分子熒光光譜法實(shí)驗(yàn)報(bào)告范文

分子熒光光譜法試驗(yàn)報(bào)告范文一、試驗(yàn)?zāi)康陌盐諢晒夤舛扔?jì)的根本原理及使用。了解熒光分光光度計(jì)的構(gòu)造和各組成局部的作用。把握分子熒光光度計(jì)分析物質(zhì)的特征熒光光譜：激發(fā)光譜、放射光譜的測(cè)定方法。了解影響熒光產(chǎn)生的幾個(gè)主要因素。學(xué)會(huì)運(yùn)用分子熒光光譜法對(duì)物質(zhì)進(jìn)展定性和定量分析。分子熒光。S1S0各振動(dòng)能級(jí)所產(chǎn)生的光輻射。激發(fā)光譜是指發(fā)光的某一譜線或譜帶的強(qiáng)度隨激發(fā)光波長(zhǎng)(或頻率)變化的曲線。橫坐標(biāo)為激發(fā)光波長(zhǎng)，縱坐標(biāo)為發(fā)光相對(duì)強(qiáng)度。激發(fā)光譜反映不同波長(zhǎng)的光激發(fā)材料產(chǎn)生發(fā)光的效果——激把其次單色器的波長(zhǎng)固定，使測(cè)定的λem不變，轉(zhuǎn)變第一單色器波長(zhǎng)，讓不同波長(zhǎng)的光照在熒光物質(zhì)上，測(cè)定它的熒光強(qiáng)度，以I為縱坐標(biāo)，λex為橫坐標(biāo)所得圖譜即熒光物質(zhì)的激發(fā)光譜，從曲線上找出放射光譜是指發(fā)光的能量按波長(zhǎng)或頻率的分布橫坐標(biāo)為波長(zhǎng)〔或頻率，縱坐標(biāo)為發(fā)光相對(duì)強(qiáng)度。放射光譜常分為帶譜和線譜，有時(shí)也會(huì)消滅既有帶譜、又有線譜的狀況。放射光譜的獲得方法：先把第一單色器的波長(zhǎng)固定，使激發(fā)的λex不變，轉(zhuǎn)變其次單色器波長(zhǎng)，讓不同波長(zhǎng)的光掃描，測(cè)定它的發(fā)光強(qiáng)度，以I為縱坐標(biāo)，λem為橫坐標(biāo)得圖譜即熒光物質(zhì)的放射光譜;λem。熒光強(qiáng)度與熒光物質(zhì)濃度的關(guān)系I0If用儀器測(cè)(A<0.05)If與濃度有下面的關(guān)系：If=KC。三、試驗(yàn)試劑和儀器試劑：羅丹明B乙醇溶液；1-萘酚乙醇溶液；3,3’-Diethyloxadicarbocyanineiodide：標(biāo)準(zhǔn)溶液，10μg/ml,20μg/ml,30μg/ml,40μg/ml和未知濃度；蒸餾水；乙醇。儀器：Fluoromax-4熒光分光光度計(jì)；1cm比色皿；spectrofluorometer分析軟件。熒光器構(gòu)造：它主要由光源、單色器、液槽、檢測(cè)器和顯示器組成。光源發(fā)出的紫外-可見或者紅外光經(jīng)過激發(fā)單色器分光后，照到熒光池中的被檢測(cè)樣品上，樣品收到該和記錄被測(cè)樣品譜圖。四、試驗(yàn)步驟3,3’-Diethyloxadicarbocyanineiodide10μg/ml,20μg/ml,30μg/ml,40μg/ml和未知濃度。翻開熒光分光光度計(jì)和電腦，預(yù)熱半個(gè)小時(shí)。翻開spectrofluorometer分析軟件，進(jìn)展相關(guān)參數(shù)的設(shè)置。首先檢測(cè)羅丹明B的激發(fā)光譜，此時(shí)固定放射波長(zhǎng)為560nm，檢測(cè)并保存激發(fā)光譜。然后依據(jù)所檢測(cè)的激發(fā)光譜中541nmB的熒光光譜的激發(fā)波長(zhǎng)，檢測(cè)并保存所得的熒光光譜。檢測(cè)1-萘酚的熒光光譜。方法同步驟3。3,3’-Diethyloxadicarbocyanineiodide2中一樣的步驟，10μg/ml,20μg/ml,30μg/ml,40μg/ml進(jìn)展檢測(cè)，記錄數(shù)據(jù)，繪制工作曲線。3,3’-Diethyloxadicarbocyanineiodide進(jìn)展