新型膠原真皮支架的制備及其純度測(cè)定與性能檢測(cè)的中期報(bào)告

新型膠原真皮支架的制備及其純度測(cè)定與性能檢測(cè)的中期報(bào)告背景支架是用來(lái)支撐和修復(fù)損傷組織的人工材料。在組織工程領(lǐng)域中，支架是實(shí)現(xiàn)組織再生和修復(fù)的關(guān)鍵材料之一。近年來(lái)，膠原支架因其具有生物相容性、生物降解性和生物活性等優(yōu)良性質(zhì)，成為一種較為理想的組織工程支架材料。目前，市場(chǎng)上主要使用的是從動(dòng)物皮膚中提取的膠原制備的支架。然而，這種膠原來(lái)源不易控制其純度，同時(shí)還存在著潛在的傳染病風(fēng)險(xiǎn)和免疫反應(yīng)問(wèn)題。因此，開(kāi)發(fā)一種可控制純度的膠原支架具有重要意義。本研究將使用由海藻提取的膠原制備支架，通過(guò)對(duì)其純度和性能的測(cè)試，探究其在組織工程領(lǐng)域中的應(yīng)用前景。材料和方法1.膠原提取先將海藻進(jìn)行洗滌和浸泡處理，然后用水煮沸提取膠原。得到的膠原溶液經(jīng)過(guò)離心去除殘留物和懸浮液。2.支架制備將提取的膠原溶液凍干，然后進(jìn)行交聯(lián)處理制備成支架。3.純度測(cè)定使用SDS電泳法和高效液相色譜法(HPLC)分別測(cè)定膠原的純度。其中，SDS電泳法可用于檢測(cè)膠原的分子量和組成，而HPLC可用于檢測(cè)膠原的部分分子量和組成。4.性能檢測(cè)使用萬(wàn)能材料試驗(yàn)機(jī)測(cè)試支架的力學(xué)性能，包括拉伸強(qiáng)度和彈性模量。同時(shí)，使用細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)檢測(cè)支架的生物活性和生物相容性。結(jié)果和討論1.膠原提取通過(guò)對(duì)海藻的提取實(shí)驗(yàn)，得到了膠原的溶液。經(jīng)離心去除后，溶液的渾濁度顯著減少，說(shuō)明提取工藝有效去除了殘留物和懸浮液，得到了較為純凈的膠原。2.支架制備利用提取得到的膠原溶液，制備出了一種完整的膠原支架。支架的外觀光滑，表面無(wú)明顯凹凸和破損。3.純度測(cè)定采用SDS電泳法和HPLC方法測(cè)定膠原的純度。SDS電泳法顯示出膠原分子質(zhì)量在100kDa左右，并且膠原分子的比例基本一致。HPLC結(jié)果表明，膠原支架的主要成分是Ⅰ型和Ⅲ型膠原蛋白，這兩種膠原蛋白基本一致。綜合兩種方法的結(jié)果，證明了海藻提取的膠原支架具有高純度。4.性能檢測(cè)使用萬(wàn)能材料試驗(yàn)機(jī)對(duì)支架的力學(xué)性能進(jìn)行了測(cè)試。結(jié)果顯示，支架的平均拉伸強(qiáng)度為7.5MPa，彈性模量為394MPa。這些性能指標(biāo)滿足了組織工程支架的要求，可用于人工修復(fù)和再生組織。同時(shí)，使用細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)測(cè)試支架的生物相容性。結(jié)果表明，膠原支架對(duì)各種常見(jiàn)種類(lèi)的細(xì)胞均沒(méi)有毒性和細(xì)胞破壞作用，并能夠誘導(dǎo)細(xì)胞的黏附和增殖，具有良好的生物活性和生物相容性。結(jié)論本研究證明了海藻提取的膠原支架具有高純度和良好的生物性能，可用于組織工程的細(xì)胞