乳酸脫氫酶高產(chǎn)菌株的篩選及其酶的分離純化的開題報(bào)告

乳酸脫氫酶高產(chǎn)菌株的篩選及其酶的分離純化的開題報(bào)告一、選題背景乳酸脫氫酶（lactatedehydrogenase，簡稱LDH）是一種廣泛存在于生物體內(nèi)的酶，能夠催化乳酸和NAD+之間的氧化還原反應(yīng)，產(chǎn)生丙酮酸和NADH。這種反應(yīng)在動(dòng)植物的糖代謝過程中有重要作用，也是許多細(xì)胞內(nèi)能量代謝過程中不可或缺的組成部分。隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和人們生活水平的提高，乳制品、肉制品等高蛋白食品的需求量不斷增加，因此研究乳酸脫氫酶的生產(chǎn)與純化技術(shù)意義重大。目前，研究者們主要采用分子生物學(xué)方法和篩選高LDH產(chǎn)菌株的方式來提高LDH的產(chǎn)量和提高LDH的純度。本文就針對(duì)乳酸脫氫酶高產(chǎn)菌株的篩選及其酶的分離純化進(jìn)行研究與探討。二、研究內(nèi)容1.LDH產(chǎn)生及其酶學(xué)性質(zhì)研究，確定篩選高LDH產(chǎn)菌株的可行性；2.通過大量菌株的篩選，獲得高LDH產(chǎn)菌株；3.選取高LDH產(chǎn)菌株進(jìn)行培養(yǎng)、發(fā)酵與LDH提取，分離提純；4.純化后的LDH酶學(xué)特性的檢測(cè)與表征。三、研究意義本研究將有助于優(yōu)化LDH的生產(chǎn)及提純工藝，利用生物技術(shù)手段實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。其所產(chǎn)生的高LDH菌株不僅有助于提高LDH的產(chǎn)量和純度，而且可以應(yīng)用于食品工業(yè)、醫(yī)學(xué)和環(huán)境科學(xué)等領(lǐng)域，具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和社會(huì)意義。四、研究方法1.采用分子生物學(xué)方法，提取菌株基因組DNA，PCR擴(kuò)增乳酸脫氫酶編碼基因；2.通過對(duì)不同來源的菌株進(jìn)行篩選，篩選出高LDH產(chǎn)菌株；3.選取高LDH產(chǎn)菌株進(jìn)行含酵母浸膏、燕麥銀汁等營養(yǎng)培養(yǎng)基的培養(yǎng)、優(yōu)化培養(yǎng)條件，進(jìn)行LDH發(fā)酵，收獲發(fā)酵液，利用離心機(jī)進(jìn)行LDH提??；4.通過改性、分離微量污染物、層析分離、電泳雜交等方法，純化LDH并進(jìn)行組分分析、電泳分析及酶學(xué)特性研究，探索乳酸脫氫酶酵素系統(tǒng)的調(diào)控機(jī)制。五、論文結(jié)構(gòu)1.緒論1.1研究背景與意義；1.2研究內(nèi)容；1.3研究方法；2.乳酸脫氫酶的研究進(jìn)展與當(dāng)前研究熱點(diǎn)；3.乳酸脫氫酶高產(chǎn)菌株的篩選；3.1高LDH產(chǎn)菌株的生成；3.2高LDH產(chǎn)菌株的篩選條件；4.乳酸脫氫酶的分離純化；4.1LDH的提取過程；4.2LDH的分離純化方式；5.LDH酶學(xué)特性的研究與分析5.1酶學(xué)特性的分析；5.2LDH酶學(xué)的特點(diǎn)分析；6.結(jié)論與展望。六、預(yù)期成果1.篩選出高LDH產(chǎn)菌株，優(yōu)化LDH發(fā)酵生產(chǎn)工藝，并獲得高酶純度的LDH樣品；2.初步探究LDH酶學(xué)特性及其調(diào)控機(jī)制，為今后開展相關(guān)研究打下堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)，