DB21-T 3670-2022 花生抗褐斑病鑒定技術(shù)規(guī)程

65.020.20CCS

B

1521 21/T

3670—2022花生抗褐斑病鑒定技術(shù)規(guī)程Rule

for

evaluation

of

to

brown

leaf

spot

peanut 遼寧省市場監(jiān)督管理局 發(fā)

布DB21/T

3670—2022 本文件按照GB/T

—《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由遼寧省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。本文件起草單位：遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院、遼寧省農(nóng)業(yè)發(fā)展服務(wù)中心。金迪。本文件發(fā)布實(shí)施后，任何單位和個人如有問題和意見建議，均可通過來電和來函等方式進(jìn)行反饋，我們將及時答復(fù)并認(rèn)真處理，根據(jù)實(shí)際情況依法進(jìn)行評估及復(fù)審。2號），聯(lián)系電話：。84號），聯(lián)系電話DB21/T

3670—20221 范圍Cercospora

Hori室內(nèi)抗性鑒定、田間抗性鑒定、病情調(diào)查、抗性評價、鑒定記載方法等。本文件適用于花生（

hypogaea

）品種及種質(zhì)資源對花生褐斑病抗性的室內(nèi)、田間鑒定及評價。2 規(guī)范性引用文件文件。NY/T

3842

東北產(chǎn)區(qū)花生生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程3術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4 縮略語下列縮略語適用于本文件。PDA馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（Potato

Dextrose

Agar

Medium）OA 燕麥瓊脂培養(yǎng)基（

Agar

Medium）5 試劑與材料PDA培養(yǎng)基、OA培養(yǎng)基。6 病原物分離與接種體制備6.1病原物分離從花生葉片病斑處挑取花生褐斑病菌分生孢子，置于無菌水中，震蕩3

，將分生孢子懸浮液涂PDA培養(yǎng)基上，26析，鑒定為落花生尾孢菌（Cercospora

Hori），采用柯赫氏法則測定致病性，確定為供接種用菌株。病原菌于4℃保存，或20%甘油中，℃長期保存?；ㄉ职卟“Y狀及病菌形態(tài)描述見附錄A。6.2 接種體制備表1表1 花生抗褐斑病鑒定病情級別劃分標(biāo)準(zhǔn)DB21/T

3670—2022接種前30

d~45

dPDA培養(yǎng)基平板上，25℃恒溫培養(yǎng)15

d2

離心管中，加入無菌水

mL，充分震蕩混勻，吸取菌懸液

μL，置于OA板，25℃恒溫培養(yǎng)10

d~15

d20

，配制成濃度為1×10個孢子懸浮液（如未立即接種使用，可置4℃保存，保存時間

d）。接種前在孢子懸浮液中加入0.1%

Tween20

1

增加病菌孢子與葉片粘附性，加入蔗糖

提高孢子萌發(fā)率。7 室內(nèi)抗性鑒定7.1室內(nèi)離體葉片準(zhǔn)備4在花盆中播種籽粒飽滿的花生種子3粒，定期澆水，于2612

h光暗交替的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至下針43、4

cm，高4.8

cm）中，杯內(nèi)含清水30

。7.2 接種℃保濕培養(yǎng)12

h18℃保濕培養(yǎng)h，培養(yǎng)7

d~10

d。7.3病情調(diào)查方法接種后25

d~30

d數(shù)及相對抗病指數(shù)。S×N

×100S×N

×100(1)

(s×n)DISDIS

(2)DI——病情指數(shù)；s——各級代表值；n——各級葉片數(shù)；S——發(fā)病最高代表值；N——調(diào)查總?cè)~數(shù)。RDI

=

1?DIP式中：RDI——相對抗病指數(shù)；DIP——品種病情指數(shù)；DIS7.4 病情分級病情分級及其對應(yīng)的癥狀描述見表1。10%10%≤病斑面積＜25%≤病斑面積＜50%≤病斑面積＜75%≤病斑面積。DB21/T

3670—20228 田間抗性鑒定8.1 抗性鑒定圃設(shè)置件一致。8.2小區(qū)設(shè)計25

m~30

m，4

m~0.6

m8020份鑒定材料各設(shè)1組抗、感病對照，抗病對照品種為花育20，感病對照品種為白沙1016。8.3 種植要求鑒定材料播種時間、栽培管理方式應(yīng)符合NY/T

3842的要求，整個生長季不施用殺菌劑。8.4 接種8.4.1 接種期接種期為花針期。8.4.2 接種方法每個品種隨機(jī)連續(xù)選擇103片至第7接種期如遇干旱天氣，應(yīng)及時進(jìn)行田間澆灌。8.5 病情調(diào)查方法接種后15

d~20

d數(shù)，計算方法同

7.3。9 抗性評價9.1 鑒定有效性判別當(dāng)感病對照材料達(dá)到其相應(yīng)感病程度（S級），該批次材料抗褐斑病鑒定視為有效。9.2抗性評價指標(biāo)依據(jù)鑒定材料相對抗病指數(shù)確定其抗性水平，劃分指標(biāo)見表2。表2 花生抗褐斑病抗病評價指標(biāo)1.0IM0.80~0.99HR0.60~0.79

0.40~0.59MR0.20~0.39

0.2HSDB21/T

3670—202210 鑒定記載宜做好花生抗褐斑病鑒定結(jié)果的記載，見附錄B。DB21/T

3670—2022附 錄 A（資料性）花生褐斑病癥狀及病菌形態(tài)描述A.1 病名和癥狀描述A.1.1 病名花生褐斑病

Peanut

brown

spotA.1.2 癥狀描述褐色，病斑周圍有亮黃色暈圈。濕度大時病斑上可見灰褐色粉狀霉層，即病菌分生孢子梗和分生孢子。葉柄和莖稈染病，病斑長橢圓形，暗褐色。花生褐斑病癥狀圖見圖A.1。圖A.1

花生褐斑病癥狀圖A.2 病原菌學(xué)名和形態(tài)描述A.2.1 病原菌花生褐斑?。≒eanut

brown

leaf

spot）致病菌為落花生尾孢（Cercospora

Hori），有性態(tài)為落花生球腔菌（Mycosphaerella

Hori）。A.2.2 形態(tài)描述花生褐斑病菌絲體在燕麥瓊脂培養(yǎng)基（OA）上菌落呈深褐色至黑色，近圓形，粘性較差。分生孢子梗叢生或散生，淡褐色，有0~2個分隔，大小

μm×3~5

μm。分生孢子倒棍棒狀，基部膨大，向上漸尖，淡褐色，具5~8個隔膜，大小40~110

μm。花生褐斑病菌菌落形態(tài)圖見圖A.2?；ㄉ职卟【稚咦有螒B(tài)圖見圖A.