù)局對(duì)有毒化學(xué)品進(jìn)行管理的標(biāo)準(zhǔn)文件。

關(guān)于工業(yè)毒物安全性評(píng)價(jià)，我國(guó)有關(guān)工業(yè)生產(chǎn)中新化學(xué)物質(zhì)毒性鑒定規(guī)程以及工業(yè)化學(xué)物質(zhì)毒性鑒定管理辦法也正在制訂中。第二節(jié)外來(lái)化合物危險(xiǎn)度評(píng)定一、基本概念

毒理學(xué)是研究外來(lái)化合物對(duì)生活機(jī)體的損害作用及其機(jī)理的一門(mén)科學(xué)，對(duì)所接觸的外來(lái)化合物進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)是毒理學(xué)的一項(xiàng)重要任務(wù)。Regulatory

toxicology:是毒理學(xué)的一個(gè)分支，是將毒理學(xué)的原理、技術(shù)、和研究結(jié)果應(yīng)用于化學(xué)物質(zhì)的管理，以達(dá)

到保障人類(lèi)健康和保護(hù)生態(tài)環(huán)境免遭破壞的目的。

外來(lái)化合物進(jìn)行毒理學(xué)評(píng)價(jià)主要包括兩部分內(nèi)容。首先是在不同接觸條件下，確定外來(lái)化合物對(duì)各種生物系統(tǒng)的毒性；然后是對(duì)人群在一定條件下接觸該化學(xué)物的安全性或危險(xiǎn)度進(jìn)行評(píng)定。

外來(lái)化合物的毒性是指其自身具有的能導(dǎo)致機(jī)體損傷的能力。但如果接觸的量低于一定水平，對(duì)機(jī)體可以不引起損害或不能觀察到明顯的損害作用。外來(lái)化合物的安全性在理論上是指無(wú)危

險(xiǎn)或危險(xiǎn)度極低，達(dá)到可以忽略的程度。但由于實(shí)驗(yàn)條件的限制和多種因素的影

響，在毒理學(xué)安全性評(píng)定的實(shí)際工作中

不可能精確確定絕對(duì)安全的接觸劑量。

一般所指安全量是指在一定接觸劑量和

接觸方式下，不致造成損害的劑量。危險(xiǎn)度(risk)是指在特定條件下，因接觸某種水平的化學(xué)毒物而造成機(jī)體損傷、

發(fā)生疾病，甚至死亡的預(yù)期概率。外來(lái)化合物的危險(xiǎn)度是指化學(xué)物在定接觸條件下，對(duì)

人體造成損害可能性的定量估計(jì)。此種可能性可以化學(xué)物對(duì)機(jī)或人群造成損害程度，即發(fā)病率或死

亡率進(jìn)行定量地表示。Acceptable

risk:公眾和社會(huì)在精神、心理等各方面均能承受的危險(xiǎn)度。virtual

safe

dose:與可接受的危險(xiǎn)度相對(duì)應(yīng)的化學(xué)毒物的接觸劑量。risk

assessment:是在綜合分析人群流行病學(xué)調(diào)查、毒理學(xué)試驗(yàn)、環(huán)境監(jiān)測(cè)和健康監(jiān)護(hù)等多方面研究資料的基礎(chǔ)上，對(duì)化學(xué)毒物損害人類(lèi)健康的潛在能力做定性和定量的評(píng)估，對(duì)評(píng)價(jià)過(guò)程中存在的不確定性進(jìn)行描述與分析，進(jìn)而判斷損害可能發(fā)生的概率和嚴(yán)重程度。目的是確定可接受的危險(xiǎn)度和VSD，為政府管理部門(mén)正確地作出衛(wèi)生和環(huán)保政策、制訂相應(yīng)的管理法規(guī)和衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)提供科學(xué)依據(jù)。二、危險(xiǎn)度的評(píng)定

