不同粉碎工藝對(duì)黑胡椒多糖溶出效果的影響

不同粉碎工藝對(duì)黑胡椒多糖溶出效果的影響

黑莓是一種擔(dān)子菌，屬于木耳科和木耳科。這是中國(guó)的一種珍貴藥物和食品。有研究表明,黑木耳中的多糖類物質(zhì)具有多種生理活性及藥用價(jià)值。黑木耳細(xì)胞壁關(guān)鍵組分———幾丁質(zhì)和β-葡聚糖,質(zhì)地堅(jiān)韌,不易被人體所消化,細(xì)胞壁內(nèi)的多糖類物質(zhì)很難透過(guò)細(xì)胞壁,被人體所吸收。胞壁破碎是提取細(xì)胞內(nèi)多糖類物質(zhì)的關(guān)鍵步驟。破碎細(xì)胞壁的方法較多,其中粉碎操作是破碎黑木耳細(xì)胞壁的重要手段之一。粉碎工藝,尤其是超微粉碎工藝對(duì)于傳統(tǒng)工藝和配方的改進(jìn),新產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)具有推動(dòng)作用。產(chǎn)品物性和微觀結(jié)構(gòu)的改變,在提高提取效率、溶解性、吸附力、固香性、藥效和生物利用率等方面得到證實(shí)。鑒于此,從產(chǎn)業(yè)化角度出發(fā),以黑木耳多糖溶出量為評(píng)價(jià)指標(biāo),探討不同粉碎工藝對(duì)黑木耳多糖類物質(zhì)溶出的影響,為開(kāi)發(fā)利用黑木耳資源及工業(yè)化生產(chǎn)提供理論依據(jù)。1材料和方法1.1材料和試劑黑木耳,浙江省富來(lái)森綠色產(chǎn)業(yè)集團(tuán)公司提供;無(wú)水乙醇、濃硫酸、葡萄糖、苯酚均為分析純?cè)噭?.2微生物儀器ds/bf、超微粉碎、干燥箱wvd-1紫外分光光度計(jì)(UV-2000)、激光粒度儀(HELDS/BF)、正置生物顯微鏡(NIKONEclipseE200)、超微粉碎機(jī)(HMB-701)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(RE-52A)、微波真空干燥箱(WVD-01)。1.3測(cè)試方法1.3.1粗粉的提取取200g黑木耳,普通機(jī)械粗粉碎后,先用40目標(biāo)準(zhǔn)篩篩分,然后過(guò)80目篩,得不同目數(shù)的粗粉,即黑木耳機(jī)械粗粉AMP40和AMP80;再用超微粉碎機(jī)調(diào)控風(fēng)機(jī)風(fēng)量進(jìn)行粉碎,得到不同粒徑的黑木耳細(xì)粉,即黑木耳細(xì)粉1(ASP1)、細(xì)粉2(ASP2)和細(xì)粉3(ASP3)。1.3.2測(cè)定黑木耳干法的粒徑使用HELDS/BF激光粒度儀和VIBRI進(jìn)樣器,在分散壓力3.01×105Pa,分散真空度8.70×103Pa,進(jìn)樣速率65.00%,漏斗高度2.00mm,分散管直徑4mm的條件下測(cè)定黑木耳干粉的粒徑。1.3.3黑粉的形狀觀察取少量不同粒度黑木耳干粉,依次放在載玻片上,蓋上蓋玻片,分別置于生物顯微鏡下,放大400倍觀察黑木耳顆粒的外形及碎裂情況。1.3.4黑木耳多糖溶出量的測(cè)定取不同目數(shù)的黑木耳干粉20g,在料水比1∶40,溫度60℃,時(shí)間2h條件下提取2次,合并提取液,離心,得上清液。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮后,加95%乙醇調(diào)至含醇量80%,4℃靜置過(guò)夜,離心得粗多糖。粗多糖經(jīng)Sevag法除蛋白后,加3倍量的無(wú)水乙醇使之沉淀,將沉淀分別用無(wú)水乙醇、丙酮、無(wú)水乙醚依次洗滌2次,微波真空干燥,得到黑木耳粗多糖。黑木耳多糖溶出量(%)=CDf/m×100式中,C———供試液中葡萄糖質(zhì)量濃度(mg/mL);D———多糖的稀釋因素(mL);f———換算因子;m———黑木耳的質(zhì)量(mg)。1.3.6aps溶出率測(cè)定分別準(zhǔn)確稱取不同目數(shù)的黑木耳粉2.000g,置于250mL錐形瓶中,加入80mL水,溫度恒定于60℃,攪拌轉(zhuǎn)速為100r/min,當(dāng)樣品開(kāi)始接觸溶液時(shí)計(jì)時(shí),分別于10、20、30、40、50、60min定量吸取溶液2mL,用改良的苯酚-硫酸法測(cè)定不同時(shí)間的多糖含量,換算成每分鐘多糖溶出量,即APS溶出率(mg/min)。