奶牛乳房炎常見病原菌的聯(lián)合藥敏試驗(yàn)

奶牛乳房炎常見病原菌的聯(lián)合藥敏試驗(yàn)

氨基糖苷類抗生素屬于氨基糖苷類抗生素。由于其較強(qiáng)的抗革蘭氏陰性細(xì)菌活性、抗酶特性和明顯的抗生素誘導(dǎo)效應(yīng)（pme），尤其是類似藥物中較低的耳腎毒性，在醫(yī)學(xué)和醫(yī)學(xué)臨床應(yīng)用中得到了廣泛應(yīng)用。替米考星(Tilmicosin)屬于大環(huán)內(nèi)酯類抗生素,是由泰樂菌素的一種水解產(chǎn)物半合成的畜禽專用抗生素,常用其磷酸鹽,具有極好的抗菌活性及藥動學(xué)特征,多用于治療畜禽細(xì)菌及支原體感染。該藥對奶牛乳房炎常見病原菌體外抑菌活性的試驗(yàn)已有報道,但其聯(lián)合用藥,特別是與氨基糖苷類藥物的聯(lián)合藥敏試驗(yàn)尚未見報道。筆者針對無乳鏈球菌、停乳鏈球菌、金黃色葡萄球菌、致病性大腸埃希菌等4種奶牛乳房炎常見病原菌進(jìn)行了阿米卡星和替米考星的聯(lián)合藥敏試驗(yàn),以期為治療奶牛乳房炎提供依據(jù)。1材料和方法1.1試驗(yàn)材料1.1.1主要合成制劑有限公司,提供為硫酸阿米卡星725IU/mg,浙江金華康恩貝生物制藥有限公司提供;替米考星(99.5%),山東齊魯制藥有限公司提供。試驗(yàn)前精密稱取各藥,無菌操作配制成2mg/ml的藥液,置4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?.1.2特勤局無乳鏈球菌、停乳鏈球菌、金黃色葡萄球菌、致病性大腸埃希菌均由西北農(nóng)林科技大學(xué)臨床獸醫(yī)研究室提供。1.1.3培養(yǎng)基犢牛血清營養(yǎng)肉湯、營養(yǎng)瓊脂、血平板均按常規(guī)方法制作。1.2聯(lián)合藥敏試驗(yàn)1.2.1單價藥的最小抑菌濃度測定采用試管2倍稀釋法。1.2.2聯(lián)合藥敏試驗(yàn)。采用微量稀釋棋盤法。以各藥對應(yīng)各種菌MIC值的2、1、1/2、1/4倍等濃度在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板上分別進(jìn)行聯(lián)合藥敏試驗(yàn)。置37℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)16h左右,觀察結(jié)果。1.2.3結(jié)果判定。以分級抑菌濃度(FIC)指數(shù)作為聯(lián)合藥敏試驗(yàn)的判斷依據(jù),計算公式如下:FIC指數(shù)=甲藥聯(lián)合時MIC甲藥單獨(dú)時MIC+乙藥聯(lián)合時MIC乙藥單獨(dú)時MIC=甲藥聯(lián)合時ΜΙC甲藥單獨(dú)時ΜΙC+乙藥聯(lián)合時ΜΙC乙藥單獨(dú)時ΜΙCFIC指數(shù)≤0.5為協(xié)同作用;FIC指數(shù)>0.5～1為相加作用;FIC指數(shù)>1～2為無關(guān)作用;FIC指數(shù)>2為拮抗作用。2結(jié)果與分析2.1單帶藥物的最小抗菌濃度(MIC)阿米卡星、替米考星單價藥對無乳鏈球菌、停乳鏈球菌、金黃色葡萄球菌、致病性大腸埃希菌4種菌的最小抑菌濃度測定結(jié)果見表1。2.2試驗(yàn)結(jié)果判定2.2.1阿米卡星與替米考星對無乳鏈球菌、停乳鏈球菌、金黃色葡萄球菌、致病性大腸埃希菌的聯(lián)合藥敏試驗(yàn)結(jié)果見表2～5。2.2.2結(jié)果判定。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果,通過FIC指數(shù)的計算公式,判斷如下:①阿米卡星與替米考星對無乳鏈球菌的FIC指數(shù)為1,故聯(lián)合用藥為相加作用。②阿米卡星與替米考星對停乳鏈球菌的FIC指數(shù)為0.75,故聯(lián)合用藥為相加作用。③阿米卡星與替米考星對金黃色葡萄球菌的FIC指數(shù)為1,故聯(lián)合用藥為相加作用。④阿米卡星與替米考星對致病性大腸埃希菌的FIC指數(shù)為1,故聯(lián)合用藥為相加作用。3阿米卡星和替米考星的聯(lián)合藥敏試驗(yàn)(1)試驗(yàn)結(jié)果顯示,無乳鏈球菌、停乳鏈球菌、金黃色葡萄球菌、致病性大腸埃希菌均對阿米卡星、替米考星單價藥高度敏感。各單價藥對試驗(yàn)菌的MIC均在7.81～62.50μg/ml,特別是致病性大腸埃希菌尤為敏感。這與阿米卡星對革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌均有作用是相一致的。同時也表明,替米考星除對引發(fā)臨床型奶牛乳房炎的致病菌中的革蘭氏陽性菌有很強(qiáng)的抑制作用外,對革蘭氏陰性菌致病性大腸埃希菌也有很好的抑菌作用。(2)阿米卡星與替米考星對無乳鏈球菌、停乳鏈球菌、金黃色葡萄球菌、致病性大腸埃希菌4種奶牛乳房炎常見病原菌的聯(lián)合藥敏試驗(yàn)FIC指數(shù)范圍0.75～1,表明阿米卡星與替米考星聯(lián)合用藥對這4種病原菌均為相加作用。(3)在抗菌藥物分類中,氨基糖苷類藥物屬于靜止期殺菌劑,其作用機(jī)制為阻礙細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成。此外,還可能通過抑制細(xì)胞膜蛋白質(zhì)合成,影響細(xì)菌細(xì)胞膜屏障功能,因而藥物更易于進(jìn)入胞漿內(nèi)而增強(qiáng)作用,破壞膜結(jié)構(gòu),導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)成分外漏而死亡。大環(huán)內(nèi)酯類藥物屬于快速抑菌劑,作用機(jī)制為與核蛋白體50S亞基結(jié)合,抑制蛋白質(zhì)合成。從理論角度看兩者聯(lián)合應(yīng)用,有相加或協(xié)同作用,該試驗(yàn)證實(shí)了這一點(diǎn)。聯(lián)合用藥的目的在于擴(kuò)大抗菌譜、減少用藥量;增強(qiáng)療效、降低或避免毒副作用;減少或延緩耐藥性的產(chǎn)生。阿米卡星屬于氨基糖苷類藥物,該類藥物均有耳、腎毒性,盡管該藥在此類藥物中副作用較小,其毒