外來(lái)化合物危險(xiǎn)度評(píng)定是以定量的概念，在人類(lèi)接觸環(huán)境危害因素后，對(duì)健康的潛在損害的程度進(jìn)行估測(cè)或鑒定。危險(xiǎn)度評(píng)定是對(duì)各種環(huán)境有害因素進(jìn)行管理的重要依據(jù)，具有客觀性、能定量及有預(yù)測(cè)性的特點(diǎn)。

危險(xiǎn)度評(píng)定的內(nèi)容包括四個(gè)部分：即明確外來(lái)化合物對(duì)機(jī)體損害作用的存在與否、定量評(píng)定接觸劑量與損害程度關(guān)系、確定人類(lèi)實(shí)際接觸量和接觸情況及對(duì)人群危險(xiǎn)度的估計(jì)。1、外來(lái)化合物對(duì)機(jī)體損害作用的評(píng)定

主要是從定性角度確定外來(lái)化合物是否可能對(duì)人類(lèi)健康造成損害以及損害程度，并對(duì)損害表現(xiàn)的性質(zhì)作出確定。確定損害作用的主要依據(jù)是通過(guò)動(dòng)物毒性試驗(yàn)和有關(guān)人群流行病學(xué)調(diào)查的資料。

通過(guò)是否具有損害作用的確定，可以初步確定一種外來(lái)化合物對(duì)人體造成損害的可能性、損害具體表現(xiàn)，以及此種損害作用的性質(zhì)及特點(diǎn)。2、接觸劑量與損害程度關(guān)系的確定

是從定量角度確定機(jī)體可能接觸外來(lái)化合物的劑量與機(jī)體損害程度的關(guān)系。主要是利用外來(lái)化合物劑量—反應(yīng)（效應(yīng)）關(guān)系，進(jìn)行評(píng)定，這是危險(xiǎn)度評(píng)定中的重要部分。

通過(guò)劑量—反應(yīng)（效應(yīng)）關(guān)系的確定，主要是可以對(duì)在與人類(lèi)可能接觸的劑量下，人類(lèi)可能受到損害的程度作出定量的估計(jì)。利用所求出的劑量—反應(yīng)（效應(yīng)）關(guān)系，可以掌握劑量—反應(yīng)（效應(yīng)）關(guān)系曲線的特點(diǎn)，是否存在閾劑量以及有關(guān)閾劑量的各種情況。

確定人類(lèi)危險(xiǎn)度中外來(lái)化合物劑量—反應(yīng)（效應(yīng)）關(guān)系的主要依據(jù)是在參照類(lèi)似人類(lèi)可能接觸情況下

進(jìn)行動(dòng)物毒性試驗(yàn)和有關(guān)人群流行病學(xué)調(diào)查的資料。人群流行病學(xué)調(diào)查資料較為可信，可直接運(yùn)用于人

群危險(xiǎn)度的確定；動(dòng)物毒性試驗(yàn)資料則必須進(jìn)行外

推處理，才能推論于人類(lèi)。外推的方法多利用適當(dāng)

的數(shù)學(xué)模型。3、人類(lèi)實(shí)際接觸量和接觸情況的確定

在明確一種外來(lái)化合物對(duì)人體可能具有損害作用及其劑量—反應(yīng)（效應(yīng)）關(guān)系之后，必須進(jìn)一步確定人類(lèi)實(shí)際接觸的劑量以及實(shí)際接觸情況。為此應(yīng)首先對(duì)人類(lèi)實(shí)際接觸此種化合物的總量進(jìn)行測(cè)定與估算。

人類(lèi)實(shí)際接觸量主要決定此種化學(xué)物進(jìn)入人類(lèi)生活環(huán)境和生產(chǎn)環(huán)境的來(lái)源和數(shù)量，再根據(jù)化合物的理化性質(zhì)進(jìn)行估算。再有，還必須分別測(cè)定空氣、水體、土壤和食物中此種化合物的含量，了解其在環(huán)境中分布的情況有助于對(duì)人類(lèi)實(shí)際接觸量進(jìn)行較精確估算。此外，還必須掌握全體人群的實(shí)際接觸情況（包括可能接觸的范圍，可能受到損害的人數(shù)和程度）以及人群中各種不同群體的實(shí)際接觸情況。例如職業(yè)性接觸人群、日常生活接觸人群、高度接觸人群、老幼病弱等易感人群等的接觸情況。接觸情況中包括劑量、頻度（即多次接觸的時(shí)

