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動物細胞融合與單克隆抗體教學(xué)目標(biāo)知識目標(biāo)⑴掌握動物細胞融合與植物體細胞雜交的區(qū)別和聯(lián)系。⑵簡述動物細胞融合和單克隆抗體制備的過程。⑶了解單克隆抗體在醫(yī)學(xué)實踐中的應(yīng)用,并說其應(yīng)用實例。能力目標(biāo)讓學(xué)生嘗試設(shè)計單克隆抗體的制備過程,指導(dǎo)學(xué)生掌握獲取知識和探索生物科學(xué)的根本方法,使學(xué)生了解生物科學(xué)認識模式以開展學(xué)生的創(chuàng)造性能力。1.情感目標(biāo)通過向?qū)W生介紹動物細胞融合與單克隆抗體技術(shù)的開展動態(tài)及一些新的研究成果,使學(xué)生明確人們對生命奧秘的揭示愈加廣泛和深入,知識不斷更新并向前開展,認識到學(xué)無止境,形成終生學(xué)習(xí)的意識。教學(xué)重、難點〔1〕動物細胞融合技術(shù)與植物體細胞雜交的區(qū)別〔2〕單克隆抗體的制備過程、方法與原理與應(yīng)用教學(xué)媒體動物細胞融合、單克隆抗體制備過程的教學(xué)課件2.教學(xué)過程【導(dǎo)入新課】師:1970年,有兩位科學(xué)家做了一個人—鼠細胞融合的實驗,以證明細胞膜上的蛋白質(zhì)分子是運動的。那么,如何實現(xiàn)人—鼠細胞的融合,以及動物細胞融合后還有什么用途呢?這就是今天我們這節(jié)課要學(xué)習(xí)的內(nèi)容。一、動物細胞的融合
1、概念:是指〔在一定的條件下〕兩個或多個細胞融合形成一個細胞的過程。[強調(diào)要點]“2個或多個動物細胞〞→“1〞、“雜交單核細胞〞2、原理:細胞膜的流動性3.3、動物細胞融合的方法:物理法〔如電場法〕、化學(xué)法〔如聚乙二醇法〕、生物法〔如仙臺病毒法〕師:在誘導(dǎo)方法上,動物細胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法是否相同?生:相類似,可以用物理法、化學(xué)法,但動物細胞融合時可用滅活的病毒作為誘導(dǎo)劑。師:誘導(dǎo)動物細胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法類似,但動物細胞融合時可用滅活的病毒作為誘導(dǎo)劑,你們知道這是為什么嗎?請閱讀課本P52的生物技術(shù)資料卡,思考并答復(fù)下面問題: 為什么滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑?生:因為滅活的病毒能使細胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)重新排布,細胞膜翻開,細胞發(fā)生融合。4.4、意義:打破生殖隔離,使遠緣雜交成為可能;廣泛應(yīng)用;制備單克隆抗體小結(jié):植物體細胞雜交和動物細胞融合的比較比較項目細胞融合的原理細胞融合的方法誘導(dǎo)方法主要用途
植物體細胞雜交細胞膜的流動性去壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合物理法(離心、振動、電激)化學(xué)法(聚乙二醇
獲得雜種植株動物細胞融合細胞膜的流動性使細胞分散后誘導(dǎo)細胞融合除以上方法,還有生物法
制備單克隆抗體5.初試牛刀:【例1】能使動物細胞融合的特有的誘導(dǎo)因子是〔〕 A.離心B.滅活的病毒C.電刺激D.振動【例2】融合后的雜交細胞的遺傳物質(zhì)有何特點〔〕 A.具有原來兩個或多個細胞的遺傳信息B.能無限增殖 C.可形成新個體D.培養(yǎng)過程會貼壁【例3】動物細胞融合的作用中最重要的是〔〕 A.克服遠源雜交不親和B.制備單克隆抗體 C.培育新物種D.生產(chǎn)雜種細胞6.二、單克隆抗體的制備溫故知新:1、本質(zhì)〔概念〕:免疫球蛋白2、來源:B淋巴細胞〔特異性〕師:傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法及缺陷是什么?
生:傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法是向動物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原,使動物產(chǎn)生抗體,然后從動物血清中別離所需要的抗體。這種生產(chǎn)抗體的方法產(chǎn)量和純度都很低,而且制備的抗體特異性差。師:讀下面一段資料,找出單克隆抗體的概念人們發(fā)現(xiàn),在動物發(fā)生免疫反響的過程中,體內(nèi)的B細胞可以產(chǎn)生多達百萬種以上的特異性抗體,但是每個B細胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體。要想獲得大量的單一抗體,必須用單個B細胞進行無性繁殖,即克隆。生:單克隆抗體:單個B細胞克隆產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體7.
師:問題:如何大量生產(chǎn)單克隆抗體?請嘗試設(shè)計一個方案。
提示1:對B細胞進行細胞培養(yǎng)可行嗎?
提示2:我們所學(xué)的哪種細胞是可以無限增殖的?
提示3:有什么方法能使B細胞產(chǎn)生抗體的能力和腫瘤細胞無限增殖能力同時具備呢?
生:如果把一種B淋巴細胞與能在體外大量增殖的骨髓瘤細胞進行融合,所得到的融合細胞既能大量增殖,又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體。
師:對,正是科學(xué)家先有了這個極富創(chuàng)造性的設(shè)想,然后再鍥而不舍地把設(shè)想變?yōu)楝F(xiàn)實,才創(chuàng)造出單克隆抗體。8.3、應(yīng)用:診斷試劑;治療疾病和運載藥物。穩(wěn)固練習(xí):單抗制備過程分哪幾步?請用箭頭把以下代表單克隆抗體制備過程步驟的圖解的字母按正確順序連接起來。順序是?學(xué)生到黑板畫出過程,教師糾正點評?!颊n堂小結(jié)〗師:[本節(jié)知識要點]2個過程、三個“一〞2個過程:動物細胞融合過程和單克隆抗體制備過程三個“一〞:一種誘導(dǎo)動物細胞融合的新方法——滅活的病毒一種新細胞——雜交瘤細胞一個優(yōu)勢——單克隆抗體特異性強、靈敏度高9.〖課堂練習(xí)〗1、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合,得到雜交細胞,經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體,與骨髓瘤細胞融合的是〔〕A.經(jīng)過免疫的B淋巴細胞B.沒經(jīng)過免疫的T淋巴細胞
C.經(jīng)過免疫的T淋巴細胞D.沒經(jīng)過免疫的B淋巴細胞2.動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較中,正確的選項是〔〕誘導(dǎo)融合的方法完全相同B.所用的技術(shù)手段根本相同C.操作步驟根本相同D.都能形成雜種細胞10.3.單克隆抗體制備過程中,骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導(dǎo)融合后,要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞,在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細胞是〔〕①淋巴細胞②小鼠骨髓瘤細胞③B淋巴細胞自身融合細胞④小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞⑤雜交瘤細胞
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