2結(jié)果與分析2.1黑粉的粒度和粒徑分布2.1.1粉體積面積平均粒徑為510由圖1可知,ASP1的粒徑在68.67~210.07μm之間,粉體表面積平均粒徑為119.28μm,屬中粉級(jí)(按《中國(guó)藥典》2005年版分類,下同)。2.1.2粒度分布和esp2由圖2可知,ASP2的粒徑在38.64~142.47μm之間,粉體表面積平均粒徑為74.37μm,屬細(xì)粉級(jí)。2.1.3粒徑大小對(duì)粉體的顆粒極細(xì)由圖3可知,ASP3的粒徑在5.72~86.67μm之間,粉體表面積平均粒徑為35.89μm,屬于極細(xì)粉級(jí)。綜合上述實(shí)驗(yàn),通過(guò)控制超微粉碎機(jī)的風(fēng)機(jī)風(fēng)量,可以得到不同粒徑分布的粉體。按照《中國(guó)藥典》2005年版(二部)的規(guī)定,粉體若能通過(guò)8號(hào)篩(90μm),均為“極細(xì)粉”,沒(méi)有關(guān)于“微粉”、“超微粉”的界定。由于黑木耳屬膠質(zhì)菌,物料韌性較大,不易得到粒徑極細(xì)的粉體。本試驗(yàn)中通過(guò)控制超微粉碎機(jī)電機(jī)的風(fēng)機(jī),在較低的風(fēng)機(jī)風(fēng)量下,可得到黑木耳的極細(xì)粉(ASP3平均粒徑<50μm)。2.2細(xì)胞破碎度由圖4可知,機(jī)械粉碎的黑木耳粉,細(xì)胞壁完整。粉體粒度越小,細(xì)胞破碎越嚴(yán)重,細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)越松散。超微粉碎的黑木耳粉,細(xì)胞表面細(xì)胞壁均發(fā)生不同程度的破裂,菌絲體散出,且粒度越小,細(xì)胞壁破裂越嚴(yán)重,菌絲體越松散。2.3原料粒度對(duì)多糖溶出量的影響按1.3.3節(jié)方法提取黑木耳多糖,不同粒度黑木耳多糖的溶出量見(jiàn)圖5。由圖5可知,原料黑木耳的粒度對(duì)多糖的溶出量影響很大,粒度越小,多糖的溶出量越多。原料粒度較大時(shí),多糖溶出量隨原料目數(shù)的變化較小,當(dāng)粒度減小至細(xì)粉級(jí)時(shí),多糖溶出量基本呈線性增長(zhǎng);當(dāng)粒度達(dá)到極細(xì)粉級(jí)別時(shí),多糖的溶出量是粗粉(40目)的3.96倍。2.4不同提取時(shí)間對(duì)多糖溶出率的影響不同粒度下黑木耳多糖的溶出率,見(jiàn)圖6。由圖6可知,多糖的溶出率與原料粒度有很大關(guān)系,不同粒度的黑木耳,其多糖溶出率的規(guī)律各不相同。原料粒度較大時(shí)(ASP1、ASP2),提取時(shí)間30min內(nèi),隨著時(shí)間的推移,多糖溶出率呈線性增加;提取時(shí)間超過(guò)30min時(shí),多糖溶出率增加緩慢。超微粉碎,原料粒度為中粉級(jí)(ASP1)時(shí),提取時(shí)間30min內(nèi),多糖溶出率呈線性增加;提取時(shí)間30~50min時(shí),多糖溶出率緩慢增加至最大值;60min時(shí),多糖溶出率呈下降趨勢(shì)。原料粒度為細(xì)粉級(jí)(ASP2),提取20min時(shí)多糖溶出率達(dá)到最大值,隨后緩慢下降。原料粒度為極細(xì)粉級(jí)(ASP3,35μm),提取時(shí)間10min時(shí),多糖溶出率最大,隨后呈下降趨勢(shì)。與普通機(jī)械粉碎及微細(xì)粉碎的溶出效果完全不同。3原料粒度對(duì)多糖溶出率的影響原料黑木耳的粉碎粒度與多糖類物質(zhì)的溶出有很大關(guān)系。黑木耳的粒度越小,其細(xì)胞壁破壁越嚴(yán)重,細(xì)胞內(nèi)多糖類物質(zhì)的溶出量越多。粒徑達(dá)極細(xì)粉級(jí)別時(shí),多糖的溶出量是普通機(jī)械粉碎(40目)的3.96倍。多糖溶出率與原料粒度有很大關(guān)系,原料粒度較大時(shí),多糖溶出率隨提取時(shí)間的推移呈線性增加。當(dāng)粒度達(dá)到極細(xì)粉級(jí)