間間隔）和接觸的持續(xù)時(shí)間等。根據(jù)這些資料，才能全面掌握人類(lèi)實(shí)際接觸情況與劑量，才能

對(duì)危險(xiǎn)度作出較為準(zhǔn)確的估計(jì)。4、對(duì)外來(lái)化合物危險(xiǎn)度的估計(jì)

對(duì)過(guò)對(duì)外來(lái)化合物對(duì)人體的損害作用及其劑量—反應(yīng)（效應(yīng)）關(guān)系和人類(lèi)實(shí)際接觸量與范圍確定后，

即可以上述各種參數(shù)為根據(jù)，對(duì)外來(lái)化合物的危險(xiǎn)

度，即外來(lái)化合物對(duì)人群健康損害的程度作出估計(jì)。在外來(lái)化合物危險(xiǎn)度中包括對(duì)接觸人群總體的危險(xiǎn)

度和個(gè)體危險(xiǎn)度。可以人群對(duì)此種外來(lái)化合物損害

作用的反應(yīng)率或死亡率表示，例如氯乙烯致癌作用

危險(xiǎn)度為死亡率增加41/100000，以死亡率表示的每日吸煙10支的危險(xiǎn)度為1/400。三、危險(xiǎn)度評(píng)定在管理毒理學(xué)中的應(yīng)用

危險(xiǎn)度評(píng)定是對(duì)有毒化學(xué)品進(jìn)行衛(wèi)生管理的主要依據(jù)。在管理毒理學(xué)實(shí)際工作中，經(jīng)常需要作出政策性的決定，而政策的決定主要根據(jù)危險(xiǎn)度進(jìn)行利弊權(quán)衡分析。

例如，一種農(nóng)藥的生產(chǎn)使用，其有利方面是可以殺滅某些病蟲(chóng)害，使農(nóng)作物增產(chǎn)；在弊的方面可由于某種原因農(nóng)藥的使用造成對(duì)環(huán)境的污染，引起中毒或使有關(guān)人群發(fā)病率增加。對(duì)某項(xiàng)政策的決定，必須權(quán)衡利害，綜合考慮工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)需要、環(huán)境質(zhì)量的保護(hù)和人民健康的保障等經(jīng)濟(jì)資料、社會(huì)效益以及衛(wèi)生效益全面分析考慮，或利多弊少或利少弊多。如果使用一種農(nóng)藥或使農(nóng)作物大量增產(chǎn)，雖有一定危險(xiǎn)度，但不過(guò)高，即可認(rèn)為利大于弊；反之，一種農(nóng)藥雖有殺蟲(chóng)效果，但不甚明顯，危險(xiǎn)度又較高，又有其它農(nóng)藥可以代替，則為弊大于利。據(jù)此可以決定取舍，并非都是如此簡(jiǎn)單明確。

外來(lái)化合物的危險(xiǎn)度評(píng)定還可為有關(guān)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的制訂提供主要依據(jù)。

例如某種外業(yè)化合物在空氣、水、食物中最高容許量等。通過(guò)危險(xiǎn)度的評(píng)定還可以對(duì)環(huán)境保護(hù)和環(huán)境污染治理效果進(jìn)行比較評(píng)定。第三節(jié)

外來(lái)化合物毒理學(xué)安全性評(píng)價(jià)程序一、基本概念1、外來(lái)化合物安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)外來(lái)化合物安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)是通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)和對(duì)人群的觀察，闡明某種外來(lái)化合物的毒性及其潛在危害，以便對(duì)人類(lèi)使用這種外來(lái)化合物的安全性作出評(píng)價(jià)，并為制訂預(yù)防措施和衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)提供理論依據(jù)。2、外來(lái)化合物的安全性外來(lái)化合物的安全性是指一種化合物在規(guī)定的使用方式和用量條件下，對(duì)人體健康不致產(chǎn)生任何損害，即不引導(dǎo)起急性、慢性中毒，亦不致對(duì)接觸者（包括老、弱、病、幼和孕婦）及其后代產(chǎn)生潛在危害。對(duì)某種外業(yè)化合物進(jìn)行安全性評(píng)定時(shí)，必須

掌握該化合物的成分、理化性質(zhì)等基本資料，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)資料，及對(duì)人群的直接觀察資料，

最后進(jìn)行綜合評(píng)定所謂絕對(duì)的安全，實(shí)際上

是不存在的。在掌握上述三方面資料的基礎(chǔ)

上，進(jìn)行最終評(píng)價(jià)時(shí)，應(yīng)且面權(quán)衡其利弊和

實(shí)際的可能性，從確保發(fā)揮該物質(zhì)的最大效

益以及對(duì)人體健康和環(huán)境造成最小的危害的

前提下作出結(jié)論。二、安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序的原則

在實(shí)際工作中，對(duì)一種外來(lái)化合物進(jìn)行毒性試驗(yàn)時(shí)，還須對(duì)各種毒性試驗(yàn)方法按一定順序進(jìn)行，

即先進(jìn)行何項(xiàng)試驗(yàn)，再進(jìn)行何項(xiàng)試驗(yàn)，才能達(dá)到

在最短的時(shí)間內(nèi)，以最經(jīng)濟(jì)的方法，取得最可靠

的結(jié)果。因此，在實(shí)際工作中采取分階段進(jìn)行的

原則。即試驗(yàn)周期短、費(fèi)用低、預(yù)測(cè)價(jià)值高的試

驗(yàn)先安排。投產(chǎn)之前或登記之前，必須進(jìn)行第一、二階段的試驗(yàn)。凡屬我國(guó)首創(chuàng)、產(chǎn)量較大、使用

較廣、接觸機(jī)會(huì)較多、或化學(xué)結(jié)構(gòu)提示有慢性毒

性和/或致癌作用可能者，必須進(jìn)行第四階段的試驗(yàn)。三、食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序

程序包括四個(gè)階段，即急性毒性試驗(yàn)；蓄積性毒性、致突變和代謝試驗(yàn)；亞慢性毒性（包括繁殖、致畸）試驗(yàn)；慢性毒性（包括致癌）試驗(yàn)。1、第一階段急性毒性試驗(yàn)（1）目的：①了解受試物的毒性強(qiáng)度和性質(zhì)。②為蓄積性和亞慢性毒性試驗(yàn)的劑量選擇提供依據(jù)。（2）試驗(yàn)項(xiàng)目：①用霍恩氏法、機(jī)率單位法或寇氏法測(cè)定經(jīng)口半數(shù)致死量（LD50）。②7天喂養(yǎng)試驗(yàn)。備注：以上兩個(gè)項(xiàng)目均分別用兩種性別的小鼠和/或大鼠進(jìn)行。（3）結(jié)果判定：①LD50或7天喂養(yǎng)試驗(yàn)的最小有作用劑量小于人的可能攝入量的10倍者，則放棄不再繼續(xù)試驗(yàn)。②大于10倍者，可進(jìn)入下一階段試驗(yàn)。為慎重起見(jiàn)，凡LD50在10倍左右時(shí)，應(yīng)進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)，或用另一種方法進(jìn)行試驗(yàn)。2、第二階段蓄各毒性、致突變或代謝試驗(yàn)（1）蓄積毒性試驗(yàn)①目的：了解受試物在體內(nèi)的蓄積情況。②試驗(yàn)項(xiàng)目：包括蓄積系數(shù)法和20天試驗(yàn)法。蓄積系數(shù)法是用兩種性別的大鼠或小鼠，各20只。20天試驗(yàn)法是用兩種性別的大鼠或小鼠，每個(gè)劑量組雌雄各10只。以上兩種方法任選一種。③結(jié)果判定：蓄積系數(shù)小于3，則放棄，不再繼續(xù)試驗(yàn)；大于或等于3，則可進(jìn)行以下的試驗(yàn)。如

1/20LD50組有死亡，且有劑量—效應(yīng)關(guān)系，則認(rèn)為有較強(qiáng)的蓄各作用，予以放棄；如1/20LD50組無(wú)死亡，則可進(jìn)入以下的試驗(yàn)。（2）致突變?cè)囼?yàn)①目的：對(duì)受試物是否具有致癌作用的可能性進(jìn)行篩選。②試驗(yàn)項(xiàng)目：包括體外試驗(yàn)與整體試驗(yàn)。體外試驗(yàn)中Ames試驗(yàn)為必做項(xiàng)目。在整體試驗(yàn)

中，可在微核試驗(yàn)和骨髓細(xì)胞染色體畸變

分析試驗(yàn)中任選一項(xiàng)；在顯性致死試驗(yàn)和

睪丸生殖細(xì)胞染色體畸變分析試驗(yàn)中任選

一項(xiàng)。③結(jié)果判定：

如三項(xiàng)試驗(yàn)均為陽(yáng)性，則表示受試物很可能具有致癌作用，除非受試物具有十分重要的價(jià)值，一般應(yīng)予以放棄。

如其中兩項(xiàng)試驗(yàn)為陽(yáng)性，則由有關(guān)專(zhuān)家進(jìn)行評(píng)議，根據(jù)受試物的重要性和可能攝入量等，綜合權(quán)衡

利弊再作用決定。

如其中一項(xiàng)試驗(yàn)為陽(yáng)性，則再選擇兩項(xiàng)其他致突變?cè)囼?yàn)（包括體外培養(yǎng)淋巴細(xì)胞染色體畸變分析、

DNA修復(fù)合成、DNA合成抑制、姐妹染色單體互換試驗(yàn)等）。如此兩項(xiàng)均為陽(yáng)性，則應(yīng)予以放棄；如有一項(xiàng)為陽(yáng)性，則可進(jìn)入亞慢性毒性試驗(yàn)。如此三項(xiàng)試驗(yàn)均為陰性，則可進(jìn)入亞慢性試驗(yàn)。（3）代謝試驗(yàn)對(duì)于我國(guó)創(chuàng)制的化學(xué)物質(zhì)，在進(jìn)行最終評(píng)價(jià)時(shí)，至少應(yīng)進(jìn)行以下幾項(xiàng)代謝方面的試驗(yàn)：①胃腸道吸收試驗(yàn)；②測(cè)定血濃度，計(jì)算生物半減期和其他動(dòng)力學(xué)指標(biāo)；③主要器官和組織中的分布試驗(yàn)；④排泄（尿、糞、膽汁）試驗(yàn)。有條件時(shí)，可進(jìn)一步進(jìn)行代謝產(chǎn)物的分離、鑒定。對(duì)于國(guó)際上多數(shù)國(guó)家已批準(zhǔn)使用和毒性評(píng)價(jià)資料比較齊全的化學(xué)物質(zhì)，可暫不要求進(jìn)行代謝試驗(yàn)。對(duì)于屬于人體正常成份的物質(zhì)可不必進(jìn)行代謝研究。3、第三階段亞慢性毒性試驗(yàn)（1）目的①觀察受試物以不同劑量水平較長(zhǎng)期喂養(yǎng)，對(duì)動(dòng)物的毒性作用性質(zhì)和靶器官，并確定最大無(wú)作用劑量。②了解受試物對(duì)動(dòng)物繁殖及對(duì)子代的致畸作用。③為慢性毒性和致癌性試驗(yàn)的劑量選擇提供依據(jù)。④為評(píng)價(jià)受試物能否應(yīng)用于食品提供依據(jù)。（2）試驗(yàn)項(xiàng)目包括以下4種試驗(yàn)：